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由标准强毒F114株全长cDNA克隆恢复猪瘟病毒 被引量：6

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摘要 通过RT-PCR获得猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV)强毒株cF114株(中国标准强毒F114株经PK-15细胞增殖)全长基因组cDNA并测序. 与已知其他几株CSFV代表毒株F114, Brescia, Alfort和C株的核苷酸同源性分别为99.41%, 96.80%, 86.03%和95.70%; 氨基酸同源性分别为99.28%, 98.54%, 93.33%和97.41%. 将获得的各基因片段按病毒基因组顺序连接成全长cDNA, 插入pMC18质粒SalⅠ/ XbaⅠ之间, 得到含病毒全长基因组的重组质粒pMC12297. 用T7 RNA聚合酶进行体外转录, 转录出的RNA转染PK-15细胞, 细胞上清液经扩增后, 测定上清液中病毒滴度. 质粒来源的CSFV(vM12297)在抗原反应性和复制能力方面与父代病毒相似. 将疫苗毒C株囊膜蛋白基因E01和E2分别替换到pMC12297相应位置, 获得嵌合体基因组质粒pM/CE01和pM/CE2, 体外恢复获得嵌合体病毒vM/CE01和vM/CE2. 两种嵌合体病毒均能感染PK-15, SK-6和原代猪睾丸细胞, 间接免疫荧光检测显示较vM12297弱, 在PK-15细胞上滴度达到8×105 F-PFU/mL. 这一工作为进一步研究和探讨CSFV增殖与致弱的机理提供了重要的实验和理论资料.
作者 聂玉春 陈建国 丁明孝
机构地区 北京大学生命科学学院细胞生物学与遗传学系
出处 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1059-1063,共5页 Chinese Science Bulletin
基金 国家重点基础研究发展规划(批准号:G1999011904) 国家自然科学基金(批准号:30170041) 高等院校博士点基金资助项目.
关键词 猪瘟病毒 全长CDNA克隆 感染性RNA 转染 体外转录 氨基酸 核苷酸
分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]
  • 相关文献

参考文献19

  • 1[1]Regenmortel M H V, Fauquet C M, Bishop D H L, et al. The Seventh Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses. San Diego: Academic Press, 2000. 859 ～ 878
  • 2[2]Thiel H J, Stark R, Weiland E, et al. Hog cholera virus: molecular composition of virions from a pestivirus. J Virol, 1991, 65: 4705 ～ 4712
  • 3[3]Moormann R J M, Gennip H G P, Miedema G K W, et al. Infectious RNA transcribed from an engineered full-length cDNA template of the genome of a pestivirus. J Virol, 1996, 70: 763 ～ 770
  • 4[4]Ruggli N, Tratschin J, Mittelholzer C, et al. Nucleotide sequence of classical swine fever virus strain alfort/187 and transcription of infectious RNA from stably cloned full-length cDNA. J Virol, 1996, 70: 3478 ～ 3487
  • 5[5]Mose C, Tratschin J D, Hofmann M A. A recombinant classical swine fever virus stably expresses a marker gene. J Virol, 1998, 72: 5318 ～ 5322
  • 6[6]Schnell M J, Mebatsion T, Conzelmann K K. Infectious rabies viruses from cloned cDNA. EMBO J, 1994, 13: 4195 ～ 4203
  • 7[7]Whelan S P J, Ball L A, Barr J N, et al. Efficient recovery of infectious vesicular stomatitis virus entirely from cDNA clones. Proc Natl Acad Sci USA, 1995, 92: 8388 ～ 8392
  • 8[8]Garcin D, Pelet T, Calain P, et al. A highly recombinogenic system for the recovery of infectious Sendai paramyxovirus from cDNA: generation of a novel copy-back non-defective interfering virus. EMBO J, 1995, 14: 6087 ～ 6094
  • 9[9]Hurrelbrink R J, Nestorowicz A, McMinn P C. Characterization of infectious murray valley encephalitis virus derived from a stably cloned genome-length cDNA. J Gen Virol, 1999, 80: 3115 ～ 3125
  • 10[10]Major M E, Mihalik K, Fernandez J, et al. Long-term follow-up of chimpanzees inoculated with the first Infectious clone for hepatitis C virus. J Virol, 1999, 73: 3317 ～ 3325

二级参考文献11

共引文献17

同被引文献72

引证文献6

二级引证文献22

科学通报
2003年 第10期

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