摘要
目的研究白藜芦醇（Res）对小鼠前脂肪细胞凋亡及细胞周期的影响及其机制。方法分别用25、50、75、100μmol／L的Res干预小鼠前脂肪细胞24、48、72h，并设0μmol／LRes为阴性对照组（每组设3个复孔，重复3次）。全自动倒置荧光显微镜观察细胞的形态学变化、细胞增殖．毒性检测试剂盒检测细胞增殖活性、流式细胞仪检测细胞凋亡与细胞周期。结果形态学上．经50μmol／LRes干预48h后的小鼠前脂肪细胞具有典型凋亡形态学改变。细胞增殖-毒性检测发现，0、25、50、75、100μmol／LRes干预24h细胞增殖率分别为100％、（97．00±1．00）％、（91．00±2．65）％、（90．67±2．52）％和（86．00±3．61）％；干预48h细胞增殖率分别是100％、（86．67±2．52）％、（76．00±2．00）％、（34．33±2．08）％和（30．33±2．52）％；干预72h，细胞增殖率分别是100％、（82．00±2．65）％、（65．67±3．06）％、（21．00±3．61）％和（16．33±3．21）％。偏相关分析结果显示细胞增殖率与干预时间、Res浓度均呈负相关关系（r=-0．72、-0．83，均P〈0．01）。0、25、50、75、100μmol／LRes干预24h，G0／G1期的细胞比例分别为（27．23±2．63）％、（39．03±2．74）％、（80．20±5．15）％、（87．97±3．12）％和（90．80±2．08）％；S期的细胞比例分别为（72．43±2．99）％、（63．93±6．90）％、（19．80±5．15）％、（12．20±2．86）％和（9．20±2．08）％，2个细胞周期的50、75、100μmol／LRes干预组与阴性对照组之间的细胞比例差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。0、25、50、75、100μmol／LRes干预48h，细胞凋亡率分别为（2．90±0．10）％、（5．40±3．81）％、（8．23±4．24）％、（29．77±6．18）％和（27．23±3．17）％；细胞坏死率分别为（7．50±0．87）％、（12．00±4．89）％、（12．27±3．81）％、（12．67±6．13）％和（20．73±2．64）％，100μmol／L的干预组的细胞调亡率、坏死率与阴性对照组的差异均具有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01），其他各组与阴性对照组的差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论在一定的剂量范围内（0～100μmol／L），Res可能抑制小鼠前脂肪细胞生命周期并促进其凋亡。
Objective To study the effects and mechanism of resveratrol （Res） on apoptosis and cell cycle in 3T3-L1 preadipocytes. Methods 3T3-L1 preadipocytes were treated with different doses of Res treatment （0, 25, 50, 75, and 100μmol/L,0 μmol/L as the negative control）for 24,48 or 72 h. The fluorescence microscope, MTT assay, and flow-cytometry were used for measuring cell morphology, cell proliferation, cell cycle, and apoptosis. Results After treated with 50 μmol/L of Res for 48 h,3T3-L1 preadipocytes exhibited typical apoptosis features when observed under fluorescence microscope. Mrl3＇ assay showed that,after different doses of Res treatment （0, 25, 50, 75, and 100 μmol/L） for 24 h,cell prolif- eration rate was 100%, （97.00 ± 1.00）%, （91.00 ± 2. 65）%, （90.67 ± 2. 52）%, and （86. 00 ± 3.61 ）%, respectively; after the similar Res treatment for 48 h, cell proliferation rate was 100%, （86. 67 ± 2. 52） % , （ 76. 00 ± 2. 00） % , （ 34. 33 ± 2.08 ） %, and （ 30. 33 ± 2. 52 ） % , respectively ; also, after the similar Res treatment for 72 h, cell proliferation rate was 100%, （82.00 ± 2.65）%, （65.67 ± 3.06） % , （21.00 ± 3.61 ） % , and （ 16. 33 ± 3.21 ） % , respectively. Partial correlation analysis showed a negative correlation between cell proliferation rate and intervention time, concentration of Res （r= -0.72,-0.83, all P 〈 0.01 ）. After different doses of Res treatment （0, 25, 50, 75, and 100 μmol/L） for 24 h,the portion of cells in GO/G1 phase was （27.23 ±2. 63）% , （39.03 ±2. 74）% , （80. 20 ±5.15）% , （87.97 ±3.12）% , （90. 80 ±2.08）% ,respectively;as the same,the portion of cells ins phase was （72.43 ±2.99）%, （63.93 ±6.90）%, （19.80 ±5.15）%, （12.20 ±2.86）%, （9. 20 ±2.08 ） % ,respectively. From the results of the cell cycle examination, the portion of cells in G0/G1 phase decreased （P 〈 0.05 or P 〈 0. 01 ） and increased evidently in S phase （P 〈 0.05 or P 〈 0. 01 ） in a dose dependent manner. After different doses of Res treatment （0, 25,50, 75, 100 μmol/L） for 48 h, apoptosis rate was （ 2. 90 ± 0. 10） %, （5.40 ± 3.81 ） %, （ 8.23 ±4. 24） %, （ 29. 77 ± 6. 18 ） %, （27.23 ± 3.17 ） %, respectively ; as the same, necrosis rate was （7. 50 ± 0. 87 ） %, （ 12. 00 ± 4. 89 ） %, （ 12. 27 ± 3.81 ） % , （ 12.67 ± 6. 13 ） % , （ 20. 73 ± 2. 64 ） % , respectively. The apoptosis and necrosis of 3T3 -L1 preadipocytes were statistically significant different between 100 μmol/L Res group and negative control group （P 〈 0.05 or P 〈 0.01 ）. Conclusion At a certain dose range （0-100 μmol/L）, Res may inhibit the life cycle and promote apoptosis of 3T3-L1 preadipocytes.
出处
《华南预防医学》
2013年第5期1-5,共5页
South China Journal of Preventive Medicine
基金
广东省建设中医药强省课题(No.20111157)
