摘要
植物真核翻译起始因子4E(eIF4E)在蛋白质翻译过程中发挥重要作用.最近研究表明eIF4E在参与植物病毒互作,影响病毒在寄主中复制和侵染过程.文中通过RNA干涉调控番茄eIF4E表达,鉴定eIF4E在植物病毒互作中的作用.根据数据库假设性一致序列(TC171564,TC170275)分别克隆了番茄"中蔬五号"SleIF4E基因及其异构体基因SleIF(iso)4E.构建了SleIF4E RNAi抑制表达载体pSL4D,通过农杆菌介导的方法导入番茄品种"中蔬五号"基因组.PCR检测和Southern blot结果表明,目标基因已整合到番茄基因组中.通过半定量RT—PCR对转基因番茄进行eIF4E表达分析,表明pSL4D转化番茄中eIF4E得到不同程度抑制.转基因植株分别接种PVY和CMV两种病毒,病毒ELISA测定和病毒RNA积累量分析表明,pSL4D转化植株相对于对照组均获得不同程度的病毒抗性,番茄eIF4E参与PVY的复制或侵染寄主过程.就不同病毒而言,RNAi对PVY抗性的调控效果比CMV调控效果好,抑制eIF4E表达可提高植物对PVY的抗性.
基金
国家自然科学基金(批准号:30671417)
华中农业大学博士科研基金(批准号:52204-07037)资助项目
