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细胞外基质硬度对人前列腺癌细胞可塑性调控作用的研究 被引量:1
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作者 郑雨 马磊 +4 位作者 李睿智 牟洁 李菁 王栋 祝海 《精准医学杂志》 2024年第3期222-225,231,共5页
目的探讨细胞外基质硬度对人前列腺癌细胞LNCaP可塑性调控的作用。方法将人LNCaP细胞分别于杨氏模量为3 GPa(A组)、20 kPa(B组)、6 kPa(C组)和1 kPa(D组)四种不同硬度细胞外基质培养皿中培养1周。采用明场显微镜及荧光显微镜观察各组细... 目的探讨细胞外基质硬度对人前列腺癌细胞LNCaP可塑性调控的作用。方法将人LNCaP细胞分别于杨氏模量为3 GPa(A组)、20 kPa(B组)、6 kPa(C组)和1 kPa(D组)四种不同硬度细胞外基质培养皿中培养1周。采用明场显微镜及荧光显微镜观察各组细胞在不同硬度基底上的形态;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测各组细胞的管腔细胞标志物基因AR、CK 8、CK 18、PSA,基底细胞标志物基因CK 5、P 63,以及增殖基因KI 67、PCNA的表达水平。结果明场显微镜及荧光显微镜观察结果显示,A组人LNCaP细胞呈现典型铺展上皮细胞形态,而B~D组均呈现团聚小细胞片状态,且D组细胞形成了三维类器官结构。RT-qPCR结果显示,四组人LNCaP细胞中KI 67、P 63基因表达水平无显著差异(P>0.05);B组PCNA基因表达水平显著高于A、C组(F=34.96,t=8.39、6.37,P<0.05);B组CK 5基因表达水平显著高于其他三组(F=29.35,t=4.46~6.73,P<0.05);D组AR、CK 8、CK 18、PSA基因表达水平显著高于其他三组(F=13.66~56.43,t=3.03~11.51,P<0.05)。结论硬度较低(杨氏模量1 kPa)的细胞外基质环境能较好维持人LNCaP细胞的管腔细胞特征,而硬度较高(杨氏模量20 kPa)的细胞外基质能使人LNCaP细胞呈现出中间态细胞表型,或许是导致前列腺癌发生的因素之一。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 细胞系 肿瘤 细胞外基质 细胞可塑性
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心肌肥大中mmu_circRNA_009396的功能研究
2
作者 夏倩倩 曹睿琦 刘翠云 《青岛大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第3期21-26,共6页
利用血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)体外构建新生小鼠心肌细胞(Neonatal Mouse Ventricular Cardiomyocytes,NMVCs)的肥大模型,通过RT-qPCR检测肥大标志基因,采用鬼笔环肽染色心肌细胞骨架,探讨circRNA009396在心肌肥大中的调控作... 利用血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)体外构建新生小鼠心肌细胞(Neonatal Mouse Ventricular Cardiomyocytes,NMVCs)的肥大模型,通过RT-qPCR检测肥大标志基因,采用鬼笔环肽染色心肌细胞骨架,探讨circRNA009396在心肌肥大中的调控作用。研究结果显示,1000 nmol/L AngⅡ刺激心肌细胞24 h后,circRNA009396表达水平下调,且在注射AngⅡ的小鼠心脏组织中下调。敲低circRNA009396会加重AngⅡ诱导的心肌肥大,过表达circRNA009396会抑制AngⅡ诱导的心肌肥大。这表明,circRNA009396是心肌特异性的环形RNA,能保护心脏,可能作为关键调节因子和下游信号通路共同参与调控心肌肥大过程。 展开更多
关键词 心肌肥大 环形RNA 血管紧张素
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DNA损伤应答中DEAD-box Helicase 41的潜在作用研究
3
作者 王心宇 朱敏 《青岛大学学报(自然科学版)》 2024年第4期8-12,18,共6页
为探究死盒解旋酶41(DEAD-box Helicase 41,DDX41)的敲低如何影响DNA损伤应答(DNA Damage Repair,DDR),慢病毒筛选敲低DDX41(shDDX41)的HeLa细胞,转染质粒FLAG-USP11、GFP-DDX41至HEK-293T细胞,设置细胞空白对照组(NC细胞)和依托泊苷加... 为探究死盒解旋酶41(DEAD-box Helicase 41,DDX41)的敲低如何影响DNA损伤应答(DNA Damage Repair,DDR),慢病毒筛选敲低DDX41(shDDX41)的HeLa细胞,转染质粒FLAG-USP11、GFP-DDX41至HEK-293T细胞,设置细胞空白对照组(NC细胞)和依托泊苷加药组,基于Western blot、免疫荧光染色以及染色体分离实验,确定shDDX41细胞DNA损伤情况及其DDR情况。实验结果显示,shDDX41细胞自发性DNA损伤高于NC细胞,细胞染色体畸形比例明显增加;shDDX41细胞过表达去泛素化酶(Ubiquitin-Specific-Processing Protease 11,USP11)后染色体畸形比例明显降低。shDDX41会募集肿瘤蛋白p53结合蛋白及组蛋白H2AX影响DDR过程。DDX41与USP11的相互作用受DNA损伤调控。这表明,DDX41可参与DDR,维护基因组稳定性,可为癌症预防治疗提供参考。 展开更多
关键词 DNA损伤应答 死盒解旋酶41 去泛素化酶
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piR-16744对缺氧—复氧诱导的小鼠原代心肌细胞焦亡作用及机制研究 被引量:3
4
作者 王飞 陈鑫哲 +1 位作者 王凯 单婵 《青岛大学学报(自然科学版)》 CAS 2022年第2期5-11,共7页
为探究piR-16744对H/R诱导的NMCs焦亡作用及机制,体外构建NMCs的H/R模型,设置缺氧6 h、12 h、24 h复氧6 h的时间梯度。使用RT-qPCR检测piR-16744的表达水平,WB检测焦亡相关蛋白GSDMD、GSDMD-C、Caspase-1及炎症因子IL-1β、IL-18的表达... 为探究piR-16744对H/R诱导的NMCs焦亡作用及机制,体外构建NMCs的H/R模型,设置缺氧6 h、12 h、24 h复氧6 h的时间梯度。使用RT-qPCR检测piR-16744的表达水平,WB检测焦亡相关蛋白GSDMD、GSDMD-C、Caspase-1及炎症因子IL-1β、IL-18的表达水平,LDH和PI染色检测细胞死亡率。结果显示,H/R 6/6 h时,NMCs中焦亡相关蛋白的表达水平最高。抑制NMCs中piR-16744的表达可促进焦亡相关蛋白表达,细胞死亡率升高;过表达piR-16744则抑制焦亡相关蛋白的表达,细胞死亡率降低;同时抑制piR-16744和Caspase-1的表达,焦亡相关蛋白的表达水平相较于单独抑制piR-16744组降低。研究表明piR-16744可通过依赖Caspase-1的经典焦亡信号通路调控NMCs焦亡。 展开更多
关键词 PIRNA 细胞焦亡 小鼠原代心肌细胞 GSDMD 心肌损伤
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p-BRAF在心肌缺血再灌注损伤中的作用和机制研究 被引量:3
5
作者 王菲 李培峰 高岩岩 《青岛大学学报(自然科学版)》 CAS 2022年第2期12-18,共7页
为探究p-BRAF通过影响线粒体功能参与心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的分子机制,构建心肌缺血再灌注(MIR)模型。采用钙离子荧光探针(Rhod-2/AM)和钙黄绿素乙酰氧基甲酯(Calcein AM)染色,观察心肌细胞线粒体Ca^(2+)、线粒体通透性转换孔(mPTP... 为探究p-BRAF通过影响线粒体功能参与心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的分子机制,构建心肌缺血再灌注(MIR)模型。采用钙离子荧光探针(Rhod-2/AM)和钙黄绿素乙酰氧基甲酯(Calcein AM)染色,观察心肌细胞线粒体Ca^(2+)、线粒体通透性转换孔(mPTP)水平。碘化丙啶染色观察经环孢素A(CsA)和Ru360处理后细胞死亡情况。蛋白免疫印迹检测p-BRAF表达,并在干扰/过表达p-BRAF后,观察细胞死亡情况及线粒体Ca^(2+)和mPTP水平。实验结果显示,与常氧组相比,缺氧复氧组心肌细胞Rhod-2/AM荧光强度增加,Calcein AM荧光强度降低,细胞死亡增加(P均<0.05);CsA和Ru360处理后,细胞死亡减少(P<0.05)。MIR中p-BRAF表达明显升高(P<0.05)。敲低BRAF后,MIR造成的细胞死亡减少,Rhod-2/AM荧光强度增加得到恢复(P均<0.05)。过表达p-BRAF后,细胞死亡增加,Rhod-2/AM荧光强度增加,Calcein AM荧光强度降低(P均<0.05)。因此,p-BRAF在MIR中上调并可通过介导线粒体Ca^(2+)超载和mPTP开放促进心肌细胞死亡,其可能成为防治MIRI的重要靶标。 展开更多
关键词 p-BRAF 线粒体Ca^(2+) MPTP 细胞死亡 心肌缺血再灌注损伤
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piRNA与心脏相关疾病研究进展 被引量:1
6
作者 王凯 周露玙 +3 位作者 刘靖 王涛 高向前 王昆 《转化医学杂志》 2020年第3期177-180,共4页
非编码基因组与人类疾病的关系一直是研究的热点,而非编码RNA在心血管疾病的研究还处于起步阶段。Piwi蛋白互作RNA(Piwi-interacting RNA,piRNA)是一种小的非编码RNA,可与Piwi蛋白结合,通过DNA甲基化沉默转座子,在生殖系中高表达和得到... 非编码基因组与人类疾病的关系一直是研究的热点,而非编码RNA在心血管疾病的研究还处于起步阶段。Piwi蛋白互作RNA(Piwi-interacting RNA,piRNA)是一种小的非编码RNA,可与Piwi蛋白结合,通过DNA甲基化沉默转座子,在生殖系中高表达和得到了广泛的研究。关于piRNA与心脏相关疾病的研究尚在起步阶段。作者对piRNA及其与心脏相关疾病的某些潜在调控关系作一综述。 展开更多
关键词 非编码RNA 心脏相关疾病 PIRNA
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长链非编码RNA CAF调节阿霉素诱导的心肌细胞毒性机制的研究 被引量:1
7
作者 陈超 张延慧 +4 位作者 王明卉 许胜 刘翠云 李培峰 王昆 《转化医学杂志》 2018年第2期68-73,共6页
目的阿霉素(doxorubicin,DOX)作为化疗药物广泛用于治疗各种肿瘤。然而,限制其临床应用的主要因素是心脏毒性,调节DOX诱导的心脏毒性的分子组分和详细机制仍然在很大程度上不明。本研究旨在探索长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncR... 目的阿霉素(doxorubicin,DOX)作为化疗药物广泛用于治疗各种肿瘤。然而,限制其临床应用的主要因素是心脏毒性,调节DOX诱导的心脏毒性的分子组分和详细机制仍然在很大程度上不明。本研究旨在探索长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)调节DOX诱导的心肌细胞毒性机制。方法采用高通量lncRNAs基因芯片研究与对照组样品相比较,2μmol/L DOX诱导的细胞样品中的lncRNA的差异性表达谱。同时采用实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法对差异表达的lncRNA分子进行验证。6只健康纯种雄性8周龄小鼠,通过DOX注射制作心脏毒性模型小鼠(模型组);6只健康C57BL/6J小鼠饲以基础饲料为对照组;小鼠原代心肌细胞根据转染情况分为阴性对照组,心肌细胞凋亡因子(cardiac apoptosis factor,CAF)组和CAF-siRNA组。通过荧光定量PCR测定模型组与对照组小鼠MIEF1基因的表达。通过合成lncRNA的小干扰RNA作为反向对照抑制MIEF1在小鼠原代心肌细胞中的表达,应用实时荧光定量PCR验证MIEF1表达情况。结果 (1)对lncRNA基因芯片结果进行差异性分析,实时定量PCR检测结果显示,与正常组相比较,DOX处理组中被命名为CAF的lncRNA表达显著上调(n=4;t=7.79,P<0.01)。(2)DOX诱导的小鼠心肌细胞毒性模型造模成功。荧光定量PCR显示,与空白对照组相比,模型组MIEF1 mRNA的表达量明显降低(n=3;t=14.978,P<0.01);不同浓度DOX处理细胞24 h后,DOX浓度越高,MIEF1 mRNA的表达量显著降低(n=4;t2μmol/L=33.423,P<0.01;t4μmol/L=36.120,P<0.01;t6μmol/L=40.205,P<0.01)。CAFsiRNA组MIEF1下调(n=4;t=12.909,P<0.01),CAF组上调(n=4;t=33.634,P<0.01)。(3)蛋白印迹法显示CAF组MIEF1蛋白表达水平明显低于阴性对照组(n=4;P<0.01),然而CAF-siRNA组MIEF1蛋白表达水平高于阴性对照组(n=4;t=4.892,P<0.01)。结论 LncRNA CAF在心脏细胞和小鼠的心脏响应DOX的治疗下调。用DOX治疗后MIEF1的表达水平显著降低。LncRNA CAF直接靶向51 k Da的MIEF1,并抑制其在转录水平的表达。本研究确定了一种由lncRNA CAF和MIEF1组成的新途径,其介导DOX心脏毒性,为治疗心脏保护提供了有希望的治疗策略。 展开更多
关键词 阿霉素 心脏毒性 长链非编码RNA MIEF1
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新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂ZN-470A抑制乳腺癌的增殖、迁移的机制研究 被引量:4
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作者 王丽荣 于杰 +6 位作者 亓洪昭 刘翠云 朱素杰 胡运洁 周志侠 孙振青 单佩佩 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1523-1529,共7页
目的研究新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂ZN-470A对乳腺癌增殖、迁移的抑制及机制。方法检测ZN-470A对组蛋白去乙酰化酶活性的抑制;Western blot、免疫荧光检测组蛋白H3、H4乙酰化水平的变化及肿瘤组织蛋白的表达变化;镜下观察ZN-470A处理... 目的研究新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂ZN-470A对乳腺癌增殖、迁移的抑制及机制。方法检测ZN-470A对组蛋白去乙酰化酶活性的抑制;Western blot、免疫荧光检测组蛋白H3、H4乙酰化水平的变化及肿瘤组织蛋白的表达变化;镜下观察ZN-470A处理后乳腺癌细胞形态的变化;MTT、克隆形成和Transwell分别检测细胞的增殖、单细胞成瘤和迁移能力。构建原位乳腺癌小鼠模型,定期药物治疗,连续治疗4周后,鉴定对照组和治疗组肿瘤大小和肺转移情况;免疫组化检测肿瘤组织组蛋白H3、H4乙酰化水平的变化。结果ZN-470A对组蛋白去乙酰化酶的活力有明显抑制作用;ZN-470A在体内外对乳腺癌均具有较好的抑制效果。结论ZN-470A可有效的抑制乳腺癌的增殖和迁移,可进一步对其作用机制进行探索。 展开更多
关键词 乳腺癌 增殖 迁移 组蛋白去乙酰化 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 靶向治疗
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健康类公众号在医学健康知识普及中的作用分析 被引量:1
9
作者 程泽伟 刘宁 +3 位作者 赵文科 郑欣慧 周爱霞 周露玙 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2023年第6期930-933,共4页
目的分析健康类微信公众号运营指标,为其成功运营提供参考。方法收集西瓜数据平台和清博数据共享平台的公众号中各行业板块数据,分析并比较资讯、娱乐、文化、情感、财经行业公众号与健康行业公众号间的差异。结果健康类公众号在“预估... 目的分析健康类微信公众号运营指标,为其成功运营提供参考。方法收集西瓜数据平台和清博数据共享平台的公众号中各行业板块数据,分析并比较资讯、娱乐、文化、情感、财经行业公众号与健康行业公众号间的差异。结果健康类公众号在“预估活跃粉丝数目”和“头条平均点赞”指标上超过83%的其他行业公众号,在“头条平均在看次数”指标上超过79%的其他行业公众号,在“头条平均评论条数”指标上低于50%的其他行业公众号。健康行业公众号与资讯、娱乐行业公众号在“预估活跃粉丝数目”指标上的差异有统计学意义(Z=3.71、2.89,P<0.05)。具有专业资源和资质的移动医疗企业类和医疗机构官方微信公众号分别为9个和11个,合计占比20%;未经认证的个人微信公众号占比31%。结论具有专业资源和资质的移动医疗企业类和医疗机构官方微信公众号目前依然较少,大多数健康类公众号的受众数、内容权威性以及专业覆盖度都有待进一步提高。 展开更多
关键词 微信公众号 转化科学 生物医学 健康教育
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非编码RNA调控动脉粥样硬化发生的研究进展 被引量:1
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作者 张延慧 韩文静 +3 位作者 陈超 刘翠云 李培峰 王昆 《转化医学杂志》 2018年第1期60-64,共5页
动脉粥样硬化是一种严重危害人类健康的心血管疾病,动脉粥样硬化的发生与很多因素有关。近年来研究发现非编码RNA在动脉粥样硬化发生过程中发挥重要的调控作用,其中主要包括微小RNA、长链非编码RNA和环状RNA。非编码RNA主要通过引起血... 动脉粥样硬化是一种严重危害人类健康的心血管疾病,动脉粥样硬化的发生与很多因素有关。近年来研究发现非编码RNA在动脉粥样硬化发生过程中发挥重要的调控作用,其中主要包括微小RNA、长链非编码RNA和环状RNA。非编码RNA主要通过引起血管内皮细胞或巨噬细胞的分化、迁移以及凋亡等过程调控动脉粥样硬化的发生。作者总结了微小RNA、长链非编码RNA和环状RNA的一些基本特征以及近几年关于它们调控动脉粥样硬化发生的研究进展。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 微小RNA 长链非编码RNA 环状RNA
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线粒体功能障碍与心力衰竭的关系研究进展 被引量:9
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作者 李炳龙 刘鹏程 刘翠云 《转化医学杂志》 2020年第2期126-128,F0003,共4页
心力衰竭是心脏病变的终末阶段,多种心血管疾病如高血压、肺心病、心肌缺血、心律失常等都可以诱发心力衰竭。研究表明,线粒体功能障碍和心力衰竭的发生发展密切相关,其中线粒体能量代谢障碍、基因突变、氧化应激损伤以及钙稳态失衡是... 心力衰竭是心脏病变的终末阶段,多种心血管疾病如高血压、肺心病、心肌缺血、心律失常等都可以诱发心力衰竭。研究表明,线粒体功能障碍和心力衰竭的发生发展密切相关,其中线粒体能量代谢障碍、基因突变、氧化应激损伤以及钙稳态失衡是诱导心力衰竭的重要因素。深入研究线粒体功能障碍与心力衰竭的关系,有利于寻找治疗心力衰竭的新靶点。作者就线粒体功能障碍与心力衰竭发病关系的相关研究进展作一综述。 展开更多
关键词 心力衰竭 线粒体 线粒体功能障碍
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共价交联明胶微球支架的制备及成骨细胞相容性研究 被引量:1
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作者 占树华 范长江 +3 位作者 蔡学昌 刘霞 董作祥 孙鹏 《精准医学杂志》 2019年第3期268-272,共5页
目的制备外观圆整、分散性好、粒径均匀的明胶微球,构建EDC交联明胶微球支架,探索该支架的成骨细胞相容性,为构建组织工程化骨奠定基础。方法 应用油包水单乳液法制备明胶微球,筛选合适粒径微球。并用EDC/NHS法交联处理微球备用,将小鼠... 目的制备外观圆整、分散性好、粒径均匀的明胶微球,构建EDC交联明胶微球支架,探索该支架的成骨细胞相容性,为构建组织工程化骨奠定基础。方法 应用油包水单乳液法制备明胶微球,筛选合适粒径微球。并用EDC/NHS法交联处理微球备用,将小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1与交联处理的明胶微球共培养作为EDC交联明胶微球组;MC3T3-E1培养于细胞培养板作为标准对照组。于接种培养1 d后采用荧光标记的鬼笔环肽进行F-actin染色,培养1、2、3 d后,分别采用活/死细胞荧光染色法及MTT法检测细胞增殖情况,探索EDC交联明胶微球支架上成骨细胞黏附、伸展情况及细胞增殖活力。结果 制得的明胶微球,外观圆整,分散性好,粒径分布集中。MC3T3-E1可以黏附于明胶微球支架,伸展良好,增殖活跃,表现出良好的细胞活力。结论 EDC交联明胶微球支架具有良好的细胞相容性,有望成为一种新型的骨组织工程支架以及颅骨缺损修复材料。 展开更多
关键词 明胶 微球体 组织支架 成骨细胞 生物相容性材料 交联试剂
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海藻糖增强嗜酸乳杆菌GDMCC1.208抑制动脉粥样硬化作用研究
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作者 高慧娟 李欣 +1 位作者 张蕾 李培峰 《青岛大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第3期21-26,33,共7页
为探究海藻糖在嗜酸乳杆菌GDMCC1.208增殖中的作用及两者组合物对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(^-/-))小鼠动脉粥样硬化发展的影响,实验组ApoE^(-/-)小鼠每日灌胃海藻糖或嗜酸乳杆菌GDMCC1.208或两者组合物,空白对照组和实验对照组小鼠仅灌... 为探究海藻糖在嗜酸乳杆菌GDMCC1.208增殖中的作用及两者组合物对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(^-/-))小鼠动脉粥样硬化发展的影响,实验组ApoE^(-/-)小鼠每日灌胃海藻糖或嗜酸乳杆菌GDMCC1.208或两者组合物,空白对照组和实验对照组小鼠仅灌胃PBS。12周后,通过油红O染色方法测定小鼠主动脉粥样硬化病变面积,检测血清胆固醇水平。研究结果显示,相较于对照组,实验组小鼠主动脉粥样硬化病变面积减小,血清胆固醇水平降低,组合物干预组小鼠病变面积和胆固醇水平变化尤为显著;海藻糖可促进嗜酸乳杆菌GDMCC1.208增殖,两者组合物可能是通过降低胆固醇水平抑制ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化病变发展。这表明,海藻糖和嗜酸乳杆菌GDMCC1.208组合物可能是一种预防和治疗动脉粥样硬化的新方法。 展开更多
关键词 嗜酸乳杆菌GDMCC1.208 海藻糖 动脉粥样硬化 ApoE^(-/-)小鼠
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长链非编码RNA NONMMUT044调节心肌缺血再灌注损伤中细胞坏死机制研究
14
作者 于雪 王涛 +6 位作者 陈鑫哲 鞠杰 王少聪 夏倩倩 赵慨然 辛晓菲 刘翠云 《青岛大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第3期9-14,共6页
为探究I/R中lnc4对细胞坏死的作用及机制,构建小鼠心肌I/R模型,体外利用H_(2)O_(2)诱导心肌细胞坏死,RT-qPCR法检测lnc4 RNA水平表达情况,PI染色检测心肌细胞坏死率,Evans Blue/TTC双染色检测心脏梗死面积,M型超声心动图观测小鼠心脏功... 为探究I/R中lnc4对细胞坏死的作用及机制,构建小鼠心肌I/R模型,体外利用H_(2)O_(2)诱导心肌细胞坏死,RT-qPCR法检测lnc4 RNA水平表达情况,PI染色检测心肌细胞坏死率,Evans Blue/TTC双染色检测心脏梗死面积,M型超声心动图观测小鼠心脏功能变化。研究结果显示,600μmol/L H_(2)O_(2)处理心肌细胞6 h后,lnc4表达上调,过表达lnc4能加剧H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞坏死,抑制lnc4能减弱H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞坏死。小鼠心脏I/R损伤中,过表达lnc4增加了心肌梗死面积,加重了心功能损伤。这表明lnc4可能作为心肌细胞坏死关键调节因子,与下游ZMYND8共同参与调节心肌细胞坏死过程。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 心肌缺血再灌注损伤 心肌梗死 心肌细胞坏死
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piRNA-102526参与缺氧/复氧诱导心肌细胞焦亡作用及机制研究
15
作者 王少聪 鞠杰 +2 位作者 陈鑫哲 于雪 王昆 《青岛大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第3期15-20,共6页
为探究piRNA-102526与心肌细胞焦亡的关系,体外构建小鼠乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧模型,设置3 h、6 h、9 h、12 h、24 h缺氧时间梯度及6 h复氧条件,检测小鼠乳鼠原代心肌细胞焦亡水平。利用qRT-PCR检测piRNA-102526表达水平,Western Blo... 为探究piRNA-102526与心肌细胞焦亡的关系,体外构建小鼠乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧模型,设置3 h、6 h、9 h、12 h、24 h缺氧时间梯度及6 h复氧条件,检测小鼠乳鼠原代心肌细胞焦亡水平。利用qRT-PCR检测piRNA-102526表达水平,Western Blotting检测焦亡相关蛋白(GSDMD、Caspase-1、IL-1β、ASC)表达,PI染色和LDH活性检测细胞死亡。研究结果显示,小鼠乳鼠原代心肌细胞缺氧6 h/复氧6 h,细胞焦亡相关蛋白表达水平最高。抑制piRNA-102526表达,小鼠乳鼠原代心肌细胞焦亡加剧,过表达piRNA-102526,小鼠乳鼠原代心肌细胞焦亡减少。这表明,piRNA-102526能通过Caspase-1参与经典焦亡通路,调节小鼠乳鼠原代心肌细胞焦亡过程。 展开更多
关键词 细胞焦亡 PIRNA 原代小鼠心肌细胞 心肌细胞损伤 GSDMD
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CLK2基因在结肠腺癌患者中的表达变化及其对结肠腺癌细胞功能的调控
16
作者 李天翔 王霞 +1 位作者 赵程 王昆 《临床医学进展》 2024年第11期826-835,共10页
目的:评估不同阶段结肠腺癌患者中CDC样激酶2 (CLK2)基因的表达,以及CLK2在结肠腺癌细胞中的表达变化和CLK2所介导的细胞功能。方法:在TIMER数据库和GEPIA数据库分析CLK2在健康与不同肿瘤组织中的表达水平,找到差异性表达显著的肿瘤类... 目的:评估不同阶段结肠腺癌患者中CDC样激酶2 (CLK2)基因的表达,以及CLK2在结肠腺癌细胞中的表达变化和CLK2所介导的细胞功能。方法:在TIMER数据库和GEPIA数据库分析CLK2在健康与不同肿瘤组织中的表达水平,找到差异性表达显著的肿瘤类型。分析TCGA数据库中各个阶段结肠腺癌患者组织中CLK2的表达水平变化。使用RT-qPCR和western blot方法检测了CLK2基因在肿瘤组织和细胞系中的表达变化。在敲低CLK2的条件下,使用western blot方法检测细胞增殖标志物和细胞周期标志物的表达。最后,使用STRING工具分析与CLK2基因相关性较强的多个关键基因。结果:结肠腺癌组织中的CLK2基因表达显著升高(p Objective: To assess CDC-like kinase 2 (CLK2) gene expression in patients with different stages of colon adenocarcinoma, as well as changes in CLK2 expression in colon adenocarcinoma cells and cellular functions mediated by CLK2. Methods: Screening for CLK2 differentially expressed tumor types in the TIMER database and the GEPIA database. Detection of CLK2 gene changes with colon adenocarcinoma tumor stage in the TCGA database. Changes in CLK2 gene expression in tumor tissues and cell lines were detected using RT-qPCR and western blot methods. The expressions of cell proliferation markers and cell cycle markers were detected using western blot method under the condition of knocking down CLK2. Finally, multiple key genes with strong correlation with CLK2 gene were analyzed using STRING tool. Results: CLK2 gene expression was significantly elevated in colon adenocarcinoma tissues (p < 0.001), and the high expression of CLK2 gene was significantly correlated with the clinical features of colon adenocarcinoma (pathological stage, T stage) (p < 0.05). CLK2 gene expression is elevated in colon adenocarcinoma cells, and knockdown of CLK2 expression can effectively inhibit cell proliferation and cell cycle. Finally, CLK3, CLK1, SRSF12 and other genes are potential binding targets of CLK2 gene. Conclusion: The expression level of the CLK2 gene is significantly correlated with the progression of colon adenocarcinoma, and decreasing the expression of the CLK2 gene is expected to be a new approach to the treatment of patients with colon adenocarcinoma. 展开更多
关键词 CLK2 结肠腺癌 TCGA数据库 细胞增殖
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益生菌联合干预对动脉粥样硬化影响及其可能机制
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作者 李欣 高慧娟 +1 位作者 张蕾 李培峰 《青岛大学学报(医学版)》 2024年第6期818-824,共7页
目的探讨鼠李糖乳杆菌(LGG)与嗜酸乳杆菌(LA)联合干预抑制动脉粥样硬化的潜在机制。方法选用C57BL/6J小鼠与APOE^(-/-)小鼠为实验对象,益生菌灌胃干预喂养小鼠。将小鼠分为空白对照组、实验对照组、LGG组、LA组和混合物组,各11只。采用... 目的探讨鼠李糖乳杆菌(LGG)与嗜酸乳杆菌(LA)联合干预抑制动脉粥样硬化的潜在机制。方法选用C57BL/6J小鼠与APOE^(-/-)小鼠为实验对象,益生菌灌胃干预喂养小鼠。将小鼠分为空白对照组、实验对照组、LGG组、LA组和混合物组,各11只。采用冷冻切片及油红O染色观察主动脉粥样斑块情况。通过试剂盒检测各组小鼠血清中总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)含量。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测主动脉炎症因子和肝脏胆固醇转运相关基因的表达水平。结果LGG与LA在体外具有良好的耐酸性和耐胆盐能力。体内实验结果显示,5组小鼠的动脉粥样斑块面积和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、胆固醇转运相关基因(CYP7A1、ABCA1和ABCG8)表达比较差异有统计学意义(F=18.04~86.45,P<0.001)。两两比较结果显示,与LGG组、LA组相比较,混合物组小鼠的主动脉斑块面积较少(t_(LSD)=2.642、4.307,P<0.05),TNF-α和IL-6表达水平降低(t_(LSD)=3.918~5.533,P<0.05),CYP7A1、ABCA1和ABCG8表达水平增高(t_(LSD)=5.271~6.598,P<0.05)。结论益生菌联合干预可以抑制动脉粥样硬化的发生发展,可能是通过抑制炎症反应或是促进胆固醇代谢等机制发挥作用。 展开更多
关键词 鼠李糖乳杆菌 嗜酸乳杆菌 动脉粥样硬化 炎症 胆固醇
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5′tRF-LysCTT对小鼠心肌细胞铁死亡的调控作用及其机制
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作者 赵炎 王凯 +1 位作者 程雪丽 王昆 《精准医学杂志》 2024年第4期289-294,共6页
目的探究tRNA衍生的小RNA(tsRNA)对小鼠心肌细胞铁死亡的调控作用及其机制。方法采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测8周龄C57BL/6J小鼠心脏、肝脏、脾脏、肾脏、大脑、肌肉中5′tRF-LysCTT的相对表达水平。将原代心肌细胞分为A~D组,A组... 目的探究tRNA衍生的小RNA(tsRNA)对小鼠心肌细胞铁死亡的调控作用及其机制。方法采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测8周龄C57BL/6J小鼠心脏、肝脏、脾脏、肾脏、大脑、肌肉中5′tRF-LysCTT的相对表达水平。将原代心肌细胞分为A~D组,A组细胞使用完全培养基培养60 h,B组先使用完全培养基培养24 h,再依次进行饥饿处理12 h,H/R处理24 h,C组和D组细胞分别转染antagomir-NC和antagomir-5′tRF-LysCTT,并于转染24 h后再依次进行饥饿(12 h)和H/R处理(12 h);将原代心肌细胞分为E~G组,E组细胞使用完全培养基培养24 h,F组细胞转染agomir-NC 24 h,G组心肌细胞转染agomir-5′tRF-LysCTT 24 h。采用RT-qPCR检测A~G组小鼠心肌细胞中5′tRF-LysCTT和Ptgs2、Gpx4、Slc7a11的相对表达水平,分别采用亚铁离子比色法测试盒、脂质活性氧(ROS)染色、CCK8试剂盒检测A~G组小鼠心肌细胞内亚铁离子相对水平、ROS水平及心肌细胞的存活率,采用普鲁士蓝染色试剂盒观察A~G组小鼠心肌细胞内铁离子沉积情况。结果RT-qPCR检测结果显示,与肝脏、脾脏、肾脏、大脑、肌肉中相比较,小鼠心脏中5′tRF-LysCTT表达水平最高(F=16.21,t=3.81~7.93,P<0.05)。D组与B组相比,心肌细胞内5′tRF-LysCTT和Ptgs2相对表达水平降低、Gpx4以及Slc7a11相对表达水平升高、亚铁离子相对水平和ROS水平降低,心肌细胞的细胞存活率升高(t=3.26~15.61,P<0.05),细胞内铁离子沉积明显增多,而C组与B组相比,细胞内的上述指标的水平差异无显著性(P>0.05)。G组与E组相比,心肌细胞内5′tRF-LysCTT和Ptgs2相对表达水平升高、Gpx4和Slc7a11相对表达水平降低、亚铁离子相对水平和ROS水平升高,心肌细胞的细胞存活率降低(t=3.57~91.84,P<0.05),细胞内铁离子沉积明显减少,而F组与E组相比,细胞内的上述指标的水平比较差异无显著性(P>0.05)。结论5′tRF-LysCTT对于小鼠心肌细胞铁死亡具有调控作用,敲低细胞内5′tRF-LysCTT可以抑制H/R诱导的心肌细胞铁死亡,而过表达5′tRF-LysCTT可促进心肌细胞铁死亡的发生。 展开更多
关键词 RNA 转移 RNA 非翻译小片段 低氧 心肌再灌注损伤 肌细胞 心脏 铁死亡
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piRNA DQ725559通过抑制心肌细胞铁死亡通路抗心肌缺血再灌注损伤的作用
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作者 王瑞荃 陈鑫哲 +1 位作者 王涛 王昆 《青岛大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第1期1-7,共7页
为探究心肌缺血再灌注损伤(Ischemia-reperfusion Injury,IRI)与铁死亡关系,寻找相关Piwi相互作用RNA(Piwi-interacting RNA,piRNA),利用小鼠乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧(Hypoxia/Reoxygenation,H/R)构建心肌细胞IRI模型,通过细胞生存率... 为探究心肌缺血再灌注损伤(Ischemia-reperfusion Injury,IRI)与铁死亡关系,寻找相关Piwi相互作用RNA(Piwi-interacting RNA,piRNA),利用小鼠乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧(Hypoxia/Reoxygenation,H/R)构建心肌细胞IRI模型,通过细胞生存率反映诱导铁死亡最佳H/R时间点,筛选铁死亡相关piRNA,检测铁死亡相关指标变化。研究结果显示,缺氧18 h/复氧6 h后,心肌细胞铁死亡和IRI呈现关联,抑制DQ725559的表达会加重心肌细胞铁死亡和IRI,过表达DQ725559会减轻心肌细胞铁死亡和IRI。研究结果表明,DQ725559可通过调节心肌细胞铁死亡通路发挥IRI调控作用,过表达DQ725559可成为RNA治疗心血管疾病新策略。 展开更多
关键词 缺血再灌注损伤 PIRNA 心肌细胞 铁死亡
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3′tRF-PheGAA对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大的调控作用及其机制
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作者 程雪丽 王凯 +1 位作者 赵炎 王昆 《精准医学杂志》 2024年第3期194-198,共5页
目的探讨3′tRF-PheGAA对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大的调控作用及其机制。方法获取小鼠乳鼠的原代心肌细胞,培养24 h以后分为A~G组。其中A组使用DMEM/F12完全培养液培养心肌细胞36 h;B组使用NC转染心肌细胞36 h;C组使用agom... 目的探讨3′tRF-PheGAA对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大的调控作用及其机制。方法获取小鼠乳鼠的原代心肌细胞,培养24 h以后分为A~G组。其中A组使用DMEM/F12完全培养液培养心肌细胞36 h;B组使用NC转染心肌细胞36 h;C组使用agomir-3′tRF-PheGAA转染心肌细胞36 h;D组使用DMEM/F12完全培养液培养心肌细胞84 h;E组在心肌细胞中加入终浓度为1μmol/L的AngⅡ处理48 h;F组使用anta-NC转染心肌细胞36 h,随后加入终浓度1μmol/L的AngⅡ处理48 h;G组使用anta-3′tRF-PheGAA转染心肌细胞36 h,随后加入终浓度1μmol/L的AngⅡ处理48 h。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测各组心肌细胞中3′tRF-PheGAA及心房钠尿肽(ANP)、脑钠肽(BNP)、β-重链肌球蛋白(β-MHC)基因表达水平;使用罗丹明标记鬼笔环肽对各组心肌细胞中F-肌动蛋白进行染色并计算心肌细胞骨架表面积。结果RT-qPCR检测结果显示,A~C组心肌细胞中3′tRF-PheGAA及ANP、BNP、β-MHC基因水平差异具有显著性(F=137.10~1061.00,P<0.05),其中与A组相比,C组3′tRF-PheGAA及ANP、BNP、β-MHC基因水平显著上调(P<0.05);D~G组心肌细胞3′tRF-PheGAA及ANP、BNP、β-MHC基因表达水平差异有显著性(F=117.60~572.30,P<0.05),其中与E组相比,G组3′tRF-PheGAA及ANP、BNP、β-MHC基因表达水平显著降低(P<0.05)。罗丹明标记的鬼笔环肽染色结果显示,A~C组心肌细胞骨架表面积差异有显著性(F=35.06,P<0.05),其中与A组相比,C组细胞骨架表面积显著增加(P<0.05);D~G组心肌细胞骨架表面积差异有显著性(F=48.05,P<0.05),其中与E组相比,G组细胞骨架表面积显著减少(P<0.05)。结论3′tRF-PheGAA通过抑制自身表达,从而缓解AngⅡ诱导的心肌细胞肥大。 展开更多
关键词 RNA 非翻译小片段 血管紧张素Ⅱ 肌细胞 心脏 心脏扩大
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