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热应激蛋白研究进展及其应用前景 被引量：12
1
作者 计红 杨焕民 吴永魁 《生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期1-3,62,共4页
将对热应激蛋白的重要生物学功能,基因表达调控的研究进展以及应用前景进行综述。
关键词 应激 热应激蛋白 分子伴侣
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转乳铁蛋白肽和α干扰素基因的牛胎儿成纤维细胞的制备 被引量：1
2
作者 余大为 张守峰 +7 位作者 朱化彬 张锦霞 范宗兴 郝海生 刘岩 赵学明 秦彤 杜卫华 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1547-1553,共7页
旨在构建含有乳铁蛋白肽基因和α干扰素基因的载体,并制备转基因牛胎儿成纤维细胞,为研制抗乳房炎和口蹄疫转基因克隆牛提供供体细胞。本研究构建了由山羊β-酪蛋白启动子启动的牛乳铁蛋白肽基因和由CMV启动子调控的人α干扰素基因的载... 旨在构建含有乳铁蛋白肽基因和α干扰素基因的载体,并制备转基因牛胎儿成纤维细胞,为研制抗乳房炎和口蹄疫转基因克隆牛提供供体细胞。本研究构建了由山羊β-酪蛋白启动子启动的牛乳铁蛋白肽基因和由CMV启动子调控的人α干扰素基因的载体,以EGFP基因作为报告基因,neo基因作为筛选基因;分别采用脂质体和电击法转染牛胎儿成纤维细胞,G418筛选得到转基因阳性细胞,并用PCR方法检测转基因细胞中目的基因的整合情况,用Western blotting检测α干扰素蛋白的表达。结果,得到了同时含有牛乳铁蛋白肽基因和人α干扰素基因的转基因牛胎儿成纤维细胞,并且α干扰素蛋白在转基因细胞中能有效表达。 展开更多
关键词 乳铁蛋白肽 Α干扰素 转基因 牛胎儿成纤维细胞
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区分高低致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-PCR方法的建立 被引量：2
3
作者 孙春亮 赵敬慧 +1 位作者 刘月 蔡锦顺 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第7期226-228,共3页
为了在临床上快速、有效区分高低致病性PRRSV,参考Gen Bank发表的代表性毒株,根据高致病性毒株Nsp2基因上有30个氨基酸不连续缺失的特点,设计并合成1对引物,扩增高低致病性PRRSV Nsp2基因的目的条带长度分别为644、734 bp,从而将二者区... 为了在临床上快速、有效区分高低致病性PRRSV,参考Gen Bank发表的代表性毒株,根据高致病性毒株Nsp2基因上有30个氨基酸不连续缺失的特点,设计并合成1对引物,扩增高低致病性PRRSV Nsp2基因的目的条带长度分别为644、734 bp,从而将二者区分开来。用本方法对长春及其周边地区送检60份病料进行盲检,检出10份高致病性PRRSV。并与N蛋白基因引物RT-PCR诊断方法进行比较,结果均一致,表明该方法准确性高。本研究所建立的RT-PCR方法为PRRSV在临床上的快速诊断和实验室流行病学调查提供了简捷的技术手段。 展开更多
关键词 PRRSV NSP2基因 RT-PCR诊断 流行病学调查
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猪繁殖与呼吸综合征病毒部分Nsp2基因及GP5基因的克隆与序列分析 被引量：4
4
作者 孙春亮 赵敬慧 +2 位作者 赵立峰 刘月 蔡锦顺 《延边大学农学学报》 2014年第3期192-198,共7页
为掌握目前长春及周边地区高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行动态及遗传变异规律,选取PRRSV CC-13株的部分Nsp2和GP5蛋白基因为研究对象,通过RT-PCR方法扩增获得这些基因片段,对其进行克隆、测序,再用MEGA(4.0)等生物软件分... 为掌握目前长春及周边地区高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行动态及遗传变异规律,选取PRRSV CC-13株的部分Nsp2和GP5蛋白基因为研究对象,通过RT-PCR方法扩增获得这些基因片段,对其进行克隆、测序,再用MEGA(4.0)等生物软件分别对其核苷酸及其推导氨基酸序列与从GenBank中选取的10余株代表毒株的相应序列进行比较。这不仅为CC-13分离毒株的遗传变异特性及来源提供了解,同时也为本地区PRRS的防制及进一步研究本地区PRRSV的分子生物学特性提供数据依据。 展开更多
关键词 PRRSV NSP2基因 GP5蛋白基因 序列分析
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猪源新型甲型H1N1流感病毒的分离鉴定及遗传进化特点
5
作者 张红娜 苗增民 +4 位作者 李欣 王浩 周玉法 夏咸柱 柴同杰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期583-591,共9页
本研究旨在了解猪源新型甲型H1N1流感病毒山东分离株的遗传进化特点。对山东地区出现的疑似H1N1流感病死猪进行病料采样,然后进行病毒的分离鉴定,并对分离病毒株(A/swine/Shandong/07/2011)的HA、NA、PB2、PB1、PA、NP、NS和M基因进行... 本研究旨在了解猪源新型甲型H1N1流感病毒山东分离株的遗传进化特点。对山东地区出现的疑似H1N1流感病死猪进行病料采样,然后进行病毒的分离鉴定,并对分离病毒株(A/swine/Shandong/07/2011)的HA、NA、PB2、PB1、PA、NP、NS和M基因进行遗传进化分析。结果显示,该株病毒8个片段的核酸序列与A/H1N1(2009)对应序列的相似性都大于99%,并且该毒株HA蛋白的裂解位点和优先识别唾液酸α-2,6受体的位点与A/H1N1(2009)也高度一致,分别为PSIQSR↓GLFGAI和190D、225D。但是,与A/H1N1(2009)毒株的HA蛋白相比,受体结合位点处出现了重要的突变(Q226R)。该研究结果为进一步研究猪源新型甲型H1N1流感病毒的分子进化提供了重要信息。 展开更多
关键词 山东地区 猪源新型甲型H1N1流感病毒 分离鉴定 相似性 基因序列分析
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引物间隔臂修饰对液相芯片食源性致病菌检测的影响
6
作者 史贇学 刘文森 +4 位作者 许娜 朱文赫 孙成彪 贾静 沈明浩 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2018年第20期140-144,共5页
建立液相芯片同时检测鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)、志贺氏菌(Shigella)方法,并对引物进行间隔臂(Spacer C3)修饰,验证C3修饰对食源性致病菌检测的影响。对引物C3修饰组和未修饰组两种食源性致病菌进行条件优化和对比。试验表明所建... 建立液相芯片同时检测鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)、志贺氏菌(Shigella)方法,并对引物进行间隔臂(Spacer C3)修饰,验证C3修饰对食源性致病菌检测的影响。对引物C3修饰组和未修饰组两种食源性致病菌进行条件优化和对比。试验表明所建立的食源性致病菌检测体系方法学评价良好,多批次结果显示稳定性较好,反应体系退火温度和杂交温度分别确定为56℃和38℃。结果表明,引物使用C3修饰对检测结果的阳性荧光值强度中值(median fluorescence intensity,MFI)有良好信号放大作用,为食源性致病菌液相芯片检测提供了参考。 展开更多
关键词 液相芯片 食源性致病菌 间隔臂 方法学评价
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犬瘟热病毒检测方法研究进展 被引量：6
7
作者 李天松 王磊 +8 位作者 王胜乐 姜雪 许微微 李元果 高玉伟 王铁成 黄耕 赵永坤 夏咸柱 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第4期305-308,共4页
犬瘟热病毒属副粘病毒科麻疹病毒属成员,食肉目各科动物均有感染报道,但主要感染犬、狼、貂、狐等动物,发病率、死亡率较高,给养殖业带来巨大的经济损失。因此注射疫苗、尽早诊断本病并及时采取相应的防治措施是减少损失的有效手段。本... 犬瘟热病毒属副粘病毒科麻疹病毒属成员,食肉目各科动物均有感染报道,但主要感染犬、狼、貂、狐等动物,发病率、死亡率较高,给养殖业带来巨大的经济损失。因此注射疫苗、尽早诊断本病并及时采取相应的防治措施是减少损失的有效手段。本文阐述了犬瘟热病毒的检测方法,以期为该病毒的研究提供参考。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 检测方法 血清学 PCR 综述
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单方中药马蹄香和5种微生态制剂中的低聚糖含量测定和比较分析 被引量：1
8
作者 黄永坤 潘媛 +7 位作者 肖桦 张峻 刘梅 董坚 刘流 杨成金 王承宇 黄根 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2012年第10期868-872,875,共6页
目的深入认识马蹄香治疗病毒肠炎的有效成分。方法应用戴安CS-3000离子色谱分析仪测定马蹄香散剂和酪酸梭菌二联活菌散剂、双歧杆菌乳杆菌三联活菌片、双歧三联活菌胶囊、布拉酵母菌散剂及乳酸菌素片5种微生态制剂中的10种低聚糖含量。... 目的深入认识马蹄香治疗病毒肠炎的有效成分。方法应用戴安CS-3000离子色谱分析仪测定马蹄香散剂和酪酸梭菌二联活菌散剂、双歧杆菌乳杆菌三联活菌片、双歧三联活菌胶囊、布拉酵母菌散剂及乳酸菌素片5种微生态制剂中的10种低聚糖含量。结果低聚糖总含量:双歧三联活菌片>酪酸梭菌二联活菌散剂>双歧三联活菌胶囊>布拉酵母菌散剂>乳酸菌素片>马蹄香散剂。在单个的低聚糖含量中,半乳糖三糖含量:酪酸梭菌二联活菌散剂>双歧三联活菌片>马蹄香散剂>乳酸菌素片>布拉酵母菌散剂>双歧三联活菌胶囊;棉籽糖含量:双歧三联活菌片>双歧三联活菌胶囊>布拉酵母菌散剂>乳酸菌素片>酪酸梭菌二联活菌散剂>马蹄香散剂;水苏糖含量:双歧三联活菌胶囊>布拉酵母菌散剂>乳酸菌素片>酪酸梭菌二联活菌散剂>马蹄香散剂>双歧三联活菌片;毛蕊花糖含量:马蹄香散剂>乳酸菌素片>双歧三联活菌胶囊>双歧三联活菌片>酪酸梭菌二联活菌散剂>布拉酵母菌散剂;潘糖含量:马蹄香散剂>布拉酵母菌散剂>酪酸梭菌二联活菌散剂>其他;鼠李糖含量:乳酸菌素片>布拉酵母菌散剂>马蹄香散剂>其他;麦芽四～七糖含量:乳酸菌素片>马蹄香散剂>布拉酵母菌散剂>其他。结论微生态制剂中低聚糖主要是半乳糖三糖、棉籽糖和水苏糖的含量高。与其他微生态制剂比较,马蹄香散剂中毛蕊花糖和潘糖的含量最高,半乳糖三糖、鼠李糖和麦芽四至七糖的含量也较高,这些低聚糖的含量高可能与改善肠道菌群和治疗病毒性肠炎的有效性有关。 展开更多
关键词 马蹄香 微生态制剂 低聚糖
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