噻唑蓝比色法检测变异链球菌、血链球菌、伴放线菌嗜血菌的研究 被引量：2

1

作者 王忠朝 范丽苑 +2 位作者 蒋俊强 蔡炜 丁一 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期306-310,共5页

目的探讨噻唑蓝(MTT)法用于口腔常见细菌(变异链球菌、血链球菌、伴放线菌嗜血菌)活菌计数的可行性及具体应用过程中的实验条件。方法本实验以菌落形成单位(CFU)法为标准对照。实验通过改变比色的波长、反应时间、试剂剂量、细菌菌龄等... 目的探讨噻唑蓝(MTT)法用于口腔常见细菌(变异链球菌、血链球菌、伴放线菌嗜血菌)活菌计数的可行性及具体应用过程中的实验条件。方法本实验以菌落形成单位(CFU)法为标准对照。实验通过改变比色的波长、反应时间、试剂剂量、细菌菌龄等实验条件,获得MTT法测量常见口腔细菌的一系列参数,对变异链球菌、血链球菌、伴放线菌嗜血菌进行活菌计数,并与CFU法所测的细菌数量相比较。结果 MTT法在测量变异链球菌时,最佳的检测波长为510nm,最佳的测定细菌范围是1.5×105～1.0×107CFU·mL-1。MTT法在测量血链球菌时,最佳的检测波长为545nm,最佳的测定细菌范围是1.5×105～2.0×107CFU·mL-1。MTT法在测量伴放线菌嗜血菌时,最佳的检测波长为557nm,最佳的测定细菌范围是1.0×106～5.0×107CFU·mL-1。MTT法与菌落形成单位法的测量结果是一致的,并且对于不同菌龄的变异链球菌、血链球菌、伴放线菌嗜血菌均适用。结论 MTT法可以用于检测变异链球菌、血链球菌、伴放线菌嗜血菌等口腔常见细菌的活菌数量,并且具有快速、方便等优点。 展开更多

关键词 噻唑蓝比色法 变异链球菌 血链球菌 伴放线菌嗜血菌 活菌计数

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不同材料硬性透氧性角膜接触镜表面细菌黏附能力的对比研究 被引量：1

2

作者 王英明 钱雪峰 +4 位作者 张晓峰 夏蔚 钟蕾 孙正太 夏静 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期717-721,共5页

背景角膜接触镜的佩戴可能会增加角膜感染的机会，一些研究认为角膜接触镜材料的透氧性与角膜感染的发生有关。目的比较用于制作硬性透氧性角膜接触镜（RGP—CL）的材料，如氟硅丙烯酸酯A（XO）、氟硅丙烯酸酯B（EO）和聚甲基丙烯酸甲酯... 背景角膜接触镜的佩戴可能会增加角膜感染的机会，一些研究认为角膜接触镜材料的透氧性与角膜感染的发生有关。目的比较用于制作硬性透氧性角膜接触镜（RGP—CL）的材料，如氟硅丙烯酸酯A（XO）、氟硅丙烯酸酯B（EO）和聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）表面对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和铜绿假单胞杆菌的黏附情况。方法分别将3种RGP—CL镜片材料置于3种细菌悬液中培养24h，采用MTT比色法、旋涡震荡菌落计数法和扫描电子显微镜观察并比较3种材料表面黏附细菌的能力。结果MTT比色法结果显示，XO制镜材料对金黄色葡萄球菌的黏附能力（A值）明显低于EO材料和PMMA材料，差异均有统计学意义（q=7．379、8．207，P〈0．01），但EO材料与PMMA材料对金黄色葡萄球菌黏附能力的比较差异无统计学意义（q=0．828，P〉0．05）；XO材料及EO材料表面表皮葡萄球菌的黏附能力低于PMMA材料，差异均有统计学意义（q=14．000、12．800，P〈0．01），而XO材料与EO材料间表皮葡萄球菌黏附能力的比较差异无统计学意义（q=1．200，P〉0．05）；3种材料对铜绿假单胞杆菌的黏附能力（A值）差异无统计学意义（F=2．155，P=0．138）。旋涡震荡菌落计数法结果显示，XO、EO、PMMA材料表面金黄色葡萄球菌的黏附数量分别为（37．9±1．5）x10^6、（49．9±2．2）x10^6、（67．4±1．6）×10^6个，差异有统计学意义（F=206．240，P=0．000），EO材料、PMMA材料表面金黄色葡萄球菌菌落计数明显高于XO材料，差异均有统计学意义（P〈0．01）。XO、EO、PMMA材料表面表皮葡萄球菌的黏附数量分别为（7．94-1．3）×10。、（10．5±1．5）×10。、（11．2±1．2）×10。个，XO材料表面表皮葡萄球菌的黏附数量明显低于PMMA材料，差异有统计学意义（q=5．060，P〈0．05），XO材料与EO材料、EO材料与PMMA材料之间表皮葡萄球菌黏附数量的差异均无统计学意义（q=3．290、1．770，P〉0．05）。3种材料表面铜绿假单胞杆菌的黏附数量差异无统计学意义（F=0．232，P=0．799）。扫描电子显微镜观察显示，XO材料和EO材料表面金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的黏附呈散在性分布，而PMMA材料表面这两种细菌黏附形成“网状”外观，3种镜片材料表面铜绿假单胞杆菌形态无明显差别。结论PMMA材料表面细菌的黏附能力强于XO材料和EO材料，RGP—CL的透氧性对镜片表面细菌黏附的能力无明显影响。 展开更多

关键词 细菌 角膜接触镜 硬性透氧性 MTT比色法 旋涡震荡菌落计数法 扫描电子显微镜

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猫儿眼植物酸抗肿瘤作用的实验研究 被引量：2

3

作者 俞发荣 连秀珍 谢明仁 《甘肃科学学报》 2005年第2期67-69,共3页

　采用气-质联用仪、流式细胞仪、MTT法和台盼蓝法对猫儿眼植物酸组分及其抗肿瘤活性进行实验研究.结果为,分别给予SGC-7901细胞猫儿眼植物酸10.0μg/mL、1.0μg/mL和0.1μg/mL48h后测定,对肿瘤细胞的抑制率分别为73.5%、52.9%和26.5%,... 　采用气-质联用仪、流式细胞仪、MTT法和台盼蓝法对猫儿眼植物酸组分及其抗肿瘤活性进行实验研究.结果为,分别给予SGC-7901细胞猫儿眼植物酸10.0μg/mL、1.0μg/mL和0.1μg/mL48h后测定,对肿瘤细胞的抑制率分别为73.5%、52.9%和26.5%,半数抑制浓度(IC50)为0.909μg/mL;对细胞增殖抑制率分别为70.8%、58.7%和30.9%,IC50为0.552μg/mL;凋亡率分别为26.8%、22.6%和12.4%. 展开更多

关键词 猫儿眼植物酸 流式细胞仪 MTT法 台盼蓝法

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和胃降逆胶囊通过PI3K/AKT信号通路调控人胃癌AGS细胞增殖与凋亡机制研究 被引量：5

4

作者 窦建卫 杨艺 +4 位作者 杨小蒨 杨燕莹 李高彪 唐锐 朱宇红 《山东中医药大学学报》 2022年第1期101-107,共7页

目的:探究和胃降逆胶囊对人胃癌AGS细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:用不同药物剂量(3 g/kg、6 g/kg、12 g/kg)制备的和胃降逆胶囊含药血清分别干预人胃癌AGS细胞,分为和胃降逆胶囊含药血清低剂量组、中剂量组、高剂量组及空白... 目的:探究和胃降逆胶囊对人胃癌AGS细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:用不同药物剂量(3 g/kg、6 g/kg、12 g/kg)制备的和胃降逆胶囊含药血清分别干预人胃癌AGS细胞,分为和胃降逆胶囊含药血清低剂量组、中剂量组、高剂量组及空白组,分别干预AGS细胞24 h、48 h、72 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,采用流式细胞仪检测细胞周期分布情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞相关蛋白磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、促凋亡基因(Bax)、抑细胞凋亡蛋白(Bcl-2)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和细胞周期蛋白依赖性抑制剂(p21)的表达情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Cyclin D1和p21 mRNA表达情况。结果:随着和胃降逆胶囊含药血清作用时间的延长,各药物组细胞活力逐渐降低,同剂量组24 h、48 h、72 h比较差异有统计学意义(P<0.05),48 h与72 h比较差异无统计学意义。在同一干预时间点,细胞活力随着药物血清浓度的增加而降低。各组含药血清处理AGS细胞48 h后,G0/G1期细胞比值与空白组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);和胃降逆胶囊可以下调AGS细胞中p-PI3K、p-AKT蛋白及抑制凋亡蛋白Bcl-2和Cyclin D1的表达(P<0.05),上调AGS细胞中促凋亡蛋白Bax和p21的表达(P<0.05);和胃降逆胶囊可以下调AGS细胞中抑制凋亡基因Bcl-2和Cyclin D1 mRNA的表达(P<0.05),上调AGS细胞中促凋亡基因Bax和p21 mRNA的表达(P<0.05),且呈现出浓度相关性。结论:和胃降逆胶囊通过抑制PI3K/AKT通路的活化,调控下游周期阻滞相关基因和凋亡相关基因的表达,进而抑制人胃癌AGS细胞增殖并促进AGS细胞凋亡。 展开更多

关键词 和胃降逆胶囊 人胃癌AGS细胞 细胞增殖 细胞凋亡 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路 四甲基偶氮唑蓝法 蛋白质印迹法 实时荧光定量聚合酶链式反应

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BALB/c鼠脾脏T淋巴细胞体外转化试验条件的优化研究 被引量：5

5

作者 郝树彬 温红玲 +1 位作者 尹玉霞 侯丽 《中国医疗器械信息》 2011年第8期31-34,共4页

为了探索BALB/c鼠脾脏T淋巴细胞转化试验的最佳培养条件,采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法,对脾细胞浓度和刀豆蛋白A(ConA)的浓度两个参数进行研究。结果表明,在本次实验条件下,采用5×105个/ml细胞、2.5μg/ml的ConA可获得最大的吸光度... 为了探索BALB/c鼠脾脏T淋巴细胞转化试验的最佳培养条件,采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法,对脾细胞浓度和刀豆蛋白A(ConA)的浓度两个参数进行研究。结果表明,在本次实验条件下,采用5×105个/ml细胞、2.5μg/ml的ConA可获得最大的吸光度(A)值,两个因素间存在明显的交互效应。 展开更多

关键词 T淋巴细胞体外转化试验 MTT法 BALB/C鼠

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甘肃猫儿眼提取物对人LGC-7910细胞毒性作用及机制 被引量：8

6

作者 俞发荣 连秀珍 《甘肃科学学报》 2005年第4期26-28,共3页

给予人LGC-7910细胞甘肃猫儿眼提取物体外培养,采用流式细胞仪、MTT法对甘肃猫儿眼提取物细胞毒性活性进行了检测.结果为,分别给予LGC-7910细胞甘肃猫儿眼提取物10.0、1.0和0.1μg/mL 48 h后测定,对细胞增殖的抑制率分别为82.4%、54.9%... 给予人LGC-7910细胞甘肃猫儿眼提取物体外培养,采用流式细胞仪、MTT法对甘肃猫儿眼提取物细胞毒性活性进行了检测.结果为,分别给予LGC-7910细胞甘肃猫儿眼提取物10.0、1.0和0.1μg/mL 48 h后测定,对细胞增殖的抑制率分别为82.4%、54.9%和33%,半数抑制浓度(IC50)为0.53μg/mL;凋亡率分别为32.1%、25.6%和16.3%. 展开更多

关键词 甘肃猫儿眼提取物 流式细胞仪 MTT法

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消痰散结方对体外肿瘤诱导的血管内皮细胞生长的影响 被引量：5

7

作者 李峻 许玲 魏品康 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第S1期200-201,共4页

目的:研究消痰散结方对体外肿瘤细胞诱导的血管内皮细胞生长的影响。方法:将不同浓度消痰散结方与胃癌 MKN-45细胞和体外培养的人脐静脉内皮细胞共同作用,用甲基噻唑基四唑(MTT)法测定人脐静脉内皮细胞数。结果:消痰散结方50μg/ml、100... 目的:研究消痰散结方对体外肿瘤细胞诱导的血管内皮细胞生长的影响。方法:将不同浓度消痰散结方与胃癌 MKN-45细胞和体外培养的人脐静脉内皮细胞共同作用,用甲基噻唑基四唑(MTT)法测定人脐静脉内皮细胞数。结果:消痰散结方50μg/ml、100 μg/ml、200 μg/ml 能明显抑制胃癌 MKN-45细胞诱导的血管内皮细胞生长,与对照组比较差异有显著性(P<0.01);而消痰散结方对血管内皮细胞生长无显著影响。结论:消痰散结方能抑制胃癌 MKN-45细胞诱导的血管内皮细胞生长。 展开更多

关键词 消痰散结方 胃癌 血管内皮细胞 甲基噻唑基四唑法

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环氧合酶2抑制剂的抗胰腺癌作用及相关机制 被引量：2

8

作者 谷倬宇 李军 +2 位作者 李思源 肖智伟 周婷 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期81-84,共4页

目的探讨环氧合酶2(COX-2)抑制剂对胰腺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力和对COX-2、基质金属蛋白酶(MMP)-14蛋白表达的影响以及可能的抗胰腺癌机制。方法不同浓度的COX-2抑制剂塞来昔布(20、60、100μmol/L)处理胰腺癌细胞后,用MTT比色法检... 目的探讨环氧合酶2(COX-2)抑制剂对胰腺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力和对COX-2、基质金属蛋白酶(MMP)-14蛋白表达的影响以及可能的抗胰腺癌机制。方法不同浓度的COX-2抑制剂塞来昔布(20、60、100μmol/L)处理胰腺癌细胞后,用MTT比色法检测细胞的增殖能力;用Transwell侵袭实验和划痕实验检测细胞的侵袭能力和迁移能力;ELISA检测MMP-14和COX-2的蛋白表达情况。结果 MTT增殖实验、Transwell侵袭实验、划痕实验分别提示,COX-2抑制剂作用后胰腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力均以浓度梯度形式下降(P<0.05);ELISA结果显示,胰腺癌细胞中COX-2和MMP-14的蛋白表达水平相应降低(P<0.05),两者表达具有显著正相关性(r=0.873,P<0.05)。结论 COX-2抑制剂可能通过抑制COX-2表达下调MMP-14表达,进而以浓度梯度形式减弱胰腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力,起到抗胰腺癌作用。 展开更多

关键词 胰腺癌 环氧合酶2抑制剂 基质金属蛋白酶14 侵袭 迁移 四甲基偶氮唑盐法 人

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柯里拉京对顺铂抗卵巢癌Hey和SKOV3细胞的增敏作用 被引量：1

9

作者 李旭丹 林志灿 +2 位作者 李煊 郑志忠 明艳林 《华侨大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2018年第6期892-898,共7页

探讨柯里拉京(corilagin)与羟基喜树碱(HCPT)、顺铂(cDDP)单独及联合用药,体外抗卵巢癌细胞Hey,SKOV3的活性及与cDDP联用机制的初步研究.利用四唑盐(MTT)比色法检测柯里拉京,HCPT,cDDP在不同质量浓度下,单独及联合用药对卵巢癌细胞的增... 探讨柯里拉京(corilagin)与羟基喜树碱(HCPT)、顺铂(cDDP)单独及联合用药,体外抗卵巢癌细胞Hey,SKOV3的活性及与cDDP联用机制的初步研究.利用四唑盐(MTT)比色法检测柯里拉京,HCPT,cDDP在不同质量浓度下,单独及联合用药对卵巢癌细胞的增殖抑制率,并根据金氏公式计算其协同指数(Q),进而评价两药联用的增敏效果.通过形态学观察吖啶橙(AO)/溴化乙啶(EB)和Hoechst 33258染色及线粒体膜电位变化,探究其诱导机制.结果表明:柯里拉京对卵巢细胞Hey,SKOV3的半抑制浓度(IC_(50)值)分别为19.20,17.17μmol·L^(-1);柯里拉京与cDDP联合作用对于SKOV3,Hey两种细胞均有协同作用,与HCPT联用只对SKOV3细胞有协同作用,对Hey细胞仅是相加效应;联合用药组对卵巢癌细胞的抑制效果显著高于单独用药组;柯里拉京与cDDP联合用药对卵巢癌细胞的杀伤效果可能是通过诱导细胞凋亡实现的. 展开更多

关键词 柯里拉京 顺铂 卵巢癌 增敏作用 细胞凋亡 四唑盐比色法

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扶正抑瘤饮和全量、半量氟尿嘧啶联用对胃癌细胞的抑制作用

10

作者 邱根全 王锐 +2 位作者 刘昳 南克俊 孙喜才 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第S1期186-188,共4页

目的:研究扶正抑瘤饮(简称中药)联用全量、半量血浆峰浓度氟尿嘧啶(5-Fu)对体外胃癌细胞增殖的影响。方法:中药分别联用全量、半量血浆峰浓度5-Fu,并以全量血浆峰浓度5-Fu(125 μg/ml)为对照。采用 MTT、法观察各组对胃癌细胞的抑制作... 目的:研究扶正抑瘤饮(简称中药)联用全量、半量血浆峰浓度氟尿嘧啶(5-Fu)对体外胃癌细胞增殖的影响。方法:中药分别联用全量、半量血浆峰浓度5-Fu,并以全量血浆峰浓度5-Fu(125 μg/ml)为对照。采用 MTT、法观察各组对胃癌细胞的抑制作用。结果:与5-Fu 组比较,中药加半量5-Fu 组对8801、MGC-803细胞株抑瘤率差异无显著性;对 SGC-7901细胞株,抑瘤率高于单用5-Fu 组(P<0.05)。对8801细胞株,中药加全量5-Fu 组与5-Fu 组比较抑制率差异无显著性;对 SGC-7901、MGC-803细胞株,中药高浓度联用组抑瘤率显著高于5-Fu 组(P<0.05)。结论:中药对不同分化程度的胃癌细胞的增殖均有不同程度的抑制作用。且中药可增强半量血浆峰浓度5-Fu 的抑瘤率,高浓度的中药可增强血浆峰度5-Fu 对部分肿瘤细胞株的抑瘤作用。 展开更多

关键词 扶正抑瘤饮 胃癌细胞株 MTT 法 抑瘤作用

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蛇炮簕对EB病毒壳抗原在体外细胞表达的抑制作用

11

作者 周海峰 梁毅 《新中医》 CAS 2012年第8期166-167,共2页

目的:观察蛇炮簕对EB病毒壳抗原(EBV-VCA)在体外细胞表达的抑制作用。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法证实蛇炮簕提取液对B95-8细胞无毒性后,采用免疫酶法研究蛇炮簕提取液对B95-8细胞EBV-VCA表达的抑制作用。结果:无毒性浓度的蛇炮簕... 目的:观察蛇炮簕对EB病毒壳抗原(EBV-VCA)在体外细胞表达的抑制作用。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法证实蛇炮簕提取液对B95-8细胞无毒性后,采用免疫酶法研究蛇炮簕提取液对B95-8细胞EBV-VCA表达的抑制作用。结果:无毒性浓度的蛇炮簕提取液对正丁酸钠、巴豆油联合激发的EBV-VCA表达有较明显抑制作用,且随浓度增加而抑制作用加强。结论:蛇炮簕有较强的体外抑制鼻咽癌EBV-VCA表达的作用,值得进一步研究。 展开更多

关键词 蛇炮簕 EB病毒壳抗原 B95-8细胞 四甲基偶氮唑盐法 免疫酶法

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促细胞生长包被丝素蛋白的制备

12

作者 赵培 庞广昌 王雪青 《武汉大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期329-334,共6页

分别以聚乙二醇、明胶、海藻酸钙、壳聚糖/聚乙二醇和多聚L-赖氨五种材料作为包被物用不同方法对丝素蛋白进行预处理,制备5种丝素蛋白包被支架,并探讨它们对HeLa,293T和B16三种细胞生长的促进效果.结果表明,HeLa,293T和B16分别适合多聚L... 分别以聚乙二醇、明胶、海藻酸钙、壳聚糖/聚乙二醇和多聚L-赖氨五种材料作为包被物用不同方法对丝素蛋白进行预处理,制备5种丝素蛋白包被支架,并探讨它们对HeLa,293T和B16三种细胞生长的促进效果.结果表明,HeLa,293T和B16分别适合多聚L-赖氨酸、壳聚糖/聚乙二醇和海藻酸钙的丝素蛋白包被方法.在包被支架上不同细胞均呈扁平状、集落性附着在丝素蛋白纤维上.本实验获得的丝素蛋白5种包被支架增强了丝素蛋白的弹性、柔软性和黏附性,提高了丝素蛋白的可操作性,且对细胞具有较好的生物相容性和明显的促进生长作用. 展开更多

关键词 丝素蛋白 包被 四唑盐(MTT)比色法 细胞活性

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