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麦红吸浆虫滞育进程中细胞色素c氧化酶活力及SmCOX1和SmCOX2的表达模式分析
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作者 古丽旦·白山别克 黄启通 +1 位作者 李方向 成卫宁 《昆虫学报》 北大核心 2025年第1期14-22,共9页
【目的】本研究旨在探讨麦红吸浆虫Sitodiplosis mosellana细胞色素c氧化酶(cytochrome c oxidase,COX)酶活力及其亚基SmCOX1和SmCOX2的基因表达变化与其滞育发育的关系,为阐明麦红吸浆虫滞育的能量代谢机制提供理论依据。【方法】采用... 【目的】本研究旨在探讨麦红吸浆虫Sitodiplosis mosellana细胞色素c氧化酶(cytochrome c oxidase,COX)酶活力及其亚基SmCOX1和SmCOX2的基因表达变化与其滞育发育的关系,为阐明麦红吸浆虫滞育的能量代谢机制提供理论依据。【方法】采用COX酶活力测试盒测定麦红吸浆虫自然滞育进程(滞育前、滞育、滞育后静息和滞育后发育)不同阶段幼虫中SmCOX活性;采用RT-PCR和RACE技术克隆SmCOX1和SmCOX2全长cDNA序列并进行生物信息分析;采用qPCR技术检测SmCOX1和SmCOX2在麦红吸浆虫滞育进程中的表达模式。【结果】麦红吸浆虫幼虫中SmCOX活性在滞育阶段较滞育前显著降低,并在整个滞阶段维持较低水平,但在滞育后静息阶段显著升高,到滞育后发育阶段再次升高,显著高于滞育和滞育后静息阶段。克隆获得了开放阅读框长度分别为1536和660 bp的SmCOX1和SmCOX2(GenBank登录号分别为PP466915和PP466916),两个基因碱基A+T含量超过75%,分别编码511和220个氨基酸,预测的蛋白分子量分别为57.70和25.76 kD。氨基酸序列分析表明,SmCOX1和SmCOX2具有线粒体COX酶催化核心典型的氧化还原铜(CuA和CuB)辅基和含血红素的金属中心heme a和heme a3,与同为瘿蚊科(Cecidomyidae)的稻瘿蚊Orseolia oryzae同源蛋白氨基酸序列一致性最高、亲缘关系最近。qPCR结果表明,SmCOX1和SmCOX2在麦红吸浆虫幼虫滞育进程中的表达量存在显著差异,在滞育前和滞育后发育阶段的表达量最高,其次为在滞育后静息期阶段的表达量,在滞育阶段的表达量最低,即变化趋势与SmCOX活性变化基本一致。【结论】麦红吸浆虫滞育进程中SmCOX活性和SmCOX1/2表达的降低与滞育阶段低水平的氧气消耗紧密相关,而其升高与滞育解除和滞育后发育阶段需要较多的能量供给紧密相关。 展开更多
关键词 麦红吸浆虫 滞育 细胞色素c氧化酶 酶活力 基因表达
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α-细辛醚上调细胞色素C及Caspase-3表达影响食管癌Eca-109细胞的生物学行为
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作者 黄静 储韬 《南通大学学报(医学版)》 2024年第4期342-345,共4页
目的:分析α-细辛醚上调细胞色素C(cytochrome C,cytC)及Caspase-3表达对食管癌Eca-109细胞生物学行为的影响。方法:将食管癌Eca-109细胞随机等量分为4组,即低、中及高剂量(分别给予25、50及100 mg/L的α-细辛醚),另随机取等量细胞加入... 目的:分析α-细辛醚上调细胞色素C(cytochrome C,cytC)及Caspase-3表达对食管癌Eca-109细胞生物学行为的影响。方法:将食管癌Eca-109细胞随机等量分为4组,即低、中及高剂量(分别给予25、50及100 mg/L的α-细辛醚),另随机取等量细胞加入等体积培养液作为空白组,培养48 h后通过平板克隆实验检测4组细胞增殖情况,Annexin V/PI法检测细胞凋亡情况,RT-qPCR及Western Blot法检测细胞中cytC及Caspase-3 mRNA及蛋白表达。结果:(1)细胞克隆数在空白组最高,低剂量组显著高于高剂量组;凋亡率在空白组最低,低剂量组显著低于高剂量组。(2)4组细胞迁移至小室下的细胞数空白组>低剂量组>中剂量组>高剂量组。(3)CytC及Caspase-3蛋白在高剂量组表达显著高于空白组及低剂量组,且中剂量组表达高于空白组。(4)CytC及Caspase-3 mRNA的表达:高剂量组>中剂量组>低剂量组>空白组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:α-细辛醚抑制Eca-109细胞增殖及侵袭,并且可能通过上调cytC及Caspase-3表达促进调亡。 展开更多
关键词 Α-细辛醚 细胞色素c cASPASE-3 食管癌EcA-109细胞 增殖 凋亡
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CDC25C表达下调的黑色素瘤细胞线粒体应激反应和线粒体途径凋亡情况观察
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作者 缪欣宇 栗彦飞 +4 位作者 郑方园 刘海龙 张瑶尧 晁耐霞 莫发荣 《山东医药》 CAS 2024年第2期31-34,38,共5页
目的探讨细胞分裂周期蛋白25C(CDC25C)对黑色素瘤B16细胞线粒体应激反应和线粒体途径凋亡的影响。方法取黑色素瘤B16细胞进行培养,将细胞随机分为转染组、转染对照组、空白对照组。转染组转染CDC25C低表达慢病毒质粒,转染对照组转染慢... 目的探讨细胞分裂周期蛋白25C(CDC25C)对黑色素瘤B16细胞线粒体应激反应和线粒体途径凋亡的影响。方法取黑色素瘤B16细胞进行培养,将细胞随机分为转染组、转染对照组、空白对照组。转染组转染CDC25C低表达慢病毒质粒,转染对照组转染慢病毒空质粒,空白对照组正常培养。利用Rhod-2/AM与MitoSOX荧光探针检测细胞线粒体内Ca^(2+)浓度及线粒体活性氧(ROS),RT-qPCR法和Western blotting法分别检测细胞线粒体应激反应相关分子ClpP、LONP1及线粒体途径凋亡相关分子Caspase-9、Caspase-3 mRNA和蛋白表达。结果与转染对照组和空白对照组相比,转染组细胞线粒体Ca^(2+)及ROS含量增加,ClpP、LONP1、Caspase-9、Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05或<0.01)。结论CDC25C表达下调激活黑色素瘤B16细胞发生线粒体应激反应,并诱导线粒体途径的细胞凋亡。 展开更多
关键词 色素 细胞分裂周期蛋白25同源蛋白c 线粒体应激反应 线粒体钙离子超载 线粒体活性氧 细胞凋亡
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核壳结构上转换发光纳米粒子的合成及用于细胞色素C的检测
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作者 董佳瑶 易静 +2 位作者 刘浏 于贺 唐宏武 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期125-131,共7页
本工作合成了三层核壳结构的上转换发光纳米粒子,其中第一层是惰性核,第二层为发光层,为了增强上转换发光强度,又在表面包覆了第三层惰性壳层。该材料粒径均一、分散性良好,其发光层厚度约为2.4nm,惰性壳层厚度约为2.9nm。在其表面修饰... 本工作合成了三层核壳结构的上转换发光纳米粒子,其中第一层是惰性核,第二层为发光层,为了增强上转换发光强度,又在表面包覆了第三层惰性壳层。该材料粒径均一、分散性良好,其发光层厚度约为2.4nm,惰性壳层厚度约为2.9nm。在其表面修饰了细胞色素C的适配体链及互补链,在适配体的3’端修饰了BHQ3基团,能够猝灭上转换纳米粒子在655nm波长处的发光。当细胞色素C存在时,适配体与细胞色素C结合从而离开其表面,使655nm处的发光恢复。在检测过程中,540nm处的发光强度不会发生变化,可以用作细胞色素C的比率荧光检测。结果表明,当细胞色素C浓度在5~80μmol/L范围时,发光信号恢复程度与细胞色素C浓度呈线性相关,相关系数为0.998,检出限为1μmol/L。所建立方法可为细胞色素C的荧光检测提供一种新的技术思路。 展开更多
关键词 上转换发光纳米粒子 细胞色素c 发光共振能量转移
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MiR-29a/b/c对葡萄膜黑色素瘤细胞功能的影响及机制
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作者 潘虹婷 王超 +1 位作者 朱鲜 侯强 《温州医科大学学报》 CAS 2024年第4期274-278,286,共6页
目的:探索miR-29a/b/c对葡萄膜黑色素瘤(UM)细胞功能的影响及其作用机制。方法:使用脂质体转染技术将hsa-miR-29a/b/c或基质金属蛋白酶2(MMP2)特异性siRNA转染进UM细胞。使用MTS实验和Matrigel Transwell实验分别检测UM细胞增殖和侵袭... 目的:探索miR-29a/b/c对葡萄膜黑色素瘤(UM)细胞功能的影响及其作用机制。方法:使用脂质体转染技术将hsa-miR-29a/b/c或基质金属蛋白酶2(MMP2)特异性siRNA转染进UM细胞。使用MTS实验和Matrigel Transwell实验分别检测UM细胞增殖和侵袭能力的变化。使用半定量PCR实验检测UM细胞中MMP2m RNA水平表达量的变化。使用ELISA实验检测UM细胞上清中MMP2蛋白分泌量的变化。结果:转染miR-29a/b/c抑制了UM细胞的增殖(P<0.05)和侵袭能力(P<0.05)。MiR-29a/b/c不影响MMP2 mRNA转录,但均能抑制UM细胞分泌MMP2(P<0.05)。在UM细胞中干扰MMP2抑制UM细胞的侵袭能力(P<0.05)。结论:Mi R-29a/b/c抑制UM细胞的增殖和侵袭。MiR-29a/b/c减少其下游靶蛋白MMP2的分泌,在UM细胞中干扰MMP2抑制细胞侵袭。 展开更多
关键词 miR-29a/b/c 葡萄膜黑色素 细胞增殖 侵袭 基质金属蛋白酶2
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蛇苔细胞色素C(Cyt C)的序列分析及功能预测
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作者 边春象 李劲涛 +1 位作者 彭正松 阮期平 《武汉植物学研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期432-436,共5页
通过核酸序列比对,在蛇苔cDNA文库中获得细胞色素C(Cyt C)基因序列,并对其编码的蛋白质产物从同源性、氨基酸组成、理化性质、亚细胞位点、结构和功能等进行生物信息学分析和预测。结果表明,该cDNA序列具有完整的开放阅读框(ORF,104~44... 通过核酸序列比对,在蛇苔cDNA文库中获得细胞色素C(Cyt C)基因序列,并对其编码的蛋白质产物从同源性、氨基酸组成、理化性质、亚细胞位点、结构和功能等进行生物信息学分析和预测。结果表明,该cDNA序列具有完整的开放阅读框(ORF,104~442bp),推测编码蛋白为112个氨基酸,与向日葵、荞麦、玉米等Cyt C存在着较高的保守性(相似性分别为84%、85%和84%),同属于细胞色素C超家族;蛇苔Cyt C蛋白的分子量为11998.7Da,不含信号肽,成熟的Cyt C起始于Ala2,其活性位点为Cys23、Cys26、His27和Met89;对蛋白质的翻译后修饰预测表明Ala2存在乙酰化修饰,Lys81和Lys95分别进行三甲基赖氨酸修饰。这些特点与其他植物Cyt C保持一致,表明该基因为蛇苔cyt c基因,在进化上相对保守。 展开更多
关键词 细胞色素c 蛇苔 序列 功能预测
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四氯合铂酸钾(K_2PtCl_4)与细胞色素c(Cyt·c)修饰体系的进一步研究
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作者 孙自勇 夏志成 +2 位作者 杨至灏 唐雯霞 朱德煦 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第1期26-31,共6页
从K_2PtCl_4与Cyt·c反应产物中分离得四个组分,SDS-PAGE及元素分析测定结果表明,它们分别对应于Cyt·c寡聚体、三聚体、二聚体及单体。这揭示了K_2PtCl_4对Cyt·c存在多位点修饰,南非如Kostic报道的Met-65为其唯一修饰位... 从K_2PtCl_4与Cyt·c反应产物中分离得四个组分,SDS-PAGE及元素分析测定结果表明,它们分别对应于Cyt·c寡聚体、三聚体、二聚体及单体。这揭示了K_2PtCl_4对Cyt·c存在多位点修饰,南非如Kostic报道的Met-65为其唯一修饰位点。通过K_2PtCl_4与羧甲基化Cyt·c修饰产物的分析研究,证实了另一标记位点His-33的存在。对Cyt·c二聚体衍生物的还原电位、紫外一可見及红外光谱研究表明,Cyt·c血红素周围的电子环境仍保持完整,但其二级结构有较大的扰动。 展开更多
关键词 化学修饰 细胞色素c 四氯合铂酸钾
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血清细胞色素C、基质金属蛋白酶9对慢性阻塞性肺疾病的诊断价值
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作者 张新 袁晓梅 《中国科技期刊数据库 医药》 2024年第11期097-101,共5页
探讨血清MMP-9、CytC水平变化对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的诊断及病情评估的价值。方法 选取2019年11月至2022年10月在新乡医学院第一附属医院接受治疗的160例COPD患者为观察组,80例同期健康体检者为对照组。酶联免疫法监测入选者血清MM... 探讨血清MMP-9、CytC水平变化对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的诊断及病情评估的价值。方法 选取2019年11月至2022年10月在新乡医学院第一附属医院接受治疗的160例COPD患者为观察组,80例同期健康体检者为对照组。酶联免疫法监测入选者血清MMP-9、CytC水平并完善氧分压、第一秒用力呼气容积、中性粒细胞等资料。对比两组间血清MMP-9、CytC水平差异。Pearson相关分析评价血清细胞色素C、基质金属蛋白酶9水平与CRP的相关性。以COPD的发生为结果,分别建立血清MMP-9、CytC水平的受试者工作特征曲线(ROC)。通过曲线下面积(AUC)评估血清MMP-9、CytC对COPD的诊断价值。结果 血清MMP-9、CytC、NEUT及CRP水平观察组高于对照组,而PaO2、FEV1%观察组低于对照组,(P均<0.05)。血清细胞色素C、基质金属蛋白酶9水平与CRP正相关(r=0.492、0.403,P<0.05)。血清CytC诊断COPD的AUC为0.751,敏感度和特异度分别为60.63%、86.25%。血清MMP-9诊断COPD的AUC为0.897,敏感度和特异度分别为80.63%、93.75%。结论 COPD患者血清CytC、MMP-9水平升高。血清CytC、MMP-9水平与COPD肺功能下降及炎症反应有关,监测血清MMP-9、CytC水平有助于COPD的诊断及病情活动程度的评估。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 细胞色素c 基质金属蛋白酶9
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利拉鲁肽基于线粒体-细胞色素C介导心肌细胞凋亡
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作者 黄学明 戴萌 徐菁慧 《西北药学杂志》 CAS 2024年第2期88-92,共5页
目的探讨利拉鲁肽在缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)处理的心肌细胞中的作用及其潜在机制。方法建立大鼠心肌细胞株(H9C2)H/R模型以模拟体外心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤。用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5)-dimethylthi... 目的探讨利拉鲁肽在缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)处理的心肌细胞中的作用及其潜在机制。方法建立大鼠心肌细胞株(H9C2)H/R模型以模拟体外心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤。用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT]和Annexin V FITC-PI染色法测定细胞增殖和凋亡。检测细胞氧化应激产物和线粒体功能。用蛋白印迹法(Western blotting)检测细胞凋亡蛋白表达和细胞色素C的释放。结果利拉鲁肽保护H9C2细胞免受H/R诱导的损伤,因其可减弱H/R对H9C2细胞活力、细胞凋亡和活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生的影响(P<0.05)。利拉鲁肽可保护线粒体功能并防止H/R损伤后H9C2细胞中细胞色素C的释放(P<0.05)。结论阐明了利拉鲁肽在治疗I/R相关心肌损伤中的潜在心血管保护作用。 展开更多
关键词 利拉鲁肽 缺氧/复氧 线粒体-细胞色素c 心肌细胞 凋亡
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细胞色素c(Cytc)诱导烟草悬浮细胞(BY-2)凋亡 被引量:4
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作者 王庆华 邓文君 李艳红 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2004年第6期666-668,共3页
用不同浓度细胞色素c(Cyt c)诱导继代时间不同的烟草悬浮细胞48 h后观察形态学特征的结果表明,继代培养10 和13 d的细胞均在10mmol·L-1Cyt c时出现最高的细胞凋亡率,而继代5 d的细胞在Cyt c浓度为12.5mmol·L-1时细胞凋 亡的... 用不同浓度细胞色素c(Cyt c)诱导继代时间不同的烟草悬浮细胞48 h后观察形态学特征的结果表明,继代培养10 和13 d的细胞均在10mmol·L-1Cyt c时出现最高的细胞凋亡率,而继代5 d的细胞在Cyt c浓度为12.5mmol·L-1时细胞凋 亡的诱导率仍表现上升趋势;DNA电泳检测结果显示凋亡处理的细胞中DNA呈现较明显的DNA梯度。 展开更多
关键词 烟草 继代培养 悬浮细胞 诱导率 浓度 形态学特征 电泳检测 细胞色素c DNA 凋亡
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单只轮虫DNA提取及其细胞色素C氧化酶Ⅰ亚基部分序列测定 被引量:20
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作者 董云伟 牛翠娟 +2 位作者 鲍蕾 李庆芬 黄晨西 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期81-83,共3页
通过调整试剂剂量及实验条件与步骤 ,利用WizardTM基因组DNA纯化试剂盒可以稳定、快捷地提取单只轮虫的DNA。以提取的DNA为模板 ,利用COⅠ通用引物 ,扩增并测定了萼花臂尾轮虫 (Brachionuscalyci florus)COⅠ部分基因的序列。与褶皱臂... 通过调整试剂剂量及实验条件与步骤 ,利用WizardTM基因组DNA纯化试剂盒可以稳定、快捷地提取单只轮虫的DNA。以提取的DNA为模板 ,利用COⅠ通用引物 ,扩增并测定了萼花臂尾轮虫 (Brachionuscalyci florus)COⅠ部分基因的序列。与褶皱臂尾轮虫 (B plicatilis)COⅠ基因序列比较结果表明 ,此片断确为轮虫COⅠ基因片断 。 展开更多
关键词 单只轮虫 DNA 提取 cOI基因片段 细胞色素c 氧化酶
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独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞细胞色素C及pro-Caspase-9、3的影响 被引量:27
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作者 王武炼 林煜 +2 位作者 张怡元 肖莉莉 冯尔宥 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第33期5269-5273,共5页
背景:前期研究表明细胞凋亡是关节软骨细胞的中心性特征,对软骨破坏起着支配性的作用,是关节软骨退行性改变的病理因素之一。目的:观察独活寄生汤含药血清对大鼠退变软骨细胞释放细胞色素C、pro Caspase-9和pro Caspase-3的影响,探讨独... 背景:前期研究表明细胞凋亡是关节软骨细胞的中心性特征,对软骨破坏起着支配性的作用,是关节软骨退行性改变的病理因素之一。目的:观察独活寄生汤含药血清对大鼠退变软骨细胞释放细胞色素C、pro Caspase-9和pro Caspase-3的影响,探讨独活寄生汤治疗骨性关节炎的可能分子生物学机制。方法:建立体外退变软骨细胞模型,分别给予独活寄生汤含药血清或空白血清干预24,48 h,收集软骨细胞,Western Blot法检测干预后退变软骨细胞细胞色素C、pro Caspase-9和pro Caspase-3蛋白表达。结果与结论:随着干预时间的延长,在胞浆中空白血清组和含药血清组细胞色素C蛋白释放均逐渐降低,含药血清组释放较空白血清组明显减少(P<0.05);线粒体中空白血清组和含药血清组细胞色素C蛋白外漏均逐渐降低,含药血清组外漏较空白血清组明显减少(P<0.05)。空白血清组和含药血清组pro Caspase-9、pro Caspase-3蛋白量均逐渐升高,含药血清组升高更显著,且24 h组与48 h组之间差异有显著性意义(P<0.01)。结果提示独活寄生汤可以通过减少细胞色素C的释放,减少Caspase-9、Caspase-3的前体裂解,推测能有效抑制软骨细胞凋亡。 展开更多
关键词 骨关节炎 膝关节 中草药 细胞色素c 组织构建 软骨细胞 独活寄生汤 膝骨性关节炎 细胞色素c procaspase-9 procaspase-3 国家自然科学基金
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线粒体细胞色素c介导的caspase-9激活通路参与大骨节病关节软骨细胞凋亡的发生机制 被引量:21
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作者 刘江涛 郭雄 +4 位作者 吴翠艳 马玮娟 韩晶 武世勋 张银刚 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期580-584,共5页
目的通过评价线粒体功能研究线粒体介导的caspase-9激活通路参与成人大骨节病关节软骨细胞凋亡的机制。方法关节软骨细胞培养,Hoechst 33258染色检测软骨细胞核形态,流式细胞仪检测软骨细胞凋亡率和细胞内活性氧含量,Western bloting检... 目的通过评价线粒体功能研究线粒体介导的caspase-9激活通路参与成人大骨节病关节软骨细胞凋亡的机制。方法关节软骨细胞培养,Hoechst 33258染色检测软骨细胞核形态,流式细胞仪检测软骨细胞凋亡率和细胞内活性氧含量,Western bloting检测细胞色素c的表达,荧光法检测caspase-9和caspase-3活性。结果大骨节病患者关节软骨细胞较正常软骨细胞凋亡百分率增加,线粒体细胞色素c释放,caspase-9和caspase-3活性增高,且活性氧含量增加。结论线粒体氧化应激参与了大骨节病软骨细胞的病理生理变化,线粒体功能障碍可能在大骨节病关节软骨细胞凋亡过程发挥了重要作用。 展开更多
关键词 线粒体 细胞凋亡 软骨细胞 大骨节病 细胞色素c cASPASE-9 cASPASE-3 活性氧(ROS)
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补骨脂和补骨脂内酯对NADPH-细胞色素C还原酶及血清肌酐的影响 被引量:19
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作者 宓穗卿 洪馨 +5 位作者 黄天来 叶少梅 欧卫平 冯美蓉 许庆文 刘启德 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 1998年第3期147-150,共4页
补肾壮阳药补骨脂水煎剂能显著增加肝脏微粒体的蛋白含量及NADPH-细胞色素C还原酶的活性,并能降低血清肌酐浓度,提示补骨脂水煎剂具有肝药酶的诱导作用,并能增加药物从肾脏清除的速度,加快药物在体内的代谢转化及向体外清除... 补肾壮阳药补骨脂水煎剂能显著增加肝脏微粒体的蛋白含量及NADPH-细胞色素C还原酶的活性,并能降低血清肌酐浓度,提示补骨脂水煎剂具有肝药酶的诱导作用,并能增加药物从肾脏清除的速度,加快药物在体内的代谢转化及向体外清除的过程。补骨脂内酯也能显著增加肝脏微粒体的蛋白含量,并对血清肌酐有影响。 展开更多
关键词 补骨脂 补骨脂内酯 NADPH 细胞色素c 还原酶
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湖北省庙河地区钉螺细胞色素C氧化酶1基因差异的研究 被引量:29
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作者 石朝辉 邱持平 +2 位作者 夏明仪 冯正 George M.Davis 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期41-44,共4页
目的 比较湖北省庙河沿岸地区钉螺CO1基因序列的差异 ,探讨光壳螺与肋壳螺差异的原因。方法 在该地区选 7个点 (上游 4个点 ,下游 3个点 )采集钉螺 ,用CTAB法提取钉螺基因组DNA ,PCR方法扩增CO1基因 ,纯化后测序 ,运用ESEE软件排序并... 目的 比较湖北省庙河沿岸地区钉螺CO1基因序列的差异 ,探讨光壳螺与肋壳螺差异的原因。方法 在该地区选 7个点 (上游 4个点 ,下游 3个点 )采集钉螺 ,用CTAB法提取钉螺基因组DNA ,PCR方法扩增CO1基因 ,纯化后测序 ,运用ESEE软件排序并比较变异位点 ,观察各点钉螺的CO1基因单倍体型 ,运用PHYLIP软件计算遗传距离 ,绘制基因进化树。结果 获得CO1基因大小为 638bp ,上游和下游累积变异位点数分别为 2 9和 46,两者差异具有显著性 ;各采集点内钉螺按变异位点多少可分为两组 ;各采集点间存在有相同的基因单倍体型 ;上游和下游螺群之间的遗传距离为 0 0 2 2 1± 0 0 10 5 ;在FITCH绘制的基因进化树上 ,上游和下游地区钉螺交错分布在同一亚种不同的两个分支中。结论 在不同的生态环境下 ,下游地区钉螺CO1基因的变异强度比上游大 ;庙河各采集点螺群间存在一定的基因流动 ;庙河地区螺群属湖北钉螺湖北亚种 (O h hupensis) ,可能存在着两种不同进化速率的螺群。 展开更多
关键词 细胞色素c氧化酶 湖北钉螺 基因差异 日本血吸虫
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离子液体1-丁基-3-三甲基硅咪唑六氟磷酸盐萃取细胞色素C 被引量:10
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作者 程德红 陈旭伟 +1 位作者 舒杨 王建华 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1187-1190,共4页
建立了疏水性离子液体1-丁基-3-三甲基硅咪唑六氟磷酸盐(BtmsimPF6)萃取细胞色素C(Cyt-c)的新方法。在萃取条件为pH1.0,Cyt-c溶液体积3mL,BtmsimPF6体积400μL,萃取时间30min时,5mg/LCyt-c的萃取效率为85%。萃取机理研究表明:在酸性条件... 建立了疏水性离子液体1-丁基-3-三甲基硅咪唑六氟磷酸盐(BtmsimPF6)萃取细胞色素C(Cyt-c)的新方法。在萃取条件为pH1.0,Cyt-c溶液体积3mL,BtmsimPF6体积400μL,萃取时间30min时,5mg/LCyt-c的萃取效率为85%。萃取机理研究表明:在酸性条件下,Cyt-c发生构型转变,肽链伸展,使疏水性基团外露,增加了Cyt-c在疏水性离子液体中的溶解性;同时,当pH<2.0时,血红素基团中的Fe与Met-80的配位断裂,空出第六个配位空间,离子液体咪唑阳离子进入到肽链孔穴与Fe发生配位,形成新的配位键,从而被萃取到离子液体中。 展开更多
关键词 细胞色素c 离子液体 萃取 机理
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微波对大鼠脑线粒体细胞色素C氧化酶亚基转录水平的影响 被引量:9
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作者 谢燕 江海洪 +4 位作者 龚茜芬 张广斌 卢波 徐庆 余争平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期987-989,共3页
目的 观察微波辐照对大鼠大脑皮层和海马组织线粒体编码基因COXⅠ和核编码基因COXⅣmRNA表达水平的影响 ,探讨微波辐照是否影响线粒体能量代谢。方法 平均功率密度为 3mW /cm2 和 3 0mW /cm2 微波急性辐照大鼠 1h后 ,应用RT PCR检测... 目的 观察微波辐照对大鼠大脑皮层和海马组织线粒体编码基因COXⅠ和核编码基因COXⅣmRNA表达水平的影响 ,探讨微波辐照是否影响线粒体能量代谢。方法 平均功率密度为 3mW /cm2 和 3 0mW /cm2 微波急性辐照大鼠 1h后 ,应用RT PCR检测大鼠大脑皮层和海马组织COXⅠ和COXⅣ基因转录水平的变化。结果  3mW /cm2 微波辐照后 0、3、2 4h ,大鼠脑海马和大脑皮层COXⅠ、COXⅣmRNA表达无显著变化。 3 0mW /cm2 微波辐照后 0、3、2 4h ,大鼠脑海马和大脑皮层COXⅠmRNA表达均明显降低 ,而COXⅣmRNA表达无显著变化。结论 微波辐照下调大鼠大脑皮层和海马线粒体编码基因COXⅠmRNA表达 ,并存在剂量依赖关系 。 展开更多
关键词 微波 线粒体 细胞色素c氧化酶 基因表达
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大剂量高压氧对脑梗死大鼠细胞色素C及caspase-3的影响 被引量:15
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作者 于秋红 郁军超 +2 位作者 吉康祥 刘亚玲 薛连璧 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2016年第5期540-543,共4页
目的观察单次高压氧(HBO)治疗9 h对永久性大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠细胞色素C和caspase-3水平的影响。方法48只Sprague-Dawley大鼠制作永久性MCAO模型,分为对照组(n=24)和高压氧组(n=24),高压氧组大鼠于造模成功后3 h予单次高压氧治疗9... 目的观察单次高压氧(HBO)治疗9 h对永久性大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠细胞色素C和caspase-3水平的影响。方法48只Sprague-Dawley大鼠制作永久性MCAO模型,分为对照组(n=24)和高压氧组(n=24),高压氧组大鼠于造模成功后3 h予单次高压氧治疗9 h,压力0.2 MPa。于造模成功后3 h、13 h、24 h行大鼠Garcia神经功能评分,于造模成功后13 h、24 h TUNEL法检测大鼠脑组织细胞凋亡数,ELISA法检测缺血半暗带脑组织细胞色素C及活性caspase-3水平。结果两组大鼠造模成功后13h、24 h神经功能均有明显改善,两组间无显著性差异(t<2.07,P>0.05)。两组造模成功后13 h、24 h均见凋亡细胞,高压氧组明显少于对照组(t>6.57,P<0.01)。高压氧组细胞色素C和caspase-3的水平在造模成功后24 h低于对照组(t>2.41,P<0.05)。结论大剂量高压氧超早期治疗可降低脑缺血后细胞色素C和caspase-3水平,减少细胞凋亡,可能是高压氧治疗脑梗死的机制之一。 展开更多
关键词 脑梗死 高压氧 细胞色素c cASPASE-3 凋亡 大鼠
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细胞色素P450CYP2C9基因多态性对甲苯磺丁脲代谢动力学的影响 被引量:22
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作者 李健 文思远 +4 位作者 王睿 陈昆 方翼 裴斐 王升启 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期695-699,共5页
目的研究细胞色素P450CYP2C9基因多态性对甲苯磺丁脲代谢动力学的影响。方法用基因芯片对137名健康志愿者进行CYP2C9基因多态性检测,将受试者分为CYP2C9野生型、杂合突变型和纯合突变型3组,用高效液相色谱法检测甲苯磺丁脲在受试者体内... 目的研究细胞色素P450CYP2C9基因多态性对甲苯磺丁脲代谢动力学的影响。方法用基因芯片对137名健康志愿者进行CYP2C9基因多态性检测,将受试者分为CYP2C9野生型、杂合突变型和纯合突变型3组,用高效液相色谱法检测甲苯磺丁脲在受试者体内的药物代谢动力学参数,统计分析各组间药代动力学性质差异。结果在137名受试者中发现了9个CYP2C91/3杂合型突变体和1个CYP2C93/3纯合型突变体,其余为野生型个体。将9名CYP2C91/3,1名CYP2C93/3以及随机抽取的10名野生型个体分组,以甲苯磺丁脲为探药进行药物代谢动力学研究。结果在杂合型突变个体组以及纯合型突变个体组中,甲苯磺丁脲的代谢率显著低于对照的野生型个体组。结论CYP2C9基因多态性对甲苯磺丁脲代谢具有显著影响并呈基因剂量效应,检测突变型个体对指导临床合理用药和个体化医疗具有重要意义。 展开更多
关键词 甲苯磺丁脲 细胞色素P450 cYP2c9 等位基因 单核苷酸多态性 基因分型
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Caspase-3激活和细胞色素c释放在脑缺血再灌注损伤中的作用 被引量:10
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作者 张文华 周璐 +4 位作者 徐淑军 陈腾 贾德泽 周茂德 吴承远 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第12期1193-1196,1200,共5页
目的探讨Caspase-3激活和细胞色素c释放在脑缺血再灌注损伤后神经元细胞凋亡中的作用。方法利用MACo法建立小鼠急性脑缺血模型,以酶活性测定、Western杂交和免疫组化等方法对Caspase-3活性变化和激活以及细胞色素c释放进行规律性观察... 目的探讨Caspase-3激活和细胞色素c释放在脑缺血再灌注损伤后神经元细胞凋亡中的作用。方法利用MACo法建立小鼠急性脑缺血模型,以酶活性测定、Western杂交和免疫组化等方法对Caspase-3活性变化和激活以及细胞色素c释放进行规律性观察。结果①脑缺血再灌注损伤后3hCaspase-3活性即开始升高,并随时间延长而进一步升高,12—24h达到高峰;②脑缺血再灌注损伤后6hCaspase-3明显激活,手术组是假手术组的7.6倍(P〈0.01);③脑缺血再灌注损伤后6h细胞色素c明显释放,手术组是假手术组的8.5倍(P〈0.01)。结论 脑缺血再灌注损伤后早期Caspase-3明显激活,细胞色素c明显释放,表明Caspase-3激活和细胞色素c释放参与了脑缺血再灌注损伤早期过程,有助于进一步研究脑缺血再灌注损伤的机制。 展开更多
关键词 脑缺血 再灌注损伤 cASPASE-3 细胞色素c
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