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基于纳米材料拉曼增强特性的细胞氧化损伤检测 被引量：2
1
作者 宋芷仪 王周平 马小媛 《陕西师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期62-69,共8页
表面增强拉曼可作为单细胞氧化损伤的一种检测手段。以铜离子诱导的细胞氧化损伤为模型、以表面增强拉曼光谱为检测手段,建立了用以表征细胞损伤的拉曼光谱方法。通过制备经多肽修饰的金纳米花作为拉曼增强基底,使其能够进入细胞并达到... 表面增强拉曼可作为单细胞氧化损伤的一种检测手段。以铜离子诱导的细胞氧化损伤为模型、以表面增强拉曼光谱为检测手段,建立了用以表征细胞损伤的拉曼光谱方法。通过制备经多肽修饰的金纳米花作为拉曼增强基底,使其能够进入细胞并达到信号增强的效果。利用CCK-8细胞毒性实验测试基底对细胞的损伤程度,确定基底质量浓度为160μg/mL。进一步利用CCK-8细胞毒性实验验证Cu^(2+)对细胞的氧化损伤,证实经Cu^(2+)诱导后细胞出现明显的损伤和死亡现象。最后,建立了Cu^(2+)诱导的细胞氧化损伤模型,并获得不同条件下细胞所呈现的拉曼光谱,发现经氧化处理后,细胞受到不同程度的损伤,细胞内的糖类、核酸、脂质和蛋白质等物质均发生了一定程度的改变,对机体造成损伤。 展开更多
关键词 表面增强拉曼 基底 细胞氧化损伤 纳米材料
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花生四烯酸诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤和凋亡 被引量：10
2
作者 王韻 汪炳华 +3 位作者 陈丽达 张冀 曹金秀 李小明 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2004年第1期60-64,共5页
探讨花生四烯酸 (AA)能否诱导人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)凋亡及其机制。以不同浓度的AA与细胞分别作用 8、16、2 0和 2 4h ,噻唑蓝 (MTT)法检测细胞存活率 ,Hoechst 3 3 2 5 8染色法观察细胞形态学变化 ,琼脂糖凝胶电泳检测DNA降解 ,流... 探讨花生四烯酸 (AA)能否诱导人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)凋亡及其机制。以不同浓度的AA与细胞分别作用 8、16、2 0和 2 4h ,噻唑蓝 (MTT)法检测细胞存活率 ,Hoechst 3 3 2 5 8染色法观察细胞形态学变化 ,琼脂糖凝胶电泳检测DNA降解 ,流式细胞术测定细胞凋亡率。测定细胞脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)含量和胞内还原型GSH含量来判断细胞氧化程度。结果表明 ,AA呈浓度和时间依赖性引起HUVECs存活率下降 (P <0 0 1)。AA处理 2 4h的HUVECs可见凋亡典型的形态学变化 ,琼脂糖电泳示“DNAladder”。AA( 5 0～ 15 0 μmol L)作用 2 0h后 ,流式细胞术检测显示细胞凋亡峰 ,细胞凋亡率分别为 2 0 7% ,3 8 6%和 5 2 5 % (P <0 0 5 )。随着AA浓度的增加 ,细胞MDA含量相应增加 ,而胞内还原型GSH含量则减少 (P <0 0 5 )。表明花生四烯酸 ( 5 0～ 15 0 μmol L)能诱导HUVECs凋亡 。 展开更多
关键词 花生四烯酸 人脐静脉内皮细胞 细胞氧化损伤 细胞凋亡 脂质过氧化
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广枣总黄酮对红细胞氧化损伤的抑制作用 被引量：11
3
作者 乌日娜 李大力 娜仁花 《时珍国医国药》 CAS CSCD 2002年第11期653-654,共2页
目的 :研究广枣总黄酮 (TFFC)的抗氧化作用。方法 :以红细胞 (RBC)为靶细胞 ,利用自氧化和激活氧化的方法。结果 :TFFC可抑制 RBC的自氧化和激活氧化 ,保护氧合血红蛋白、抑制过氧化物 (L PO)和绿色素的生成。结论 :TFFC具有抗自由基及... 目的 :研究广枣总黄酮 (TFFC)的抗氧化作用。方法 :以红细胞 (RBC)为靶细胞 ,利用自氧化和激活氧化的方法。结果 :TFFC可抑制 RBC的自氧化和激活氧化 ,保护氧合血红蛋白、抑制过氧化物 (L PO)和绿色素的生成。结论 :TFFC具有抗自由基及抗氧化作用 。 展开更多
关键词 广枣 总黄酮 红细胞氧化损伤 抑制作用 抗氧化作用
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细胞氧化损伤时8-羟基鸟嘌呤的测定 被引量：4
4
作者 张海涛 祝其锋 +2 位作者 莫丽儿 庄海旗 蔡春 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第3期280-283,共4页
利用Ｈ２Ｏ２易通过细胞膜而到达核这一特点，初步探讨了不同浓度Ｈ２Ｏ２对ＨＬ６０细胞ＤＮＡ的氧化损伤程度．发现Ｈ２Ｏ２浓度在０４ｍｍｏｌ／Ｌ以上时，作用８～２４ｈ可以用气相色谱／火焰离子检测器（ＧＣ／ＦＩＤ）检测到... 利用Ｈ２Ｏ２易通过细胞膜而到达核这一特点，初步探讨了不同浓度Ｈ２Ｏ２对ＨＬ６０细胞ＤＮＡ的氧化损伤程度．发现Ｈ２Ｏ２浓度在０４ｍｍｏｌ／Ｌ以上时，作用８～２４ｈ可以用气相色谱／火焰离子检测器（ＧＣ／ＦＩＤ）检测到氧化损伤标志产物———８羟基鸟嘌呤（８ｏｈＧ），并观测到在０４～０８ｍｍｏｌ／ＬＨ２Ｏ２作用一定时间时。 展开更多
关键词 8-羟基鸟嘌呤 H2O2 GC/FID 细胞氧化损伤
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Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞氧化损伤的缓解作用 被引量：4
5
作者 张艳淑 姚林 +3 位作者 Arthur H.K DJang 李清钊 刘英莉 王广增 《中国工业医学杂志》 CAS 北大核心 2004年第1期16-17,20,共3页
目的　探讨Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞氧化损伤的影响。方法　应用支气管灌洗的方法获得大鼠肺泡巨噬细胞 (AM) ,纯化后与终浓度 5 0 μg/ml的温石棉分别孵育 2h和 4h ,在孵育的同时加入不同浓度的Oncolyn ,检测AM中DNA损伤状况... 目的　探讨Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞氧化损伤的影响。方法　应用支气管灌洗的方法获得大鼠肺泡巨噬细胞 (AM) ,纯化后与终浓度 5 0 μg/ml的温石棉分别孵育 2h和 4h ,在孵育的同时加入不同浓度的Oncolyn ,检测AM中DNA损伤状况以及抗氧化酶SOD、GSH Px的活性。结果　肺泡巨噬细胞与温石棉共同培养 2h后 ,DNA损伤和SOD、GSH Px活性增加 ,表现出彗星出现率和DNA迁移长度增加 ;当培养 4h后 ,彗星出现率比培养 2h更高 ,DNA迁移长度不再增加 ,而SOD、GSH Px活性均下降。在AM与温石棉作用的同时加入不同浓度的Oncolyn后 ,DNA损伤减轻 ,抗氧化酶SOD、GSH Px的活性上升。 展开更多
关键词 Oncolyn 温石棉 肺泡巨噬细胞氧化损伤 缓解作用 检测
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牛磺酸和支链氨基酸对大鼠肝细胞氧化损伤的保护作用 被引量：6
6
作者 宋樱 张敏 王冬 《青岛大学医学院学报》 CAS 2004年第1期20-21,24,共3页
①目的　探讨牛磺酸和支链氨基酸对CCl4致大鼠体外肝细胞损伤的保护作用及其可能机制。②方法　实验分为对照组、损伤组、牛磺酸 (Tau)组、牛磺酸和支链氨基酸 (T&B)组。用 1 0、2 0mmol/LCCl4诱导大鼠体外肝细胞过氧化损伤 ,并以 1... ①目的　探讨牛磺酸和支链氨基酸对CCl4致大鼠体外肝细胞损伤的保护作用及其可能机制。②方法　实验分为对照组、损伤组、牛磺酸 (Tau)组、牛磺酸和支链氨基酸 (T&B)组。用 1 0、2 0mmol/LCCl4诱导大鼠体外肝细胞过氧化损伤 ,并以 1 .5 0mmol/LTau和按一定比例混合的T&B复合物 0 .75 g/L进行肝细胞保护。测定孵育液中谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶 (AST)活性及丙二醛 (MDA)含量。③结果　以 1 0mmol/LCCl4诱导肝细胞损伤时 ,Tau和T&B均能降低血清ALT、AST活性 ,减少MDA生成 ,与损伤组相比有显著差异 (F =4 .4 4 5～1 4 .0 71 ,q =3.82 5～ 4 .6 72 ,P <0 .0 1 )。以 2 0mmol/LCCl4诱导肝细胞损伤时 ,T&B能降低血清ALT、AST活性 ,减少MDA生成 ,与损伤组相比有显著差异 (q =4 .933～ 6 .0 0 1 ,P <0 .0 1 ) ,而Tau只能降低ALT、AST活性 (q =5 .6 0 3、5 .986 ,P <0 .0 1 ) ,但对MDA的生成影响不大 (q =1 .879,P >0 .0 5 )。 ④结论　牛磺酸和支链氨基酸对CCl4所致的肝细胞损伤具有保护功能 ,其保护作用可能是通过抗脂质过氧化作用实现的。 展开更多
关键词 牛磺酸 支链氨基酸 肝细胞氧化损伤 保护作用 细胞培养
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大豆异黄酮对神经管畸形细胞氧化损伤保护作用 被引量：1
7
作者 赵海峰 李秀花 +2 位作者 李学敏 崔志英 肖荣 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1383-1384,共2页
关键词 细胞氧化损伤 神经管畸形 大豆异黄酮 保护作用 上皮细胞增生 细胞DNA 双螺旋结构 DNA损伤
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细胞凋亡抑制剂防护晶状体上皮细胞氧化损伤的信号转导机制 被引量：2
8
作者 祁明信 黄秀榕 严京 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1632-1632,共1页
目的:旨在探讨细胞凋亡抑制剂阿魏酸钠(SF)、五味子乙素(Sch B)、菊花(FC)、车前子(SP)对氧化损伤的晶状体上皮细胞(LEC)内Ca2+、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,揭示天然药物防治白内障的细胞和分子学机制. 方法:将四种药物... 目的:旨在探讨细胞凋亡抑制剂阿魏酸钠(SF)、五味子乙素(Sch B)、菊花(FC)、车前子(SP)对氧化损伤的晶状体上皮细胞(LEC)内Ca2+、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,揭示天然药物防治白内障的细胞和分子学机制. 方法:将四种药物与H2O2造成氧化损伤的体外培养牛LEC共同孵育后,进行以下研究:1、采用四甲基偶氮唑兰(MTT)法观察在不同时间和浓度条件下LEC活性的变化.2、采用荧光分光光度法测定不同时间细胞内钙离子浓度([Ca2+]i).3、采用放射免疫法测定不同时间LEC内cAMP、cGMP的含量.观察药物的剂量效应与时间效应. 展开更多
关键词 细胞氧化损伤 细胞凋亡抑制剂 晶状体上皮细胞 信号转导机制 环磷酸腺苷(cAMP) 环磷酸鸟苷(cGMP) 细胞内钙离子浓度 放射免疫法测定 荧光分光光度法
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氯离子通道阻断剂对肺血管内皮细胞氧化损伤的保护作用 被引量：1
9
作者 薛军 张丙芳 +6 位作者 贾敏 招明高 晏伟 付勇 徐宏勇 梅其炳 戚好文 《中国临床康复》 CSCD 2003年第21期2906-2907,F003,共3页
目的:研究氯离子通道阻断剂在肺血管内皮细胞氧化损伤中的作用。方法:以肉联厂检疫合格的健康小牛为研究对象,过氧化氢(H2O2)诱导体外培养的牛肺动脉内皮细胞损伤,观察Cl-通道阻断剂对受损细胞细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)释放量、三磷酸... 目的:研究氯离子通道阻断剂在肺血管内皮细胞氧化损伤中的作用。方法:以肉联厂检疫合格的健康小牛为研究对象,过氧化氢(H2O2)诱导体外培养的牛肺动脉内皮细胞损伤,观察Cl-通道阻断剂对受损细胞细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)释放量、三磷酸腺苷(ATP)含量、细胞内钙离子浓度犤Ca2+犦i和DNA降解程度的影响。结果:Cl-通道阻断剂可使受损细胞的细胞活力得到提高,NPPB组和NFA组分别恢复到0.449±0.015和0.535±0.023;LDH释放量下降,分别为(12.4±0.4)%,(6.4±0.6)%。ATP含量分别回升为18.22nmol/mg蛋白质和21.96nmol/mg蛋白质,犤Ca2+犦i下降和DNA降解程度减轻。结论:Cl-通道参与了氧化剂对肺血管内皮细胞损伤的病理过程,Cl-通道阻断剂对肺血管内皮细胞的损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 氯离子通道阻断剂 肺血管内皮细胞 肺细胞氧化损伤 乳酸脱氢酶 三磷酸腺苷 肺细胞保护
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蒲公英花提取物对红细胞氧化损伤的抑制作用 被引量：2
10
作者 李波 信瑞 +1 位作者 柳承鑫 曲丹华 《中国实验诊断学》 2021年第8期1198-1200,共3页
细胞通过有氧代谢使生命活动得以进行和维持,有氧代谢过程中会产生活性氧(ROS)等多种自由基[1]。自由基对细胞来说是一把双刃剑,一方面,自由基是有氧代谢所必备的;另一方面,对机体存在毒性。许多实验已经表明,自由基反应能导致细胞退化... 细胞通过有氧代谢使生命活动得以进行和维持,有氧代谢过程中会产生活性氧(ROS)等多种自由基[1]。自由基对细胞来说是一把双刃剑,一方面,自由基是有氧代谢所必备的;另一方面,对机体存在毒性。许多实验已经表明,自由基反应能导致细胞退化、老化、裂解[2]。H_(2)O_(2)是一种ROS,在诱导细胞的损伤、死亡中起关键作用。它能损伤DNA、使酶失活、氧化激素、破坏细胞膜的完整性,甚至杀死细胞等,是多种疾病的起点[3]。 展开更多
关键词 有氧代谢 细胞氧化损伤 自由基反应 酶失活 蒲公英花 多种疾病 抑制作用 提取物
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甲苯二异氰酸酯所致小鼠骨髓细胞氧化损伤及机体自身修复作用的研究
11
作者 于淼 于蕾 季宇彬 《中国药理通讯》 2010年第2期61-62,共2页
目前，室内空气污染物的研究已成为国际上环境科学领域的热点课题之一。甲苯二异氰酸酯（toluenediisocyanate，简称TDI）主要用于生产聚氨酯树脂和聚氨酯泡沫，而广泛用作墙体绝缘材料、密封地板、卫生间等处，并且一些家具也含有此类... 目前，室内空气污染物的研究已成为国际上环境科学领域的热点课题之一。甲苯二异氰酸酯（toluenediisocyanate，简称TDI）主要用于生产聚氨酯树脂和聚氨酯泡沫，而广泛用作墙体绝缘材料、密封地板、卫生间等处，并且一些家具也含有此类物质。甲苯二异氰酸酯属于低毒类有机化合物，但在所有二异氰酸酯类化合物中却是毒性最大的一种，是公认的工业致敏原。 展开更多
关键词 甲苯二异氰酸酯 细胞氧化损伤 修复作用 小鼠骨髓 室内空气污染物 聚氨酯泡沫 机体 有机化合物
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抗氧化乳酸菌的筛选及其对小肠上皮细胞氧化损伤的保护作用 被引量：4
12
作者 王小鹏 崔文明 +7 位作者 王子卓越 杨文月 黄宇琪 李静蕊 陈水燕 郭培培 赵改名 闫爽 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第4期387-394,共8页
从36株分离自长寿老人粪便的乳酸菌中筛选高抗氧化活性菌株,利用过氧化氢(H_(2)O_(2))建立大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)氧化损伤模型,探究所筛选菌株对IEC-6细胞氧化应激的影响。结果表明,菌株HN-04、HN-05、HN-15有较强的体外抗氧化能力,其... 从36株分离自长寿老人粪便的乳酸菌中筛选高抗氧化活性菌株,利用过氧化氢(H_(2)O_(2))建立大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)氧化损伤模型,探究所筛选菌株对IEC-6细胞氧化应激的影响。结果表明,菌株HN-04、HN-05、HN-15有较强的体外抗氧化能力,其DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基清除能力分别为52.18%~57.16%、47.44%~52.38%、37.11%~43.31%,菌株对IEC-6细胞的黏附率分别为6.77%、6.92%和5.82%。在3株乳酸菌的干预作用下,氧化损伤细胞的存活率提高了5.31%~11.19%,细胞中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和总抗氧化能力(T-AOC)分别提升12.03%~32.39%、21.20%~47.42%、36.10%~87.14%和23.55%~48.69%,丙二醛含量(MDA)降低20.98%~48.80%。所筛选的3株乳酸菌具有缓解细胞氧化应激损伤的作用,可作为天然抗氧化剂应用于功能性食品开发。 展开更多
关键词 乳酸菌 抗氧化活性 小肠上皮细胞 细胞黏附 细胞氧化损伤
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麦胚清蛋白抗氧化肽的筛选及对细胞氧化损伤的保护作用 被引量：11
13
作者 张羽 汪芳 +3 位作者 翁泽斌 包伊凡 宋海昭 沈新春 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第17期10-18,共9页
本研究运用超滤与凝胶层析等分离纯化技术逐级分离麦胚清蛋白中性蛋白酶酶解产物,以氧化自由基吸收能力(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)与2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-... 本研究运用超滤与凝胶层析等分离纯化技术逐级分离麦胚清蛋白中性蛋白酶酶解产物,以氧化自由基吸收能力(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)与2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonicacid),ABTS)阳离子自由基清除率为评价指标,筛选具有较高抗氧化活性的产物组分,并以该组分为研究对象,利用液相色谱-串联质谱结合Peptide Ranker数据库活性预测技术筛选出具有高抗氧化活性的小肽,并通过高糖诱导血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)及H2O2诱导HepG2细胞与VSMCs建立细胞氧化应激模型,评价小肽对细胞氧化损伤的保护作用。结果表明,经超滤与层析筛选出分子质量较小的V组分抗氧化活性最高,液相色谱-串联质谱鉴定出该组分主要由20个小肽组成,PeptideRanker预测与抗氧化实验验证发现肽序列LNYPPY(765.3 Da)抗氧化活性最高(ORAC 3.01μmol TE/μmol)、ABTS阳离子自由基清除率(95.58%)。肽序列LNYPPY对H2O2诱导的HepG2细胞和VSMCs氧化损伤具有很好的保护作用,但对高糖诱导的VSMCs异常增殖以及活性氧水平上升无明显影响。综上,肽LNYPPY具有良好的体外抗氧化活性,且对H2O2诱导的细胞氧化损伤具有保护作用,研究可为麦胚清蛋白的开发利用提供重要的理论参考。 展开更多
关键词 麦胚清蛋白 分离 抗氧化肽 细胞氧化损伤
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醒脑静注射液对β淀粉样蛋白25-35诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的影响 被引量：1
14
作者 王茹 李卫萍 +3 位作者 陈向荣 张磊 申艳方 杜菊梅 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2018年第8期34-37,共4页
目的观察醒脑静注射液对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的影响,探讨其相关作用机制。方法用不同浓度醒脑静(5、10、20μL/m L)预处理SH-SY5Y细胞3 h,随后以25μmol/L Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞24 h制备阿尔茨海... 目的观察醒脑静注射液对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的影响,探讨其相关作用机制。方法用不同浓度醒脑静(5、10、20μL/m L)预处理SH-SY5Y细胞3 h,随后以25μmol/L Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞24 h制备阿尔茨海默病体外模型。实验细胞分为正常对照组、模型组和醒脑静低、中、高剂量组,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量,酶标法检测细胞内丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果与正常对照组比较,模型组中细胞内ROS含量明显增加,MDA水平明显升高,GSH、SOD水平明显下降(P<0.05);与模型组比较,不同浓度醒脑静预处理组细胞凋亡率降低,细胞内ROS含量明显降低,MDA水平明显下降,GSH、SOD水平显著升高(P<0.05)。结论醒脑静注射液预处理可抑制Aβ诱导的细胞氧化损伤,减少细胞凋亡,发挥细胞保护作用。 展开更多
关键词 醒脑静注射液 细胞氧化损伤 细胞凋亡 Β-淀粉样蛋白25-35 阿尔茨海默病
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瑞芬太尼对大鼠急性心肌缺血再灌注时心肌细胞氧化损伤的作用研究 被引量：1
15
作者 范志强 王建刚 +1 位作者 张佳雷 余翔 《中国药物与临床》 CAS 2009年第12期1200-1201,共2页
心肌缺血再灌注后在改善心肌供血的同时又加重了单纯心肌缺血所造成的损伤．出现心律失常、梗死面积扩大、持久性心室收缩功能低下等状况。
关键词 心肌缺血再灌注 细胞氧化损伤 瑞芬太尼 急性 大鼠 梗死面积扩大 心室收缩功能 心律失常
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麦胚源活性肽对H_(2)O_(2)诱导的成骨细胞-破骨细胞 共育体系中细胞氧化损伤的保护作用 被引量：3
16
作者 罗涛 李宇 +5 位作者 汪芳 翁泽斌 熊玲 宋海昭 王銮凤 沈新春 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第21期126-136,共11页
目的:为促进麦胚的高值化利用,建立H_(2)O_(2)诱导的成骨细胞(osteoblast,OB)-破骨细胞(osteoclast,OC)共育体系氧化应激模型,探究麦胚源活性肽ADWGGPLPH对OB和OC活性的影响。方法:利用流式细胞术、噻唑蓝(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)... 目的:为促进麦胚的高值化利用,建立H_(2)O_(2)诱导的成骨细胞(osteoblast,OB)-破骨细胞(osteoclast,OC)共育体系氧化应激模型,探究麦胚源活性肽ADWGGPLPH对OB和OC活性的影响。方法:利用流式细胞术、噻唑蓝(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide,MTT)增殖实验、异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染等方法,明确麦胚源活性肽对氧化应激环境中OB增殖和凋亡的作用。利用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活力检测、酶联免疫吸附测定以及抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色等方法研究麦胚源活性肽对氧化应激共育体系中OB和OC分化活性的影响。结果:麦胚源活性肽能够有效抑制氧化应激共育体系中OB内活性氧的增加,并通过抑制丙二醛生成,增强谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶活力,提高OB免受自由基攻击以及清除自由基的能力。麦胚源活性肽可显著抑制氧化应激共育体系中OB凋亡(FITC/PI双染结果显示OB凋亡率由12.4%下调至5.3%,OB细胞活力由60.4%提高至92.8%(P<0.01)),改善了OB增殖水平。此外,麦胚源活性肽对OB早期分化活性指标ALP活力、蛋白I型胶原以及晚期分化活性指标骨钙素水平的下降具有良好改善作用,OB矿化率从21.3%提高至84.3%(P<0.01),从而使OB发挥良好的分化活性和矿化功能。TRAP染色结果显示麦胚源活性肽也能有效抑制氧化应激造成的OC过度分化(OC相对阳性面积从376.4%减小至128.1%(P<0.01))。结论:麦胚源活性肽对H_(2)O_(2)诱导的OB-OC共育体系中细胞氧化损伤具有保护作用,从而维持良好的细胞稳态,本实验可为麦胚蛋白的开发利用提供一定的理论参考。 展开更多
关键词 麦胚肽 细胞氧化损伤 成骨-破骨细胞共育体系 细胞稳态
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黄芩苷在原代心肌细胞氧化损伤中的保护作用及机制研究 被引量：1
17
作者 邱丽满 林婧 +2 位作者 褚剑锋 林久茂 彭军 《福建中医药》 2017年第2期31-33,共3页
目的通过体外实验研究黄芩苷在心肌细胞氧化损伤中的保护作用及其机制。方法取SD乳鼠心肌细胞进行原代培养,按各实验需要分组并干预。采用MTT法检测不同剂量黄芩苷对心肌氧化损伤细胞模型中细胞活力的影响,采用Western Blot法检测不同... 目的通过体外实验研究黄芩苷在心肌细胞氧化损伤中的保护作用及其机制。方法取SD乳鼠心肌细胞进行原代培养,按各实验需要分组并干预。采用MTT法检测不同剂量黄芩苷对心肌氧化损伤细胞模型中细胞活力的影响,采用Western Blot法检测不同剂量黄芩苷对心肌氧化损伤细胞模型DNA双链断裂损伤指标γ-H2AX和核内β-catenin表达的影响,并用Wnt/β-catenin信号通路激活剂LiCl干预,进一步探讨黄芩苷在对心肌氧化损伤细胞模型的保护机制。结果心肌氧化损伤细胞模型的细胞活力显著下降,γ-H2AX和核内β-catenin的蛋白表达明显上调;低剂量黄芩苷对心肌氧化损伤细胞模型的细胞活力和γ-H2AX、核内β-catenin的表达无明显影响;而中、高剂量黄芩苷能够明显阻止受损心肌细胞活力下降,并下调心肌氧化损伤细胞模型的γ-H2AX和核内β-catenin的表达;且高剂量黄芩苷能够下调Wnt/β-catenin信号通路激活剂LiCl干预下的原代心肌细胞γ-H2AX和核内β-catenin的表达水平。结论黄芩苷能够通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,阻止心肌细胞氧化损伤。 展开更多
关键词 黄芩苷 心肌细胞氧化损伤 Γ-H2AX WNT/Β-CATENIN信号通路
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脑蛋白水解物对H_2O_2诱导的PC12细胞氧化损伤的修复作用及其胃漂浮片处方的优化
18
作者 杨昕祺 王广红 +3 位作者 糜心雅 安丽萍 杜培革 王曼力 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期286-291,共6页
目的:检测脑蛋白水解物(BPH)对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤的修复作用,运用星点设计-效应面法对BPH胃漂浮片的处方进行优化。方法:将对数生长期PC12细胞分为正常对照组、模型组(300μmol·L-1 H2O2)、BPH组、人工胃液处理的BPH(GBPH)... 目的:检测脑蛋白水解物(BPH)对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤的修复作用,运用星点设计-效应面法对BPH胃漂浮片的处方进行优化。方法:将对数生长期PC12细胞分为正常对照组、模型组(300μmol·L-1 H2O2)、BPH组、人工胃液处理的BPH(GBPH)组、人工肠液处理的BPH(IBPH)组、人工胃液处理的BPH片(GBPH-T)组和人工胃液处理的BPH漂浮片(GBPH-FT)组(后5组均加不同条件处理的20、40、60、80和100mg·L-1BPH),另设空白对照组;正常对照组不做任何处理,空白对照组只加培养基,其他各组采用300μmol·L-1 H2O2孵育3h造成损伤模型。采用MTT法检测细胞活力;利用Design-expert8.0.6Trial软件,将HPMC-K4M、十八醇和丙烯酸树脂Ⅱ号用量作为考察因素,以8h累积释放度为评价指标,优化处方。结果:与正常对照组比较,60mg·L-1 BPH组细胞活力明显升高(P<0.05);与模型组比较,BPH、IBPH、GBPH和GBPH-FT组细胞活力明显升高(P<0.05或P<0.01);与BPH组比较,IBPH组细胞活力明显降低(P<0.05),GBPH组细胞活力差异无统计学意义(P>0.05);与GBPH-T组比较,GBPH-FT组细胞活力明显升高(P<0.05)。优化处方为BPH 20mg,乳糖10mg,硬脂酸镁0.4mg,微晶纤维素20mg,HPMC-K4M27mg,十八醇63mg,丙烯酸树脂Ⅱ号13mg;BPH胃漂浮片均在5s内起漂,持续漂浮>8h,8h累积释放度实测值与预测值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:BPH对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤具有修复作用。星点设计-效应面法预测性和重复性良好,合理可行,可用于BPH胃漂浮片处方的优化。 展开更多
关键词 脑蛋白水解物 细胞氧化损伤 星点设计 漂浮片
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北虫草多糖提取工艺优化及其细胞氧化损伤保护作用 被引量：18
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作者 王迦琦 许梦然 +2 位作者 高婧文 葛俊宏 孙新 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第13期141-147,共7页
目的:优化北虫草多糖的提取工艺,研究北虫草多糖对血管平滑肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:采用L9(34)正交实验法优化多糖提取工艺,利用羟自由基法、DPPH自由基法和FRAP法检测北虫草多糖清除自由基的能力。在细胞水平上构建过氧化氢诱... 目的:优化北虫草多糖的提取工艺,研究北虫草多糖对血管平滑肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:采用L9(34)正交实验法优化多糖提取工艺,利用羟自由基法、DPPH自由基法和FRAP法检测北虫草多糖清除自由基的能力。在细胞水平上构建过氧化氢诱导细胞氧化损伤模型,采用MTT法、ROS细胞染色法评估北虫草多糖对过氧化氢诱导大鼠主动脉平滑肌细胞氧化损伤的保护作用。结果:北虫草多糖的最佳提取条件为:提取温度90℃,料液比1∶30 g/mL,提取次数3次,提取时间3.0 h,最高得率为7.94%±0.16%。在多糖浓度为1.6 mg/mL时对羟自由基和DPPH自由基的清除能力以及总抗氧化能力分别为75.57%±1.39%、80.23%±2.75%和(0.22±0.01)mmol/mg。细胞实验表明北虫草多糖可显著抑制过氧化氢诱导细胞内ROS生成,提高细胞存活率。结论:成功优化北虫草多糖提取工艺,北虫草多糖具备良好的体外清除自由基的活性,对由氧化应激所导致的心血管疾病中起到很好的防治意义。 展开更多
关键词 北虫草多糖 提取工艺 正交实验 主动脉平滑肌细胞 细胞氧化损伤
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槟榔多糖对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用 被引量：2
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作者 冀晓龙 王治雯 +3 位作者 潘飞兵 匡凤姣 吴长浩 闫溢哲 《轻工学报》 北大核心 2022年第6期18-24,共7页
采用CCK-8法测定细胞的存活率、Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率,利用蛋白质免疫印迹检测人结直肠腺癌细胞(Caco-2细胞)中抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax及细胞间紧密连接蛋白的表达情况,研究槟榔多糖对DMNQ诱发Caco-2细胞氧... 采用CCK-8法测定细胞的存活率、Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率,利用蛋白质免疫印迹检测人结直肠腺癌细胞(Caco-2细胞)中抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax及细胞间紧密连接蛋白的表达情况,研究槟榔多糖对DMNQ诱发Caco-2细胞氧化损伤的保护作用。结果表明:槟榔多糖能显著抑制促凋亡蛋白Bax的表达并同时促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制DMNQ引起的细胞凋亡并减轻内质网应激,显著上调Caco-2细胞紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin 1的表达,维持细胞紧密连接的完整性,即槟榔多糖能显著改善DMNQ诱导的Caco-2细胞氧化损伤。 展开更多
关键词 槟榔多糖 CACO-2细胞 细胞氧化损伤
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