牛诺如病毒感染相关腹泻犊牛粪便菌群的特征分析

1

作者 赵清梅 崔省委 +3 位作者 郭仕辉 余永涛 梁泰宇 李欢语 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3484-3494,共11页

[目的]比较哺乳期健康犊牛和感染牛诺如病毒(Bovine norovirus,BNoV)的腹泻犊牛粪便菌群多样性和物种组成,初步揭示BNoV感染的腹泻犊牛粪便菌群特征。[方法]首先应用PCR和RT-PCR法对健康和腹泻犊牛粪便中的腹泻相关病原进行检测,然后采... [目的]比较哺乳期健康犊牛和感染牛诺如病毒(Bovine norovirus,BNoV)的腹泻犊牛粪便菌群多样性和物种组成,初步揭示BNoV感染的腹泻犊牛粪便菌群特征。[方法]首先应用PCR和RT-PCR法对健康和腹泻犊牛粪便中的腹泻相关病原进行检测,然后采用16S rRNA扩增子测序技术对病原检测阴性的健康犊牛粪便(H组)和仅BNoV检测阳性的腹泻犊牛粪便(BNoV组)的微生物多样性、菌群组成和功能进行比较分析。[结果]与H组相比,BNoV组粪便菌群操作分类单元(OTUs)数量和Chao1指数显著升高(P<0.05),Shannon和Simpson指数极显著降低(P<0.01)。与H组相比,BNoV组粪便变形菌门、埃希-志贺属、丁酸球菌属丰度极显著升高(P<0.01),放线菌门、柯林斯菌属、巨球型菌属、厄氏菌属、双歧杆菌属、粪杆菌属等丰度极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05)。双歧杆菌属、柯林斯菌属、巨球型菌属、厄氏菌属、粪杆菌属等在H组显著富集,而丁酸球菌属、埃希-志贺属、脆弱拟杆菌、梭菌属等在BNoV组显著富集。与H组相比,BNoV组粪便菌群胞内过程和信号传导、脂质代谢、新陈代谢、异生物质生物降解与代谢、萜类和聚酮类化合物代谢等显著或极显著上调(P<0.05;P<0.01),而膜转运、复制与修复、翻译、核苷酸代谢、遗传信息处理等显著或极显著下调(P<0.05;P<0.01)。[结论]感染BNoV的腹泻犊牛粪便菌群丰富度、多样性、物种组成和功能与健康犊牛显著不同,提示BNoV感染犊牛处于肠道菌群紊乱状态。 展开更多

关键词 牛诺如病毒(bnov) 犊牛腹泻 粪便菌群 16S rRNA扩增子测序

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牛诺如病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量：8

2

作者 师志海 王文佳 +5 位作者 兰亚莉 张彬 孟红丽 王亚州 滑留帅 徐照学 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1728-1736,共9页

牛诺如病毒(BNoV)是国内新发的犊牛腹泻病原,笔者拟建立检测BNoV的Real-time PCR方法。根据BNoV流行株的RNA聚合酶(RdRp)基因序列设计引物,通过优化反应条件和体系,成功建立基于EvaGreen检测BNoV的Real-time PCR方法。该检测方法的Ct值... 牛诺如病毒(BNoV)是国内新发的犊牛腹泻病原,笔者拟建立检测BNoV的Real-time PCR方法。根据BNoV流行株的RNA聚合酶(RdRp)基因序列设计引物,通过优化反应条件和体系,成功建立基于EvaGreen检测BNoV的Real-time PCR方法。该检测方法的Ct值与标准品模板在2.24×102~2.24×108拷贝·μL-1线性关系良好,相关系数R2=0.997,扩增效率为98.44%;该方法可特异性检出BNoV,对其他犊牛腹泻相关病原呈阴性;最低检测限为22.4拷贝·μL-1;批间和批内的变异系数均小于2%,重复性好。对2017年9月—2019年5月采自河南省的221份犊牛腹泻样本中BNoV的检出率为11.31%(25/221),采样场阳性率为92.86%(13/14)。本试验所建方法灵敏度高、特异性强、稳定性好,为BNoV的检测和流行病学调查提供了有力手段。 展开更多

关键词 牛诺如病毒 实时荧光定量PCR 犊牛腹泻 检测

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牛星状病毒和牛诺如病毒双重PCR检测方法的建立及应用 被引量：4

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作者 王文佳 邓廷贤 +5 位作者 徐照学 张彬 孟红丽 王亚州 兰亚莉 师志海 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期786-790,共5页

为建立能同时快速检测牛星状病毒(BAstV)和牛诺如病毒(BNoV)的方法,本研究根据BAstV ORF1a基因和BNoV RdRp基因设计了2对特异性引物,通过优化反应条件,建立了能够同时检测BAstV和BNoV的双重PCR方法。特异性试验结果显示,该方法对牛轮状... 为建立能同时快速检测牛星状病毒(BAstV)和牛诺如病毒(BNoV)的方法,本研究根据BAstV ORF1a基因和BNoV RdRp基因设计了2对特异性引物,通过优化反应条件,建立了能够同时检测BAstV和BNoV的双重PCR方法。特异性试验结果显示,该方法对牛轮状病毒等5种犊牛腹泻常见病原的扩增结果均为阴性,仅BAstV和BNoV扩增结果为阳性,特异性较强;敏感性试验结果显示,该方法对BAstV和BNoV重组质粒的最低检测限分别为1.09×10^3拷贝/μL和1.42×10^3拷贝/μL,敏感性较高;批内和批间试验结果一致,该方法重复性好。利用该方法和各病原单一PCR方法同时对221份河南省犊牛腹泻粪便样品进行检测,BAstV和BNoV的阳性检出率分别为18.1%和9.96%,两种方法符合率为100%。本研究在国内首次建立了检测BAstV和BNoV的双重PCR方法,其特异性强,敏感性高,重复性好,为BAstV和BNoV的鉴别检测及其分子流行病学调查提供了技术支持。 展开更多

关键词 牛星状病毒 牛诺如病毒 犊牛腹泻 双重PCR

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牛诺如病毒及牛嵴病毒双重PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：9

4

作者 师志海 徐照学 +1 位作者 兰亚莉 王文佳 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第1期28-32,共5页

本研究根据BNoV和BKoV基因组的保守区域设计2对特异性引物,建立了能同时检测牛诺如病毒(Bovine norovirus,BNo V)和牛嵴病毒(Bovine kobuvirus,BKo V)的双重PCR检测方法。该方法能特异性扩增BNo V和BKo V的目的条带,且未扩增出其他犊牛... 本研究根据BNoV和BKoV基因组的保守区域设计2对特异性引物,建立了能同时检测牛诺如病毒(Bovine norovirus,BNo V)和牛嵴病毒(Bovine kobuvirus,BKo V)的双重PCR检测方法。该方法能特异性扩增BNo V和BKo V的目的条带,且未扩增出其他犊牛腹泻病毒性病原;BNoV和BKoV的最低检测限分别为5.39×105 copies/μL和2.23×106 copies/μL;对临床采集的127份犊牛腹泻样品检测结果显示,BNoV的阳性率为6.30%(8/127),BKoV的阳性率为4.72%(6/127),两者与单一PCR检测结果相一致,符合率为100%。本研究建立的双重PCR方法具有良好的敏感性、特异性、重复性,可用于BNoV和BKoV的快速检测和流行病学调查。 展开更多

关键词 牛诺如病毒 牛嵴病毒 犊牛腹泻 双重PCR

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牛诺如病毒的研究进展 被引量：1

5

作者 张鑫 李诗晴 +2 位作者 王旭 曹杰 马翀 《中国奶牛》 2021年第8期32-36,共5页

牛诺如病毒(Bovine norovirus,BNoV)已在全球多个国家发病并在健康犊牛的粪便样本中检出,且不同国家和地区所报道的感染率各异。为更好地了解该病毒的特征,本文收集并整理了部分已发表文献,对BNoV的病原学特性、致病机理、临床表现、流... 牛诺如病毒(Bovine norovirus,BNoV)已在全球多个国家发病并在健康犊牛的粪便样本中检出,且不同国家和地区所报道的感染率各异。为更好地了解该病毒的特征,本文收集并整理了部分已发表文献,对BNoV的病原学特性、致病机理、临床表现、流行病学现况和检测方法等研究进展情况进行综述,以期帮助科研人员和奶牛、肉牛养殖业相关从业人员进一步了解BNoV。 展开更多

关键词 牛诺如病毒 犊牛 腹泻

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牛诺如病毒和冠状病毒双重PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：4

6

作者 王文佳 师志海 +1 位作者 兰亚莉 徐照学 《动物医学进展》 北大核心 2019年第10期6-9,共4页

为建立能同时检测牛诺如病毒(BNoV)和牛冠状病毒(BCoV)的聚合酶链反应(PCR)检测方法,根据BNoV和BCoV基因组的保守区域设计2对特异性引物,预期特异性扩增BNoV和BCoV的片段大小分别为542 bp和896 bp。特异性检测结果显示,该方法能特异性扩... 为建立能同时检测牛诺如病毒(BNoV)和牛冠状病毒(BCoV)的聚合酶链反应(PCR)检测方法,根据BNoV和BCoV基因组的保守区域设计2对特异性引物,预期特异性扩增BNoV和BCoV的片段大小分别为542 bp和896 bp。特异性检测结果显示,该方法能特异性扩增BNoV和BCoV的目的条带,未扩增出其他犊牛腹泻病毒性病原;BNoV和BCoV的最低检测限分别为6.71×10^4 copies/μL和1.38×10^5 copies/μL。对采集自河南地区的127份犊牛腹泻样品的检测结果显示,BNoV的阳性率为6.30%(8/127),BCoV的阳性率为14.96%(19/127),与单项PCR检测结果相一致。结果表明,建立的双重PCR方法可用于BNoV和BCoV的检测及流行病学调查。 展开更多

关键词 牛诺如病毒 牛冠状病毒 犊牛腹泻 双重聚合酶链反应

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新疆地区GIII.2型牛诺如病毒流行病学调查及ORF1基因遗传进化分析 被引量：3

7

作者 马志刚 何琴 +8 位作者 施晨阳 刘馨博 郭雪萍 吴静 马英才 苏战强 钟旗 姚刚 马雪连 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期888-891,902,共5页

为调查牛诺如病毒(BNoV)在新疆不同地区牛场中的感染情况,本实验针对BNoV的RdRp基因设计特异性引物,采用RT-PCR方法对新疆乌鲁木齐、塔城、伊犁、喀什4个地区的7个牛场共230份牛粪便样品进行检测,并获得塔城地区一株BNoV开放阅读框1(OR... 为调查牛诺如病毒(BNoV)在新疆不同地区牛场中的感染情况,本实验针对BNoV的RdRp基因设计特异性引物,采用RT-PCR方法对新疆乌鲁木齐、塔城、伊犁、喀什4个地区的7个牛场共230份牛粪便样品进行检测,并获得塔城地区一株BNoV开放阅读框1(ORF1)基因,对其进行遗传进化、同源性及基因重组分析。流行病学调查结果显示,新疆地区BNoV阳性率为17.83%(41/230),其中塔城地区阳性率最高(60.00%,9/15)。对检测的BNoV ORF1基因进行遗传进化分析,结果显示,其属于GIII.2型BNoV,与中国四川地区OK032546.1病毒株相似性最高(94.6%),聚为一支;同源性分析结果显示,本研究中检测到的两株BNoV的ORF1基因序列之间的同源性为100%,均与OK032546.1病毒株相应基因序列同源性最高(96.6%)。ORF1编码的氨基酸序列分析显示两株BNoV ORF1与MZ573179.1病毒株同源性最高(98.35%),且与国内外其他GIII.2型病毒株同源性在76.1%以上。通过对ORF1基因重组分析,结果显示,本研究检测到的BNoV与国内外经典株ORF1基因无基因重组现象。本研究填补了新疆地区对BNoV基因序列研究的空白,为BNoV感染的防制提供了参考依据。 展开更多

关键词 牛诺如病毒 感染情况 ORF1基因 遗传进化分析

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牛诺如病毒病研究进展 被引量：4

8

作者 苗艳 朱庆贺 +9 位作者 钟鹏 陈亮 兰世捷 张蕾 冯万宇 李丹 沈思思 田秋丰 薛沾枚 刘雪松 《动物医学进展》 北大核心 2023年第2期94-98,共5页

诺如病毒是杯状病毒科、诺如病毒属的RNA病毒,可感染人类和包括牛在内的多种动物,在世界范围内不同年龄的牛中均发现了该病毒。近年还没有适合该病毒的细胞培养系统,有关其发病机制和流行病学等方面的信息有限。该病毒常在犊牛腹泻粪便... 诺如病毒是杯状病毒科、诺如病毒属的RNA病毒,可感染人类和包括牛在内的多种动物,在世界范围内不同年龄的牛中均发现了该病毒。近年还没有适合该病毒的细胞培养系统,有关其发病机制和流行病学等方面的信息有限。该病毒常在犊牛腹泻粪便中被单独检测到,或与其他致腹泻病原混合感染,表明该病毒与犊牛腹泻的发生有关,深入对该病毒的研究对犊牛腹泻疾病的防控具有重要意义。论文对牛诺如病毒的病原学、致病机制、流行病学和诊断方法等研究进行综述,为该病的研究提供参考。 展开更多

关键词 牛诺如病毒 病原学 流行病学 诊断

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部分地区奶牛腹泻粪便样中诺如病毒的检测和演化分析 被引量：11

9

作者 王玥琳 郭紫晶 +1 位作者 岳华 汤承 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1048-1055,共8页

牛诺如病毒(bovine norovirus,BNoV)是一种引起犊牛腹泻的病原,目前已在19个国家检出。本研究旨在调查该病毒在国内部分地区的流行情况及分子特征。采用RT-PCR方法检测了5个省12个奶牛场的93份腹泻粪便样本和54份健康粪便样本。结果显示... 牛诺如病毒(bovine norovirus,BNoV)是一种引起犊牛腹泻的病原,目前已在19个国家检出。本研究旨在调查该病毒在国内部分地区的流行情况及分子特征。采用RT-PCR方法检测了5个省12个奶牛场的93份腹泻粪便样本和54份健康粪便样本。结果显示:腹泻样本中BNoV检出率为25.81%,极显著高于健康粪便样本中9.26%的检出率(P<0.01),证明该病毒与犊牛腹泻具有相关性;基于29个RdRp序列的遗传进化分析显示,5份样本为GIII.1型,24份样本为GIII.2型。对获得的18个VP1和13个VP2基因片段的遗传进化分析发现,中国的BNoV毒株具有独特的演化趋势。本研究证明BNoV已在国内的奶牛中广泛流行,是国内犊牛腹泻的新发病原,且国内的BNoV毒株具有独特的演化趋势,为犊牛腹泻的防控提供了重要参考。 展开更多

关键词 牛诺如病毒 奶牛 腹泻 流行 分子特征

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牛诺如病毒和牛嵴病毒及牛环曲病毒三重RT-PCR检测方法的建立 被引量：1

10

作者 孙睿雪 李玉铎 +5 位作者 吴国军 陈天杰 车瑞香 茹毅 韩欢胜 赵建军 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期454-464,共11页

为了解牛诺如病毒(BNo V)、牛嵴病毒(BKV)和牛环曲病毒(BTo V)在国内的流行情况,本研究参考Gen Bank中登录的BNo V Rd Rp基因、BKV 3D基因和BTo V N基因保守区域,设计3对特异性引物,成功建立了能够同时快速检测BNo V、BKV、BTo V的三重R... 为了解牛诺如病毒(BNo V)、牛嵴病毒(BKV)和牛环曲病毒(BTo V)在国内的流行情况,本研究参考Gen Bank中登录的BNo V Rd Rp基因、BKV 3D基因和BTo V N基因保守区域,设计3对特异性引物,成功建立了能够同时快速检测BNo V、BKV、BTo V的三重RT-PCR方法。该方法特异性较强,仅对BNo V、BKV、BTo V扩增出特异性条带,对其他5种常见引发犊牛腹泻的病毒均未扩增出条带;敏感性较高,针对p MD18-T-BNo V、p MD18-T-BKV和p MD18-T-BTo V质粒标准品的最低检测限分别为2.73×10^(4)copies/μL、2.87×10^(4)copies/μL、3.18×10^(3)copies/μL;重复性好,同批次样品的3次检测结果均一致。使用该方法对153份临床样品进行检测,结果显示,BNo V、BKV、BToV的阳性率分别为11.11%、25.49%、38.56%,3种病毒混合感染率为7.18%。与其他学者建立的单一RT-PCR检测方法相比,符合率分别为94.77%、93.46%、91.50%。上述结果表明,本试验建立的三重RT-PCR方法为犊牛上述国内新发病毒快速检测及流行病学调查提供了技术支撑。 展开更多

关键词 牛诺如病毒 牛嵴病毒 牛环曲病毒 三重RT-PCR

原文传递

牛诺如病毒、牛星状病毒和牛环曲病毒多重PCR检测方法的建立及应用 被引量：15

11

作者 师志海 徐照学 +5 位作者 兰亚莉 张彬 孟红丽 王亚州 金磊 王文佳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1924-1928,共5页

为建立能同时检测牛诺如病毒(BNoV)、牛星状病毒(BAstV)和牛环曲病毒(BToV)的方法,根据BNoV、BAstV和BToV基因组的保守区域设计3对特异性引物,预期特异性扩增BNoV、BAstV和BToV的片段大小分别为542,376,698 bp,建立了BNoV、BAstV和BToV... 为建立能同时检测牛诺如病毒(BNoV)、牛星状病毒(BAstV)和牛环曲病毒(BToV)的方法,根据BNoV、BAstV和BToV基因组的保守区域设计3对特异性引物,预期特异性扩增BNoV、BAstV和BToV的片段大小分别为542,376,698 bp,建立了BNoV、BAstV和BToV的多重PCR检测方法。结果显示,该方法能特异性扩增BNoV、BAstV和BToV的目的条带,且未扩增出其他犊牛腹泻病原;BNoV、BAstV和BToV的最低检测限分别为1.34×10^4,1.06×10^4,1.03×10^4拷贝/μL。对采集自河南省的221份犊牛腹泻样品的检测结果显示,BNoV、BAstV和BToV的检出率分别为9.96%(22/221),18.10%(40/221)和19.00%(42/221)。三者与单一PCR检测结果相一致。结果表明,本试验建立的多重PCR方法可用于BNoV、BAstV和BToV的检测和流行病学调查。 展开更多

关键词 牛诺如病毒 牛星状病毒 牛环曲病毒 犊牛腹泻 多重PCR

原文传递

牛诺如病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立 被引量：2

12

作者 师志海 王文佳 +4 位作者 兰亚莉 张彬 孟红丽 王亚州 徐照学 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期969-975,共7页

牛诺如病毒(BNoV)是国内新发的犊牛腹泻的病原,为建立高效快速、特异的BNoV定量检测方法,本研究参照GenBank登录的BNoV的RdRp基因的保守序列,设计合成了1对特异性引物和1条探针,通过优化反应条件和体系,建立了BNoV的TaqMan荧光定量PCR... 牛诺如病毒(BNoV)是国内新发的犊牛腹泻的病原,为建立高效快速、特异的BNoV定量检测方法,本研究参照GenBank登录的BNoV的RdRp基因的保守序列,设计合成了1对特异性引物和1条探针,通过优化反应条件和体系,建立了BNoV的TaqMan荧光定量PCR方法。结果显示,该方法选择的引物具有高度特异性,只对BNoV有特异性扩增,而对牛冠状病毒等4种犊牛腹泻常见病原未见扩增;对BNoV核酸最低检测限为15.9 copies/μL,且批内、批间变异系数均小于2%,重复性好。对采集自2017年9月至2019年11月河南、山东和四川省的261份犊牛腹泻样本进行检测,结果显示BNoV的阳性检出率为11.49%(30/261)。本研究建立的TaqMan实时荧光定量PCR方法对BNoV的病原检测和流行病学调查具有重要意义。 展开更多

关键词 牛诺如病毒 犊牛腹泻 TaqMan荧光定量PCR

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宁夏部分地区新生犊牛腹泻的病原调查及主要病原的遗传进化分析 被引量：12

13

作者 郭仕辉 赵清梅 +6 位作者 陈绍淑 张浩东 田新岳 张津慎 许立华 马云 余永涛 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期413-424,共12页

为了解宁夏地区新生犊牛腹泻(Neonatal calf diarrhea,NCD)相关病原的流行情况,应用PCR法分别对宁夏部分地区采集的195份2月龄内断奶前犊牛粪便进行NCD相关病原检测,并对主要病原进行遗传进化分析。结果表明,宁夏部分地区NCD主要发生于3... 为了解宁夏地区新生犊牛腹泻(Neonatal calf diarrhea,NCD)相关病原的流行情况,应用PCR法分别对宁夏部分地区采集的195份2月龄内断奶前犊牛粪便进行NCD相关病原检测,并对主要病原进行遗传进化分析。结果表明,宁夏部分地区NCD主要发生于30日龄内的犊牛,牛轮状病毒(Bovine Rotavirus,BRV)、牛冠状病毒(Bovine Coronavirus,BCoV)、牛诺如病毒(Bovine Norovirus,BNoV)和隐孢子虫是该地区引起NCD的主要病原,在腹泻犊牛中检出率分别为19.8%、9.43%、12.26%、6.6%。遗传进化分析表明,检出的BRV、BCoV与国内已报道的毒株遗传进化关系较近,BNoV主要为GⅢ.2型,隐孢子虫主要为微小隐孢子虫。上述结果表明,BRV、BCoV、BNoV和隐孢子虫是宁夏部分地区NCD的主要相关病原,其中BNoV已经在该地区新生犊牛中广泛流行。 展开更多

关键词 新生犊牛腹泻 牛轮状病毒 牛诺如病毒 流行病学

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牛诺如病毒和牛环曲病毒双重PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：7

14

作者 王文佳 徐照学 +4 位作者 张彬 孟红丽 王亚州 兰亚莉 师志海 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期892-896,共5页

为建立能同时检测牛诺如病毒(BNoV)和牛环曲病毒(BToV)的方法,根据BNoV和BToV基因组的保守区域设计2对特异性引物,预期特异性扩增BNoV和BToV的片段大小分别为542,698 bp,建立了BNoV和BToV的双重PCR检测方法。特异性检测结果显示,该方法... 为建立能同时检测牛诺如病毒(BNoV)和牛环曲病毒(BToV)的方法,根据BNoV和BToV基因组的保守区域设计2对特异性引物,预期特异性扩增BNoV和BToV的片段大小分别为542,698 bp,建立了BNoV和BToV的双重PCR检测方法。特异性检测结果显示,该方法能特异性扩增BNoV和BToV的目的条带,且未扩增出其他犊牛腹泻病原;对BNoV和BToV的最低检出量分别为1.90×10^4,1.86×10^4拷贝/μL。利用该方法对采自河南部分地区的184份犊牛腹泻样品的检测结果显示,BNoV和BToV的阳性检出率分别为11.41%和12.50%,与单一PCR检测结果一致。结果表明,本试验建立的方法对BNoV和BToV的鉴别诊断、混合感染和流行病学调查具有重要的应用价值。 展开更多

关键词 牛诺如病毒 牛环曲病毒 犊牛腹泻 双重PCR

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牛冠状病毒、牛诺如病毒和牛嵴病毒多重PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：8

15

作者 王文佳 徐照学 +1 位作者 兰亚莉 师志海 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1306-1310,1355,共6页

为建立能同时检测牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)、牛诺如病毒(bovine norovirus,BNoV)和牛嵴病毒(bovine kobuvirus,BKV)的方法,根据BCoV、BNoV和BKV基因组的保守区域设计3对特异性引物,预期特异性扩增BCoV、BNoV和BKV的片段大... 为建立能同时检测牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)、牛诺如病毒(bovine norovirus,BNoV)和牛嵴病毒(bovine kobuvirus,BKV)的方法,根据BCoV、BNoV和BKV基因组的保守区域设计3对特异性引物,预期特异性扩增BCoV、BNoV和BKV的片段大小分别为896,542,216 bp,建立了BCoV、BNoV和BKV的多重PCR检测方法。特异性检测结果显示,该方法能特异性扩增BCoV、BNoV和BKV的目的条带,且未扩增出其他犊牛腹泻(calf diarrhea,CD)病原;BCoV、BNoV和BKV的最低检测限分别为9.51×10^5,5.39×10^5,2.23×10^6 copies/μL。对采集自河南部分地区的127份CD样品的检测结果显示,BCoV的阳性率为14.96%(19/127),BNoV的阳性率为6.30%(8/127),BKV的阳性率为4.72%(6/127),三者与单一PCR检测结果相一致。结果表明,本研究建立的多重PCR方法可用于BCoV、BNoV和BKV的检测和流行病学调查。 展开更多

关键词 牛冠状病毒 牛诺如病毒 牛嵴病毒 CD 多重PCR

原文传递

哺乳期腹泻犊牛粪便中病原流行状况调查 被引量：1

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作者 王旭 李诗晴 +2 位作者 张鑫 曹杰 马翀 《中国奶牛》 2021年第11期23-27,共5页

随着国内牧场饲养管理水平的不断提高,犊牛腹泻问题越来越受到重视。为获取国内牧场哺乳期腹泻犊牛粪便中常见病原及牛诺如病毒和牛嵴病毒的流行情况,本次调查采用多种病原检测方法对国内6个地区18个牧场的130份哺乳期腹泻犊牛粪便样品... 随着国内牧场饲养管理水平的不断提高,犊牛腹泻问题越来越受到重视。为获取国内牧场哺乳期腹泻犊牛粪便中常见病原及牛诺如病毒和牛嵴病毒的流行情况,本次调查采用多种病原检测方法对国内6个地区18个牧场的130份哺乳期腹泻犊牛粪便样品中的7种病原进行检测。调查发现:牛轮状病毒和微小隐孢子虫检出率最高,分别为38.5%(50/130)和37.7%(49/130);牛冠状病毒、大肠杆菌F5和球虫检出率分别为13.1%(17/130)、6.2%(8/130)和3.8%(5/130);牛诺如病毒和牛嵴病毒的检出率分别为10.0%(13/130)和4.6%(6/130)。并在2日龄腹泻犊牛粪便中检出了微小隐孢子虫。调查表明,轮状病毒和隐孢子虫在犊牛中感染率最高,牛诺如病毒和牛嵴病毒等新发病原的流行情况仍需要进一步调查。 展开更多

关键词 犊牛腹泻 轮状病毒 微小隐孢子虫 牛嵴病毒 牛诺如病毒

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