南美油藤PvWRI1转录因子的克隆及其在油脂合成中的功能分析

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作者 李晓明 吴志华 +1 位作者 尚秀华 刘果 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1048-1057,共10页

WRI1是一类具有APETALA2结构域的转录因子,参与油脂生物合成过程。本研究从新鲜南美油藤叶片中克隆PvWRI1基因组序列,并对其进行生物信息学分析。通过构建过表达载体,将PvWRI1基因转化到烟草中获得转基因阳性烟草植株,收获成熟种子,利... WRI1是一类具有APETALA2结构域的转录因子,参与油脂生物合成过程。本研究从新鲜南美油藤叶片中克隆PvWRI1基因组序列,并对其进行生物信息学分析。通过构建过表达载体,将PvWRI1基因转化到烟草中获得转基因阳性烟草植株,收获成熟种子,利用气相色谱法进行脂肪酸组分测定。并通过实时荧光定量PCR分析PvWRI1基因下游脂肪酸途径基因的表达水平。PvWRI1基因组DNA全长5072 bp,编码区长度为1312 bp,编码436个氨基酸,共存在7个外显子和6个内含子。疏水性分析显示该蛋白为亲水性蛋白,结构域分析该蛋白含有2个AP2/EREBP结构区和4个固有无序蛋白区,二级结构分析表明该蛋白相对保守。磷酸化位点预测N端含叶绿体转运肽特征。氨基酸同源性分析在不同物种中AP2结构域同源性较高,系统进化树显示PvWRI1与蓖麻同源性最高。脂肪酸组分测定结果表明,硬脂酸和亚麻酸含量显著增加,分别增加16.8%和7.5%。转基因种子的含油量由12.84%增加到24.06%,达1.87倍。同时,亚油酸/亚麻酸平衡比例下降7.8%。RT-qPCR结果显示过表达PvWRI1导致下游脂肪酸途径基因表达量均出现上调,其中WRI1基因极显著上调,FATA、KASI和FAD3基因显著上调。因此,PvWRI1作为调控脂肪酸生物合成的关键因子,对改良油料植物含油量和脂肪酸平衡具有指导作用。 展开更多

关键词 南美油藤 PvWRI1 基因克隆 过表达 脂肪酸测定 表达量

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南美油藤果油的急性、亚急性及遗传毒性的实验研究 被引量：7

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作者 吴争 丁晟 +4 位作者 蔡宏 肖岗 张维民 夏芝璐 谌乐礼 《科技广场》 2012年第12期206-208,共3页

目的:研究南美油藤果油的安全性,为合理开发利用南美油藤提供科学依据。方法:对样品进行小鼠急性经口毒性试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、Ames试验、大鼠30天喂养试验[1]。结果:雌、雄两种性别小鼠MTD均大于20ml/kgBW;... 目的:研究南美油藤果油的安全性,为合理开发利用南美油藤提供科学依据。方法:对样品进行小鼠急性经口毒性试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、Ames试验、大鼠30天喂养试验[1]。结果:雌、雄两种性别小鼠MTD均大于20ml/kgBW;未见南美油藤果油对大鼠体重、摄食量、食物利用率、血常规、血生化有生物学意义的影响;遗传毒性试验结果为阴性。结论:根据急性毒性分级,受试物属无毒物,无遗传毒性,南美油藤果油的大鼠30天喂养实验的NOAEL为10ml/kgBW。 展开更多

关键词 急性毒性 亚急性毒性 遗传毒性 南美油藤 南美油藤果油

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油料植物南美油藤扦插技术研究 被引量：15

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作者 尚秀华 高丽琼 +3 位作者 谢耀坚 张沛健 陈鸿鹏 彭彦 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期14-18,共5页

以2 a生南美油藤枝条作为穗条研究不同生根剂种类、生根剂浓度、穗条根部生根剂浸泡时间、穗条不同木质化程度以及以0.5年生枝条作为穗条研究不同品种对南美油藤扦插生根效果的影响。结果发现:南美油藤扦插7 d左右出现愈伤组织,10左右... 以2 a生南美油藤枝条作为穗条研究不同生根剂种类、生根剂浓度、穗条根部生根剂浸泡时间、穗条不同木质化程度以及以0.5年生枝条作为穗条研究不同品种对南美油藤扦插生根效果的影响。结果发现:南美油藤扦插7 d左右出现愈伤组织,10左右愈伤组织出出现白芽点,12 d左右开始生根,20 d可以移栽。不同生根剂种类、生根剂浓度、穗条根部生根剂浸泡时间对南美油藤扦插生根率具有显著影响,生根剂IBA,浓度500~1 000 mg/L,浸泡时间20~60 s对南美油藤扦插生根效果最优;木质化程度低的枝条作为穗条扦插效果优于完全木质化枝条,已经驯化的南美油藤V扦插效果优于其他几个品种。 展开更多

关键词 南美油藤 扦插 生根效果

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南美油藤油的脂肪酸组成分析 被引量：8

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作者 杨金 李庆华 +4 位作者 李娟 易平 吴娜 王泽峰 刘卫 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期88-90,共3页

以石油醚为溶剂室温浸提南美油藤种子所含的油脂,采用气相色谱质谱(GC/MS)分析测定南美油藤油的脂肪酸组成与含量。结果表明:南美油藤油中主要的脂肪酸为亚麻酸(46.65%)、亚油酸(41.43%)、棕榈酸(5.50%)和硬脂酸(5.36%),4种主要脂肪酸... 以石油醚为溶剂室温浸提南美油藤种子所含的油脂,采用气相色谱质谱(GC/MS)分析测定南美油藤油的脂肪酸组成与含量。结果表明:南美油藤油中主要的脂肪酸为亚麻酸(46.65%)、亚油酸(41.43%)、棕榈酸(5.50%)和硬脂酸(5.36%),4种主要脂肪酸含量占总脂肪酸含量的98.94%,不饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量的88.62%。南美油藤油是一种亚麻酸含量很高的食用油脂,具有很好的营养价值。 展开更多

关键词 南美油藤油 脂肪酸 气相色谱质谱

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景洪市普文镇南美油藤的生长结实特征研究 被引量：1

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作者 郑科 谷丽萍 +1 位作者 刘玉蓉 晏学卫 《现代农业科技》 2016年第24期139-141,共3页

本文对南美油藤开花特性与适宜生长环境、在景洪市普文镇的地径生长、种植3个月后的分枝数、果实心室数以及结实特性进行了研究,以期为今后规模化种植南美油藤提供参考。

关键词 南美油藤 开花特性 心室数 分枝数 生长环境 云南景洪 普文镇

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南美油藤PvFAD7基因的克隆及其表达模式和功能分析 被引量：1

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作者 刘果 吴志华 +2 位作者 彭彦 尚秀华 高丽琼 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期745-755,共11页

ω-3 FAD基因是α-亚麻酸合成途径中的一个关键限速酶基因,通过调节该基因的过量表达,可提高植物中α-亚麻酸含量。对南美油藤ω-3脂肪酸脱氢酶基因PvFAD7的克隆及其表达模式和功能分析,有利于探明南美油藤种子高含量α-亚麻酸的合成机... ω-3 FAD基因是α-亚麻酸合成途径中的一个关键限速酶基因,通过调节该基因的过量表达,可提高植物中α-亚麻酸含量。对南美油藤ω-3脂肪酸脱氢酶基因PvFAD7的克隆及其表达模式和功能分析,有利于探明南美油藤种子高含量α-亚麻酸的合成机制,为下一步利用遗传改良生产植物α-亚麻酸奠定理论基础。基于前期南美油藤种子转录组数据,从南美油藤新鲜叶片同源克隆获得南美油藤脂肪酸脱氢酶基因PvFAD7的DNA全长序列,并对其进行生物信息学分析。通过实时荧光定量PCR分析该基因在南美油藤不同器官(成熟叶、新叶、茎、根、果皮、幼嫩种子和成熟种子)中的表达模式,并利用亚细胞定位技术观察该基因的编码蛋白在烟草叶表皮细胞中的定位情况。通过构建过表达载体,介导农杆菌遗传转化获得过表达PvFAD7基因的转基因阳性烟草植株,并对收获的种子利用气相色谱法进行脂肪酸组分的测定。南美油藤PvFAD7基因DNA全长序列为2222 bp,编码461个氨基酸,包括8个外显子和7个内含子。蛋白多序列比对结果显示南美油藤PvFAD7编码蛋白与同科植物蓖麻和橡胶树同源性最高。生物信息学分析结果表明,PvFAD7蛋白有4个组氨酸保守区,是典型的膜结合类脂肪酸脱氢酶,N端具有叶绿体转运肽特征与亚细胞定位结果一致,显示为PvFAD7蛋白定位于叶绿体。RT-qPCR的结果显示PvFAD7基因在南美油藤成熟叶和新叶中相对表达量最高,而种子中的表达量最低且两个不同时期种子中PvFAD7的相对表达量差异不显著。通过构建过表达载体pCAMBIA1301-PvFAD7并转化获得过表达PvFAD7基因的转基因阳性烟草植株,发现烟草种子亚油酸含量降低了6.40%,而α-亚麻酸、棕榈酸和含油量分别增加了0.87%、3.19%和18.09%。因此,PvFAD7为叶绿体型ω-3脂肪酸脱氢酶基因,在催化亚油酸合成α-亚麻酸的反应中发挥了一定的功能,但可能不是南美油藤种子中α-亚麻酸合成的主效基因。 展开更多

关键词 南美油藤 PvFAD7基因 表达模式 亚细胞定位 过表达

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外源激素对低温胁迫下南美油藤幼苗叶片生理生化指标的影响 被引量：10

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作者 刘果 高丽琼 +3 位作者 彭彦 尚秀华 詹妮 吴志华 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期2181-2190,共10页

【目的】探索南美油藤幼苗的抗冷害机制,为我国南美油藤幼苗低温胁迫适应性研究提供一定的理论参考和支持。【方法】利用脱落酸(ABA)和赤霉素(GA3)两种外源激素作为诱导剂,测定南美油藤幼苗在4℃低温胁迫下不同激素和不同浓度处理下的... 【目的】探索南美油藤幼苗的抗冷害机制,为我国南美油藤幼苗低温胁迫适应性研究提供一定的理论参考和支持。【方法】利用脱落酸(ABA)和赤霉素(GA3)两种外源激素作为诱导剂,测定南美油藤幼苗在4℃低温胁迫下不同激素和不同浓度处理下的幼苗叶片膜系统[相对电导率(REC),丙二醛(MDA)含量]、渗透调节物质[可溶性蛋白(SP),可溶性糖(SS)]和氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)]活性等生理生化指标随处理时间的变化。【结果】南美油藤幼苗叶片喷施10μmol/L ABA后经低温胁迫能显著降低其膜系统REC和MDA含量(P<0.05,下同),而喷施10 mg/L GA3能有效降低其MDA含量;南美油藤幼苗叶片喷施10μmol/L ABA后经低温胁迫能显著增加其SP和SS含量,而喷施GA3南美油藤幼苗叶片SP和SS含量的增加效果不显著(P>0.05,下同);喷施10μmol/L ABA后经低温胁迫均能有效提高幼苗叶片SOD、POD和CAT活性,喷施10 mg/L GA3可适当提高其POD活性,5 mg/L GA3能在一定程度上提高其CAT活性,但随着低温处理时间的延长,喷施GA3对南美油藤幼苗叶片中CAT活性增强效果不显著。对7种生理生化指标的Pearson相关性分析结果显示,SOD、POD和CAT 3种氧化酶活性间存在正相关关系,且POD与REC呈负相关,CAT与REC和MDA含量呈负相关,故增强SOD、POD和CAT的活性,可适当降低REC和MDA含量,提高南美油藤幼苗的抗冷害能力。SP和SS均与3种氧化酶活性呈正相关,且SS与REC和MDA呈负相关,因此增加SP和SS含量对南美油藤幼苗抵抗冷害能力有积极的作用。【结论】喷施适当浓度的外源激素ABA(10μmol/L)和GA3(5~10 mg/L)能有效提高南美油藤幼苗的抗冷害能力。 展开更多

关键词 南美油藤 外源激素 低温胁迫 氧化酶活性

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南美油藤种子发育过程的代谢组学和转录组学联合分析 被引量：6

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作者 刘果 陈鸿鹏 +2 位作者 吴志华 彭彦 谢耀坚 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第5期169-179,共11页

【目的】南美油藤种子油中富含不饱和脂肪酸,是一种具有重要经济价值和应用前景的油料植物。目前影响南美油藤种子油脂合成的关键基因、途径及其调控机理尚未清晰。因此,对南美油藤种子的脂质代谢物的动态变化规律及重要脂肪酸代谢相关... 【目的】南美油藤种子油中富含不饱和脂肪酸,是一种具有重要经济价值和应用前景的油料植物。目前影响南美油藤种子油脂合成的关键基因、途径及其调控机理尚未清晰。因此,对南美油藤种子的脂质代谢物的动态变化规律及重要脂肪酸代谢相关调控基因的研究,不仅能够为提高其种子油产量和改善油脂品质提供理论基础,也可为其他木本油料植物高效开发利用提供有价值的参考依据。【方法】选用不同生长阶段的南美油藤种子(形成初期、发育初期、中期、后期、成熟期)为研究对象,结合GC-MC代谢组学技术和高通量转录组测序技术,分析种子发育过程中脂质代谢物含量的动态变化规律,并根据种子不同生长阶段的差异表达基因寻找出脂质代谢物生物合成与累积的关联酶基因。【结果】脂质代谢组学分析发现,南美油藤种子中高含量的α-亚麻酸和亚油酸主要在种子成熟阶段合成与累积,是判别南美油藤种子中脂肪酸缓慢累积时期与快速累积阶段的依据。转录组学分析表明,南美油藤种子成熟阶段前后的基因表达存在显著差异。结合代谢组学与转录组学的分析结果显示,与脂肪酸生物合成和累积相关的6个关键酶基因的表达模式与脂肪酸的合成和累积存在显著的相关性,基因家族的不同成员存在生物学功能的差异性和多样性。其中FAD2-3、FAD7、FATA、KAS2、LACS2、LACS8和SAD酶基因表达与脂肪酸总含量及主要脂肪酸含量呈显著正相关,说明7个酶基因表达对南美油藤种子油脂的合成与累积有促进作用;FAD2-2、KCS1、KCS10和LACS1酶基因与脂肪酸总含量及主要脂肪酸含量呈显著负相关,说明4个酶基因的表达对南美油藤种子油脂的合成与累积具有抑制作用。【结论】南美油藤种子成熟前后脂肪酸含量及差异表达基因存在显著差异,可依据种子中α-亚麻酸和亚油酸的含量变化将种子发育过程划分为脂肪酸缓慢累积和快速累积2个时期;南美油藤种子脂肪酸代谢中的6个关键酶基因的表达模式与脂肪酸的合成和累积存在显著的相关性,且同一基因家族的不同成员在脂肪酸的累积过程中可能具有不同的生物学功能。研究结果可为利用分子生物学技术提高南美油藤种子油产量和改变脂肪酸组分提供备选基因和相应的理论基础。 展开更多

关键词 南美油藤 代谢组学 转录组学 油脂合成 不饱和脂肪酸

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南美油藤种子的营养成分与开发前景分析 被引量：2

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作者 刘果 高丽琼 +2 位作者 吴志华 彭彦 尚秀华 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第6期90-97,共8页

为科学开发和合理利用南美油藤种子,提高其经济价值,以大果印加果和小果印加果两种南美油藤种子以及4个不同来源地的小果印加果种子为材料,对其脂肪酸、氨基酸和矿物质等营养成分进行检测分析。结果表明:南美油藤种子营养成分丰富,以脂... 为科学开发和合理利用南美油藤种子,提高其经济价值,以大果印加果和小果印加果两种南美油藤种子以及4个不同来源地的小果印加果种子为材料,对其脂肪酸、氨基酸和矿物质等营养成分进行检测分析。结果表明:南美油藤种子营养成分丰富,以脂肪和蛋白质含量为主,总糖含量较低,小果印加果种子中脂肪和蛋白质较大果印加果种子稍高,可作为一种植物蛋白资源和油料作物进行开发利用。不饱和脂肪酸含量在南美油藤种子中占脂肪酸总量的93.34%,尤其是亚麻酸的含量仅次于亚麻籽,可作为亚麻酸的主要开发来源之一。南美油藤种子中氨基酸种类齐全,16种氨基酸总含量约为27.11 g/100 g,7种必需氨基酸含量较高,占氨基酸总量的31.97%,9种药效氨基酸含量占总氨基酸含量的67.49%。种子中矿物质元素含量丰富,尤其是常量元素K、P、Mg,是一种典型的高钾低钠食品。高含量的维生素E含量使得南美油藤种子可作为维生素E的优良天然来源之一。因此,南美油藤种子具有较高的营养价值和药用价值,还在日化用品方面具有较大的应用潜力,可作为一种优良的木本油料资源、药用资源或食品等加工产品进行研究与开发。 展开更多

关键词 南美油藤 营养成分 脂肪酸 氨基酸 矿物质元素

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南美油藤开花物候及结果习性 被引量：1

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作者 刘果 高丽琼 +2 位作者 吴志华 尚秀华 彭彦 《桉树科技》 2019年第1期29-34,共6页

深入了解南美油藤的生长习性,可为南美油藤的花果调控及其他集约培育技术提供理论依据。本研究采用全年跟踪、固定植株和人工授粉标记观察等方法对其开花物候及结果习性等生物学特性进行了研究。结果表明:南美油藤种植后2个月即开花,4... 深入了解南美油藤的生长习性,可为南美油藤的花果调控及其他集约培育技术提供理论依据。本研究采用全年跟踪、固定植株和人工授粉标记观察等方法对其开花物候及结果习性等生物学特性进行了研究。结果表明:南美油藤种植后2个月即开花,4个月后开始挂果,全年都能够开花和结果。修枝对南美油藤开花率和结果率均有显著提高,是南美油藤种质资源圃有效的管理措施。对结果习性的调查显示,7—11月是南美油藤果实和种子生长与收获的旺盛季节。 展开更多

关键词 南美油藤 开花物候期 结果习性 结果率 修枝

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云南河口南美油藤栽培试验初报 被引量：2

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作者 陈鸿洁 钱云 +4 位作者 陈伟强 王树明 只佳增 林木森 罗国红 《热带农业科技》 2016年第4期25-27,35,共4页

在云南河口的南美油藤栽培试验初步表明：在河口低热环境条件下,南美油藤能正常开花、结果、成熟,种子产量折合1 230 kg/hm^2,种仁出油率40%～45%,但是冬季易遭受低温寒害,枝叶受损;花果期长（10 月至翌年7 月）,雄花多,雌花少,大多数... 在云南河口的南美油藤栽培试验初步表明：在河口低热环境条件下,南美油藤能正常开花、结果、成熟,种子产量折合1 230 kg/hm^2,种仁出油率40%～45%,但是冬季易遭受低温寒害,枝叶受损;花果期长（10 月至翌年7 月）,雄花多,雌花少,大多数花而不实,果少且小,是导致产量较低的重要因素,需要从抗寒品种选育和调整栽培措施方面深入试验研究. 展开更多

关键词 南美油藤 引种栽培 低热河谷 河口

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不同种植密度对南美油藤生长特性及产量的影响

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作者 陈鸿洁 钱云 +5 位作者 只佳增 周劲松 张荣琴 赵东兴 孙寅虎 张建春 《热带农业科学》 2021年第7期20-25,共6页

对云南河口低热河谷地区的南美油藤进行3种种植密度(A 150 cm×200 cm、B 200 cm×200 cm、C 250 cm×250 cm)试验,并对其生长量及产量影响的栽培试验研究,结果表明:3种种植密度的茎围增长量在夏季随气温的升高而迅速生长,... 对云南河口低热河谷地区的南美油藤进行3种种植密度(A 150 cm×200 cm、B 200 cm×200 cm、C 250 cm×250 cm)试验,并对其生长量及产量影响的栽培试验研究,结果表明:3种种植密度的茎围增长量在夏季随气温的升高而迅速生长,冬季随气温的降低长势趋于缓慢,茎围增长量在一年中呈慢-快-慢的变化趋势;密度250 cm×250 cm的茎围增长量显著高于密度150 cm×200 cm和200 cm×200 cm,现蕾期、初花期、初果期及成熟期均提前;全年单株脱壳前、脱壳后、种仁总产量、单果重为密度250 cm×250 cm>200 cm×200 cm>150 cm×200 cm,各种植密度之间全年单株脱壳前、脱壳后和种仁总产量差异达显著性水平,200 cm×200 cm、250 cm×250 cm的单果重无显著性差异,但是与150 cm×200 cm的差异达显著性水平。3种密度的种仁出油率无显著性差异。密度小的长势及产量均优于密度大的,即定植时适当增大株行距有利于南美油藤的生长和产量的提高。 展开更多

关键词 南美油藤 种植密度 生长量 产量

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南美油藤新品种印奇1号的选育及栽培技术

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作者 谷丽萍 郑科 +1 位作者 李思广 郭永清 《耕作与栽培》 2019年第4期55-56,共2页

印奇1号是采用系统选育方法培育而成的南美油藤优良家系。植株主蔓明显,花果同期,持续开花持续收获,蒴果具棱角,多为5个心室,每个心室1粒种子,种植一年内单株平均干果产量达2.44kg,适宜在景洪普文、墨江、绿春及其海拔在1200m以下相似... 印奇1号是采用系统选育方法培育而成的南美油藤优良家系。植株主蔓明显,花果同期,持续开花持续收获,蒴果具棱角,多为5个心室,每个心室1粒种子,种植一年内单株平均干果产量达2.44kg,适宜在景洪普文、墨江、绿春及其海拔在1200m以下相似地区种植。 展开更多

关键词 南美油藤 印奇1号 选育 栽培技术

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南美星油藤种子生物学特性初步探讨 被引量：4

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作者 蔡波 王亚荣 +3 位作者 蔡泽坪 吴繁花 王榜琴 于旭东 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期2987-2996,共10页

本研究对南美星油藤(Plukenetia volubilis L.)种子的生物学特性进行研究,通过观测果实及种子,测定种子的千粒重、种子含水量、种子活力和种皮透水性;研究不同梯度的温度、化学药剂对种子发芽特性的影响;观测种苗生长特性等。结果表明... 本研究对南美星油藤(Plukenetia volubilis L.)种子的生物学特性进行研究,通过观测果实及种子,测定种子的千粒重、种子含水量、种子活力和种皮透水性;研究不同梯度的温度、化学药剂对种子发芽特性的影响;观测种苗生长特性等。结果表明其胚乳丰富,千粒重较大,但含水量不高。种子活力受贮藏时间的影响较大,25℃贮藏30~60 d的种子发芽效果最佳,1年后将失去活力。KMnO_4和GA_3均能不同程度地提高种子萌发率,此外其萌发率还受浸种温度影响。本研究不仅可以了解南美星油藤植株繁殖性状,还能为南美星油藤的推广种植提供理论依据。 展开更多

关键词 南美星油藤 种子 生物学特性

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