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梭曼抗体酶研究Ⅱ:“潜过渡态”半抗原设计策略及其在梭曼抗体酶研究中的应用 被引量:3
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作者 杨日芳 恽榴红 +1 位作者 王字玲 荣康泰 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2000年第2期105-109,113,共6页
探索用化学免疫方法防治梭曼中毒。方法 :提出“潜过渡态”半抗原设计策略 ,并据此设计、合成了新型半抗原和人工抗原。结果 :该新型半抗原可成功诱导具有类酶活性的催化梭曼水解的抗体酶 ;还发现了一种新型的磷酰酯交换反应。结论 :实... 探索用化学免疫方法防治梭曼中毒。方法 :提出“潜过渡态”半抗原设计策略 ,并据此设计、合成了新型半抗原和人工抗原。结果 :该新型半抗原可成功诱导具有类酶活性的催化梭曼水解的抗体酶 ;还发现了一种新型的磷酰酯交换反应。结论 :实验证明了该半抗原设计策略的有效性。该半抗原设计策略还可能应用于能诱生催化磷 (膦 )酸二酯水解的抗体酶的半抗原设计 ,以及应用于有类似酯酶、酰胺酶、肽酶或核苷酸活性的抗体酶的研究。 展开更多
关键词 梭曼 半抗原设计策略 抗体酶 合成 潜过渡态
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新型喹乙醇残留标志物人工半抗原的设计及其在动物组织残留检测中的应用
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作者 白玉惠 王鹤佳 +2 位作者 刘智宏 黄耀凌 徐士新 《中国兽药杂志》 北大核心 2016年第2期22-28,共7页
为提高酶联免疫方法测定喹乙醇残留标志物(MQCA)的检测性能,设计了一种新型MQCA人工半抗原,该半抗原既完整保留MQCA分子特征性基团和结构,又具有便于和蛋白质载体偶联的基团-NH2。通过三步化学反应合成该半抗原,将其与蛋白质载体偶联... 为提高酶联免疫方法测定喹乙醇残留标志物(MQCA)的检测性能,设计了一种新型MQCA人工半抗原,该半抗原既完整保留MQCA分子特征性基团和结构,又具有便于和蛋白质载体偶联的基团-NH2。通过三步化学反应合成该半抗原,将其与蛋白质载体偶联成为免疫抗原后,进一步制备特异性抗体,研制了MQCA酶联免疫试剂盒,灵敏度高,特异性好,IC50为1.94μg/L。建立了测定动物性产品中MQCA残留量的直接竞争酶联免疫法,测定猪肝、猪肉、鸡肉、鸡蛋中MQCA的检测限分别为0.42、0.23、0.28、0.28μg/kg。猪肉中不同添加浓度MQCA(1,2,4μg/kg)的回收率为70%~97%;批内、批间变异系数均低于12%。本试剂盒可同时快速检测大批样品,有望在MQCA残留检测中发挥重要作用。研究有助于指导小分子药物半抗原的合理设计,为现有的半抗原设计方法提供新的理念和思路。 展开更多
关键词 喹乙醇残留标志物 半抗原设计 酶联免疫分析 残留检测
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黄曲霉毒素B_1半抗原分子设计与抗原合成及抗体特性研究进展 被引量:3
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作者 王亚楠 王晓斐 +3 位作者 牛琳琳 雷壮 张海棠 王自良 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第23期367-376,共10页
本文综述了国内外半抗原分子设计方法、基本要求、应遵循原则、抗原合成方法等方面的研究进展,尤其是对黄曲霉毒素B_1(AFB_1)半抗原分子设计与抗原合成及抗体特性进行了详尽阐述,旨在为AFB_1制备AFB_1及其他小分子半抗原高质量的抗体提... 本文综述了国内外半抗原分子设计方法、基本要求、应遵循原则、抗原合成方法等方面的研究进展,尤其是对黄曲霉毒素B_1(AFB_1)半抗原分子设计与抗原合成及抗体特性进行了详尽阐述,旨在为AFB_1制备AFB_1及其他小分子半抗原高质量的抗体提供新的方法和思路。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 半抗原分子设计 抗原合成 抗体特性
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硫代磷酸酯类有机磷药物抗原设计及免疫分析 被引量:1
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作者 王晶 陈秀金 +5 位作者 王方雨 李道敏 李兆周 张改平 邓瑞广 侯玉泽 《中兽医医药杂志》 2016年第1期71-77,共7页
半抗原的设计与合成是免疫分析方法的关键。本文介绍了硫代磷酸酯类有机磷药物半抗原的设计路线与合成方法,总结了各种免疫分析方法(如酶联免疫法、偏振荧光免疫法、胶体金免疫层析法和免疫传感器)在硫代磷酸酯类有机磷药物残留检测中... 半抗原的设计与合成是免疫分析方法的关键。本文介绍了硫代磷酸酯类有机磷药物半抗原的设计路线与合成方法,总结了各种免疫分析方法(如酶联免疫法、偏振荧光免疫法、胶体金免疫层析法和免疫传感器)在硫代磷酸酯类有机磷药物残留检测中的应用,并对未来免疫分析法的发展方向进行了展望。 展开更多
关键词 硫代磷酸酯类有机磷药物 半抗原设计 免疫分析 检测
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氰戊菊酯人工结合抗原合成方法研究进展
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作者 刘莹 余华强 +3 位作者 赵翠荣 王立峰 陈科海 彭萍 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第12期3211-3216,共6页
随着拟除虫菊酯农药的用量越来越大,其残留问题日益突出。氰戊菊酯作为检出率和超标率最高的菊酯类农药之一,为满足对其快速、简便、现场检测的要求,建立氰戊菊酯的免疫分析方法,首先必须合成适当的人工结合抗原。综述了目前国内外有关... 随着拟除虫菊酯农药的用量越来越大,其残留问题日益突出。氰戊菊酯作为检出率和超标率最高的菊酯类农药之一,为满足对其快速、简便、现场检测的要求,建立氰戊菊酯的免疫分析方法,首先必须合成适当的人工结合抗原。综述了目前国内外有关氰戊菊酯的人工抗原合成方法的研究进展,旨在为氰戊菊酯的免疫分析研究提供依据。 展开更多
关键词 氰戊菊酯 免疫分析 半抗原设计 偶联
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拟除虫菊酯类农药酶免疫分析方法研究进展 被引量:14
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作者 王春梅 程敬丽 +1 位作者 刘毅华 朱国念 《农药学学报》 CAS CSCD 2008年第1期15-22,共8页
对拟除虫菊酯类单一农药残留和多残留酶免疫分析方法的研究进展进行了综述。在介绍单一农药残留酶免疫分析方法中半抗原分子设计和ELISA方法建立的基础上,指出刚性连接臂是菊酯类农药免疫半抗原分子设计的一般原则,包被原和免疫原采用... 对拟除虫菊酯类单一农药残留和多残留酶免疫分析方法的研究进展进行了综述。在介绍单一农药残留酶免疫分析方法中半抗原分子设计和ELISA方法建立的基础上,指出刚性连接臂是菊酯类农药免疫半抗原分子设计的一般原则,包被原和免疫原采用不同的载体蛋白和不同结构的半抗原有利于菊酯类农药ELISA方法的建立。在介绍菊酯类农药多残留酶免疫分析方法时,剖析了通用免疫半抗原的结构特点,阐述了宽谱特异性抗体的筛选方法,揭示了在菊酯类农药多残留酶免疫分析法中存在竞争半抗原的选择具有盲目性、宽谱特异性抗体对不同农药的特异性差异较大的问题。并对拟除虫菊酯类农药通用免疫半抗原设计及多残留酶免疫分析技术的发展趋势进行了探讨。 展开更多
关键词 拟除虫菊酯 酶免疫分析 半抗原设计 农药残留
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呋喃西林代谢物多克隆抗体制备及酶联免疫吸附分析方法 被引量:7
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作者 任海涛 沈玉栋 +5 位作者 徐振林 杨金易 雷红涛 肖治理 王弘 孙远明 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期330-333,379,共5页
为了建立检测呋喃西林代谢物(SEM)的酶联免疫吸附分析方法(ELISA),将所设计合成的系列半抗原与牛血清白蛋白(BSA)偶联制备免疫原并免疫新西兰大白兔,筛选获得源于新颖半抗原H3的具有高亲和力、高特异性抗SEM多克隆抗体。同时,基于设计... 为了建立检测呋喃西林代谢物(SEM)的酶联免疫吸附分析方法(ELISA),将所设计合成的系列半抗原与牛血清白蛋白(BSA)偶联制备免疫原并免疫新西兰大白兔,筛选获得源于新颖半抗原H3的具有高亲和力、高特异性抗SEM多克隆抗体。同时,基于设计合成的系列同/异源包被抗原,考察了不同结构包被原对ELISA灵敏度的影响,发现H4-OVA作为异源包被原建立SEM的ELISA检测方法可获得最佳的检测效果,结果显示:ELISA方法的半抑制浓度(IC50)为12.37ng/mL;定量检测线性范围(IC20~IC80)为0.439~110.78ng/mL;检测限(IC10)达0.07ng/mL,达到了国内外相关检测限量要求,可应用于实际食品样品检测。 展开更多
关键词 硝基西林 半抗原设计 多克隆抗体 异源包被 ELISA(酶联免疫吸附分析)
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抗体酶的研究及应用 被引量:5
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作者 范立梅 阮红 《温州大学学报》 2005年第4期51-54,共4页
抗体酶是具有催化活性的免疫球蛋白,它既具有抗体的高效选择性,又能像酶那样高效催化化学反应,开创了催化剂研究的崭新领域.本文从抗体酶的作用机理、设计利制备、应用领域、存在的问题和研究展望等多个角度进行综述.
关键词 抗体酶 半抗原设计 工程抗体催化
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催化抗体研究新进展 被引量:1
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作者 罗贵民 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第4期354-359,共6页
催化抗体也叫抗体酶 ,是具有催化活性的免疫球蛋白 .由于它兼具抗体的高度选择性和酶的高效催化性 ,因而催化抗体制备技术的开发预示着可以人为生产适应各种用途的 ,特别是自然界不存在的高效催化剂 ,对生物学、化学和医学等多种学科有... 催化抗体也叫抗体酶 ,是具有催化活性的免疫球蛋白 .由于它兼具抗体的高度选择性和酶的高效催化性 ,因而催化抗体制备技术的开发预示着可以人为生产适应各种用途的 ,特别是自然界不存在的高效催化剂 ,对生物学、化学和医学等多种学科有重要的理论意义和实用价值 .综述了催化抗体研究的最新进展 ,讨论了该领域目前存在的问题 ,提出了解决这些问题的可能办法 . 展开更多
关键词 催化抗体 抗体酶 半抗原设计 随机奕变
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基于高特异性单克隆抗体的间接竞争ELISA检测食品中胭脂红的研究 被引量:5
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作者 朱琳 陈子键 +5 位作者 罗林 王宇 钟玉心 沈玉栋 孙远明 徐振林 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期128-135,共8页
该研究设计合成了一种胭脂红半抗原,分别采用重氮化法和戊二醛法将半抗原与载体蛋白偶联制备人工抗原,通过免疫Bal b/c小鼠及杂交瘤技术成功筛选制备了胭脂红高特异性单克隆抗体,与苋菜红、柠檬黄等结构类似物无交叉反应。基于该抗体建... 该研究设计合成了一种胭脂红半抗原,分别采用重氮化法和戊二醛法将半抗原与载体蛋白偶联制备人工抗原,通过免疫Bal b/c小鼠及杂交瘤技术成功筛选制备了胭脂红高特异性单克隆抗体,与苋菜红、柠檬黄等结构类似物无交叉反应。基于该抗体建立了间接竞争酶联免疫分析方法用于检测食品中胭脂红残留。该方法对胭脂红的半抑制浓度(IC_(50))和检出限(IC_(10))分别为10.1 ng/mL和0.98 ng/mL,线性范围为2~50 ng/mL。将该方法应用于山楂条和雪碧中胭脂红的快速检测,样品加标回收率分别为93.0%~113%和93.0%~100%,相对标准偏差分别为9.7%~12%和3.2%~3.9%。结果与HPLC-UV方法一致,表明该方法可用于食品中痕量胭脂红的快速筛查。 展开更多
关键词 胭脂红 半抗原设计 单克隆抗体 间接竞争ELISA 食品
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拟除虫菊酯类农药及其代谢物免疫检测技术研究进展 被引量:3
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作者 许梓红 罗林 +4 位作者 陈子键 王炳志 严义勇 孙远明 徐振林 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期320-328,共9页
拟除虫菊酯类农药是一类在世界范围内被广泛用于防治害虫的神经毒剂。由于用量大且存在一定毒性,因此,研究适合现场快速检测的筛查方法对于保障消费者身心健康具有重要作用。基于抗体特异性识别的免疫分析法具有简便、灵敏、快速及低成... 拟除虫菊酯类农药是一类在世界范围内被广泛用于防治害虫的神经毒剂。由于用量大且存在一定毒性,因此,研究适合现场快速检测的筛查方法对于保障消费者身心健康具有重要作用。基于抗体特异性识别的免疫分析法具有简便、灵敏、快速及低成本等特点,是当前食品安全主流快速检测方法。该文重点介绍了拟除虫菊酯类农药及其代谢物半抗原设计策略、抗体制备和免疫检测新方法等方面研究进展,并对其应用现状、存在的问题及未来前景进行了评述。 展开更多
关键词 拟除虫菊酯类 免疫法检测 半抗原设计 抗体制备
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活力高于天然谷胱甘肽过氧化物酶的含硒抗体酶 被引量:3
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作者 丁兰 赵大庆 +2 位作者 倪嘉缵 罗贵民 刘仔 《中国科学(B辑)》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期293-300,共8页
还原型谷胱甘肽(GSH)的巯基和两个羧基分别与2,4-二硝基氯苯(DNCB)和甲醇反应,合成出半抗原Hp2;通过戊二醛将Hp2连到牛血清白蛋白(BSA)上,合成出全抗原Ag2;吸收光谱法测出Hp2在BSA上的平均连接量为30.2mol/mol.用标准的单克隆抗体(McAb... 还原型谷胱甘肽(GSH)的巯基和两个羧基分别与2,4-二硝基氯苯(DNCB)和甲醇反应,合成出半抗原Hp2;通过戊二醛将Hp2连到牛血清白蛋白(BSA)上,合成出全抗原Ag2;吸收光谱法测出Hp2在BSA上的平均连接量为30.2mol/mol.用标准的单克隆抗体(McAb)制备技术,制备出阳性McAb(IgG)-4G3;4G3对GSH和半抗原Hp2的解离常数(K_D)表明,单克隆抗体4G3对GSH具有较强的亲和力.对4G3进行两步化学诱变(Chemical Mutation),诱变后即为具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性的含硒抗体酶(m4G3),m4G3的GPX活力为9337U/μmol,是兔肝GPX(RL-GPX,5780U/μmol)的 1.6倍,曾报道的含硒抗体酶m4A4(1239 U/μmol)的7.5倍,制备出活性高于天然酶的抗体酶,证实了半抗原设计思想.将m4G3拆分成Fab和Fc片段,发现m4G3的活性中心位于Fab片段上,m4G3的硒代半胱氨酸(Se-Cys)含量为1.9 mol/mol. 展开更多
关键词 谷胱甘肽 过氧化物酶 抗体酶 半抗原设计
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