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紫外线照射对牛孤雌激活卵母细胞和体细胞核移植胚胎体外发育的影响 被引量:4
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作者 李雪峰 安志兴 +1 位作者 李向臣 张涌 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期20-24,共5页
分析了紫外线 (ultraviolet,UV)照射对牛孤雌激活卵母细胞和体细胞核移植胚胎卵裂和体外发育的影响。结果发现 ,经UV照射 2 0s和 40s的卵母细胞孤雌激活后的卵裂率和囊胚发育率都极显著低于UV照射 0s和 1 0s的卵母细胞 (P <0 .0 1 ) ... 分析了紫外线 (ultraviolet,UV)照射对牛孤雌激活卵母细胞和体细胞核移植胚胎卵裂和体外发育的影响。结果发现 ,经UV照射 2 0s和 40s的卵母细胞孤雌激活后的卵裂率和囊胚发育率都极显著低于UV照射 0s和 1 0s的卵母细胞 (P <0 .0 1 ) ,表明UV照射卵母细胞超过 2 0s降低了孤雌激活胚胎的卵裂和体外发育潜力。核移植中UV照射卵母细胞 2 0s后 ,重组胚的卵裂率极显著低于卵母细胞照射 0s和 1 0s时所构建的重组胚 (P <0 .0 1 ) ,但囊胚发育率无显著差异 (P>0 .0 5 ) ;而UV照射卵母细胞 40s时 ,所构建的重组胚的卵裂率和囊胚发育率都明显低于其他各组 ,表明超过 2 0s的UV照射显著降低了重组胚的卵裂和体外发育潜力。研究结果表明 ,核移植中用UV指导卵母细胞去核时UV照射时间应控制在 2 0s以内 ,UV照射 1 展开更多
关键词 紫外线照射 卵母细胞 体细胞核 体外发育 孤雌生殖 UV照射 胚胎移植
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硬骨鱼类体细胞核的移植——(Ⅰ)鲫鱼体细胞核和鲤鱼卵细胞质配合的移植 被引量:3
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作者 林礼堂 夏仕玲 朱新平 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 1991年第2期9-11,共3页
用鲫鱼成体体细胞核作供体,直接移植到鲤鱼的去核卵内。移植后的卵子能进行分裂和发育.经过连续核移植,在193个移核卵中。获得一尾发育到孵出期的杂种幼鱼,存活224小时.
关键词 鲫鱼 体细胞核 鲤鱼 细胞 移植
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广西巴马小型猪体细胞核移植体系的建立 被引量:3
3
作者 王献伟 卢晟盛 卢克焕 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第6期2376-2381,共6页
通过建立广西巴马小型猪体细胞核移植培养体系,为后续转基因克隆猪生产及其相关研究提供最佳条件。试验探讨了盲吸法对猪卵母细胞的去核效率;利用分离到的广西巴马小型猪附睾成纤维细胞作供体构建重构胚胎,探讨6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)... 通过建立广西巴马小型猪体细胞核移植培养体系,为后续转基因克隆猪生产及其相关研究提供最佳条件。试验探讨了盲吸法对猪卵母细胞的去核效率;利用分离到的广西巴马小型猪附睾成纤维细胞作供体构建重构胚胎,探讨6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)和细胞松弛素B(CB)对其后续胚胎发育的影响;利用分离到的广西巴马小型猪腹部成纤维作供体,探讨其对核移植胚胎的发育效率。结果表明:猪卵母细胞盲吸法去核的效率为73.75%;广西巴马小型猪附睾成纤维细胞作供体构建重构胚胎,6-DMAP和CB对其后续胚胎发育没有显著差异(分裂率和囊胚率分别为:89.89%and 6.74%vs.82.95%and 5.68%,P>0.05);腹部成纤维细胞作供体,重构胚胎的融合率、分裂率和囊胚率分别为55.40%、67.53%和6.49%。采用盲吸法可以对体外成熟猪卵母细胞成功去核,广西巴马小型猪腹部成纤维细胞和附睾成纤维细胞均可作供体成功构建体细胞核移植胚胎,并可以发育到囊胚。 展开更多
关键词 广西巴马小型猪 体细胞核 移植
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影响体细胞核移植效率的因素 被引量:3
4
作者 刘亚 章孝荣 《动物医学进展》 CSCD 2003年第6期35-38,共4页
哺乳动物体细胞核移植 (克隆 )是近年来迅速发展起来的一项新技术 ,对濒危动物保护、优良种畜快速扩群以及核质关系的研究、药物试验等诸多领域都具有重大意义。但体细胞核移植是一项程序繁杂的工作 ,每一步操作所采用的试剂、材料和方... 哺乳动物体细胞核移植 (克隆 )是近年来迅速发展起来的一项新技术 ,对濒危动物保护、优良种畜快速扩群以及核质关系的研究、药物试验等诸多领域都具有重大意义。但体细胞核移植是一项程序繁杂的工作 ,每一步操作所采用的试剂、材料和方案等都会影响到核移植效率 ,因而其影响因素十分众多。文章根据目前已有资料 ,论述了卵母细胞来源、卵母细胞与供体细胞的胞质容量、卵母细胞的去核方案、体细胞供体动物的年龄、供体细胞的组织来源与传代次数及供体细胞的冷藏、冷冻和所处的细胞周期阶段对核移植效率的影响。另外 ,对重组胚的融合 -激活方案、核移植方案及重构胚的培养方案对核移植效率的影响也作了简要论述。 展开更多
关键词 体细胞核 移植效率 影响因素 卵母细胞 胞质容量 动物育种
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卵母细胞和供核体细胞质量对牛体细胞核移植效率的影响 被引量:1
5
作者 江胜芳 张昌军 +2 位作者 姜雪强 罗清炳 董毅飞 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期28-31,共4页
将未成熟牛卵母细胞进行体外成熟培养,挤压法去除卵母细胞核,以牛耳成纤维细胞作为供核细胞进行体细胞核移植研究,观察形成囊胚组与未形成囊胚组平均每卵巢获卵数、卵母细胞体外成熟率、供核体细胞细胞传代次数、饥饿天数的差异。结果表... 将未成熟牛卵母细胞进行体外成熟培养,挤压法去除卵母细胞核,以牛耳成纤维细胞作为供核细胞进行体细胞核移植研究,观察形成囊胚组与未形成囊胚组平均每卵巢获卵数、卵母细胞体外成熟率、供核体细胞细胞传代次数、饥饿天数的差异。结果表明:形成囊胚组平均每卵巢获卵数(4.90枚)和体外成熟率(63.9%)均显著高于未形成囊胚组(分别为4.05枚、48.4%)。形成囊胚组供核体细胞代数(4.7代)和血清饥饿天数(4.7d)与未形成囊胚组(分别为6.1代、4.4d)无显著差异。卵巢质量和卵母细胞质量是决定能否形成克隆囊胚的重要影响因素,在供体细胞传代3~8代、饥饿1~9d的范围内,供体细胞传代次数和血清饥饿处理时间对克隆效率无显著影响。 展开更多
关键词 体细胞核移植 卵母细胞 体细胞
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基因打靶用于哺乳动物体细胞核移植技术研究进展 被引量:3
6
作者 朱武洋 贾青 《畜牧兽医杂志》 2002年第5期10-12,15,共4页
哺乳动物体细胞核移植技术以其供核效率高而在动物克隆技术中占有明显的优势 ;基因打靶技术通过外源 DNA与染色体 DNA间的重组可达到定点修饰、改造基因组的目的。它与体细胞核移植技术相结合具有巨大的技术优势和广阔的应用前景。将为... 哺乳动物体细胞核移植技术以其供核效率高而在动物克隆技术中占有明显的优势 ;基因打靶技术通过外源 DNA与染色体 DNA间的重组可达到定点修饰、改造基因组的目的。它与体细胞核移植技术相结合具有巨大的技术优势和广阔的应用前景。将为畜牧生产和医学生物学的研究带来前所未有的价值。 展开更多
关键词 基因打靶 哺乳动物 体细胞核 移植技术
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小鼠体细胞核移植显微操作问题的探讨
7
作者 李井春 方南洙 《吉林畜牧兽医》 2006年第10期12-14,18,共4页
本文阐述了体细胞核移植显微操作工具的制备及注意的问题和显微操作程序;同时,对体细胞核移植操作中值得注意的几个细节问题进行分析和探讨。
关键词 小鼠 体细胞核 移植 显微操作
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老龄牛将受益于体细胞核转移
8
作者 胡小华(译编) 《农村养殖技术(新兽医)》 2005年第7期48-48,共1页
在大动物中通过一项最新的研究结果表明,克隆干细胞的再生能力与成熟干细胞相比有着指数竞争优势。
关键词 老龄牛 体细胞核 细胞 克隆技术 再生能力
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从多利到波来:用体细胞核转移克隆 被引量:5
9
作者 Darius Moradpour Hubert E.Blum 郝连杰 《德国医学》 CAS 1999年第6期367-368,共2页
绵羊多利(Dolly)是第一只从成年动物成熟体细胞克隆出来的哺乳动物,这一研究一方面向基础生物发生学原则提出了挑战;另一方面为生殖生物学、医学以及制药学等的基础研究和应用开创了全新的前景。因此,用体细胞核转移克隆的技术具有巨大... 绵羊多利(Dolly)是第一只从成年动物成熟体细胞克隆出来的哺乳动物,这一研究一方面向基础生物发生学原则提出了挑战;另一方面为生殖生物学、医学以及制药学等的基础研究和应用开创了全新的前景。因此,用体细胞核转移克隆的技术具有巨大潜在意义。同时,它也提出了伦理问题,不仅在专业领域,而且在社会上引起广泛的讨论。 展开更多
关键词 体细胞核 克隆 多利 波来 特点 应用
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成年体细胞核移植克隆猪 被引量:1
10
作者 IRINA A.polejaeva 张质莹 《国外畜牧科技》 2001年第5期33-35,共3页
关键词 克隆猪 成年体细胞核 移植
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率先证明人类的体细胞核可以被重新编程并可至少发育至囊胚阶段
11
《中国科学院院刊》 2004年第2期120-120,共1页
关键词 人类 体细胞核 编程 囊胚阶段 种间细胞融合 胚胎干细胞
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卵母细胞和供核细胞对体细胞克隆的影响
12
作者 敬晓棋 雷安民 +2 位作者 杨春荣 胡军和 窦忠英 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2006年第1期20-22,共3页
关键词 体细胞克隆 卵母细胞 克隆胚胎 移植程序 生物医药 畜牧生产 克隆效率 体细胞 体细胞核 发育率
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不同来源供体细胞及含羞草素对水牛体细胞核移植的影响
13
作者 李日聪 杨春艳 +2 位作者 庞春英 黄右军 梁贤威 《畜牧与兽医》 北大核心 2010年第6期49-51,共3页
本文主要探讨供体细胞类型及含羞草素对水牛体细胞克隆的影响。结果如下:与成纤维细胞相比,卵丘/颗粒细胞可以获得较高的融合率和分裂率,但两者的囊胚率差异不显著;克隆水牛的成纤维细胞能用于核移植,而且对核移植结果没有影响;性别对... 本文主要探讨供体细胞类型及含羞草素对水牛体细胞克隆的影响。结果如下:与成纤维细胞相比,卵丘/颗粒细胞可以获得较高的融合率和分裂率,但两者的囊胚率差异不显著;克隆水牛的成纤维细胞能用于核移植,而且对核移植结果没有影响;性别对重构胚的早期发育影响不大;含羞草素处理可以替代血清饥饿处理。 展开更多
关键词 不同来源 体细胞 含羞草 水牛 体细胞核 成纤维细胞 体细胞克隆 移植 细胞类型 颗粒细胞 结果 饥饿处理 发育影响 重构胚 融合率 囊胚率 分裂率 血清 性别 卵丘
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具野稻细胞质的胞质型雄性不育系的体细胞克隆变异II.体细胞克隆温敏核不育突变
14
作者 马镇荣 王昌虎 +1 位作者 刘卫 凌定厚 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期313-320,共8页
在胞质型水稻雄性不育系IR66707A和IR69700A经离体培养而获得的136个体细胞克隆中,发现了温敏核不育突变5例。这类突变体在广州地区的自然气候下,早季至晚季前期表现为不育,晚季后期表现为可育。盛夏,在幼穗发育至花粉形成阶段对部分突... 在胞质型水稻雄性不育系IR66707A和IR69700A经离体培养而获得的136个体细胞克隆中,发现了温敏核不育突变5例。这类突变体在广州地区的自然气候下,早季至晚季前期表现为不育,晚季后期表现为可育。盛夏,在幼穗发育至花粉形成阶段对部分突变材料进行短日照处理,发现对短日照敏感的不育系农垦58S转换为可育,而供试的5例突变及另一对照培矮64S却与未经处理的材料一样仍表现为不育,表明它们的育性与日照长度的变化无关。在同一发育时期进行低温处理的结果显示,低温处理10d及10d以上者可发生育性转换,自交结实率在17.23%-42.19%之间,而未经处理的材料仍然表现不育,表明它们的育性转换与温度有关。以正常品种为父本与突变体杂交,F1全部为可育;F2可育与不育个体的分离比为3:1;以F1为父本与之测交,TF1代中可育与不育个体的分离比为1:1。遗传分析表明,这种温敏核不育突变为一对隐性核基因所控制。获得了由胞质型雄性不育变为胞核型雄性不育的突变体,这在体细胞克隆变异领域中是一种典型的突变。 展开更多
关键词 水稻 野稻细胞 胞质型雄性不育系 体细胞克隆变异 体细胞克隆温敏不育突变
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干细胞生长因子协同血小板生成素体外扩增脐血巨核前体细胞的研究
15
作者 李博 文飞球 +3 位作者 陈霆 丁路 冯战桂 杨默 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期473-475,共3页
目的探讨在干细胞生长因子(SCF)和血小板生成素(TPO)组合作用下,人脐血CD34^+细胞体外扩增为巨核前体细胞的效果。方法采用经免疫磁珠纯化系统收集的人脐血CD34^+细胞与SCF+TPO组合体外培养,研究该组合对巨核前体细胞的扩增效果。结果在... 目的探讨在干细胞生长因子(SCF)和血小板生成素(TPO)组合作用下,人脐血CD34^+细胞体外扩增为巨核前体细胞的效果。方法采用经免疫磁珠纯化系统收集的人脐血CD34^+细胞与SCF+TPO组合体外培养,研究该组合对巨核前体细胞的扩增效果。结果在SCF和TPO组合的作用下,脐血CD34^+细胞(6例)显著地向巨核前体细胞(CD61+CD41^+细胞)扩增。CD61^+CD41^+细胞构成比在培养第7天达到峰值(15.57±4.95)%,第14天为(9.06±2.72)%;存第14天,CD61^-CD41^+细胞总数和巨核系细胞集落形成单位(CFU- MK)达到高峰,为较理想的培养时间。经过体外扩增,总细胞数、CD34^+细胞数、CD61^+CD41^+细胞和CFU-MK均显著增加。结论在SCF和TPO组合的作用下,脐血CD34^+细胞可有效地扩增为巨核前体细胞。 展开更多
关键词 细胞 体细胞 体外扩增 血小板生成素 细胞生长因子
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溶葡萄球菌素基因乳腺特异表达载体的构建与检测及转基因核供体细胞的制备
16
作者 上官陶 张勃伟 +2 位作者 孙薇薇 黄欣 张涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1374-1379,共6页
本研究旨在构建溶葡萄球菌素基因牛乳腺特异表达载体(pEPB),转染牛胎儿成纤维细胞,为制备溶葡萄球菌素基因的转基因克隆牛提供核供体细胞。本研究以pEGFP-C1为载体骨架,通过PCR扩增牛2.6kb的β-酪蛋白5′调控区及0.6kb的3′侧翼区(poly... 本研究旨在构建溶葡萄球菌素基因牛乳腺特异表达载体(pEPB),转染牛胎儿成纤维细胞,为制备溶葡萄球菌素基因的转基因克隆牛提供核供体细胞。本研究以pEGFP-C1为载体骨架,通过PCR扩增牛2.6kb的β-酪蛋白5′调控区及0.6kb的3′侧翼区(poly A)序列作为调控序列,制备成含有绿色荧光和新霉素筛选标记的牛乳腺特异表达载体,经PCR和酶切鉴定正确后,用转染试剂FuGene HD反复转染牛pEPB乳腺上皮细胞3~5次,用催乳素诱导后,经免疫荧光分析,检测目的蛋白的表达。然后,用电转染法转染牛胎儿成纤维细胞,经G418筛选得到阳性细胞后,把阳性细胞扩大培养并提取其基因组,因为溶葡萄球菌素基因是外源基因,经PCR及Southern blot检测来确定目的基因是否已经整合到细胞的基因组上。结果表明,溶葡萄球菌素基因在牛乳腺细胞中得到了表达,并整合到牛胎儿成纤维细胞的基因组中,得到了转溶葡萄球菌素基因的核供体细胞。结果显示,本研究所获得的转基因牛胎儿成纤维细胞可作为体细胞核移植的供体细胞进行转基因克隆牛研究。 展开更多
关键词 溶葡萄球菌素基因 乳腺特异表达 牛乳腺上皮细胞 牛胎儿成纤维细胞 转基因体细胞
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鱼类体细胞核移植研究
17
作者 林礼堂 夏仕玲 《珠江水产》 1990年第15期83-86,共4页
关键词 鱼类 体细胞核 移植
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TPO和FL有效扩增脐血CD34+细胞为巨核前体细胞 被引量:1
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作者 李博 文飞球 +3 位作者 丁路 陈霆 冯战桂 杨默 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2006年第4期204-206,共3页
目的探讨人脐血CD34+细胞在TPO和FL细胞因子组合作用下体外扩增为巨核前体细胞的效果,为开展血小板减少症的细胞治疗建立实验条件。方法本研究采用人脐血经免疫磁珠法纯化分离的CD34+细胞,研究TPO+FL细胞因子组合对体外巨核前体细胞的... 目的探讨人脐血CD34+细胞在TPO和FL细胞因子组合作用下体外扩增为巨核前体细胞的效果,为开展血小板减少症的细胞治疗建立实验条件。方法本研究采用人脐血经免疫磁珠法纯化分离的CD34+细胞,研究TPO+FL细胞因子组合对体外巨核前体细胞的扩增效果。结果显示在TPO与FL组合的作用下,脐血CD34+细胞(n=6)显著地扩增为巨核前体细胞(CD61+CD41+细胞),作用14天为较理想时间。无论是全细胞数和CD34+细胞,或是CD61+CD41+细胞和CFUMK,经过体外扩增,均显著增加。结论研究表明脐血CD34+细胞在TPO和FL细胞因子组合作用下可有效地扩增为巨核前体细胞,第14天是培养较理想时间。 展开更多
关键词 细胞 TPO FL 体细胞 CD34+细胞
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FSH、LH对猪卵母细胞核成熟及体外成熟时间对去核效率的影响 被引量:5
19
作者 李晟阳 罗光彬 +3 位作者 张晓华 姚汝强 何丽华 纪英卓 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2006年第11期37-39,共3页
克隆动物(核移植)的原理就是将卵裂球或体细胞核移人去核的卵母细胞或受精卵中,采用各种激活方法使之激活,发生卵裂,移植受体后产生个体。猪的体细胞克隆效率与其他动物(牛、羊)相比较低,需要大量的成熟后去核的卵子做为核受体... 克隆动物(核移植)的原理就是将卵裂球或体细胞核移人去核的卵母细胞或受精卵中,采用各种激活方法使之激活,发生卵裂,移植受体后产生个体。猪的体细胞克隆效率与其他动物(牛、羊)相比较低,需要大量的成熟后去核的卵子做为核受体。促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)在卵泡卵母细胞的生长、发育和成熟过程中起着极其重要的作用。 展开更多
关键词 体外成熟时间 体细胞核 FSH 卵泡卵母细胞 LH 克隆动物
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哺乳动物细胞核移植有关机理研究进展 被引量:3
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作者 韩建永 桑润滋 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期105-109,112,共6页
综述了哺乳动物细胞核移植的有关机理 ,包括哺乳动物早期胚胎基因组的转录激活与分化 ,体细胞核全能性的恢复 ,核受体卵母细胞的激活和MPF在细胞周期中的变化及其调节细胞周期的机理。
关键词 哺乳动物 细胞移植 促成熟因子 早期胚胎基因组 体细胞核全能性 受体卵母细胞
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