槟榔碱对人胃黏膜上皮细胞的毒性作用研究

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作者 李家旭 成钰莹 +5 位作者 杨扬 王璧莹 蒋玉珍 陈建萍 黎攀 杜冰 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第9期341-349,共9页

本文旨在探讨槟榔碱对人胃黏膜上皮细胞GES-1的毒性作用。用不同浓度(60、90、120、150μg/mL)的槟榔碱处理GES-1细胞,并检测GES-1细胞活力、活性氧水平(Reactive Oxygen Species,ROS)和线粒体膜电位(Mitochondrial Membrane Potential,... 本文旨在探讨槟榔碱对人胃黏膜上皮细胞GES-1的毒性作用。用不同浓度(60、90、120、150μg/mL)的槟榔碱处理GES-1细胞,并检测GES-1细胞活力、活性氧水平(Reactive Oxygen Species,ROS)和线粒体膜电位(Mitochondrial Membrane Potential,MMP),测定GES-1细胞还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)水平、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活力、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)活力、三磷酸腺苷(ATP)酶活力。测定肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukin 6,IL-6)、血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)、转化生长因子-β(Transforming Growth Factor-β,TGF-β)水平。结果表明,与空白对照组相比,槟榔碱刺激后GES-1细胞形态发生改变,细胞活力最低降低至24%,活性氧水平最高升至12.5倍,线粒体膜电位最低下降至10.4%。在150μg/mL槟榔碱刺激下,总ATP酶以及Na^(+)K^(+)-ATP酶活力分别下降至42.31%和39.84%,GSH和SOD分别下降了40.23%和34.1%,LDH上升了30.46%,TNF-α、IL-6、VEGF、TGF-β水平分别上升了4.67%、10.2%、23.14%和22.83%。结果表明槟榔碱能够产生氧化应激并诱发炎症因子,对GES-1细胞造成毒性损伤。 展开更多

关键词 槟榔碱 人胃黏膜上皮细胞GES-1 氧化应激 线粒体 细胞毒性

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参白颗粒干预细胞焦亡降低人胃黏膜上皮细胞炎症的机制研究

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作者 李亚可 张忠绵 +4 位作者 张希颜 张丽菊 陶婧娜 王岚 李志红 《世界中医药》 北大核心 2024年第21期3311-3317,共7页

目的:探究参白颗粒(SBKL)干预细胞焦亡通路降低人胃黏膜上皮细胞(GES-1)炎症的机制。方法:通过脂多糖(LPS)诱导GES-1建立炎症模型。1)设置不同浓度梯度的LPS干预GES-1后,通过蛋白质印迹法(WB)检测各组NOD样受体热蛋白结构域蛋白3(NLRP3... 目的:探究参白颗粒(SBKL)干预细胞焦亡通路降低人胃黏膜上皮细胞(GES-1)炎症的机制。方法:通过脂多糖(LPS)诱导GES-1建立炎症模型。1)设置不同浓度梯度的LPS干预GES-1后,通过蛋白质印迹法(WB)检测各组NOD样受体热蛋白结构域蛋白3(NLRP3)的表达,确定LPS造模的相对最佳浓度;2)设置不同浓度SBKL干预GES-1,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)验证SBKL对GES-1毒性并筛选最佳干预浓度;3)实验分为空白组、模型组和SBKL组,除空白组外,其余2组以LPS构建炎症模型,干预24 h后通过WB检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、剪切的半胱氨酸蛋白酶-1(Cleaved Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)、剪切的消皮素D(Cleaved GSDMD)的表达;流式细胞术检测活性氧(ROS)、细胞焦亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中白细胞介素18(IL-18),白细胞介素1β(IL-1β),肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果:1)LPS造模的相对最佳浓度为0.5μg/mL;2)CCK-8检测发现SBKL对于GES-1无毒性作用;3)与空白组比较,模型组NLRP3、Caspase-1、Cleaved Caspase-1、GSDMD、Cleaved GSDMD、ROS和焦亡率表达升高;与模型组比较,SBKL组上述指标表达明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:SBKL能够抑制细胞焦亡通路降低LPS诱导的GES-1炎症反应及氧化应激,减轻细胞焦亡。 展开更多

关键词 参白颗粒 慢性萎缩性胃炎 细胞焦亡 NOD样受体热蛋白结构域蛋白3 炎症反应 半胱氨酸蛋白酶-1 消皮素D 人胃黏膜上皮细胞

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艾灸血浆对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的影响 被引量：4

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作者 洪金标 易受乡 +4 位作者 黄芸 林亚平 杜燕 彭宏 彭艳 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2010年第31期3287-3293,共7页

目的:探讨艾灸血浆对乙醇损伤的离体人胃黏膜上皮细胞(GES-1)的保护作用.方法:将离体胃黏膜上皮细胞(GES-1)分为4组,即空白组、乙醇损伤模型组、艾灸穴位血浆组和艾灸非穴位血浆组.艾灸人体足三里、中脘、关元穴及非穴对照点前后提取并... 目的:探讨艾灸血浆对乙醇损伤的离体人胃黏膜上皮细胞(GES-1)的保护作用.方法:将离体胃黏膜上皮细胞(GES-1)分为4组,即空白组、乙醇损伤模型组、艾灸穴位血浆组和艾灸非穴位血浆组.艾灸人体足三里、中脘、关元穴及非穴对照点前后提取并制备艾灸前后的血浆.以含8%乙醇培养液作用于后3组胃黏膜上皮细胞,建立胃黏膜上皮细胞损伤模型.各组分别加入预先提取的灸前血浆、艾灸穴位血浆和艾灸非穴位血浆.采用MTT法检测细胞抑制率,比色法检测细胞培养上清液中液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量,流式细胞技术检测细胞周期及细胞凋亡率.结果:模型组与空白组比较,细胞A490降低(P<0.01),抑制率明显上升;与模型组比较,艾灸穴位血浆组A490升高(P<0.01),细胞抑制率降低;艾灸非穴位血浆组A490低于艾灸穴位血浆组A490(P<0.01),而细胞抑制率高于艾灸穴位血浆组(26.52%vs22.06%).与空白组比较,模型组培养液中LDH、MDA、SOD含量均有所提高(P<0.01或0.05);艾灸穴位血浆组与模型组比较,SOD水平升高(P<0.01),LDH、MDA含量降低(均P<0.01);艾灸非穴位血浆组与艾灸穴位血浆组比较,SOD水平下降(34.11kU/L±4.14kU/Lvs38.73kU/L±4.34kU/L,P<0.05),LDH和MDA水平升高(9.26U/L±1.62U/Lvs7.38U/L±1.28U/L;3.91μmoL/L±0.11μmoL/Lvs3.75μmoL/L±0.11μmoL/L,均P<0.05).艾灸非穴血浆组与艾灸穴位血浆组比较,细胞周期中各期无明显差异(均P>0.05),凋亡率升高(1.56%±0.19%vs1.24%±0.08%,P<0.01).结论:艾灸足三里、中脘、关元穴后提取的人体血浆对受损人胃黏膜细胞具有一定的保护作用. 展开更多

关键词 艾灸血浆 人胃黏膜上皮细胞 细胞凋亡 乳酸脱氢酶 丙二醛 超氧化物歧化酶

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小檗碱减轻幽门螺杆菌诱导的人胃黏膜上皮细胞损伤 被引量：19

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作者 陈宁南 万强 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2283-2286,2292,共5页

目的:探讨小檗碱(Ber)对幽门螺杆菌(Hp)诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的保护作用及机制。方法:采用Hp感染GES-1细胞,加入小檗碱(5,10和20μmol/L)和细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)抑制剂PD98059(20μmol/L)共培养。MTT法检测细胞活力,... 目的:探讨小檗碱(Ber)对幽门螺杆菌(Hp)诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的保护作用及机制。方法:采用Hp感染GES-1细胞,加入小檗碱(5,10和20μmol/L)和细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)抑制剂PD98059(20μmol/L)共培养。MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA法检测细胞白细胞介素(IL)-1β及IL-8的水平,比色法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性并以Western blot法检测细胞Bax、Bcl-2、p-ERK1/2的蛋白水平。结果:与对照组比较,Hp可抑制GES-1细胞活力、促进GES-1细胞凋亡、诱导GES-1细胞分泌IL-1β和IL-8、增加LDH活性、增加GES-1细胞内p-ERK1/2及Bax蛋白水平并降低Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学显著性(P<0.05);与Hp感染组比较,中、高剂量小檗碱均可逆转Hp对GES-1细胞活力、细胞凋亡、细胞IL-1β及IL-8分泌、LDH活性和GES-1细胞内p-ERK1/2、Bax及Bcl-2蛋白水平的影响,差异均有统计学显著性(P<0.05);与高剂量小檗碱组比较,PD98059联合小檗碱可进一步逆转Hp对GES-1细胞上述指标的影响,差异均有统计学显著性(P<0.05)。结论:小檗碱可通过抗炎、增加细胞活力和抗凋亡来减轻Hp诱导的GES-1细胞损伤,其机制可能与抑制ERK1/2通路有关。 展开更多

关键词 小檗碱 幽门螺杆菌 细胞外调节蛋白激酶1/2 人胃黏膜上皮细胞

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氯吡格雷对人胃黏膜上皮细胞增殖作用的影响及其机制的研究 被引量：3

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作者 汪志兵 姜宗丹 +5 位作者 张振玉 张弓羽 王劲松 黄文斌 何帮顺 王书奎 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2013年第12期1240-1243,共4页

目的探讨氯吡格雷(Clopidogrel)对人胃黏膜上皮细胞(GES-1)增殖作用的影响及其机制。方法建立GES-1单层细胞模型,将细胞分为阴性对照组、氯吡格雷24 h干预组、氯吡格雷48 h干预组、氯吡格雷72 h干预组,采用MTT比色法和流式细胞术检测各... 目的探讨氯吡格雷(Clopidogrel)对人胃黏膜上皮细胞(GES-1)增殖作用的影响及其机制。方法建立GES-1单层细胞模型,将细胞分为阴性对照组、氯吡格雷24 h干预组、氯吡格雷48 h干预组、氯吡格雷72 h干预组,采用MTT比色法和流式细胞术检测各组细胞增殖、凋亡情况;采用Western blotting检测各细胞组紧密连接蛋白Occludin的表达量。结果与阴性对照组相比,氯吡格雷24 h干预组、氯吡格雷48 h干预组、氯吡格雷72 h干预组的细胞增殖明显受到抑制(P<0.05);Western blotting结果显示:与阴性对照组相比,后三组的Occludin表达下降。结论在GES-1细胞模型中,氯吡格雷可能通过降低Occludin的表达,从而损伤GES-1细胞。 展开更多

关键词 氯吡格雷 人胃黏膜上皮细胞 增殖 凋亡

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三种中药有效成分对转化的人胃黏膜上皮细胞的抑制作用 被引量：2

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作者 石雪迎 赵凤志 +3 位作者 由江峰 戴欣 王洁良 崔湘琳 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 2004年第12期14-18,共5页

目的明确三种中药有效成分三七皂甙(PNS)、黄芪皂甙(AS)及黄芩甙(Ba)单用或配伍对永生化的人胃黏膜上皮细胞GES1以及经过幽门螺杆菌(HP)培养滤液转化后的GES1细胞(HP细胞)增殖能力的影响。方法以HP培养上清滤液作用GES1细胞,通过描绘细... 目的明确三种中药有效成分三七皂甙(PNS)、黄芪皂甙(AS)及黄芩甙(Ba)单用或配伍对永生化的人胃黏膜上皮细胞GES1以及经过幽门螺杆菌(HP)培养滤液转化后的GES1细胞(HP细胞)增殖能力的影响。方法以HP培养上清滤液作用GES1细胞,通过描绘细胞生长曲线、软琼脂集落形成试验和裸鼠成瘤试验检测细胞恶性转化程度。分别以不同浓度的三七皂甙、黄芪皂甙及黄芩甙处理两种细胞,四甲基谷氮唑盐(MTT)法及软琼脂集落形成试验检测三种药物单用及配伍对细胞增殖活性的影响。结果HP滤液作用后的GES1细胞增殖活性升高,软琼脂集落形成能力增强,但仍不能在裸鼠体内成瘤。PNS、AS及Ba对GES1和HP细胞的增殖活性有明显的抑制作用,并有随剂量增加作用增强的趋势。三药配伍应用对两种细胞的抑制作用增强,还能明显抑制HP细胞的软琼脂集落形成能力。结论HP滤液能促进GES1细胞的进一步转化。三种药物有效成分显著抑制GES1及HP细胞的增殖,三药配伍抑制作用有不同程度的增强。 展开更多

关键词 三七皂甙 黄芪皂甙 黄芩甙 人胃黏膜上皮细胞GES-1 幽门螺杆菌 细胞转化 抑制作用

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血清药理学方法观察氯吡格雷对人胃黏膜上皮细胞GES-1的影响 被引量：2

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作者 吴海露 张振玉 +3 位作者 高欣 姜宗丹 胡可伟 何帮顺 《胃肠病学》 2012年第6期334-337,共4页

背景:氯吡格雷可引起胃肠道不良反心尤其是消化道出血,前期研究已证实氯吡格雷原药对人胃黏膜上皮细胞GES-1增殖具有抑制作用。然而,氯吡格雷经肝脏代谢后对胃黏膜上皮细胞是否具有损伤作用目前尚无报道。目的:通过血清药理学办法研究... 背景:氯吡格雷可引起胃肠道不良反心尤其是消化道出血,前期研究已证实氯吡格雷原药对人胃黏膜上皮细胞GES-1增殖具有抑制作用。然而,氯吡格雷经肝脏代谢后对胃黏膜上皮细胞是否具有损伤作用目前尚无报道。目的:通过血清药理学办法研究氯吡格雷含药血清体外对人胃黏膜上皮细胞侏GES-1的影响,以探讨氯吡格雷对人胃黏膜的损伤作用。方法:分离1例服用氯吡格雷(75 mg/d)一年而导致消化道出血患者的血清,并配置成浓度分别为5%、10%、15%、20%的含药血清,同时取该患者停用氯吡格雷10 d后的血清作为对照。与GES-1细胞共同培养24 h后,以倒置相差显微镜观察细胞形念学变化,MTT法和流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡情况。结果:与对照组相比,不同浓度的含药血清可使GES-1细胞变圆、核浓缩,对GES-1细胞均有抑制增殖、促进凋亡的效应,并呈一定的浓度依赖性。结论:氯吡格雷经肝脏代谢后的产物对人胃黏膜上皮细胞具有损伤作用。 展开更多

关键词 氯吡格雷 人胃黏膜上皮细胞 血清 药理学 细胞增殖 细胞凋亡

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人胃黏膜上皮细胞介电谱的实验研究 被引量：2

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作者 沈斌 赵伟红 +2 位作者 杨阳 包秀玲 马青 《宁波大学学报（理工版）》 CAS 2015年第3期103-107,共5页

在0.01~100 MHz范围内,使用交流电阻抗方法测量了人胃上皮GES-1细胞悬浮液的介电谱,通过介电谱的实部和虚部以及复平面图的分析,观察体积分数对GES-1细胞介电谱特性的影响.结果表明GES-1细胞的介电行为具有3个特征：（1）频率依赖性,即... 在0.01~100 MHz范围内,使用交流电阻抗方法测量了人胃上皮GES-1细胞悬浮液的介电谱,通过介电谱的实部和虚部以及复平面图的分析,观察体积分数对GES-1细胞介电谱特性的影响.结果表明GES-1细胞的介电行为具有3个特征：（1）频率依赖性,即随电场频率的增加,其介电常数增量（Δε=ε-εh）减小,电导率增量（Δκ=κ-κL）增加;（2）体积分数依存性,即当体积分数增加时,介电常数最大增量（Δεmax）、电导率最大增量（Δκmax）和峰值（P1、P2、P3）随之增加;（3）具有3个特征频率（f1、f2、f3）,分别来源于细胞膜（f1）、细胞核膜（f2）和细胞核仁（f3）. 展开更多

关键词 人胃黏膜上皮细胞株GES-1 细胞体积分数 介电谱 介电常数 电导率

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康复新液对非甾体抗炎药诱导的人胃黏膜上皮细胞 GES-1细胞损伤的影响 被引量：8

9

作者 胡婷婷 饶朝龙 +2 位作者 谢晓芳 唐欣 彭成 《成都中医药大学学报》 2019年第4期29-33,共5页

目的:观察康复新液对非甾体抗炎药引起的GES-1细胞形态损伤和凋亡相关蛋白变化的影响,为其临床治疗胃溃疡提供科学依据。方法:采用非甾体抗炎药制备胃黏膜上皮细胞损伤模型,MTT法测定不同浓度康复新液对其增殖和形态变化影响;Hoechst/P... 目的:观察康复新液对非甾体抗炎药引起的GES-1细胞形态损伤和凋亡相关蛋白变化的影响,为其临床治疗胃溃疡提供科学依据。方法:采用非甾体抗炎药制备胃黏膜上皮细胞损伤模型,MTT法测定不同浓度康复新液对其增殖和形态变化影响;Hoechst/PI染色检测凋亡发生情况;Western blot测定细胞中凋亡相关蛋白表达水平。结果:浓度过高或过低的康复新液均会对GES-1细胞的生长有一定的抑制作用,适当浓度的康复新液能一定程度减轻非甾体抗炎药引起的细胞损伤,减少凋亡细胞和死细胞数量;与非甾体抗炎药组相比较,康复新液组和非甾体抗炎药+康复新液组Bcl-2和Bax水平比值升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:康复新液能抑制非甾体抗炎药引起的GES-1细胞损伤,其作用机制可能与减轻非甾体抗炎药引起的GES-1细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 康复新液 人胃黏膜上皮细胞GES-1 非甾体抗炎药 细胞调亡 BCL-2 BAX

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六月雪水提取物对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的保护作用 被引量：3

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作者 李洪亮 许仙赟 范小娜 《湖北农业科学》 2016年第8期2035-2038,2034,共5页

前期研究发现六月雪[Serissa serissoides（DC.）Druce]对乙醇诱导的大鼠胃黏膜损伤有良好的保护作用,因此进一步在细胞水平上探讨六月雪水提取物对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的保护作用。采用体外细胞培养人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞... 前期研究发现六月雪[Serissa serissoides（DC.）Druce]对乙醇诱导的大鼠胃黏膜损伤有良好的保护作用,因此进一步在细胞水平上探讨六月雪水提取物对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的保护作用。采用体外细胞培养人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞,将GES-1细胞用0～10%的乙醇孵育4～6 h,建立胃黏膜损伤模型。将参试GES-1细胞分为正常组、模型组、荆花胃康胶丸组、六月雪水提取物剂量组,正常组不做任何处理培养24 h,其他组加入一定浓度的乙醇处理一段时间后,加入含荆花胃康胶丸、六月雪水提取物各浓度剂量的培养基,正常组、模型组不加入药物,继续培养24 h,利用MTT检测各组GES-1细胞的活性。将MTT筛选后效果最佳的六月雪3个浓度以及荆花胃康胶丸组1个浓度分别定为高、中、低剂量组和阳性药物组,运用吖啶橙荧光染色法检测各组细胞凋亡情况,采用Western-Blot法检测各试验组碱性成纤维细胞生长因子（b FGF）蛋白的表达情况。结果表明,5%的乙醇孵育GES-1细胞4 h是造成胃黏膜损伤的最佳细胞模型,对GES-1细胞的抑制率达到40%。六月雪水提取物组中,60、70、80μg/m L 3个浓度效果最佳,与该组其他浓度比较差异显著（P〈0.05）;荆花胃康胶丸组中,在浓度为160μg/m L时细胞增殖最明显;均高于其他浓度的荆花胃康胶丸组;吖啶橙染色后显微镜下观察正常GES-1细胞形态均一、生长良好,而模型组大量细胞明显出现衰老或凋亡,荆花胃康胶丸组、六月雪水提取物组GES-1细胞生长情况明显好于模型组;模型组b FGF的蛋白表达水平明显高于正常组,差异显著（P〈0.05）;与模型组比较,六月雪水提取物组的b FGF蛋白表达水平明显增加,差异极显著（P〈0.01）;六月雪水提取物组与荆花胃康胶丸组比较,b FGF的表达水平差异也达极显著水平（P〈0.01）。说明六月雪水提取物可以保护乙醇损伤的人胃黏膜上皮系GES-1细胞,可以增加b FGF的蛋白表达水平,提高溃疡愈合速度。 展开更多

关键词 六月雪 水提取物 乙醇 人胃黏膜上皮细胞

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替格瑞洛含药血清对人胃黏膜上皮细胞GES-1的损伤作用

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作者 樊叶 韩维维 +1 位作者 何帮顺 张振玉 《徐州医科大学学报》 CAS 2017年第4期252-255,共4页

目的探讨替格瑞洛含药血清对人胃黏膜上皮细胞株GES-1的损伤作用。方法分离1例服用替格瑞洛（180mg／d）后2h的患者血清，并配制成不同浓度（5％、10％、15％、20％）的含药血清，同时取该患者服用替格瑞洛前的血清作为对照，培养GES-1... 目的探讨替格瑞洛含药血清对人胃黏膜上皮细胞株GES-1的损伤作用。方法分离1例服用替格瑞洛（180mg／d）后2h的患者血清，并配制成不同浓度（5％、10％、15％、20％）的含药血清，同时取该患者服用替格瑞洛前的血清作为对照，培养GES-1细胞24、48、72h。采用MTT法检测细胞增殖，倒置相差显微镜观察各浓度组含替格瑞洛血清培养GES-1细胞后细胞形态学变化，流式细胞仪检测各浓度组细胞凋亡情况。结果MTr显示替格瑞洛含药血清对GES-1细胞的损伤随着浓度增加而增强，呈浓度依赖性（P〈0．05），而无时间依赖性（P〉0．05）。光镜下可见含药血清组的贴壁细胞数量减少，细胞变圆、悬浮，部分细胞核浓缩，细胞损伤随着含药血清浓度增加而加重。流式细胞术显示，替格瑞洛含药血清组细胞凋亡率增大，且随浓度增加而增强。结论替格瑞洛含药血清对人胃黏膜上皮细胞有损伤作用． 展开更多

关键词 替格瑞洛 人胃黏膜上皮细胞 血清药理学 细胞增殖 细胞凋亡

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1,25-二羟维生素D3对人胃黏膜上皮细胞恶性转化过程的影响 被引量：2

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作者 张明明 贾彬 +1 位作者 陈栋 闫慧明 《山西医科大学学报》 CAS 2013年第6期435-438,共4页

目的研究1,25-二羟维生素D3(骨化三醇)在化学致癌剂N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导的恶性转化过程中对人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞生长、凋亡及Shh、Gli1基因表达的影响。方法 MNNG诱导GES-1细胞作为对照组,诱导后用不同浓度(10-6... 目的研究1,25-二羟维生素D3(骨化三醇)在化学致癌剂N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导的恶性转化过程中对人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞生长、凋亡及Shh、Gli1基因表达的影响。方法 MNNG诱导GES-1细胞作为对照组,诱导后用不同浓度(10-6,10-7,10-8,10-9mmol/L)1,25-二羟维生素D3干预(实验组),采取四甲基固氮唑盐(MTT)检测实验组和对照组细胞增殖并确定实验组最佳药物浓度。分为GES-1细胞组、对照组和实验组,流式细胞术(FCM)检测各组细胞的凋亡率,RT-PCR检测各组细胞Shh、Gli1 mRNA基因的表达。结果 MTT法显示,对照组细胞出现大量死亡,实验组给予10-6,10-7,10-8,10-9mmol/L的1,25-二羟维生素D3干预后存活细胞较对照组增多(P<0.05)。取最佳药物作用浓度10-6mmol/L为实验组,FCM测各组细胞7 d的凋亡率分别为实验组(45.73±2.08)%、对照组(85.23±2.08)%、GES-1细胞组(4.9±0.91)%。与对照组相比,实验组细胞凋亡明显减少(P<0.05)。RT-PCR显示Shh mRNA在实验组(0.674 7±0.011 6)、对照组(0.661 6±0.009 5)均表达(P>0.05),Gli1 mRNA实验组(0.338 2±0.015 0)表达低于对照组(0.532 8±0.011 5)(P<0.05)。结论 1,25-二羟维生素D3有阻止GES-1细胞恶性转化的作用,从而可达到延缓或阻止细胞恶变的目的。其机制可能与通过阻断Sonic Hedgehog(SHH)信号通路有关。 展开更多

关键词 1 25-二羟维生素D3 人胃黏膜上皮细胞 细胞凋亡 恶变

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大黄素对氯吡格雷损伤人胃黏膜上皮细胞的保护作用及机制研究 被引量：7

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作者 邓志燕 万强 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第6期1301-1304,共4页

目的：探讨大黄素对氯吡格雷损伤人胃黏膜上皮细胞GES-1的保护作用及可能机制。方法：用氯吡格雷0.36 mmol/L处理GES-1细胞后,加入大黄素（15、30、60μmol/L）和JNK抑制剂SP600125 10μmol/L共培养。流式细胞术测细胞凋亡、MTT法测细... 目的：探讨大黄素对氯吡格雷损伤人胃黏膜上皮细胞GES-1的保护作用及可能机制。方法：用氯吡格雷0.36 mmol/L处理GES-1细胞后,加入大黄素（15、30、60μmol/L）和JNK抑制剂SP600125 10μmol/L共培养。流式细胞术测细胞凋亡、MTT法测细胞增殖、比色法测乳酸脱氢酶（LDH）活性、Western Blot测细胞Bax、Bcl-2、p-JNK及t-JNK蛋白表达。结果：与对照组比较,氯吡格雷可促进GES-1细胞凋亡,抑制GES-1细胞增殖,增加GES-1细胞LDH活性,增加GES-1细胞内p-JNK、Bax蛋白表达并降低Bcl-2蛋白表达（P〈0.01）;与氯吡格雷组比较,中、高剂量大黄素可减少GES-1细胞凋亡,促进GES-1细胞增殖,降低GES-1细胞LDH活性,降低GES-1细胞内p-JNK、Bax蛋白表达并增加Bcl-2蛋白表达（P〈0.05或P〈0.01）;与大黄素高剂量组比较,SP600125可进一步减少GES-1细胞凋亡,促进GES-1细胞增殖,降低GES-1细胞LDH活性,降低GES-1细胞内p-JNK、Bax蛋白表达并增加. 展开更多

关键词 大黄素 氯吡格雷 JNK信号通路 人胃黏膜上皮细胞

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黄芪甲苷对脂多糖诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1的抗炎作用及机制研究 被引量：23

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作者 赵彩萍 刘翠玲 +3 位作者 梁爽 李欣蓉 柳雪蕾 朱美玲 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期918-923,共6页

目的研究黄芪甲苷对脂多糖(LPS)诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1的抗炎作用及有关机制。方法采用LPS不同浓度(0.25、0.5、1、1.5、2μg·mL-1)及时间(15、30、45、60、120 min)诱导GES-1细胞炎症反应,筛选LPS诱导的合适浓度、时间。将G... 目的研究黄芪甲苷对脂多糖(LPS)诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1的抗炎作用及有关机制。方法采用LPS不同浓度(0.25、0.5、1、1.5、2μg·mL-1)及时间(15、30、45、60、120 min)诱导GES-1细胞炎症反应,筛选LPS诱导的合适浓度、时间。将GES-1细胞分为空白对照组、模型组及黄芪甲苷0.1、1、10μg·mL-1浓度组;黄芪甲苷预处理2 h后,以筛选出的LPS浓度、时间诱导GES-1细胞。采用MTS法检测细胞存活率;采用ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)的含量;采用RT-qPCR法检测细胞诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、环氧合酶2(COX-2)mRNA的表达;采用Western Blot法检测细胞丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白(Erk、Jnk/SAPK、P38 MAPK)的磷酸化水平。结果选择0.25μg·mL-1及30 min作为LPS诱导GES-1细胞炎症模型的浓度及时间。黄芪甲苷浓度≤100μg·mL-1时对GES-1细胞存活率无明显影响。与空白对照组比较,模型组细胞的炎症因子IL-6水平明显升高(P<0.01),iNOS、COX-2 mRNA表达水平明显升高(P<0.01),p-P38、p-Jnk、p-Erk蛋白表达明显上调(P<0.001)。与模型组比较,0.1、1、10μg·mL-1不同浓度黄芪甲苷组的细胞IL-6水平均明显降低(P<0.01),iNOS及COX-2(10μg·mL-1浓度组)mRNA表达均明显下调(P<0.01),p-P38(1、10μg·mL-1浓度组)及p-Jnk(0.1、10μg·mL-1浓度组)、p-Erk(0.1、10μg·mL-1浓度组)蛋白表达均明显下调(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论黄芪甲苷可能通过抑制MAPK信号通路的激活来抑制LPS诱导的GES-1细胞炎症相关因子产生,从而发挥抗炎作用。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 人胃黏膜上皮细胞GES-1 抗炎作用 MAPK信号通路 白细胞介素6 诱导型一氧化氮合酶 环氧合酶2

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奥美拉唑联合荆花胃康胶丸对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的保护作用 被引量：11

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作者 袁毅萍 常卫华 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第15期2296-2298,共3页

目的探讨奥美拉唑联合荆花胃康胶丸对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的保护作用。方法体外培养人胃黏膜上皮细胞GES-1,将GES-1细胞用4%～8%的乙醇孵育2～5 h建立稳定的胃黏膜损伤模型。将实验细胞分为正常组、模型组、奥美拉唑组、荆花胃... 目的探讨奥美拉唑联合荆花胃康胶丸对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的保护作用。方法体外培养人胃黏膜上皮细胞GES-1,将GES-1细胞用4%～8%的乙醇孵育2～5 h建立稳定的胃黏膜损伤模型。将实验细胞分为正常组、模型组、奥美拉唑组、荆花胃康胶丸组、奥美拉唑联合荆花胃康胶丸组(联合用药组),正常组不做任何处理培养24 h,其他组加入一定浓度的乙醇处理一段时间后,奥美拉唑组、荆花胃康胶丸组、联合用药组再加相应的培养基,正常组、模型组不加入药物,继续培养24 h,利用MTT实验检测各组细胞活性。采用蛋白免疫印迹法检测各组碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白的表达情况。结果 7%的乙醇孵育GES-1细胞3 h是造成胃黏膜损伤的最佳细胞模型,对细胞的抑制率达到40%。奥美拉唑组中,浓度为0～60μg/mL时细胞增殖呈剂量依赖性;荆花胃康胶丸组中,在浓度为200μg/mL时细胞增殖最明显;联合用药组细胞的活性均高于相应浓度的奥美拉唑组和荆花胃康胶丸组。模型组bFGF的蛋白表达水平明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,奥美拉唑组和荆花胃康胶丸组中bFGF的表达均明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,联合用药组bFGF的表达水平进一步增加(P<0.01)。结论奥美拉唑与荆花胃康胶丸联用后在低剂量情况下可以保护胃黏膜损伤的人胃黏膜上皮细胞,可以减少用药剂量,提高用药安全性。 展开更多

关键词 奥美拉唑 荆花胃康胶丸 联合用药 人胃黏膜上皮细胞GES-1

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人工合成的亚硝基化合物MNNG致人胃黏膜上皮细胞恶性转化模型的建立及机制分析 被引量：5

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作者 王霞 叶景鸿 许尤琪 《山东医药》 CAS 2021年第2期46-49,共4页

目的建立人工合成的亚硝基化合物N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)暴露致人胃黏膜上皮细胞GES-1恶性转化的模型,并分析其作用机制。方法取GES-1细胞,分为空白对照组、溶剂对照组和MNNG诱导组。空白对照组正常培养,MNNG诱导组在培养基中加... 目的建立人工合成的亚硝基化合物N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)暴露致人胃黏膜上皮细胞GES-1恶性转化的模型,并分析其作用机制。方法取GES-1细胞,分为空白对照组、溶剂对照组和MNNG诱导组。空白对照组正常培养,MNNG诱导组在培养基中加入2μmol/L的MNNG,溶剂对照组加入等体积的DMSO。常规培养4周。于实验第5周行病理染色观察三组细胞形态,细胞克隆形成实验检测细胞克隆能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Western blotting法检测细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin1表达,qPCR法检测LC3Ⅱ、Beclin1 mRNA表达,裸鼠成瘤实验检测各组细胞成瘤能力。结果MNNG诱导组细胞体积增大,形态不规则,排列紊乱,部分细胞呈团块状生长,部分细胞呈梭形。与空白对照组相比,MNNG诱导组细胞克隆形成数目明显增多,细胞迁移速度增高(P均<0.05),LC3Ⅱ、Beclin1蛋白及mRNA表达水平降低(P均<0.05),裸鼠成瘤能力增加。结论成功建立MNNG致人胃黏膜上皮细胞恶性转化模型,其机制可能与自噬相关。 展开更多

关键词 人胃黏膜上皮细胞 亚硝基化合物 N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍 细胞恶性转化 细胞自噬 细胞模型

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腹水草水提液对乙醇损伤人胃黏膜上皮细胞活性及凋亡的影响研究

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作者 蒙桂宾 徐云飞 +2 位作者 胡宇曦 罗启超 赵伟春 《浙江中医药大学学报》 CAS 2018年第3期171-177,共7页

[目的]研究腹水草水提液对人胃黏膜上皮细胞株GES-1细胞的保护作用,探讨其对乙醇损伤后GES-1细胞凋亡的影响。[方法]采用磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)法测定腹水草水提液和阳性对照药雷尼替丁对GES-1细胞的最大安全浓度(maximum n... [目的]研究腹水草水提液对人胃黏膜上皮细胞株GES-1细胞的保护作用,探讨其对乙醇损伤后GES-1细胞凋亡的影响。[方法]采用磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)法测定腹水草水提液和阳性对照药雷尼替丁对GES-1细胞的最大安全浓度(maximum non-toxic concentration,TC0),其中以不加药物处理的细胞为正常组,采用SPSS 19.0统计软件计算腹水草水提液对GES-1细胞增殖的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)。分别以含低(20μg·mL^(-1))、中(40μg·mL^(-1))、高(80μg·mL^(-1))剂量腹水草水提液和雷尼替丁(45μg·mL^(-1))的DMEM培养基培养GES-1细胞48 h后,改用含5%乙醇的DMEM培养基培养4 h,运用SRB法和Annexin-V/PI双染法分别检测GES-1细胞的活性和凋亡情况。[结果]与正常组相比,在5~160μg·mL^(-1)剂量范围内,腹水草水提液对GES-1细胞存活率无显著影响(P﹥0.05);当腹水草水提液剂量≥320μg·mL^(-1)时,细胞存活率显著降低(P<0.05或P<0.01);TC0和IC50分别为160μg·mL^(-1)和5 096μg·mL^(-1)。与正常组比较,雷尼替丁剂量在2.8~180μg·mL^(-1)范围内,GES-1细胞存活率均﹥90%;当雷尼替丁剂量≥360μg·mL^(-1)时,细胞存活率显著降低(P<0.05);TC0和IC50分别为180μg·mL^(-1)和5 396μg·mL^(-1)。经低、中、高剂量腹水草水提液和雷尼替丁预处理48h后,GES-1细胞的存活率均显著高于模型组(P<0.01);腹水草水提液中、高剂量组细胞的存活率均显著高于雷尼替丁组(P<0.05,P<0.01)。模型组细胞凋亡率显著高于正常组(P<0.01);经腹水草水提液低、中、高剂量预处理后,细胞凋亡率显著低于模型组(P<0.01),且呈剂量依赖性;高剂量组的凋亡率低于雷尼替丁组,但两组间差异无统计学意义(P﹥0.05)。[结论]在腹水草水提液5~160μg·mL^(-1)和雷尼替丁2.8~180μg·mL^(-1)的剂量范围内,两者对GES-1细胞均无毒性。腹水草水提液显著提高乙醇损伤后GES-1细胞的存活率,并降低其凋亡率。中、高剂量腹水草水提液对乙醇损伤细胞的保护作用优于雷尼替丁。 展开更多

关键词 腹水草 水提液 剂量 人胃黏膜上皮细胞 细胞存活率 细胞凋亡

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蟾蜍灵对人胃黏膜上皮细胞GES-1的毒性研究

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作者 刘玉玲 刘利 +1 位作者 邓佳丽 郭祉良 《生物化工》 2022年第5期103-105,109,共4页

目的:研究不同浓度蟾蜍灵对人体胃黏膜上皮细胞GES-1的毒性作用。方法:用不同浓度(0 nmol/L、1 nmol/L、10 nmol/L、25 nmol/L、50 nmol/L和100 nmol/L)蟾蜍灵作用于GES-1细胞24 h、48 h和72 h,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测蟾蜍灵对GE... 目的:研究不同浓度蟾蜍灵对人体胃黏膜上皮细胞GES-1的毒性作用。方法:用不同浓度(0 nmol/L、1 nmol/L、10 nmol/L、25 nmol/L、50 nmol/L和100 nmol/L)蟾蜍灵作用于GES-1细胞24 h、48 h和72 h,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测蟾蜍灵对GES-1细胞增值的影响;再分别以0 nmol/L、25 nmol/L、50 nmol/L和100 nmol/L蟾蜍灵处理GES-1细胞48 h,在光学显微镜下观察GES-1细胞形态变化,运用荧光探针DCFH-DA法在荧光显微镜下观察细胞内绿色荧光强度。结果:不同浓度(0~100 nmol/L)蟾蜍灵处理GES-1细胞24 h时,对细胞无杀伤作用(与对照组0 nmol/L相比,P>0.05),但在48 h和72 h时,蟾蜍灵抑制GES-1细胞的生长,且呈浓度依赖性(与对照组0 nmol/L相比,P<0.05),同时诱导细胞内产生大量的ROS。结论:蟾蜍灵可以引起人胃黏膜上皮细胞GES-1的损伤,并诱导细胞内产生大量的ROS,本实验的结果将为蟾蜍灵在临床中的应用提供实验依据。 展开更多

关键词 蟾蜍灵 人胃黏膜上皮细胞 细胞增值 活性氧

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基于Raf/MEK/ERK通路探讨平胃胶囊含药血清对MNNG诱导的人胃黏膜上皮细胞炎癌转化的影响

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作者 汪霞 王丽娟 +4 位作者 牛小英 樊泽坤 牛媛媛 毛兰芳 汪龙德 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2024年第10期1056-1062,共7页

目的从快速加速纤维肉瘤/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶/细胞外信号调节激酶(Raf/MEK/ERK)通路探讨平胃胶囊治疗慢性萎缩性胃炎的可能作用机制。方法15只SD大鼠随机分为空白组5只、平胃胶囊组10只,空白组大鼠给予1 ml/100 g的生理盐... 目的从快速加速纤维肉瘤/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶/细胞外信号调节激酶(Raf/MEK/ERK)通路探讨平胃胶囊治疗慢性萎缩性胃炎的可能作用机制。方法15只SD大鼠随机分为空白组5只、平胃胶囊组10只,空白组大鼠给予1 ml/100 g的生理盐水灌胃,平胃胶囊组大鼠给予平胃胶囊混悬液0.63 g/(kg·d)灌胃,连续3天后采集血清。采用N-甲基-N-硝基-亚硝基胍(MNNG)诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1建立癌前病变细胞模型。将造模成功细胞分为对照组(10%胎牛血清)、空白血清组(10%胎牛血清+10%空白血清)、含药血清组(平胃胶囊含药血清),采用CCK-8法筛选平胃胶囊含药血清干预体积分数及时间。将人胃黏膜上皮细胞GES-1分为正常组、模型组、空白血清组、含药血清组、U0126组、联合组,每组3个复孔。除空白组外其余各组细胞造模成功后,正常组和模型组加入等体积的胎牛血清,空白血清组加入等体积的空白血清,含药血清组加入筛选确认的体积分数的平胃胶囊含药血清,U0126组给予10μmol/L的丝裂原活化的细胞外信号调节激酶1(MEK1)抑制剂U0126,联合组给予等体积的平胃胶囊含药血清+10μmol/L的U0126。培养筛选确认的时间后,ELISA法检测细胞上清中白细胞介素6(IL-6)水平,免疫荧光检测细胞中IL-6、MEK1的表达,RT-qPCR法检测细胞IL-6、Raf、MEK1、ERK mRNA表达,Western Blot法检测细胞IL-6、Raf、MEK1、ERK1/2蛋白表达。结果选取5.35%的体积分数、干预48 h的平胃胶囊含药血清进行后续实验。与正常组比较,模型组、空白血清组细胞上清中IL-6含量,细胞中IL-6、Raf、MEK1、ERK mRNA及IL-6、Raf、MEK1、ERK1/2蛋白表达均升高(P<0.01)。与模型组比较,含药血清组、U0126组、联合组上述各指标均下降(P<0.05或P<0.01)。与含药血清组比较,联合组细胞中IL-6、MEK1表达,IL-6、Raf、MEK1、ERK mRNA表达,IL-6、Raf、MEK1、ERK1/2蛋白表达均降低(P<0.05或P<0.01)。与U0126组比较,联合组细胞中IL-6表达降低,IL-6、MEK1、ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论平胃胶囊含药血清可能通过抑制Raf/MEK/ERK通路改善GES-1细胞的炎癌转化,从而发挥治疗慢性萎缩性胃炎的作用。 展开更多

关键词 慢性萎缩性胃炎 平胃胶囊 人胃黏膜上皮细胞 炎癌转化 快速加速纤维肉瘤 丝裂原活化的细胞外信号调节激酶 细胞外信号调节激酶

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3种中药有效成分对幽门螺杆菌培养滤液转化的人胃黏膜上皮细胞的杀伤作用 被引量：27

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作者 石雪迎 赵凤志 +4 位作者 由江峰 邵宏权 戴欣 王洁良 崔湘琳 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期454-457,I0002,共5页

目的明确3种中药有效成分三七皂甙、黄芪皂甙及黄芩甙单用或配伍对经过幽门螺杆菌培养滤液转化后的永生化人胃黏膜上皮GES-1细胞(简称HP细胞)的凋亡诱导作用。方法以三七皂甙、黄芪皂甙及黄芩甙单独或联合作用HP细胞,AnnexinV及PI双染,... 目的明确3种中药有效成分三七皂甙、黄芪皂甙及黄芩甙单用或配伍对经过幽门螺杆菌培养滤液转化后的永生化人胃黏膜上皮GES-1细胞(简称HP细胞)的凋亡诱导作用。方法以三七皂甙、黄芪皂甙及黄芩甙单独或联合作用HP细胞,AnnexinV及PI双染,流式细胞仪检测药物对HP细胞凋亡/坏死的影响;电镜和Hoechst33258及PI双染荧光显微镜观察凋亡细胞形态。结果三七皂甙、黄芪皂甙及黄芩甙单用可引起HP细胞凋亡及死亡比例增加并呈一定的时间依赖性,配伍应用作用强于单独应用(与对照组比较P<0.05),增强程度从大至小依次为三药合用>三七皂甙黄芪皂甙合用>黄芪皂甙黄芩甙合用>三七皂甙黄芩甙合用。结论3种中药有效成分单用及配伍对HP细胞有明显的毒性作用;引起细胞死亡的机制部分是通过诱导凋亡实现的;不同药物配伍应用的增效程度不同。 展开更多

关键词 三七皂甙 黄芪皂甙 黄芩甙 人胃黏膜上皮细胞系GES-1 幽门螺杆菌 细胞死亡

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