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猪T细胞受体α链基因的克隆、序列分析及其结构预测 被引量:3
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作者 冯海燕 莫斯科 +1 位作者 房永祥 景志忠 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期23-29,共7页
旨在为研究猪T细胞受体分子结构与功能,并首次在国内克隆了猪T细胞受体α链基因。以GenBank上登载的猪T细胞受体(Tcell receptor,TCR)α链(AB087988)为参考序列,从甘肃合作猪外周血液淋巴细胞中用RT-PCR的方法克隆了TCR-α链基因(p... 旨在为研究猪T细胞受体分子结构与功能,并首次在国内克隆了猪T细胞受体α链基因。以GenBank上登载的猪T细胞受体(Tcell receptor,TCR)α链(AB087988)为参考序列,从甘肃合作猪外周血液淋巴细胞中用RT-PCR的方法克隆了TCR-α链基因(pTCR-α)。结果表明:克隆的TCR-α基因具有完整的ORF,全长819 bp,编码272个氨基酸,预测蛋白分子量为30 kDa,含18个强碱性氨基酸,23个强酸性氨基酸,87个疏水性氨基酸和103个极性氨基酸,含有一段20个氨基酸的信号肽序列;与GenBank上登载的TCR-α参考序列(AB087988)的同源性为94.6%,与其他具有完整ORF的猪TCR-α相比,同源性为54.4%-80.3%。推测可能是一新的TCR-α基因转录本。同时,应用生物信息学技术分析了其基因序列及编码蛋白的结构特征,这为猪T细胞受体分子结构与功能的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪T细胞受体α链基因 基因克隆 序列分析 生物信息学
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人高亲和力IgE受体α链基因克隆及表达 被引量:3
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作者 孙蔚凌 毕志刚 《中国麻风皮肤病杂志》 2005年第8期609-612,共4页
目的:克隆人高亲和力IgE受体α链基因,并进行原核表达,制备出可溶性FcεRIα蛋白。方法:应用RT-PCR技术,从皮肤组织的总RNA中扩增人高亲和力IgE受体α链基因,连接至PUCm-T载体,重组克隆进行DNA测序。将测序证实的目的片段与高效表达载体... 目的:克隆人高亲和力IgE受体α链基因,并进行原核表达,制备出可溶性FcεRIα蛋白。方法:应用RT-PCR技术,从皮肤组织的总RNA中扩增人高亲和力IgE受体α链基因,连接至PUCm-T载体,重组克隆进行DNA测序。将测序证实的目的片段与高效表达载体pET30a连接,构建重组质粒并转入表达宿主菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂柱亲和层析纯化。结果:RT-PCR扩增出一个约950bp的DNA片段,测序结果显示该片段与GenBank上登录的FcεRIα基因序列完全一致;经原核表达后,获得相对分子质量37000的FcεRIα融合蛋白。结论:本实验成功克隆、表达了人FcεRIα基因,制备出可溶性FcεRIα蛋白,为抗FcεRIα抗体的检测及自身免疫性慢性荨麻疹发病机制的研究提供了条件。 展开更多
关键词 基因克隆 基因表达 人高亲和力IgE受体α链 自身免疫性慢性荨麻疹 高亲和力IGE受体 α链基因 BL21(DE3) DNA测序 DNA片段 高效表达载体
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山羊CLAⅠα链基因的克隆及生物信息学分析
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作者 邓阳 吴国华 +6 位作者 颜新敏 赵志荀 李杨 李健 窦永喜 张志东 张强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第7期2065-2070,共6页
为探究山羊CLAⅠα链基因的多态性,本试验根据GenBank中山羊CLAⅠα链基因序列设计引物,采用RT-PCR技术从10个品系山羊白细胞中克隆山羊CLAⅠα链基因,测序后进行生物信息学分析。结果表明,CLAⅠα链基因长度为1 074bp,编码357个氨基酸... 为探究山羊CLAⅠα链基因的多态性,本试验根据GenBank中山羊CLAⅠα链基因序列设计引物,采用RT-PCR技术从10个品系山羊白细胞中克隆山羊CLAⅠα链基因,测序后进行生物信息学分析。结果表明,CLAⅠα链基因长度为1 074bp,编码357个氨基酸。经核苷酸序列分析发现,10个品系山羊CLAⅠα链基因同源性集中在82.8%~99.5%之间。将10个品系山羊CLAⅠα链基因核苷酸推导的氨基酸序列进行比对,发现突变集中在α1区域(22—110位氨基酸)与α2区域(111—203位氨基酸)。遗传进化分析表明,GenBank中山羊CLAⅠα链基因与红寺湖绒山羊、河西绒山羊、陕北绒山羊、阿尔巴斯绒山羊的CLAⅠα基因遗传关系较近,与其他6个品系山羊,即简阳大耳山羊、金堂黑山羊、西农萨能奶山羊、美姑山羊、大足黑山羊、努比亚山羊的CLAⅠα基因遗传关系较远。本试验结果为进一步研究CLAⅠα链基因的多态性奠定了理论基础。 展开更多
关键词 山羊 CLAⅠα链基因 克隆 生物信息分析
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白细胞介素2受体α链基因转录起始点和5'调控区结合蛋白的初步研究
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作者 刘立德 沈(王羽)琲 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第2期169-175,共7页
借助于5'和3'末端删切后重建的IL-2R a链基因调控区次级克隆,在体外合成有放射性同位素参入的反意义RNA探针与总RNA进行液相杂交,结果表明TPA或PHA分别活化的T细胞在IL-2R a链表达过程中都在不同程度上有选择地利用了调控区内... 借助于5'和3'末端删切后重建的IL-2R a链基因调控区次级克隆,在体外合成有放射性同位素参入的反意义RNA探针与总RNA进行液相杂交,结果表明TPA或PHA分别活化的T细胞在IL-2R a链表达过程中都在不同程度上有选择地利用了调控区内分别为-58(5')和+1(3')位两个转录起始点中3'转录起始点。热休克使PHA活化细胞更明显地利用+1位点。PHA诱导Jurkat细胞表达IL-2RamRNA斑点杂交证实,Jurkat细胞在活化16小时表达IL-2Ra基本达到高峰,至24小时已明显下降。根据这一规律提取PHA诱导活化15小时的Jurkat细胞S100和NE,进行有关结合蛋白的研究,初步结果显示磷酸纤维素柱的KCI洗脱组分中存在着DNA结合蛋白,有关结合蛋白性质的研究正在进行中。 展开更多
关键词 结合蛋白 白细胞介素2 受体 α链基因
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鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因的克隆与分子进化分析
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作者 孙凯 李新生 +5 位作者 崔保安 陈红英 魏战勇 张蕾 宋亚鹏 阮武营 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第12期60-63,共4页
根据GenBank中登录(登录号:AB115244)的鸭MHC-Ⅰα链序列设计并合成1对引物,采用RT-PCR技术从鸳鸯鸭脾脏组织中克隆出鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因,并进行T-A克隆和序列测定。结果表明,所获得的鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因长909bp,编码303个氨基... 根据GenBank中登录(登录号:AB115244)的鸭MHC-Ⅰα链序列设计并合成1对引物,采用RT-PCR技术从鸳鸯鸭脾脏组织中克隆出鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因,并进行T-A克隆和序列测定。结果表明,所获得的鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因长909bp,编码303个氨基酸的多肽,含一个完整的鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因。序列比较发现,鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因与GenBank登录的其它品种的鸭MHC-Ⅰα链核苷酸同源性为89.4%~91.0%,与人和其他动物的MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因的氨基酸同源性为11.1%~79.3%,表明MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因存在着种的多样性,且亲缘关系越近,同源性越高。鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因的成功克隆为进一步研究鸭MHC-Ⅰ基因表达、生物学活性和应用奠定基础。 展开更多
关键词 鸳鸯鸭 MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因 克隆 序列分析
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层粘蛋白α链基因突变对神经组织发育影响的研究
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作者 王振宇 朱喜科 《解剖科学进展》 CAS 2005年第4期318-320,共3页
目的研究层粘蛋白α链在神经系统发育中的作用。方法用乙基甲磺酸盐(ethyl m ethane-su lphonate,EMS)诱发线虫C.elegans层粘蛋白α链基因突变,通过DNA测序确定突变部位,用在C.elegans神经系统特异表达的启动子和绿色荧光蛋白报告基因... 目的研究层粘蛋白α链在神经系统发育中的作用。方法用乙基甲磺酸盐(ethyl m ethane-su lphonate,EMS)诱发线虫C.elegans层粘蛋白α链基因突变,通过DNA测序确定突变部位,用在C.elegans神经系统特异表达的启动子和绿色荧光蛋白报告基因构建的表达载体,注入生殖腺来观察后代正常和突变体的神经组织。结果诱导层粘蛋白α链基因突变产生四种突变体,其中两种即第803位和第2074位的突变形成终止密码,为无义突变,绿色荧光蛋白标记的神经纤维荧光图象显示呈锯齿状,且有纤维断裂。另外两种分别位于第98位、第1415位突变,是错义突变,二者引起的神经纤维改变不明显。结论层粘蛋白α链基因第803位和第2074位的无义突变引起神经纤维异常发育。 展开更多
关键词 线虫C.elegans α链层粘蛋白基因 突变体 神经系统 层粘蛋白α链 基因突变
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汉族人和法国人Ⅰ型胶原α链Spl结合序列MscⅠ酶切位点基因多态性的比较
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作者 陈金标 秦林林 +5 位作者 Borel Olivier 张卫 葛崇华 马海波 肖艳霞 Patrick Garnero 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2001年第1期29-31,共3页
目的 了解中国汉族人和法国人Ⅰ型胶原α链Spl结合序列MscⅠ酶切位点基因多态性分布的异同。方法 对 96例中国汉族人和 78例法国人用DXA骨密度仪进行BMD测量 ,同时采集全血并抗凝保存。用聚合酶链式反应、限制性酶切技术对Ⅰ型胶原α... 目的 了解中国汉族人和法国人Ⅰ型胶原α链Spl结合序列MscⅠ酶切位点基因多态性分布的异同。方法 对 96例中国汉族人和 78例法国人用DXA骨密度仪进行BMD测量 ,同时采集全血并抗凝保存。用聚合酶链式反应、限制性酶切技术对Ⅰ型胶原α链Spl结合序列基因型进行分析。结果  96例汉族人的基因型均为SS ,78例法国人的基因型为 5 3例SS、2 2例Ss和 3例ss,经Fisherχ2 检验 ,显示差异有非常显著性 (P <0 0 1)。结论 汉族人和法国人的Ⅰ型胶原α链Spl结合序列MscⅠ酶切位点基因多态性显著不同。汉族人Ⅰ型胶原α链Spl结合序列MscⅠ酶切位点稀少。 展开更多
关键词 Ⅰ型胶原α链基因 Spl结合序列多态性
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在线虫,C.elegans,Laminin〆链基因突变导致神经发育异常
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作者 朱喜科 王振宇 城圭一郎 《解剖科学进展》 CAS 2000年第2期181-181,183,共2页
关键词 Lamininα链基因 神经发育异常 基因突变
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