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基于MALDI-TOF MS肽指纹图谱技术的中药鹿血晶掺伪鉴别研究
1
作者 王慎兴 曹玲 +6 位作者 黄青 马聪玉 潘建斌 赵浩东 施海蔚 狄斌 陈洪渊 《质谱学报》 北大核心 2025年第1期115-122,共8页
本研究应用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术,构建了具有物种特异性的白蛋白和血红蛋白特征肽指纹图谱,用于中药鹿血晶的掺伪鉴别。以鹿血晶真品(梅花鹿、马鹿)和常见掺伪品(猪、牛、羊、驴)共6个物种的血晶制品作... 本研究应用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术,构建了具有物种特异性的白蛋白和血红蛋白特征肽指纹图谱,用于中药鹿血晶的掺伪鉴别。以鹿血晶真品(梅花鹿、马鹿)和常见掺伪品(猪、牛、羊、驴)共6个物种的血晶制品作为研究对象,通过理论肽段预测并结合高分辨质谱,筛选出1组能够反映物种差异的特征肽段。采集不同物种来源血晶制品以及不同来源市售中药鹿血晶的特征肽指纹图谱,并结合化学计量学分析,实现了不同来源血晶制品的快速准确区分。该方法能够实现复杂基质样品中目标特征肽段的灵敏、特异检测,具有高专属性、快速、便捷的优势,为鹿血晶及血晶类中药制品的掺伪鉴别提供了准确的分析手段,也为其他复杂蛋白类制品的快速鉴别提供了有价值的参考。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 中药鹿血晶 肽指纹图谱 掺伪鉴别
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磁性氮化碳复合材料的制备及其对磷酸化肽的富集
2
作者 姜丽艳 张玮璐 +1 位作者 赵璐 胡良海 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期564-571,共8页
蛋白质的磷酸化在细胞信号传导和疾病发生发展中起着重要作用,但磷酸化的动态变化和低丰度的特点使得对其直接分析有着较大的困难。为了解决磷酸化肽难离子化、检测丰度低的瓶颈问题,本研究制备了一种磁性氮化碳复合材料,结合基质辅助... 蛋白质的磷酸化在细胞信号传导和疾病发生发展中起着重要作用,但磷酸化的动态变化和低丰度的特点使得对其直接分析有着较大的困难。为了解决磷酸化肽难离子化、检测丰度低的瓶颈问题,本研究制备了一种磁性氮化碳复合材料,结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS),建立了一种对复杂样品中低丰度磷酸化肽富集与分析的方法。采用电子显微镜、红外光谱分析及X射线衍射分析等手段对合成的磁性氮化碳材料进行表征。以酪蛋白酶解产物为实验模型,发现磁性氮化碳材料能够实现对磷酸化肽的高选择性富集和高灵敏度检测,检出限为0.1 fmol。选择脱脂牛奶、人唾液和人血清为实际分析样品,发现磁性氮化碳材料对微量蛋白生物样品中磷酸化肽的分析具有较高的应用潜力。 展开更多
关键词 氮化碳 磁性固相萃取 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 磷酸化肽 富集
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建立一种适合本实验室快速检测产KPC酶肺炎克雷伯菌的方法
3
作者 滕元姬 易雪丽 +2 位作者 陈晓颖 罗斌 王春芳 《右江医学》 2024年第8期740-745,共6页
目的运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)检测产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP),筛选并验证其特征峰,建立一种适用于本实验室快速检测产KPC酶型CRKP的方法。方法收集临床耐碳青霉烯类... 目的运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)检测产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP),筛选并验证其特征峰,建立一种适用于本实验室快速检测产KPC酶型CRKP的方法。方法收集临床耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌39株,运用PCR方法检测出其中23株产KPC酶,再采用MALDI-TOF MS技术检测KPC酶阳性CRKP菌株,得到质谱图后用Flex Analyst软件分析筛选出其中特征峰,并进行重复性实验和临床验证评估。结果综合筛选出产KPC酶CRKP最佳特征峰为m/z 6432,特征峰验证实验和重复性实验的特异性和敏感性分别为96.67%和100%。临床验证评估特异性和敏感性分别为92.31%和100%。结论利用MALDI-TOF MS技术可检出产KPC酶CRKP的最佳特征峰为m/z 6432,经实验证实该特征峰特异性和敏感性高,可为临床快速诊断和治疗产KPC酶CRKP提供理论基础。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术 特征峰 肺炎克雷伯菌 碳青霉烯酶
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半夏炮制过程中毒性凝集素蛋白的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析 被引量：1
4
作者 黄益曼 李春晖 +5 位作者 柏家辉 陆颖洁 李添 董志颖 苏越 郭寅龙 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第2期226-236,共11页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)受灵敏度和重复性的影响,对完整蛋白的定量分析存在困难。本研究采用纤维素纳米晶体(CNC)辅助MALDI-TOF MS,结合内标法定量分析半夏炮制过程中半夏凝集素(PTL),通过优化CNC辅助样本制备... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)受灵敏度和重复性的影响,对完整蛋白的定量分析存在困难。本研究采用纤维素纳米晶体(CNC)辅助MALDI-TOF MS,结合内标法定量分析半夏炮制过程中半夏凝集素(PTL),通过优化CNC辅助样本制备的时长和比例,以麦胚凝集素(TVL)为内标,直接分析不同炮制程度半夏各炮制品及其浸泡上清液中PTL含量。结果表明,CNC辅助MALDI样本制备有效提升了MALDI-TOF MS定量分析的线性和重复性。随着炮制时间的延长,姜半夏、清半夏和法半夏炮制品的PTL含量逐渐下降,浸泡上清液中PTL含量逐渐上升。其中,由于pH值的改变,法半夏炮制品浸泡上清液中PTL含量呈先上升后下降的趋势。此外,将该方法应用于不同饮片生产企业的多批次半夏炮制品饮片中,均未检出PTL。该方法操作简便,可有效分析半夏炮制过程中PTL含量的变化,为研究半夏炮制过程对PTL的影响提供了参考。 展开更多
关键词 半夏 炮制方法 半夏凝集素(PTL) 纤维素纳米晶体(CNC) 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)
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MALDI-TOF MS法快速鉴定散装即食食品中3种食源性致病菌 被引量：4
5
作者 崔洁 林吉恒 +3 位作者 孙瑛 严卓彦 夏瑛瑛 黄朱梁 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第5期253-270,共18页
本研究旨在利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)快速检测并鉴定散装即食食品中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌3种食源性... 本研究旨在利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)快速检测并鉴定散装即食食品中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌3种食源性致病菌。通过对点样方式、前处理方式、不同培养基及培养时间等各项实验条件的优化筛选确定最佳方法,并考察其检测限和稳定性,同时用所建立的方法与多重PCR法、VITEK 2等生化鉴定法进行结果比对,比较三者鉴定结果的一致性,最后进行批量食品样本检测来探寻MALDI-TOF MS鉴定法在散装即食食品中的适用性。结果表明,三种目标菌同一批次及不同传代次数的鉴定得分均大于95%,变异系数均小于2%,所建立的方法重复性和稳定性良好,且检测限为10^(5)CFU/mL,MALDI-TOF MS菌株鉴定结果与多重PCR法、生化鉴定法结果高度一致,且比二者检测用时更短,更加特异高效;在点样方式上,相较于夹心法与混合干滴法,三种覆盖法点样平均鉴定得分更高,均为99.9%,其中1μL+1μL覆盖法点样可获得的平均峰数目更多,特征峰更复杂且强度更高;而在前处理方式上,甲酸乙腈法与其他两种菌体处理方法相比可获得更多的出峰量和更高的峰强度,平均鉴定得分均在98%以上,且与数据库中图谱匹配度更高。综上所述,MALDI-TOF MS法在致病菌鉴定方面不仅灵敏特异、准确快速,且操作简便、结果直观,作为国标法的有力补充,为食源性致病菌的分析鉴定与分型溯源提供了新思路。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 散装即食食品 沙门氏菌 金 黄色葡萄球菌 蜡样芽孢杆菌
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矿泉水中铜绿假单胞菌检测能力的验证与分析 被引量：1
6
作者 王同智 朱文斌 +2 位作者 张洪伟 李俊霞 周浩 《食品安全导刊》 2024年第3期78-81,共4页
通过参加外单位组织的矿泉水中铜绿假单胞菌检测能力验证,探索减少过滤后菌落数的计数方式和范围,提高实验室应用GB 8538—2022进行检测的能力,同时验证MALDI-TOF MS的准确性。依据组织方的作业指导书对样品进行处理,采取25 mL+225 mL... 通过参加外单位组织的矿泉水中铜绿假单胞菌检测能力验证,探索减少过滤后菌落数的计数方式和范围,提高实验室应用GB 8538—2022进行检测的能力,同时验证MALDI-TOF MS的准确性。依据组织方的作业指导书对样品进行处理,采取25 mL+225 mL的方式进行稀释,根据GB 8538—2022进行检测,同时应用MALDI-TOF MS进行鉴定。样品23-V717、23-H802报告结果的评价Z值分别为-0.1、-0.9,皆为满意。此方式提高了实验员检测水平,验证了借助基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)鉴定的准确性,缩短了检验检测时间。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 铜绿假单胞菌 检测能力 准确性
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基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法测定α/β-二羰基类化合物与标准瓜氨酸化肽段之间的衍生化反应活性
7
作者 李雁凤 周丹丹 +7 位作者 陈旭飞 赵娟娟 高春丽 邱兴泰 唐紫超 邓楠 赵伟宁 边阳阳 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期711-720,共10页
蛋白质瓜氨酸化是一种由生物酶调控的不可逆翻译后修饰,其与免疫相关疾病、癌症、神经系统性疾病和老年痴呆症等重大疾病的发生和发展密切相关。蛋白质的瓜氨酸化修饰丰度低、缺乏亲和标签、m/z变化小且易受同位素及脱酰胺化作用干扰,... 蛋白质瓜氨酸化是一种由生物酶调控的不可逆翻译后修饰,其与免疫相关疾病、癌症、神经系统性疾病和老年痴呆症等重大疾病的发生和发展密切相关。蛋白质的瓜氨酸化修饰丰度低、缺乏亲和标签、m/z变化小且易受同位素及脱酰胺化作用干扰,因此对蛋白质的瓜氨酸化修饰进行质谱分析面临着巨大挑战。通过对瓜氨酸侧链脲基进行化学衍生反应,可以提高瓜氨酸化肽段的m/z差值,引入亲和富集标签,可有效提高瓜氨酸化分析的灵敏度和精准度。本研究以标准瓜氨酸化肽段为研究对象,以基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)为检测手段,对一系列二羰基类化合物与瓜氨酸化肽段之间的化学反应活性进行测定。在对α-二羰基类化合物的考察中发现,苯乙二醛、丙酮醛、1,2-环己二酮和1,10-邻二氮杂菲-5,6-二酮对瓜氨酸化肽段的衍生化效率很高,并且能够生成单一的衍生化产物;2,3-丁二酮、乙二醛与瓜氨酸化肽段之间的反应效率也很高,但会生成一系列副反应产物。在对β-二羰基类化合物的考察中发现,1,3-环己二酮、2,4-戊二酮在与瓜氨酸化肽段进行反应后,均可以产生单一的衍生化产物,但反应效率很低,不适用于瓜氨酸化肽段的化学衍生反应。实验结果表明,α-二羰基结构是实现高效、特异性瓜氨酸化肽段化学衍生反应的基础,α-二羰基类化合物中不同的侧链结构又决定了衍生化产物的结构、衍生化效率及副产物的生成。通过进一步合成含有亲和标签的α-二羰基类化合物,可以实现瓜氨酸化肽段的特异性富集和精准鉴定,有助于瓜氨酸化蛋白质及其位点鉴定的新方法开发。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 二羰基结构 瓜氨酸化肽段 化学衍生
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矿泉水中粪链球菌的检测能力验证结果与分析
8
作者 李发俊 张琼丹 +1 位作者 黄佳慧 叶子爵 《现代食品》 2024年第9期171-173,180,共4页
为提高实验室对矿泉水中粪链球菌的检测能力,确保其检测数据的准确性和可靠性,先采用国标方法计数,后采用传统微生物鉴定法、全自动微生物鉴定法和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(简称MALDI-TOF MS)3种方法对可疑菌进行鉴定。结果... 为提高实验室对矿泉水中粪链球菌的检测能力,确保其检测数据的准确性和可靠性,先采用国标方法计数,后采用传统微生物鉴定法、全自动微生物鉴定法和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(简称MALDI-TOF MS)3种方法对可疑菌进行鉴定。结果表明,3种方法均成功鉴定出粪链球菌,且样品23-A864和23-N843的Z值分别为-0.5和-0.1,满足要求。3种方法相互验证,其中基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法具有耗时短、效率高的优势。 展开更多
关键词 粪链球菌 矿泉水 微生物鉴定 能力验证 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF MS)
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温敏核不育水稻花药蛋白质组初步分析 被引量：49
9
作者 谢锦云 李小兰 +3 位作者 陈平 曹梦林 陈良碧 梁宋平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期215-221,共7页
采用固相pH梯度 SDS聚丙烯酰胺双向凝胶电泳对温敏核不育水稻 96 4 2S可育与不育条件下减数分裂期花药总蛋白进行了分离 ,通过银染显色 ,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱 .PDQuest 2DE图像分析软件可识别约 10 0 0个蛋白质点 ... 采用固相pH梯度 SDS聚丙烯酰胺双向凝胶电泳对温敏核不育水稻 96 4 2S可育与不育条件下减数分裂期花药总蛋白进行了分离 ,通过银染显色 ,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱 .PDQuest 2DE图像分析软件可识别约 10 0 0个蛋白质点 .蛋白质点在 2D胶上的重复性为 :沿等电聚焦方向偏差为 1 4 5± 0 2 3mm(n =8) ,沿SDS PAGE方向偏差为 :1 15± 0 17mm(n =8) .对两种育性不同样品的 2D胶上部分共有的蛋白质点 ,采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 (matrixassistedlaserdesorption ionizationtimeofflightmassspctrometry ,MALDI TOF MS)进行了肽质谱指纹图分析 .通过采用PeptIdent软件对SWISS PROT数据库的查询 ,有 5 0个蛋白质点在数据库得到归属鉴定 .对育性不同的2种样品 2D较上明显差异的蛋白质点进行了分析鉴定 .在不育变化为可育的过程中 ,明显表达上调的蛋白质点包括几丁质酶 ,酸性磷酸酶 ,胞浆激酶 ,谷蛋白前体 ,以及ESTSC72 61蛋白 ,明显下调的蛋白质包括β expansin前体 ,谷氨酸氨甲酰转移酶和 展开更多
关键词 水稻 温敏核不育 花药 蛋白质组 蛋白质点 育性 MALDI-TOF质谱分析
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双向凝胶电泳-飞行时间质谱法分析人肺鳞癌细胞NCI-H520蛋白质组成分 被引量：34
10
作者 詹显全 陈主初 +5 位作者 关勇军 李萃 何春梅 梁宋平 谢锦云 陈平 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第6期575-582,共8页
目的：建立和优化肿瘤蛋白质组研究的方法系统，并分析人肺鳞癌细胞蛋白质组。方法：用固相 ｐＨ梯度双向凝胶电泳分离人肺鳞癌细胞系ＮＣＩ－Ｈ５２０总蛋白，银染显色，ＰＤＱｕｅｓｔ ２ＤＥ软件分析，对部分蛋白质 点用基质辅助激... 目的：建立和优化肿瘤蛋白质组研究的方法系统，并分析人肺鳞癌细胞蛋白质组。方法：用固相 ｐＨ梯度双向凝胶电泳分离人肺鳞癌细胞系ＮＣＩ－Ｈ５２０总蛋白，银染显色，ＰＤＱｕｅｓｔ ２ＤＥ软件分析，对部分蛋白质 点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（ｍａｔｒｉｘ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｌａｓｅｒ　ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ ｏｆ　ｆｌｙｉｎｇ　ｍａｓｓ　 ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ， ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ－ＭＳ）测定其胶内酶解后的肽质指纹图谱，用 ＰｅｐｔＩｄｅｎｔ软件查询 ＳＷＩＳＳ－ＰＲＯＴ数据库。结果：获得了分辨 率和重复性均较好的双向电泳银染图谱，图像分析探测到３块胶的平均蛋白质点数为（１１４６±１１６），平均匹配的点 数为（８５１±９５），匹配率达 ７３． ７％， ３ 块胶在蛋白质点位置上具有较好的重复性， ＩＥＦ方向的平均偏差为（１． ５２± ０．２２）ｍｍ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ方向的平均偏差为（１．９７ ± ０．１３）ｍｍ。随机取６０个蛋白质点进行胶内原位酶解－质谱指纹图 分析得到了５４个蛋白质点的肽质指纹图，查询数据库初步鉴定了４４个蛋白质，其中部分是与细胞周期有关的蛋 白，部分是与信号传导有关的蛋白。 展开更多
关键词 双向电泳 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 肺肿瘤 鳞癌细胞 NCI-G520
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柞蚕微孢子虫3种孢壁蛋白的提取与鉴定 被引量：6
11
作者 王伯阳 姜义仁 +3 位作者 杨瑞生 李艳卓 王勇 秦利 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期330-336,共7页
在微孢子虫侵染宿主的过程中,孢壁蛋白扮演着重要的角色。分别采用沸水浴法、SDS法从柞蚕微孢子虫(Nosema per-nyi,Np)孢子中提取孢壁蛋白以及利用发芽后的孢子壳提取孢壁蛋白,对提取的孢壁蛋白进行SDS-PAGE分析和质谱鉴定。结果显示,... 在微孢子虫侵染宿主的过程中,孢壁蛋白扮演着重要的角色。分别采用沸水浴法、SDS法从柞蚕微孢子虫(Nosema per-nyi,Np)孢子中提取孢壁蛋白以及利用发芽后的孢子壳提取孢壁蛋白,对提取的孢壁蛋白进行SDS-PAGE分析和质谱鉴定。结果显示,将发芽后的孢子壳以沸水浴法提取孢壁蛋白最为有效,但操作复杂,部分孢壁蛋白损失严重。初步鉴定从发芽后的孢子壳中提取的编号为P35、P32和P29的3种蛋白属于柞蚕微孢子虫孢壁蛋白,蛋白分子质量分别为35、32、29 kD,其中孢壁蛋白P32的含量最丰富,P35和P29的含量相对较低。根据相应肽指纹图谱预测孢壁蛋白P32的一级结构类似核孔蛋白,可能与孢壁的选择透过性有关,而P35与VASA2n蛋白的一级结构类似,因此有可能与柞蚕微孢子虫的繁殖有关。 展开更多
关键词 柞蚕微孢子虫 孢壁蛋白 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱
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“双甲酸夹心”快速样本前处理方法的建立及在丝状真菌质谱鉴定中的初步应用 被引量：6
12
作者 苍金荣 王翠 +5 位作者 王曦 陈苗 魏喆敏 张利侠 马娟 李玲 《现代检验医学杂志》 CAS 2018年第3期21-23,共3页
目的解决布鲁克microflex LT MALDI-TOF质谱仪在临床微生物学实验室丝状真菌鉴定中样本处理技术操作繁琐,耗时较长的弊端,建立一种快速、简便的丝状真菌质谱鉴定样本前处理方法。方法以2017年1月~2018年3月陕西省人民医院门诊及住院患... 目的解决布鲁克microflex LT MALDI-TOF质谱仪在临床微生物学实验室丝状真菌鉴定中样本处理技术操作繁琐,耗时较长的弊端,建立一种快速、简便的丝状真菌质谱鉴定样本前处理方法。方法以2017年1月~2018年3月陕西省人民医院门诊及住院患者临床标本分离到的各种丝状真菌为研究对象,采用"双甲酸夹心"法进行上机前处理,即于96孔不锈钢靶板上用无菌微量吸头滴加1μl甲酸,再选取培养基上生长的丝状真菌菌落(幼龄菌丝体最好)用蘸取少许甲酸溶液的无菌牙签挑取菌丝体与甲酸溶液混合并进行充分研磨,待其自然干燥后在其表面再次滴加1μl的甲酸溶液,干燥后再加1μl基质液(仪器配套),待干燥后即可上机。对检测结果采用形态学和基因测序方法进行确证。结果新建方法前处理鉴定的丝状真菌有曲霉菌、青霉菌、拟青霉、镰刀菌、皮肤癣菌、接合菌、暗色真菌、双向真菌,并且对一些形态不典型或少见丝状真菌都能正确鉴定到种,如裂褶菌、红色单囊菌等。共鉴定菌株158株,其中113株可鉴定到种,31株鉴定到属,无法鉴定14株。结论新建立的丝状真菌样本快速前处理方法,大大缩短了样本前处理实验流程,具有快速、简便、高效、极低实验成本、鉴定正确率较高的特点,可快速为临床提供丝状真菌鉴定结果,使患者得到及时有效的抗真菌治疗。 展开更多
关键词 丝状真菌 双甲酸夹心法 MALDI-TOF质谱仪
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基于高压液相色谱法的地沟油聚类分析方法研究 被引量：4
13
作者 刘庆菊 蔡波太 +3 位作者 袁龙飞 周影 黄金成 何裕建 《食品安全质量检测学报》 CAS 2013年第2期401-409,共9页
目的建立基于高压液相色谱法的地沟油聚类分析方法,对地沟油进行行之有效的测定。方法假设目标油样的主要成分分为甘油三酯和其他杂质两大类,通过对其MALDI-TOF质谱峰的分析及高压液相色谱峰(HPLC)的聚类判别,实现地沟油的分析检测。首... 目的建立基于高压液相色谱法的地沟油聚类分析方法,对地沟油进行行之有效的测定。方法假设目标油样的主要成分分为甘油三酯和其他杂质两大类,通过对其MALDI-TOF质谱峰的分析及高压液相色谱峰(HPLC)的聚类判别,实现地沟油的分析检测。首先利用MALDI-TOF质谱对油样进行初步分析;然后根据出峰时间选取了14个特征高压液相色谱峰,得到其面积百分比,并对其进行标准化处理;采用聚类分析技术将41个已知油样聚成六大类,建立样品数据库;对未知样品数据进行判别分析,可以对其进行检测。结果该方法可以检测到食用油中掺入10%的地沟油含量。将该方法用于26个盲样,结果显示,准确率为92.3%。结论该方法可以对地沟油进行有效地测定。 展开更多
关键词 地沟油 高压液相色谱法 MALDI-TOF 质谱 聚类分析 判别分析
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温度对人肺癌细胞A549蛋白质表达的影响 被引量：9
14
作者 陈子珺 王三英 +1 位作者 陈晋安 彭宣宪 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期179-179,共1页
肺癌蛋白质组的研究,有助于阐明其发病机制并对肺癌的防治有益。本文从研究人肺癌细胞热休克蛋白的表达情况出发,通过比较37℃、42℃和45℃培养条件下的人肺癌细胞A549总蛋白质的双向电泳图谱,获得3个温度敏感的差异蛋白点,依次命名为P_... 肺癌蛋白质组的研究,有助于阐明其发病机制并对肺癌的防治有益。本文从研究人肺癌细胞热休克蛋白的表达情况出发,通过比较37℃、42℃和45℃培养条件下的人肺癌细胞A549总蛋白质的双向电泳图谱,获得3个温度敏感的差异蛋白点,依次命名为P_1、P_2、P_3。对差异蛋白进行MALDI-TOF-MS分析和采用SWISS-PROT数据库中的Peptident软件检索后,初步鉴定P_1与2种醛酮还原酶家族成员相匹配,P_2可能为一种新蛋白,P_3为锌指蛋白11A。 展开更多
关键词 温度 人肺癌细胞A549 蛋白质 表达 肽质量指纹谱 基质辅助激光解吸/飞行时间质谱 热休克蛋白
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枯草芽孢杆菌B2菌株产生的表面活性素变异体的纯化和鉴定 被引量：67
15
作者 高学文 姚仕义 +2 位作者 Huong Pham Joachim Vater 王金生 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期647-652,共6页
利用 6mol LHCl沉淀枯草芽孢杆菌B2菌株的去细胞培养液 ,甲醇抽提获得脂肽类抗生素粗提物 ,过SephadexLH 2 0层析柱获得粗纯化物 ,经MALDI TOF MS检测表明B2菌株仅含有表面活性素一种脂肽类抗生素。利用HPLCSMARTSYSTEM ,将粗纯化物过 ... 利用 6mol LHCl沉淀枯草芽孢杆菌B2菌株的去细胞培养液 ,甲醇抽提获得脂肽类抗生素粗提物 ,过SephadexLH 2 0层析柱获得粗纯化物 ,经MALDI TOF MS检测表明B2菌株仅含有表面活性素一种脂肽类抗生素。利用HPLCSMARTSYSTEM ,将粗纯化物过 μRPCC2 C1 8层析柱对表面活性素变异体进行分离后获得纯化物。经MALDI TOF PSD MS对纯化物的结构分析表明 ,B2菌株的表面活性素变异体由 1 3、1 4和 1 5个碳原子的脂肪酸链以及L Glu L Leu D Leu L Val L Asp D Leu L 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 表面活性素 变异体 纯化 鉴定
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气体绝缘开关设备电缆终端绝缘硅油老化问题试验研究 被引量：15
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作者 张若兵 辛鸿帅 郭国化 《高电压技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第11期3746-3752,共7页
气体绝缘开关设备（GIS）高压充油电缆终端绝缘硅油随运行时间的增加会逐渐老化,从而造成电缆终端的绝缘性能大大降低。为了进行硅油老化状态的判定,首先研究了热老化对硅油电气性能的影响,然后采用针板电极对硅油进行了放电老化试验,... 气体绝缘开关设备（GIS）高压充油电缆终端绝缘硅油随运行时间的增加会逐渐老化,从而造成电缆终端的绝缘性能大大降低。为了进行硅油老化状态的判定,首先研究了热老化对硅油电气性能的影响,然后采用针板电极对硅油进行了放电老化试验,通过不同放电形式下击穿电压、介质损耗角正切（简称介损值）、体积电阻率等电气参数的变化规律以及MALDI-TOF质谱分析的结果来评价硅油的老化状态。综合以上分析,证明了单纯的热老化对硅油电气性能的影响较小且非常缓慢,并且初步形成了硅油老化状态的评价标准：若击穿电压U≥40 kV,介损值tanδ≤0.6%,体积电阻率ρ≥5×1012Ω·m,质谱分析表明没有明显低分子量聚硅氧烷生成,则硅油处于轻微老化状态;若击穿电压U为30~35 kV,介损值tanδ为1%~1.5%,体积电阻率ρ为1011~1012Ω·m,质谱分析表明分子量在1 400~2 400范围内时出现稳定间隔吸收峰,则硅油处于中度老化状态;若击穿电压U≤25 kV,介损值tanδ≥5%,体积电阻率ρ≤1010Ω·m,质谱分析表明分子量在550~750甚至更低范围内时出现稳定间隔吸收峰,则硅油处于严重老化状态。 展开更多
关键词 GIS 电缆终端 绝缘硅油 热老化 击穿电压 体积电阻率 介质损耗角正切 MALDI-TOF质谱分析 老化状态
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胶质瘤组织中蛋白质表达谱的研究及疾病相关蛋白质的筛选 被引量：3
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作者 王雅杰 方芳 +7 位作者 周亚莉 张国军 吕虹 刘志忠 史从宁 耿会娟 韩金利 康熙雄 《中国全科医学》 CAS CSCD 2008年第16期1436-1438,共3页
目的利用双向凝胶电泳-MALDI-TOF质谱技术进行胶质瘤组织中蛋白质表达谱的研究,并进行胶质瘤组织中疾病相关蛋白质的筛选。方法分别提取6例胶质瘤患者脑组织、6例相对正常脑组织的总蛋白质,进行双向凝胶电泳、银染,两组凝胶图像差异分析... 目的利用双向凝胶电泳-MALDI-TOF质谱技术进行胶质瘤组织中蛋白质表达谱的研究,并进行胶质瘤组织中疾病相关蛋白质的筛选。方法分别提取6例胶质瘤患者脑组织、6例相对正常脑组织的总蛋白质,进行双向凝胶电泳、银染,两组凝胶图像差异分析,得到差异蛋白质。对目的差异蛋白质进行MALDI-TOF质谱分析。结果获得了分辨率较高的胶质瘤和相对正常脑组织双向凝胶电泳图谱,鉴定了29个差异蛋白质点中的18个蛋白质,得到15个阳性结果。在鉴定中得到阳性结果的差异蛋白质中,胶质瘤组织上调的蛋白质有:γ-肌动蛋白、三联基元蛋白5的环指蛋白、假想蛋白、RAS结合蛋白、T细胞识别的鳞状细胞癌抗原、SMC1结构维持染色体1样1、ATP结合盒转运载体蛋白1和果糖二磷酸醛缩酶;下调的蛋白质有:β-球蛋白、脑肌酸激酶、类似S期激酶活化剂、CUG-BP和ETR-3样因子、类似磷酸二酯酶4D相互作用蛋白、CD2抗原和肌动蛋白结合蛋白。结论利用双向凝胶电泳-MALDI-TOF质谱技术进行胶质瘤组织中疾病相关蛋白质的研究得到差异蛋白质,其中上调蛋白质功能为细胞的骨架结构形成、细胞的侵袭性生长、肿瘤耐药性和促进细胞增殖等;下调蛋白质功能为免疫调节、细胞周期调节、抑制细胞迁移、在脑组织中参加细胞能量代谢和调节细胞特异性和发育等;还有一些未知功能蛋白质。所得结果为胶质瘤疾病蛋白质组学的进一步研究打下了一定的工作基础。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 蛋白质组 双向凝胶电泳-飞行时间质谱
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壳寡糖在传统食品酸菜腌渍过程中的应用 被引量：2
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作者 金桥 王鑫 +3 位作者 王刚 佟长青 徐建平 李伟 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第S1期198-201,共4页
采用复合酶降解法从壳聚糖中制备得到壳寡糖,并对所得壳寡糖进行了时间飞行质谱分析。经分析该壳寡糖聚合度为2~10,但也有少量聚合度为32~70。采用正常腌渍和添加壳寡糖两种方式进行酸菜发酵,并对发酵液的pH、大肠菌群数、乳酸菌数、霉... 采用复合酶降解法从壳聚糖中制备得到壳寡糖,并对所得壳寡糖进行了时间飞行质谱分析。经分析该壳寡糖聚合度为2~10,但也有少量聚合度为32~70。采用正常腌渍和添加壳寡糖两种方式进行酸菜发酵,并对发酵液的pH、大肠菌群数、乳酸菌数、霉菌和酵母数等指标的变化规律进行研究。结果表明:随着发酵时间的延长,两种发酵液的pH迅速下降并稳定至3.20左右;pH值的下降,抑制了大肠菌群生长,而且有壳寡糖的酸菜发酵液对大肠菌群的抑制作用更加明显;在发酵过程中,乳酸菌的数量逐渐上升,酵母菌的数量在发酵初期增长很快,霉菌的数量则一直较少。感官品质评价结果表明,添加壳寡糖腌渍的酸菜感官质量优于传统腌渍方法得到的酸菜。 展开更多
关键词 壳寡糖 时间飞行质谱 酸菜 发酵
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MALDI-TOF质谱在院内感染致病菌检测中的应用 被引量：3
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作者 屠博文 史伟峰 +3 位作者 韩晓冬 杜强 徐晓怡 郝超 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第33期4665-4670,共6页
目的采用MALDI-TOF质谱分析方法鉴定院内感染致病菌。方法同步使用VITEK-2和MALDI-TOF质谱鉴定院内感染致病菌。从检测时间、鉴定率及检出数量进行两种方法的对比。将微生物大分子指纹图谱进行共性峰比对计算,获得院内感染致病菌株间同... 目的采用MALDI-TOF质谱分析方法鉴定院内感染致病菌。方法同步使用VITEK-2和MALDI-TOF质谱鉴定院内感染致病菌。从检测时间、鉴定率及检出数量进行两种方法的对比。将微生物大分子指纹图谱进行共性峰比对计算,获得院内感染致病菌株间同源性结构关系的差异。结果共检出31株大肠埃希氏菌、28株肺炎克雷伯氏菌及解鸟苷酸拉乌尔菌等罕见致病菌9株。MALDI-TOF质谱检测能够在1h内检出所有的致病菌,且鉴定率和检出数量高于VITEK-2。结论致病菌的院内感染呈现科室为中心点源传播的模式。MALDI-TOF质谱检测速度快、准确率高,能够进行临床耐药菌的聚类分析,有望成为致病菌鉴定和临床耐药菌风险监测工作的主要技术力量。 展开更多
关键词 交叉感染MALDI-TOF质谱 VITEK-2生化分析 同源性分析
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MALDI-TOF-MS鉴定生物脱氮细菌的方法研究 被引量：4
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作者 徐昕荣 朱斌 +2 位作者 马瑜璐 向弘 陈丽凤 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期148-150,161,共4页
采用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对生物脱氮废水处理系统中分离得到的两株细菌进行蛋白质质量指纹图谱分析。对供试细菌,比较样品处理方法和基质选择对细菌蛋白质质量指纹图谱的影响,获得优化的实验条件,并对方法... 采用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对生物脱氮废水处理系统中分离得到的两株细菌进行蛋白质质量指纹图谱分析。对供试细菌,比较样品处理方法和基质选择对细菌蛋白质质量指纹图谱的影响,获得优化的实验条件,并对方法的重现性进行了研究。建立了一种快速的细菌蛋白质质量指纹图谱鉴定方法。结果显示:该方法灵敏度高,且分析过程简单快速,具有广泛的开发和应用意义。 展开更多
关键词 基质辅助激光解析电离质谱 蛋白质质量指纹图谱 细菌 鉴定
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