Klotho在急性缺血再灌注性肾损伤中的变化及其与凋亡的关系 被引量：17

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作者 钱盈盈 严玉澄 +7 位作者 沈玥 车琳 关雪晶 戴慧莉 顾乐怡 吴蓓 倪兆慧 钱家麒 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期788-793,798,共7页

目的观察Klotho蛋白在缺血再灌注急性肾损伤中的表达变化,探讨其在肾小管上皮细胞凋亡中的作用。方法 10只BALB/c小鼠随机分为肾脏缺血再灌注组(I/R组,n=5)和假手术组(Sham组,n=5),采用双侧肾蒂夹闭术建立肾缺血再灌注模型,于造模后24 ... 目的观察Klotho蛋白在缺血再灌注急性肾损伤中的表达变化,探讨其在肾小管上皮细胞凋亡中的作用。方法 10只BALB/c小鼠随机分为肾脏缺血再灌注组(I/R组,n=5)和假手术组(Sham组,n=5),采用双侧肾蒂夹闭术建立肾缺血再灌注模型,于造模后24 h留取小鼠的血清及肾组织。应用酶法分别测定血清尿素氮和肌酐,ELISA法检测血清Klotho蛋白水平,TUNEL染色法检测肾脏细胞凋亡水平,Real-Time PCR及Western blotting技术分别检测肾组织Klotho、Bax、Bcl-2和Caspase-3的基因及蛋白表达,应用Pearson直线相关法分析急性肾损伤时小鼠全身及局部的Klotho水平和肾脏凋亡的关系。结果与Sham组相比,I/R组小鼠术后24 h肾小管上皮细胞明显变性、坏死,肾脏凋亡细胞明显增加,肾组织cleaved Caspase-3蛋白水平、Bax/Bcl-2 mRNA及蛋白表达比值均显著升高。I/R组小鼠血清Klotho蛋白水平较Sham组小鼠显著降低[(669.89±136.51)pg/mL vs.(2 107.92±549.22)pg/mL,P<0.01],肾组织Klotho mRNA及蛋白表达分别较Sham组下调约9/10(P<0.001)及1/5(P<0.05)。相关性分析显示肾组织bax/bcl-2 mRNA比值与血清Klotho蛋白及肾组织klotho mRNA均呈显著负相关(r=-0.833,P<0.01;r=-0.916,P<0.001),肾组织Bax/Bcl-2蛋白比值和肾组织Klotho蛋白也呈显著负相关(r=-0.637,P<0.05)。结论缺血再灌注急性肾损伤后小鼠全身及肾组织局部Klotho表达均显著下调,Klotho水平的下降可能与凋亡诱导的肾损害密切相关。 展开更多

关键词 缺血再灌注损伤 急性肾损伤 KLOTHO BAX Bcl-2 凋亡

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问道中国,写在中国大地上的“文化路书”

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作者 沈峥嵘 刘浏 +2 位作者 陈澄 朱娜 钱盈盈 《华人时刊》 2025年第1期42-45,共4页

要开启一段“China Travel”你会去哪里?大卫.库维达(David Couvidat)选择了云南普洱,一个以茶命名的城市。大卫来自法国,在中国生活6年,一直从事法语教学和中法文化交流工作。他习惯早上喝杯咖啡,下午再泡上一杯茶。在他位于南京闹市... 要开启一段“China Travel”你会去哪里?大卫.库维达(David Couvidat)选择了云南普洱,一个以茶命名的城市。大卫来自法国,在中国生活6年,一直从事法语教学和中法文化交流工作。他习惯早上喝杯咖啡,下午再泡上一杯茶。在他位于南京闹市区的办公室里,存着铁观音、碧螺春等不少好茶,都是中国朋友送的。 展开更多

关键词 碧螺春 中法文化交流 铁观音 大卫 法语教学 云南普洱 一杯茶 文化路

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Klotho蛋白与氧化应激关系的研究进展 被引量：3

3

作者 钱盈盈 严玉澄 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期90-93,共4页

Klotho基因（惫￡）是Kklro-o等u0在1997年研究原发性高血压时发现的抗衰老基因，kl缺乏小鼠会出现类似人类衰老的各种表现；相反，kl高表达小鼠衰老表现得以改善，寿命延长。氧化应激是引起衰老的重要原因，也参与了许多疾病的发生、... Klotho基因（惫￡）是Kklro-o等u0在1997年研究原发性高血压时发现的抗衰老基因，kl缺乏小鼠会出现类似人类衰老的各种表现；相反，kl高表达小鼠衰老表现得以改善，寿命延长。氧化应激是引起衰老的重要原因，也参与了许多疾病的发生、发展。近年来很多证据表明，Klotho蛋白（KL）与机体氧化应激和衰老密切相关。现就KL与氧化应激的关系作一综述。 展开更多

关键词 KLOTHO蛋白 氧化应激 KLOTHO基因 衰老基因 原发性高血压 人类衰老 寿命延长 小鼠

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基于读写的高中英语阅读教学模式探讨 被引量：7

4

作者 钱盈盈 《英语广场（学术研究）》 2016年第5期167-168,共2页

随着社会的进步,教育体制改革不断深化。英语是高中阶段教学的重要组成部分,将读写相结合的教学模式应用到高中英语教学中,有利于提高学生的英语学习成绩,因此,在英语教学中,应该加强对学生综合能力的培养。阅读和写作是英语教学的重要... 随着社会的进步,教育体制改革不断深化。英语是高中阶段教学的重要组成部分,将读写相结合的教学模式应用到高中英语教学中,有利于提高学生的英语学习成绩,因此,在英语教学中,应该加强对学生综合能力的培养。阅读和写作是英语教学的重要组成部分,两者在英语学习中,相互作用、相互影响,二者相结合促进了英语教学规模的提高。该模式的运用,促进了学生学习视野的开阔,提高了学生的写作能力,改善了当前英语教学的现状,为新课程改革的实施创造了有利条件。 展开更多

关键词 高中英语教学 阅读教学 问题 策略

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如何有效地使用肢体语言

5

作者 钱盈盈 《疯狂英语（新读写）》 2020年第8期15-18,61,共5页

面部表情、眼神、头部的运动、手势以及身体的姿态等这些肢体语言可以完成很多口头语言无法完成的沟通任务。那么,如何恰当地运用肢体语言呢?

关键词 面部表情 口头语言 肢体语言

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Klotho基因真核表达载体的构建及其在TCMK-1细胞中的稳定表达

6

作者 沈玥 路丽明 +5 位作者 钱盈盈 关雪晶 齐渊元 倪兆慧 钱家麒 严玉澄 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期567-572,共6页

目的构建小鼠Klotho基因真核表达载体,进而获得稳定表达Klotho分子的小鼠肾上皮细胞株TCMK-1。方法应用PCR方法扩增带有FLAG标签的Klotho编码基因,并克隆至载体pCD-CXIN(CMVMCS-IRES-Neomycin)的相应位点;经酶切及测序鉴定重组质粒,脂... 目的构建小鼠Klotho基因真核表达载体,进而获得稳定表达Klotho分子的小鼠肾上皮细胞株TCMK-1。方法应用PCR方法扩增带有FLAG标签的Klotho编码基因,并克隆至载体pCD-CXIN(CMVMCS-IRES-Neomycin)的相应位点;经酶切及测序鉴定重组质粒,脂质体转染TCMK-1细胞,通过G418筛选得到稳定表达Klotho分子的TCMK-1细胞株;Real-Time PCR检测Klotho mRNA水平,Western blotting检测Klotho蛋白的表达。结果将带有FLAG标签的Klotho基因重组表达载体转染至TCMK-1细胞后,经G418筛选获得TCMK-1细胞株。与对照组相比,Klotho mRNA和蛋白表达均显著升高。结论成功构建了Klotho基因的重组表达载体,并获得了稳定表达Klotho基因的TCMK-1细胞株,为进一步研究Klotho基因和蛋白在小鼠肾上皮细胞中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 KLOTHO 内部核糖体进入位点序列 FLAG标签 TCMK-1细胞

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终末期肾病患者骨骼肌中丙酮酸脱氢酶活性与丙酮酸脱氢酶激酶4的表达 被引量：2

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作者 徐辰祺 闵璐琳 +8 位作者 陈晓欢 陆任华 朱铭力 谢可炜 钱盈盈 郭相江 倪兆慧 阿依加肯·卡司木马力 顾乐怡 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期305-309,共5页

目的·探讨终末期肾病(end-stage renal disease,ESRD)患者骨骼肌丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase,PDH)活性及丙酮酸脱氢酶激酶4(pyruvate dehydrogenase kinase 4,PDK4)在骨骼肌中表达水平的变化。方法·收取ESRD患者和... 目的·探讨终末期肾病(end-stage renal disease,ESRD)患者骨骼肌丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase,PDH)活性及丙酮酸脱氢酶激酶4(pyruvate dehydrogenase kinase 4,PDK4)在骨骼肌中表达水平的变化。方法·收取ESRD患者和非慢性肾脏病(non-chronic kidney diseases,non-CKD)患者骨骼肌样本,比较2组患者的临床特征,ELISA法检测PDH活性,实时荧光定量PCR法检测PDK1~PDK4型同工酶、PDH各亚基的基因转录水平,Western blotting检测PDK1和PDK4蛋白表达水平。结果·non-CKD组和ESRD组患者在一般人口学资料上无明显差异,ESRD组血浆肌酐、尿素氮显著升高(均P<0.05),估算的肾小球滤过率、血红蛋白、白蛋白则显著降低(均P<0.05)。ESRD组骨骼肌PDH活性显著低于non-CKD组(P=0.014),2组患者骨骼肌PDK1~PDK4及PDH各亚基mRNA转录水平无明显差异,ESRD组PDK4蛋白表达量显著高于non-CKD对照组(P=0.000)。结论·ESRD患者骨骼肌中PDH活性下降,可能与PDK4表达上调有关。 展开更多

关键词 终末期肾病 骨骼肌 丙酮酸脱氢酶 丙酮酸脱氢酶激酶4 线粒体

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基于PLC和触摸屏的电机变频调速控制系统设计与实现 被引量：6

8

作者 田磊 吴静 +4 位作者 蒋东 张明伟 任兴 钱盈盈 陈夹夹 《科技创新与应用》 2017年第15期50-51,共2页

文章以西门子S7-200系列PLC的CPU224XP作为核心控制处理器,以西门子SMART700触摸屏作为人机交互界面,通过人机交互界面对电动机的运行状态进行监视及控制,完成电动机的启停、变频调速、正反转运行。实验结果表明:该系统工作稳定、运行... 文章以西门子S7-200系列PLC的CPU224XP作为核心控制处理器,以西门子SMART700触摸屏作为人机交互界面,通过人机交互界面对电动机的运行状态进行监视及控制,完成电动机的启停、变频调速、正反转运行。实验结果表明:该系统工作稳定、运行可靠、控制精度较高。 展开更多

关键词 PLC 触摸屏 变频调速

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我国大中城市停车管理问题研究 被引量：1

9

作者 王小东 陈萧 +2 位作者 朱丽颖 钱盈盈 姜仕勋 《新西部（中旬·理论）》 2013年第4期58-58,68,共2页

本文分析了我国大中城市停车难的表现与原因,介绍了国外有关停车管理的措施与经验,提出了解决大中城市停车管理问题的对策建议。即:限制策略:减少汽车增长,完善公共交通体系;建设策略:因地制宜、科学规划、统筹布局;管理策略:加强智能管... 本文分析了我国大中城市停车难的表现与原因,介绍了国外有关停车管理的措施与经验,提出了解决大中城市停车管理问题的对策建议。即:限制策略:减少汽车增长,完善公共交通体系;建设策略:因地制宜、科学规划、统筹布局;管理策略:加强智能管理,提高科技手段;体制策略:注重监管体制的协同一致性;法治策略:制定和完善停车相关政策法规体系。 展开更多

关键词 大中城市 停车管理 问题 对策建议

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政府向社会组织购买服务的路径依赖与路径创造——基于深圳市F区社会建设专项资金的实证研究

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作者 林民望 钱盈盈 《中国社会组织研究》 2024年第1期70-96,287,共28页

在政府购买服务中,政府对社会组织的资助偏好究竟存在路径依赖还是路径创造,抑或是二者共存?本文利用2018~2020年深圳市F区政府购买服务数据,采用混合效应回归、分组回归及调节效应分析方法进行实证分析。研究结果表明:(1)社会组织与政... 在政府购买服务中,政府对社会组织的资助偏好究竟存在路径依赖还是路径创造,抑或是二者共存?本文利用2018~2020年深圳市F区政府购买服务数据,采用混合效应回归、分组回归及调节效应分析方法进行实证分析。研究结果表明:(1)社会组织与政府间合作经历与其获得的政府资助呈正相关关系,体现为政府对有过多次合作经历的社会组织产生路径依赖效应;(2)与设想情况相反,社会组织的成立年限与其获得的政府资助呈负相关关系,政府倾向于扶持专业能力较强的成立年限较短的社会组织;(3)社会组织专业化水平负向调节合作经历对政府购买服务资助偏好的影响,即社会组织专业化建设有助于其获取更多资源,减少对政府财政资助的路径依赖。 展开更多

关键词 政府购买服务 社会组织 路径依赖 路径创造 资助偏好

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大学生创业模式的创新

11

作者 姜仕勋 钱盈盈 +2 位作者 朱丽颖 陈萧 王小东 《环球市场信息导报（理论）》 2013年第2期53-53,13,共2页

大学生创业现状的基本研究 通过对大学生创业行为的人群进行问卷调查与深入访谈，围绕大学生创业模式的主题进行开展。以社会认知、创业者的自述为切入点，课题组进行了深入研究。对大学生群体随机发送调查问卷2000份，收回有效调查问... 大学生创业现状的基本研究 通过对大学生创业行为的人群进行问卷调查与深入访谈，围绕大学生创业模式的主题进行开展。以社会认知、创业者的自述为切入点，课题组进行了深入研究。对大学生群体随机发送调查问卷2000份，收回有效调查问卷1907份，走访34人。就大学生群体对创业的观点和体会进行统计分析并分类研究。 展开更多

关键词 大学生创业 创业模式 大学生群体 创新 调查问卷 深入访谈 问卷调查 创业行为

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一个美国青年的金陵寻访

12

作者 付岩岩 钱盈盈 +2 位作者 周天琦(图) 高鑫(图) 蒋楚嫣(图) 《华人时刊》 2024年第1期7-9,共3页

“天气晴朗,但是很冷。上午10时,斯迈思和里格斯先生来访,在我的办公室与两位农民进行了商谈……”摘自《魏特琳日记》“这位里格斯先生是我的曾外祖父,他当年是南京安全区国际委员会的重要成员之一。”美国青年林奎(克里斯·汉金)2... “天气晴朗,但是很冷。上午10时,斯迈思和里格斯先生来访,在我的办公室与两位农民进行了商谈……”摘自《魏特琳日记》“这位里格斯先生是我的曾外祖父,他当年是南京安全区国际委员会的重要成员之一。”美国青年林奎(克里斯·汉金)2023年2月来到南京留学,一个月前,他在阅读《魏特琳日记》时竞读到自己曾外祖父查尔斯·里格斯的名字。 展开更多

关键词 里格斯 天气晴朗 克里斯 查尔斯 日记 青年

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论元代以降青花装饰的时尚筛选

13

作者 谢建明 钱盈盈 《艺术百家》 CSSCI 北大核心 2016年第6期188-190,201,共4页

元代以降,青花繁盛,有鸳鸯、莲瓣、缠枝花卉等各种经典纹饰,明净优雅、寓意吉祥,有着完整的风格体系和审美格调,是古代瓷器装饰艺术中最具有特色的一种。对于这些传统纹样的研究,已有较为详细的分类和整体探究,其中无论是民窑还是官窑... 元代以降,青花繁盛,有鸳鸯、莲瓣、缠枝花卉等各种经典纹饰,明净优雅、寓意吉祥,有着完整的风格体系和审美格调,是古代瓷器装饰艺术中最具有特色的一种。对于这些传统纹样的研究,已有较为详细的分类和整体探究,其中无论是民窑还是官窑都是现代审美有意义上的优秀文化遗产。现代陶瓷艺术装饰设计之中,对传统的吸收、改造还远远不够,不能时尚地筛选并将其应用到现代陶瓷创作中,未能有效继承古代优秀文化。研究元、明、清青花瓷装饰的创作缘由及审美内涵,并理顺其发展流变,有益于现代陶瓷的设计创新。 展开更多

关键词 设计艺术 装饰设计 古代青花装饰 审美 时尚

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提升高中英语听力教学效率的方法探究 被引量：2

14

作者 钱盈盈 《中学教学参考》 2014年第18期44-44,共1页

听力教学是高中英语教学的重要组成部分,也是教学中的一大难点.如何开展英语教学以帮助学生在考试中获得高分并且提升学生的英语听力,是高中英语教师一直都在探究的一个问题.笔者自身多年从事高中英语教学,就如何开展英语听力教学也有... 听力教学是高中英语教学的重要组成部分,也是教学中的一大难点.如何开展英语教学以帮助学生在考试中获得高分并且提升学生的英语听力,是高中英语教师一直都在探究的一个问题.笔者自身多年从事高中英语教学,就如何开展英语听力教学也有一些自己的拙见,下面,笔者将自己多年教学中的一些经验和所得进行简要论述,希望能够起到抛砖引玉的作用. 展开更多

关键词 高中英语教学 英语听力教学 教学效率 英语教师 抛砖引玉 学生 高分 考试

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松弛素对马兜铃酸诱导肾小管上皮细胞MMP-9/TIMP-1表达的影响 被引量：2

15

作者 钱盈盈 杨秀 +2 位作者 谢祥成 钱红萍 章炜 《浙江中西医结合杂志》 2020年第11期876-879,共4页

目的探讨松弛素(RLX)对马兜铃酸(AA-I)诱导的肾小管上皮细胞(HK-2细胞)分泌细胞外基质、细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)表达的影响。方法体外培养人近端肾小管HK-2细胞,根据是否给予AA-I刺激及RLX干预分... 目的探讨松弛素(RLX)对马兜铃酸(AA-I)诱导的肾小管上皮细胞(HK-2细胞)分泌细胞外基质、细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)表达的影响。方法体外培养人近端肾小管HK-2细胞,根据是否给予AA-I刺激及RLX干预分为对照组(无干预)、AA-I组(AA-I 10μg/mL刺激48h)、RLX组(RLX 10ng/mL干预48h)、RLX+AA-I组(RLX 10ng/mL干预48h后再给予AA-I 10μg/mL刺激48h)。ELISA法检测各组细胞上清中Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)、纤连蛋白(FN)的表达,免疫印迹技术检测细胞MMP-9、TIMP-1蛋白的表达。结果与对照组比较,AA-I组HK-2细胞分泌Col-Ⅳ[(87.62±4.46)ng/mL比(26.80±0.59)ng/mL,P<0.05)]、FN[(53.86±0.62)ng/mL比(23.06±0.18)ng/mL,P<0.05)]水平增加,TIMP-1[(3.72±0.33)比(1.00±0.11),P<0.05]表达上调,MMP-9[(0.39±0.01)比(1.00±0.23),P<0.05]表达下调;与AA-I组比较,RLX+AA-I组Col-Ⅳ[(47.32±0.68)ng/mL比(87.62±4.46)ng/mL]、FN水平[(37.61±2.38)ng/mL比(53.86±0.62)ng/mL]降低(P<0.05),TIMP-1[(2.04±0.15)比(3.72±0.33)]表达下调,MMP-9[(0.71±0.02)比(0.39±0.01)]表达上调(P<0.05)。结论RLX可改善AA-I诱导的HK-2细胞分泌细胞外基质的失衡,减少细胞外基质的沉积,作用机制可能与下调TIMP-1表达及上调MMP-9表达有关。 展开更多

关键词 马兜铃酸肾病 松弛素 基质金属蛋白酶9 金属蛋白酶组织抑制因子1

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论历代青花瓷绘的笔法与图式

16

作者 钱盈盈 《美术教育研究》 2019年第13期34-35,共2页

青花瓷绘的逐渐成熟经历了自然装饰、商业装饰、艺术装饰等,其笔法表达和图式创造游走在商业与艺术之间,形成了艺术史上的一个典型案例。青花绘制与烧制技艺成熟以后,青花纹样呈现出不同的艺术风格,其内容和技法相互促进、共同发展,呈... 青花瓷绘的逐渐成熟经历了自然装饰、商业装饰、艺术装饰等,其笔法表达和图式创造游走在商业与艺术之间,形成了艺术史上的一个典型案例。青花绘制与烧制技艺成熟以后,青花纹样呈现出不同的艺术风格,其内容和技法相互促进、共同发展,呈现出一个个阶段性的特征。单线勾勒塌染笔法的青花呈现出细腻凝重的风格;细笔白描的笔法呈现了中国画中工笔画淡雅清新的风格;以一笔点画的方式多见于熟练的匠工,逸笔草草、率意洒脱,极富观感;用双勾填色的纹饰往往以花卉为主,偏向图案化,看起来规整、匀称。青花瓷绘演绎的是一个从自然到意象、再从意象到抽象的过程,从简到繁、又从繁到简的艺术创作过程,展示出其图式表达的清晰特征和创造精神。 展开更多

关键词 青花纹样 笔法 艺术风格 图式 表达

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程式的固守与精神的雕琢——论思惟菩萨造像艺术传承的变与不变

17

作者 钱盈盈 钱秋虹 《艺术家》 2019年第10期82-83,共2页

历代佛教造像艺术,在基本稳定的程式框架之内,逐步得以发展,不同时代的艺术改造使造像精神得到精准表达。"思惟菩萨"传入中国后,从简单到复杂,既有太子形象,也有菩萨和罗汉形象,在5~6世纪时最为常见,均以半趺跏坐、左臂支颐... 历代佛教造像艺术,在基本稳定的程式框架之内,逐步得以发展,不同时代的艺术改造使造像精神得到精准表达。"思惟菩萨"传入中国后,从简单到复杂,既有太子形象,也有菩萨和罗汉形象,在5~6世纪时最为常见,均以半趺跏坐、左臂支颐、低头敛目、微笑沉思等为基本形态,至北齐、北周时最为兴盛。自隋唐至明清的遗存较少,但有精品或大型的作品出现。"思惟菩萨"是一种极具魅力的佛教艺术形态,虽然存世不多,但所表达的情感和境界是深层次的,体现出思维的神性以及觉者的精神升华。 展开更多

关键词 造像 程式 “思惟菩萨” 艺术

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合作学习在英语听力教学中的运用

18

作者 钱盈盈 《学苑教育》 2010年第5期52-52,共1页

本文分析了英语听力教学中存在的一些误区，提出了教师在英语听力教学中利用合作学习来改变学生学习状态的方法，以提高学生的学习兴趣，进而提高学生的英语听力技能。

关键词 误区 合作学习的意义 合作学习的运用

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Klotho对缺血再灌注急性肾损伤的影响研究 被引量：4

19

作者 章炜 王鸣 +5 位作者 费晓 葛玉英 杨秀 谢祥成 杨丽莉 钱盈盈 《浙江医学》 CAS 2020年第20期2175-2179,2184,I0006,共7页

目的探讨基因Klotho对缺血再灌注急性肾损伤的影响及可能的作用机制。方法60只BALB/c小鼠按随机数字表法分为假手术+0.9%氯化钠注射液组(Sham+veh组)、假手术+Klotho补充组(Sham+kl组)、缺血再灌注急性肾损伤+0.9%氯化钠注射液组(I/R+ve... 目的探讨基因Klotho对缺血再灌注急性肾损伤的影响及可能的作用机制。方法60只BALB/c小鼠按随机数字表法分为假手术+0.9%氯化钠注射液组(Sham+veh组)、假手术+Klotho补充组(Sham+kl组)、缺血再灌注急性肾损伤+0.9%氯化钠注射液组(I/R+veh组)、缺血再灌注急性肾损伤+Klotho补充组(I/R+kl组),每组各15只。各组小鼠再按不同的处死时相(术后第1、2、7天)随机分为D1(5只)、D2(5只)、D7(5只)3个亚组。采用双侧肾蒂夹闭法建立缺血再灌注急性肾损伤模型。Sham+veh组和Sham+kl组小鼠定位肾蒂但不夹闭,其余操作同上。Sham+kl组和I/R+kl组予再灌注后30 min腹腔注射360 ng Klotho蛋白注射液,Sham+veh组和I/R+veh组腹腔注射0.2ml 0.9%氯化钠注射液。于造模术后第1、2、7天收集小鼠血、尿、肾脏标本。分别检测血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)值,HE染色观察肾小管损伤程度,免疫组化法观察肾脏组织炎症细胞浸润情况及Klotho表达情况,ELISA法检测血Klotho和尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平,real-time PCR及Western blot法分别检测肾脏组织Klotho、凋亡相关因子B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、裂解的半胱氨酸蛋白酶(cleaved Caspase)-3的mRNA及蛋白表达。结果I/R+veh组小鼠遭受缺血再灌注损伤后肾功能显著下降,肾小管上皮细胞变性、坏死,至术后第7天明显好转。与Sham+veh组比较,I/R+veh组小鼠血Klotho蛋白水平于术后第1天明显降低,至术后第7天仍未能恢复正常,肾脏组织Klotho mRNA及蛋白表达水平于术后第1天同样明显降低(均P<0.05)。I/R+veh组小鼠肾脏组织Bax/Bcl-2 mRNA及蛋白、cleaved Caspase-3蛋白表达水平均于术后第1天较Sham+veh组明显升高(均P<0.05),CD68+细胞浸润增多。外源性补充Klotho蛋白后,I/R+kl组肾脏组织Bax/Bcl-2 mRNA及蛋白、cleaved Caspase-3蛋白表达水平分别较I/R+veh组下降30%、45%、62%(均P<0.05),CD68+细胞浸润减少。结论缺血再灌注急性肾损伤时Klotho表达下调;外源性补充Klotho蛋白可能通过抑制细胞凋亡及炎症细胞浸润等途径发挥肾脏保护作用。 展开更多

关键词 急性肾损伤 KLOTHO 缺血再灌注 细胞凋亡 炎症

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Klotho通过抑制氧化应激对肾小管上皮细胞低氧/再氧化损伤的影响 被引量：2

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作者 邵驾宇 应奇素 +3 位作者 钱盈盈 杨秀 费晓 王鸣 《现代实用医学》 2020年第12期1458-1459,I0001,共3页

目的探讨Klotho蛋白对肾小管上皮细胞低氧/再氧化损伤的保护机制。方法体外培养小鼠近端肾小管上皮细胞(TCMK-1),根据是否给予低氧/再氧化刺激及Klotho蛋白干预分为对照组(无干预),低氧/再氧化损伤组(低氧24 h后再复氧不同时间),低氧/... 目的探讨Klotho蛋白对肾小管上皮细胞低氧/再氧化损伤的保护机制。方法体外培养小鼠近端肾小管上皮细胞(TCMK-1),根据是否给予低氧/再氧化刺激及Klotho蛋白干预分为对照组(无干预),低氧/再氧化损伤组(低氧24 h后再复氧不同时间),低氧/再氧化+Klotho干预组(给予Klotho蛋白预处理1 h后,低氧24 h后再复氧8 h)。Western blot法检测细胞Klotho蛋白的表达;Cyto Tox-ONETM法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)的释放水平,评估细胞损伤程度;DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果低氧/再氧化损伤组LDH释放率高于对照组,低氧/再氧化+Klotho治疗组LDH释放率低于低氧/再氧化损伤组(P <0.05)。同时,低氧/再氧化损伤组ROS水平高于对照组,低氧/再氧化+Klotho治疗组ROS水平低于低氧/再氧化损伤组(P <0.05)。结论 Klotho对肾小管上皮细胞低氧/再氧化损伤的保护作用可能与其抗氧化应激的作用机制相关。 展开更多

关键词 肾小管上皮细胞 低氧/再氧化 KLOTHO 氧化应激

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