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两种不同来源LMP1致瘤性的比较研究 被引量:3
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作者 蓝轲 任彩萍 +3 位作者 谢鹭 何志巍 甘润良 姚开泰 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第10期1033-1037,共5页
目的:比较鼻咽癌来源的LMP1基因(NLMP1)和标准株B95.8来源的LMP1基因(BLMP1)的致瘤性。方法:将带有NLMP1及BLMP1的两种真核表达载体分别转染小鼠成纤维细胞系NIH3T3,获得稳定表达LMP1的细胞,通过软琼脂集落形成试验及裸鼠致瘤试验比较... 目的:比较鼻咽癌来源的LMP1基因(NLMP1)和标准株B95.8来源的LMP1基因(BLMP1)的致瘤性。方法:将带有NLMP1及BLMP1的两种真核表达载体分别转染小鼠成纤维细胞系NIH3T3,获得稳定表达LMP1的细胞,通过软琼脂集落形成试验及裸鼠致瘤试验比较两种细胞的致瘤性。结果:获得稳定表达NLMP1和BLMP1的两种NIH3T3细胞;NIH3T3/NLMP1的集落形成率和成瘤率均明显高于NIH3T3/BLMP1。结论:NLMP1的致瘤性强于BLMP1,进一步确证了中国鼻咽癌来源的EBVLMP1比一般的EBVLMP1具有更强的致瘤性,也为在中国鼻咽癌流行区可能存在一株特殊的EBV株系提供了一定的依据。 展开更多
关键词 潜伏膜蛋白1 EPSTEIN-BARR病毒 鼻咽肿瘤 N-LMP1 B-LMP1
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鼻咽癌来源潜伏膜蛋白1的表达诱发转基因小鼠鼻咽不典型增生 被引量:3
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作者 蓝轲 乔贵林 +3 位作者 沈新民 张玲 吕丽春 姚开泰 《动物医学进展》 CSCD 2002年第5期46-48,54,共4页
为建立鼻咽癌来源潜伏膜蛋白 1 ( N-L MP1 )转基因小鼠模型 ,从整体的角度研究 N-L MP1的功能 ,进一步阐明 EB病毒在鼻咽癌变过程中的作用 ,应用 DNA重组技术将角质细胞特异性启动子 EDL2与 N-L MP1连接 ,构建转基因 EDL2 -N-L MP1 ;并... 为建立鼻咽癌来源潜伏膜蛋白 1 ( N-L MP1 )转基因小鼠模型 ,从整体的角度研究 N-L MP1的功能 ,进一步阐明 EB病毒在鼻咽癌变过程中的作用 ,应用 DNA重组技术将角质细胞特异性启动子 EDL2与 N-L MP1连接 ,构建转基因 EDL2 -N-L MP1 ;并用显微注射技术 ,将转基因 EDL2 -N-L MP1注射入小鼠受精卵前核 ,再将注射后的受精卵植入假孕母鼠 ,获得转基因鼠 ,然后观察目的基因在鼻咽部的表达和病理变化。本实验共获得 53只转基因鼠 ,PCR法证明其中 6只小鼠有 N-L MP1基因扩增带 ,Southern杂交显示 PCR阳性小鼠有特异的杂交信号 ,整合率为 1 1 .3 % ;1只 4月龄的转基因鼠出现了鼻咽部不典型增生。说明 N-L MP1单独就能诱发小鼠鼻咽部发生癌前病变 ,为 EB病毒可能是鼻咽癌的主要病因提供了有力的证据。 展开更多
关键词 鼻咽癌 潜伏膜蛋白1 表达 诱发 转基因小鼠 鼻咽不典型增生
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稳定表达鼻咽癌来源潜伏膜蛋白1基因的鼻咽癌细胞系的建立 被引量:3
3
作者 蓝轲 甘润良 +3 位作者 任彩萍 何志巍 谢鹭 姚开泰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期97-100,共4页
目的 :建立稳定表达鼻咽癌 (NPC)来源潜伏膜蛋白 1(LMP1)的鼻咽癌细胞系。方法 :利用基因重组技术构建NPC来源LMP1的一般性真核表达载体及上皮特异性表达载体 ,并将其转染鼻咽癌细胞系CNE - 2 ,用PCR、RT -PCR及蛋白印迹等检测N -LMP1在... 目的 :建立稳定表达鼻咽癌 (NPC)来源潜伏膜蛋白 1(LMP1)的鼻咽癌细胞系。方法 :利用基因重组技术构建NPC来源LMP1的一般性真核表达载体及上皮特异性表达载体 ,并将其转染鼻咽癌细胞系CNE - 2 ,用PCR、RT -PCR及蛋白印迹等检测N -LMP1在CNE - 2中的整合和表达。结果 :①成功构建了N -LMP1的一般性和上皮特异性表达载体。②N -LMP1基因在CNE - 2细胞中获得了正确表达。结论 :成功建立了稳定表达NPC来源LMP1的鼻咽癌细胞系 ,为进一步研究LMP1在鼻咽癌细胞中的作用机制奠定基础。 展开更多
关键词 膜蛋白类 爱泼斯坦-巴尔病毒 鼻咽肿瘤
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鼻咽癌来源LMP1转基因小鼠的制备 被引量:2
4
作者 蓝轲 乔贵林 +3 位作者 沈新民 张玲 吕丽春 姚开泰 《动物医学进展》 CSCD 2002年第1期69-71,共3页
本试验利用显微注射技术,制备鼻咽癌来源LMP1基因(N-LMP1)的转基因小鼠。共获得15只首建鼠,经小鼠尾部组织DNA分析,PCR法证明其中两只小鼠有N-LMP1基因扩增带,Southern杂交显示PCR阳性小鼠有... 本试验利用显微注射技术,制备鼻咽癌来源LMP1基因(N-LMP1)的转基因小鼠。共获得15只首建鼠,经小鼠尾部组织DNA分析,PCR法证明其中两只小鼠有N-LMP1基因扩增带,Southern杂交显示PCR阳性小鼠有特异的杂交信号,整合率为13.3%。N-LMP1转基因小鼠的建立为研究N-LMP1在鼻咽癌变过程中的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 EPSTEIN-BARR病毒 潜伏膜蛋白1 鼻咽癌 转基因小鼠 病因
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EB病毒BNLF-1基因研究的新进展 被引量:4
5
作者 蓝轲 《生命科学》 CSCD 2001年第1期18-22,46,共6页
EB病毒广泛存在于人群中,它的潜伏感染与鼻咽癌的发生密切相关。EBV在潜伏感染的过程中表达一种潜伏膜蛋白 1(LMP1),具有致瘤性,因此编码 LMP1的基因 BNLF-1被认为是 EBV的癌基因。BNLF-1基因具有广... EB病毒广泛存在于人群中,它的潜伏感染与鼻咽癌的发生密切相关。EBV在潜伏感染的过程中表达一种潜伏膜蛋白 1(LMP1),具有致瘤性,因此编码 LMP1的基因 BNLF-1被认为是 EBV的癌基因。BNLF-1基因具有广泛的生物学功能,在鼻咽癌的发生发展过程中起重要作用。近年的研究表明,鼻咽癌来源的EBV与标准株EBV比较存在相当的变异,而鼻咽癌来源的LMP1在致瘤性上也明显强于标准株LMP1。本文将综述BNLF-1基因生物学功能研究方面的新进展,并简要介绍变异型LMP1研究的新成果。 展开更多
关键词 EB病毒 鼻咽癌 潜伏膜蛋白1 疱疹病毒
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我们应如何面对“克隆人”
6
作者 蓝轲 姚开泰 《湖南医科大学学报(社会科学版)》 1999年第2期59-61,共3页
自从克隆羊“多利”报道以来 ,克隆羊技术成为人们关注的热点。克隆羊技术除了其在技术上的进步意义外 ,也引发了不少的伦理学问题。随着时间的推移 ,“克隆人”将有可能成为现实 ,必将对现行伦理学规范产生巨大的冲击。本文就伦理观念... 自从克隆羊“多利”报道以来 ,克隆羊技术成为人们关注的热点。克隆羊技术除了其在技术上的进步意义外 ,也引发了不少的伦理学问题。随着时间的推移 ,“克隆人”将有可能成为现实 ,必将对现行伦理学规范产生巨大的冲击。本文就伦理观念的更新问题展开讨论。 展开更多
关键词 克隆人 克隆技术 《中国肿瘤》 安乐死合法化 克隆羊 不孕症 伦理学问题 进步意义 生物学意义 器官移植
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鼻咽癌中生长因子细胞因子mRNA差异表达分析 被引量:4
7
作者 谢鹭 许亮国 +3 位作者 蓝轲 何志巍 李官成 姚开泰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期448-450,453,共4页
目的 :考察鼻咽癌中差异表达的生长因子 细胞因子 ,推测鼻咽癌发生中可能存在的免疫机制。方法 :采用cDNA阵列杂交技术 ,同时对 98个己知与肿瘤相关的生长因子 细胞因子在鼻咽癌、正常鼻咽组织及其他几种头颈部鳞癌中的mRNA表达水平... 目的 :考察鼻咽癌中差异表达的生长因子 细胞因子 ,推测鼻咽癌发生中可能存在的免疫机制。方法 :采用cDNA阵列杂交技术 ,同时对 98个己知与肿瘤相关的生长因子 细胞因子在鼻咽癌、正常鼻咽组织及其他几种头颈部鳞癌中的mRNA表达水平进行筛查 ,筛选出在鼻咽癌中差异表达的生长因子 细胞因子基因。结果 :在鼻咽癌中上调的基因包括 :早期生长应答蛋白 1,肝癌来源生长因子 ,白介素 1β ,血小板来源生长因子A链 ,干细胞因子 ,畸胎瘤来源生长因子 ,干扰素诱导肽、蛋白 ,干扰素调节因子及干扰素受体等 ;在鼻咽癌中下调的基因有 :TGF β 2等。 结论 :鼻咽癌细胞可能自分泌或促进分泌大量生长因子 ,鼻咽癌侵润淋巴细胞分泌的细胞因子主要为Th1细胞型。 展开更多
关键词 鼻咽癌 生长因子 细胞因子 CDNA阵列 MRNA
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一种快速检测启动子特异性的方法 被引量:2
8
作者 冯湘玲 蓝轲 +4 位作者 张玲 周文 史剑凌 刘卫东 姚开泰 《生命科学研究》 CAS CSCD 2001年第4期339-341,361,共4页
非洲爪蟾的受精卵体积大 ,易于操作 ,与转基因鼠比较 ,转基因爪蟾操作更是快速、经济、简便 ,是一种深受欢迎的脊椎动物模型 .利用绿色荧光蛋白 (GFP)的特性 ,与不同的基因启动子连接 ,并运用显微注射技术制备转基因蟾 .根据 GFP表达情... 非洲爪蟾的受精卵体积大 ,易于操作 ,与转基因鼠比较 ,转基因爪蟾操作更是快速、经济、简便 ,是一种深受欢迎的脊椎动物模型 .利用绿色荧光蛋白 (GFP)的特性 ,与不同的基因启动子连接 ,并运用显微注射技术制备转基因蟾 .根据 GFP表达情况 。 展开更多
关键词 启动子 绿色荧光蛋白 非洲爪蟾 显微注射 特异性 快速检测
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小鼠鼻咽部组织相对特异基因调控区的克隆与分析 被引量:2
9
作者 张玲 李虹 +7 位作者 谢鹭 蓝轲 韩为农 冯湘玲 何志巍 姚开泰 He Zhi YAO Kaitai 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期203-206,共4页
通过RT -PCR证实PLUNC基因在小鼠鼻咽部具有相对特异性表达。进一步用染色体步移的方法克隆该基因 5′端旁侧序列 847bp ,网上分析结果提示此序列具有调控活性 ,体外报道基因的研究亦证实这一结果。进一步的研究表明 ,其核心调控区位于... 通过RT -PCR证实PLUNC基因在小鼠鼻咽部具有相对特异性表达。进一步用染色体步移的方法克隆该基因 5′端旁侧序列 847bp ,网上分析结果提示此序列具有调控活性 ,体外报道基因的研究亦证实这一结果。进一步的研究表明 ,其核心调控区位于转录起始位点上游 2 0 0bp之内。这一工作将为构建鼻咽癌转基因动物提供良好的前提。 展开更多
关键词 鼻咽部组织 特异性表达 基因调控 鼻咽癌
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人多聚免疫球蛋白受体转基因鼠的建立 被引量:3
10
作者 吕丽春 何英 +6 位作者 蓝轲 沈新明 黄华 江培洲 王爽 徐守军 姚开泰 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第2期127-129,共3页
目的构建携带有多聚免疫球蛋白受体(pIgR)的转基因鼠,使其能以近乎自然的状态感染EBV,观察EBV在鼻咽部病变过程中的作用。方法采用角质上皮特异性启动子ED-L2调控的pIgR基因,用显微注射方法将其导入受精卵中,使该基因能在F0代转基因鼠... 目的构建携带有多聚免疫球蛋白受体(pIgR)的转基因鼠,使其能以近乎自然的状态感染EBV,观察EBV在鼻咽部病变过程中的作用。方法采用角质上皮特异性启动子ED-L2调控的pIgR基因,用显微注射方法将其导入受精卵中,使该基因能在F0代转基因鼠鼻咽部特异性表达。结果PCR检测F0代pIgR基因阳性率达37.5%(6/16),Southern杂交F0代pIgR基因阳性率为12.5%(2/16)。结论表达多聚免疫球蛋白受体的转基因动物有望成为研究EBV病毒致病机制的一种新的动物模型。 展开更多
关键词 多聚免疫球蛋白受体 转基因 EB病毒 鼻咽癌 疱疹病毒4型
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采用原位杂交及电镜检测CR2转染小鼠细胞的EB病毒感染
11
作者 任彩萍 蓝轲 +5 位作者 冯湘玲 许亮国 何志巍 刘卫东 王慧 姚开泰 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期1-6,共6页
EB病毒不能感染小鼠是因为小鼠CR2受体构像与人的不同。通过对小鼠CR2受体进行定点突变 ,然后将野生型和突变型小鼠CR2 / 1(MCR2 / 1)及人CR2 (hCR2 )用基因转移技术导入小鼠鼻咽上皮细胞系 (TMNE)进行表达 ,观察转染阳性细胞是否具有结... EB病毒不能感染小鼠是因为小鼠CR2受体构像与人的不同。通过对小鼠CR2受体进行定点突变 ,然后将野生型和突变型小鼠CR2 / 1(MCR2 / 1)及人CR2 (hCR2 )用基因转移技术导入小鼠鼻咽上皮细胞系 (TMNE)进行表达 ,观察转染阳性细胞是否具有结合EB病毒的能力。EBER - 1杂交结果显示 ,只有转染hCR2和突变型MCR2(mtMCR2 )的TMNE细胞可以感染EB病毒 ,但是前者感染EB病毒的阳性率比后者的高得多。电镜结果也进一步证实EB病毒可以感染这两种细胞。这为进一步研究EB病毒进入细胞的机制及建立EB病毒相关的鼻咽癌动物模型奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 EPSTEIN-BARR病毒 CR2基因 原位杂交 电镜观察 鼻咽癌
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小鼠补体受体Ⅱ型基因改造后感染EB病毒
12
作者 任彩萍 蓝轲 +3 位作者 刘卫东 何志巍 王慧 姚开泰 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第2期98-102,共5页
通过对小鼠补体受体Ⅱ型基因 (CR2 )进行定点突变 ,然后将野生型和突变型小鼠CR2 / 1(MCR2 / 1)及人CR2 (hCR2 )用电穿孔方法导入小鼠SP2 / 0进行表达 ,采用免疫组织化学等方法鉴定阳性细胞系。用EB病毒对转染阳性细胞进行感染 ,EBER 1... 通过对小鼠补体受体Ⅱ型基因 (CR2 )进行定点突变 ,然后将野生型和突变型小鼠CR2 / 1(MCR2 / 1)及人CR2 (hCR2 )用电穿孔方法导入小鼠SP2 / 0进行表达 ,采用免疫组织化学等方法鉴定阳性细胞系。用EB病毒对转染阳性细胞进行感染 ,EBER 1杂交结果显示 ,仅转染hCR2和突变型MCR2 (mtMCR2 )的SP2 / 0细胞感染了EB病毒 ,前者感染EB病毒的阳性率较后者高很多。这为进一步研究EB病毒进入细胞的机制及建立EB病毒相关的鼻咽癌动物模型奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 EPSTEIN-BARR病毒 补体受体Ⅱ型基因 基因突变 鼻咽癌 原位杂交 小鼠
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血小板生成素及其受体的信号传导
13
作者 蓝轲 《国外医学(临床生物化学与检验学分册)》 2000年第3期148-150,共3页
血小板生成素具有促进巨核细胞增殖、成熟、产生血小板的功能。为探讨其作用的分子机制,本文综述了近年来血小板生成素基因的结构、功能,对血小板生成素受体及JAK-STAT信号传导途径的作用研究中的新进展。
关键词 血小板生成素 血小板生成素受体 信号传导
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爪蟾用于启动子组织特异性表达检测的初步研究 被引量:2
14
作者 蓝轲 冯湘玲 《动物医学进展》 CSCD 2002年第2期57-58,共2页
本实验利用绿色荧光蛋白 ( GFP)与嗜上皮启动子 EDL 2连接 ,运用显微注射技术将EDL 2 -GFP注射入爪蟾受精卵以制备转基因蛙 ,根据 GFP在蛙体内的表达情况 。
关键词 启动子 绿色荧光蛋白 爪蟾 显微注射 组织特异性 表达 检测
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WST-1法用于抗恶性肿瘤药物筛选的实验研究 被引量:3
15
作者 蓝轲 范维珂 黄昕 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 1998年第3期225-229,共5页
WST-1是一种新型的四唑盐。它生成水溶性的有色物质。比色时不需额外的溶解步骤。在本研究中我们将WST,1用于胃癌细胞株SGC-7901的抗癌药物筛选试验。我们的研究表明:①最适细胞接种数0.5×104-1×... WST-1是一种新型的四唑盐。它生成水溶性的有色物质。比色时不需额外的溶解步骤。在本研究中我们将WST,1用于胃癌细胞株SGC-7901的抗癌药物筛选试验。我们的研究表明:①最适细胞接种数0.5×104-1×104/孔。②.WST-1显色法的最佳波长450nm。③.WST-1显色法重复性良好,组内变异系数为3.5%~8.7%。④WST-1法比MTT法敏感。⑤.WST-1法比MTT法简便。⑥.WST-1法用于抗癌药物筛选结果与MTT法具有良好的符合性。结果表明,WST-1法具有快速、简便的特点。是体外瘤株筛选抗癌新药和临床肿瘤药敏试验的可靠方法。 展开更多
关键词 WST-1法 MTT法 抗癌药 药物筛选
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转基因小鼠技术及其在肿瘤研究中的应用
16
作者 蓝轲 古柏燕 《动物医学进展》 CSCD 2002年第4期46-49,共4页
本文综述了近年来出现的一些转基因新方法 ,诸如精子载体法、核移植法及逆转录病毒法等 。
关键词 应用 转基因小鼠技术 肿瘤研究
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爱的四重奏——论元平诗歌的艺术特色
17
作者 蓝轲 《湖北科技学院学报》 1993年第1期82-84,共3页
第一次读元平的诗纯属偶然,正因为有这一次机巧。我便被元平的诗深深地吸引了。 那是一个很晴朗的日子,在蜀地某著名刊物担任副主编的一位同行寄来两本新近出版的杂志。我当时很高兴地将它们放入提包里,下班回到家里后,已是黄昏,我坐在... 第一次读元平的诗纯属偶然,正因为有这一次机巧。我便被元平的诗深深地吸引了。 那是一个很晴朗的日子,在蜀地某著名刊物担任副主编的一位同行寄来两本新近出版的杂志。我当时很高兴地将它们放入提包里,下班回到家里后,已是黄昏,我坐在椅子上仔细地翻阅,欣赏那一首首清新而又意蕴深远的诗歌作品,读着读着,我的目光在一首题为《扔出去的球》上反复徘徊起来。 展开更多
关键词 艺术特色 诗歌作品 元平 审美视角 当代诗坛 诗评家 创作情况 诗行 就这样 叙事性
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做遍自己想做的行当
18
作者 蓝轲 《上海科学生活》 2001年第4期34-34,共1页
在北京MTV全球音乐电视台主持人大搜索总决赛的比赛现场.主持人这样介绍10号选手兰宁羽:“唯一一位参加主持人大赛的CEO”。正就读于北京航空航天大学计算机系一年级的兰宁羽不仅涉足影视,组织自己的摇滚乐队.而且还是中国最年轻的... 在北京MTV全球音乐电视台主持人大搜索总决赛的比赛现场.主持人这样介绍10号选手兰宁羽:“唯一一位参加主持人大赛的CEO”。正就读于北京航空航天大学计算机系一年级的兰宁羽不仅涉足影视,组织自己的摇滚乐队.而且还是中国最年轻的CEO之一.他网站的名字就叫“一起音乐网”(www.17music.net). 展开更多
关键词 兰宁羽 音乐网站 创业 企业领导
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一个与人鼻咽癌相关新基因的克隆 被引量:21
19
作者 何志巍 谢鹭 +7 位作者 许亮国 蓝轲 刘卫东 张玲 任彩萍 史建凌 周文 姚开泰 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第11期1168-1173,共6页
利用高密度cDNA微阵列表达检测技术,筛选出在成人正常鼻咽组织高表达而在成人鼻咽低分化鳞状细胞癌组织中低表达的EST N27741,用 RT-PCR技术证实之,进而由该EST克隆出长度为1096bp的新基因.利用生物信... 利用高密度cDNA微阵列表达检测技术,筛选出在成人正常鼻咽组织高表达而在成人鼻咽低分化鳞状细胞癌组织中低表达的EST N27741,用 RT-PCR技术证实之,进而由该EST克隆出长度为1096bp的新基因.利用生物信息学分析发现,该序列含有完整的阅读框架,编码 256个氨基酸,在5’端起始密码子上游有终止密码子TAA,3’端有加尾信号AATAAA和 polyA尾.该新序列在非冗余的核酸序列数据库中比较,无同源的已知基因存在,被认为是一个新的与鼻咽癌相关的基因. 展开更多
关键词 鼻咽癌 基因克隆 致病基因 cDNA微阵列表达检测
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探索中科院高科技产业化之路——记上海杰事杰材料新技术公司
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作者 蓝轲 《瞭望》 北大核心 1995年第28期36-37,共2页
如何顺利实现科技成果的转化,发展高技术产业,中国科学院有关研究所和企业在进行着这方面的探索。其中,中科院化学所上海杰事杰材料新技术公司所走的转化之路颇具典型性。 现为“工程塑料国家工程研究中心上海基地”的上海杰事杰材料新... 如何顺利实现科技成果的转化,发展高技术产业,中国科学院有关研究所和企业在进行着这方面的探索。其中,中科院化学所上海杰事杰材料新技术公司所走的转化之路颇具典型性。 现为“工程塑料国家工程研究中心上海基地”的上海杰事杰材料新技术公司,创立短短两年里,从借贷60万元起步,到如今拥有资产2000余万,以其独特的创新模式和快速的成果转化机制,迅速地成为一家专业从事工程塑料及其制品的研究、开发及产业化的高技术企业。 工程塑料是从本世纪60年代开始发展的新型材料,其发展水平已成为衡量一个国家工业发达水平的重要指标之一,我国在该领域与世界先进国家相比差二十年左右。我国每年进口工程塑料达60万吨。 展开更多
关键词 工程塑料 高科技产业化 新技术 中科院 空调器 联营企业 技术公司 创新模式 国家工程研究中心 成果转化机制
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