以RBP-4为靶点的疫苗对2型糖尿病小鼠血糖降低的研究 被引量：4

1

作者 李彦涵 余柄廷 +5 位作者 孙静 李建芳 乌美妮 王海璇 胡云章 胡凝珠 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第10期46-50,I0006,共6页

目的探讨以人源RBP-4为靶标的疫苗免疫干预胰岛素抵抗的有效性和可行性,为2型糖尿病治疗新方法的推进提供基础研究数据。方法以T7噬菌体为载体表达人源RBP-4的疫苗经皮下免疫2型糖尿病小鼠,同时设空载体组和空白对照组,经2次免疫后在不... 目的探讨以人源RBP-4为靶标的疫苗免疫干预胰岛素抵抗的有效性和可行性,为2型糖尿病治疗新方法的推进提供基础研究数据。方法以T7噬菌体为载体表达人源RBP-4的疫苗经皮下免疫2型糖尿病小鼠,同时设空载体组和空白对照组,经2次免疫后在不同时间点检测体液免疫水平、空腹血糖值及体重,并于20周处死动物进行病理学切片检测。结果 RBP-4疫苗有效诱导了抗RBP-4 Ig G抗体的产生,并于12周达到峰值,同时,免疫组的空腹血糖值从第8周开始逐步下降,到第12周时较空载体组和空白组有显著差异,并始终维持在2型糖尿病发病值(7 mmol/L)以下。实验期间,2型糖尿病小鼠未出现蜷缩、竖毛、搔鼻、抽搐等明显异常,免疫组、空载体组小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏组织均未观察到明显病变,表明RBP-4疫苗安全性良好。结论 RBP-4疫苗能显著降低2型糖尿病小鼠的血糖,有可能成为治疗胰岛素抵抗的一个新突破点。 展开更多

关键词 2型糖尿病 RBP-4疫苗 DB/DB小鼠

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应用树鼩对硫酸乙酰肝素佐剂的安全性初步评价

2

作者 李彦涵 李建芳 +3 位作者 孙静 乌美妮 王海璇 胡云章 《实验动物与比较医学》 CAS 2017年第5期390-394,共5页

目的通过检测佐剂硫酸乙酰肝素(HS)对树鼩皮肤的刺激性反应以及佐剂与甲型肝炎减毒活疫苗(Hep A-1)联合免疫树鼩后主要组织器官的病理分析,探讨以树鼩作为动物模型进行安全性评价的可行性。方法根据给药次数和皮肤是否完整将树鼩随机分... 目的通过检测佐剂硫酸乙酰肝素(HS)对树鼩皮肤的刺激性反应以及佐剂与甲型肝炎减毒活疫苗(Hep A-1)联合免疫树鼩后主要组织器官的病理分析,探讨以树鼩作为动物模型进行安全性评价的可行性。方法根据给药次数和皮肤是否完整将树鼩随机分组,采用树鼩同体自身左右对比的方法进行皮肤刺激性实验。根据疫苗及佐剂种类将树鼩随机分组,采用皮下免疫方式,免疫后20周取主要组织器官制备病理切片,HE染色,观察主要组织器官病理学特征。结果佐剂HS单次及多次给药对树鼩完整皮肤组和破损皮肤组的受试部位均不产生红斑、水肿等刺激性变化。与对照组相比,HepA-1免疫组以及HepA-1联合HS免疫组的心、肝、脾、肺、肾及大脑组织病理观察,均未见明显异常。结论证实了以树鼩作为动物模型进行疫苗安全性评价的可行性,为以后疫苗及药物评估平台建设提供了基础数据。 展开更多

关键词 树鼩 硫酸乙酰肝素(Hs) 甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1) 皮肤刺激性实验 病理分析 安全性评价

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盐酸舍曲林对老年糖尿病焦虑抑郁患者的临床观察 被引量：7

3

作者 陆连生 陈娜 +3 位作者 史万英 李彦涵 马艳芬 杨爱从 《河北医药》 CAS 2011年第24期3780-3780,共1页

随着糖尿病患者的逐年增多,糖尿病合并焦虑抑郁也成为临床医生倍加关注的问题。糖尿病合并焦虑抑郁的原因除了社会心理原因外,还有神经内分泌的原因,抑郁障碍的病理生理机制涉及几种神经介质。对本院干部病房2010年1月至2010年12月应用... 随着糖尿病患者的逐年增多,糖尿病合并焦虑抑郁也成为临床医生倍加关注的问题。糖尿病合并焦虑抑郁的原因除了社会心理原因外,还有神经内分泌的原因,抑郁障碍的病理生理机制涉及几种神经介质。对本院干部病房2010年1月至2010年12月应用盐酸舍曲林治疗糖尿病伴发焦虑抑郁障碍老年患者40例的疗效观察进行总结,报告如下。 展开更多

关键词 盐酸舍曲林 糖尿病 焦虑抑郁 老年

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低分子量肝素钠佐剂对甲型肝炎病毒疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响 被引量：4

4

作者 王玮 余柄廷 +3 位作者 李建芳 李彦涵 刘丽君 胡凝珠 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第1期19-24,共6页

目的探讨低分子量肝素钠(low molecular weight heparin sodium,LMWH-Na)佐剂对甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法将ICR小鼠随机分成8组,6只/组,分别为甲型肝炎减毒活疫苗Hep A-l(18 EU)与5种... 目的探讨低分子量肝素钠(low molecular weight heparin sodium,LMWH-Na)佐剂对甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法将ICR小鼠随机分成8组,6只/组,分别为甲型肝炎减毒活疫苗Hep A-l(18 EU)与5种不同剂量(100μL,20μL,10μL,1μL,0.1μL)的低分子量肝素钠混合免疫小鼠作为实验组,并取生理盐水作为阴性对照组(Blank)、Hep A-l(18 EU)作为阳性对照组、Hep A-l混合Al(OH)3(300μg)作为铝佐剂对照组,共免疫一次,于免疫后第4、8、12、16周进行尾静脉采血,采用ELISA法检测小鼠血清中抗HAV抗原特异性Ig G抗体水平。在试验期间,对小鼠的健康状况进行观察,并于免疫16周后,取低分子量肝素钠最大剂量组100μL组及生理盐水组小鼠肾脏、脾脏、肝脏、肺脏、心脏各主要器官制作病理切片进行对比观察。结果除阴性对照组外,各组小鼠免疫后第4周后均产生抗-HAV Ig G,并随时间的延长抗体水平逐渐升高,于第8周达到最高值,此后逐渐下降。同一时间不同组的抗体水平不同。其中,第4周,第8周,铝佐剂对照组,低分子量肝素钠100μL组,低分子量肝素钠20μL组,低分子量肝素钠10μL组的抗体水平高于阳性对照组且差异具有统计学意义(P<0.05),第12周,铝佐剂对照组,低分子量肝素钠20μL组和低分子量肝素钠10μL组的抗体水平高于阳性对照组(P<0.05),第16周,铝佐剂对照组和低分子量肝素钠10μL组的抗体水平高于阳性对照组(P<0.05),但在整个实验期间,低分子量肝素钠各组的抗体水平都低于铝佐剂对照组的抗体水平。表明低分子量肝素钠可增强HAV抗原特异性体液免疫应答,具有佐剂效应,最佳剂量为10μL/组,但其佐剂效应低于铝佐剂效应。试验期间,各组小鼠均未出现异常。低分子量肝素钠100μL组小鼠肾、脾、肝、肺、心组织均未观察到病变。结论低分子量肝素钠可明显增强HAV抗原诱导小鼠的体液免疫应答,具有成为新型疫苗佐剂的研发价值。 展开更多

关键词 低分子量肝素钠 佐剂 甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-l) 体液免疫

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树鼩经甲型肝炎减毒活疫苗、乙型肝炎疫苗及联合硫酸乙酰肝素佐剂免疫后的免疫效果评价 被引量：2

5

作者 王东宝 胡云章 +3 位作者 胡凝珠 罕园园 匡德宣 李彦涵 《实验动物与比较医学》 CAS 2017年第2期113-117,共5页

目的探讨甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)、乙型肝炎疫苗(Hbv)以及HepA-1、Hbv分别与佐剂硫酸乙酰肝素(HS)联合对树鼩进行免疫后树鼩体液免疫应答的影响。方法按照疫苗种类、佐剂以及免疫途径将树鼩随机分组,同时设空白对照组,分别于末次免... 目的探讨甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)、乙型肝炎疫苗(Hbv)以及HepA-1、Hbv分别与佐剂硫酸乙酰肝素(HS)联合对树鼩进行免疫后树鼩体液免疫应答的影响。方法按照疫苗种类、佐剂以及免疫途径将树鼩随机分组,同时设空白对照组,分别于末次免疫后的4周、8周、12周、16周和20周尾静脉采血,用ELISA法检测树鼩血清中的特异性IgG抗体水平。结果除空白对照组外,实验组均在末次免疫的第四周检测到抗甲型肝炎病毒(HAV)及抗乙型肝炎病毒(HBV)抗体,抗体水平随着免疫时间延长而逐渐升高并于12周达到峰值,此后逐渐下降。同时,联合HS佐剂组的体液免疫效果均优于单纯疫苗免疫组。并且不同抗原以及联合佐剂采用不同的免疫途径免疫树鼩其免疫效果存在显著性差异。结论通过对树鼩进行疫苗免疫原性和增强免疫效果检测,证实以树鼩作为动物模型进行疫苗评价的可行性。 展开更多

关键词 树鼩 甲型肝炎减毒活疫苗(HepA—1) 乙型肝炎疫苗(Hbv) 硫酸乙酰肝素(HS) 体液免疫

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神奇的漫画书

6

作者 李彦涵 潘晓娟 《小学生作文选刊（中高年级）》 2011年第7期57-58,共2页

昏暗的路灯下，一本漫画书躺在路中间，书页被风吹得“哗哗”响。皎洁的月光洒在它身上，显得格外冷清。漫画书失落地躺在那儿，它是多么渴望有人将它捡起，可是好半天了，也没人正眼瞧过它。突然，一个黑黑瘦瘦的小女孩来到漫画书身边... 昏暗的路灯下，一本漫画书躺在路中间，书页被风吹得“哗哗”响。皎洁的月光洒在它身上，显得格外冷清。漫画书失落地躺在那儿，它是多么渴望有人将它捡起，可是好半天了，也没人正眼瞧过它。突然，一个黑黑瘦瘦的小女孩来到漫画书身边，她手里提着一个塑料袋，里面装着好多空瓶子。漫画书一看就明白了，漫不经心地瞧了她一眼， 展开更多

关键词 《神奇的漫画书》 小学生 作文 语文学习

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吲哚胺-2,3-双加氧酶抑制剂联合铝佐剂对甲型肝炎减毒活疫苗诱导小鼠体液免疫应答的效应分析 被引量：1

7

作者 何慧 李彦涵 +3 位作者 李建芳 马静 胡云章 胡凝珠 《实验动物与比较医学》 CAS 2017年第2期108-112,共5页

目的探讨吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)抑制剂INCB024360类似物与铝佐剂联合对甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)诱导小鼠体液免疫应答的影响,以评价其复合佐剂效应。方法分别将三种不同剂量的INCB024360类似物(150μg,100μg,50μg)与Al(OH)_3(30... 目的探讨吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)抑制剂INCB024360类似物与铝佐剂联合对甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)诱导小鼠体液免疫应答的影响,以评价其复合佐剂效应。方法分别将三种不同剂量的INCB024360类似物(150μg,100μg,50μg)与Al(OH)_3(300μg)复合后与HepA-1共同免疫ICR小鼠分别作为复合佐剂1组,2组,3组,同时设空白对照组、单纯疫苗组、铝佐剂对照组和单一INCB024360类似物(100μg)组,共免疫一次,于免疫后4周、8周、12周、16周进行尾静脉采血,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清抗甲型肝炎病毒(HAV)IgG抗体水平。结果除空白对照组外,各组小鼠免疫后4周、8周、12周、16周,均产生抗HAV IgG抗体,抗体水平随免疫时间的延长逐渐升高,于12周达到峰值。复合佐剂2组[HepA-118 EU+Al(OH)_3 300μg+INCB024360类似物100μg]产生的抗体水平最高且持续时间较长,在8周和12周时,其对HepA-1的免疫增强效应显著高于单一佐剂组以及铝佐剂对照组(P<0.05,t值分别为3.169、2.439)。4周、8周、12周、16周,单一佐剂组与单纯疫苗组差异均不具有统计学意义(P>0.05)。结论 IDO抑制剂INCB024360类似物与铝佐剂复合后具有较强的复合佐剂效应,免疫增强效应优于铝佐剂对照组;但是单一的INCB024360类似物不具有显著佐剂效应。 展开更多

关键词 吲哚胺-2 3-双加氧酶(ID0)INCB024360类似物 疫苗佐剂 甲型肝炎减毒活疫苗(HepA.1)体液免疫 佐剂效应

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EB病毒BHRF1基因慢病毒载体的构建及功能鉴定 被引量：2

8

作者 孙静 孙强明 +5 位作者 李建芳 李彦涵 乌美妮 廖芸 王晶晶 胡云章 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第6期1197-1201,共5页

目的:构建并制备能够有效表达EB病毒BHRF1基因的重组慢病毒载体,观察BHRF1表达对人胚肺成纤维细胞(KMB17)凋亡的影响。方法:采用RT-PCR法,从B95-8细胞扩增EBV BHRF1基因,克隆至pWPI GW慢病毒载体上,与pVSVG及pSPAX质粒共转染人胚肾293T... 目的:构建并制备能够有效表达EB病毒BHRF1基因的重组慢病毒载体,观察BHRF1表达对人胚肺成纤维细胞(KMB17)凋亡的影响。方法:采用RT-PCR法,从B95-8细胞扩增EBV BHRF1基因,克隆至pWPI GW慢病毒载体上,与pVSVG及pSPAX质粒共转染人胚肾293T细胞,包装出重组慢病毒。将纯化后的重组慢病毒直接感染293T和KMB17细胞,荧光显微镜、实时定量RT-PCR、免疫印迹等方法检测BHRF1在细胞中的表达水平。流式细胞仪检测BHRF1表达对凋亡诱导剂或无血清培养诱发KMB17细胞凋亡的影响。结果:重组慢病毒介导BHRF1在293T和KMB17细胞内获得表达,能有效地抑制KMB17细胞的凋亡。结论:成功构建了表达BHRF1基因的重组慢病毒载体。 展开更多

关键词 EB病毒 BHRF1 慢病毒载体 细胞凋亡

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介孔生物质基活性炭负载TiO2的光催化降解动力学研究 被引量：7

9

作者 李彦涵 梁淑芬 +3 位作者 刘孟浩 张争艳 蒋恩臣 简秀梅 《太阳能学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第7期17-25,共9页

采用介孔生物质基活性炭作为载体负载TiO2,研究载体比表面积、不同煅烧温度、不同负载比例下的载体负载TiO2光催化剂对光催化降解水体有机污染物亚甲基蓝的影响,通过比表面积测试法(BET)、扫描电子显微镜(SEM)和X射线衍射(XRD)分析手段... 采用介孔生物质基活性炭作为载体负载TiO2,研究载体比表面积、不同煅烧温度、不同负载比例下的载体负载TiO2光催化剂对光催化降解水体有机污染物亚甲基蓝的影响,通过比表面积测试法(BET)、扫描电子显微镜(SEM)和X射线衍射(XRD)分析手段对其表面形貌和晶体结构进行表征。结果表明,载体的比表面积和孔隙结构与光催化反应效果呈正向影响关系,当活性炭与TiO2质量比为1.3∶1,煅烧温度为500℃时的样品(记为1.3AC4@1TiO2-500)比表面积为460.10 m2/g,对亚甲基蓝溶液的光催化降解量可达到24.06 mg/g。光催化剂煅烧温度与TiO2锐钛晶型的完善程度和晶粒尺寸呈正向影响关系,因而提高煅烧温度可增强光催化反应效果,当活性炭与TiO2质量比为1.3∶1,煅烧温度为700℃时的样品(记为1.3AC4@1TiO2-700)对亚甲基蓝溶液的光催化降解量可达到26.72 mg/g。活性炭负载比例与光催化反应效果呈正向影响关系,活性炭负载比例的增加可促进TiO2光生载流子的分离,增强光电流响应强度,从而提高光催化活性。拟合结果表明,采用介孔生物质基活性炭负载TiO2对亚甲基蓝的光催化反应可用伪一级动力学方程较好表示。 展开更多

关键词 光催化 TIO2 有机污染物 介孔材料 生物质 活性炭

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松子壳基活性炭光催化剂的制备及其催化性能研究 被引量：3

10

作者 王家旻 梁淑芬 +4 位作者 李彦涵 冯韵 孙焱 蒋恩臣 简秀梅 《可再生能源》 CAS 北大核心 2020年第1期8-12,共5页

为了提高TiO2光催化剂对水体有机污染物的降解能力,将松子壳基活性炭作为载体负载TiO2,研究载体比表面积、载体与TiO2的复合比例以及煅烧温度对复合光催化剂降解水体有机污染物亚甲基蓝的影响。通过BET,XRD,FTIR和SEM分析方法对复合光... 为了提高TiO2光催化剂对水体有机污染物的降解能力,将松子壳基活性炭作为载体负载TiO2,研究载体比表面积、载体与TiO2的复合比例以及煅烧温度对复合光催化剂降解水体有机污染物亚甲基蓝的影响。通过BET,XRD,FTIR和SEM分析方法对复合光催化剂的比表面积、晶体结构、有机官能团和表面形貌进行了表征。研究结果表明:适当的增加载体的比表面积,有利于Ti O2的负载和复合光催化剂催化活性的提高;当活化水量为1.5 mL/min时,在充分的水蒸气活化反应下,松子壳炭可制备成比表面积为634.65 m^2/g的活性炭,使其负载TiO2后具有较好的亚甲基蓝吸附作用和光降解作用;当TiO2与活性炭的质量比为0.8∶1时,复合光催化剂的催化效果较好;当煅烧温度为450℃时,复合光催化剂具有较优的催化效果,降解率可达77.10%。 展开更多

关键词 光催化 活性炭负载 TIO2 比表面积 亚甲基蓝

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EB病毒转化B淋巴细胞建立的永生细胞株长期传代遗传稳定性的研究 被引量：2

11

作者 李彦涵 黄小琴 +5 位作者 林克勤 陶玉芬 易文 姚宇峰 史磊 褚嘉祐 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期276-279,共4页

目的研究EB病毒转化外周血B淋巴细胞建成的永生细胞株在传代过程中遗传特性是否发生改变。方法对10株永生细胞株进行30代的长期传代培养，采用染色体显带、微卫星DNA及端粒酶活性检测技术，观察不同传代次数的永生细胞株二倍性、染色体... 目的研究EB病毒转化外周血B淋巴细胞建成的永生细胞株在传代过程中遗传特性是否发生改变。方法对10株永生细胞株进行30代的长期传代培养，采用染色体显带、微卫星DNA及端粒酶活性检测技术，观察不同传代次数的永生细胞株二倍性、染色体核型、微卫星DNA及端粒酶活性的改变。结果永生细胞株在30代以内，在染色体二倍性、核型、微卫星DNA方面保持稳定，未检测出端粒酶活性。结论经EB病毒转化的永生细胞株在有限代次内遗传特征是稳定的。 展开更多

关键词 永生细胞株 染色体二倍性 微卫星DNA 端粒酶活性 遗传稳定性

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KMB-17细胞株的遗传稳定性 被引量：5

12

作者 黄小琴 李彦涵 +4 位作者 陶玉芬 林克勤 易文 史荔 褚嘉祐 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期150-152,共3页

目的研究连续传代的KMB-17细胞株的遗传稳定性。方法将第23代KMB-17细胞连续传代至60代,按常规染色体分析方法,观察不同代次细胞的染色体数目和结构变化。选取核基因组和线粒体基因组中高突变的15个STR位点,经PCR扩增和电泳分析微卫星... 目的研究连续传代的KMB-17细胞株的遗传稳定性。方法将第23代KMB-17细胞连续传代至60代,按常规染色体分析方法,观察不同代次细胞的染色体数目和结构变化。选取核基因组和线粒体基因组中高突变的15个STR位点,经PCR扩增和电泳分析微卫星不稳定性。结果KMB-17细胞株经连续传代培养至56代仍未发生染色体数目和结构改变,微卫星位点也未发生突变。结论KMB-17细胞株连续传代培养后,仍能保持细胞生物学特征及遗传特征的稳定,40代以前的细胞作为疫苗生产基质是安全的。 展开更多

关键词 KMB-17细胞 遗传稳定性 STR位点 染色体

原文传递

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸与氢氧化铝联合佐剂对HBsAg诱导小鼠体液免疫应答的影响 被引量：3

13

作者 王琳 王海漩 +3 位作者 李建芳 李彦涵 胡凝珠 胡云章 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第9期1143-1146,共4页

目的研究烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)与氢氧化铝联合佐剂对HBsAg诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法将NAD与氢氧化铝按不同剂量联合后,与不同剂量的HBsAg混合,分别经肌肉注射免疫ICR小鼠1针或2针(间隔2... 目的研究烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)与氢氧化铝联合佐剂对HBsAg诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法将NAD与氢氧化铝按不同剂量联合后,与不同剂量的HBsAg混合,分别经肌肉注射免疫ICR小鼠1针或2针(间隔2周),每只注射0.2 ml,并设阴性对照组(生理盐水)、单纯抗原对照组、单纯铝佐剂对照组和单纯NAD对照组,共23组,每组6只。分别于末次免疫后2、4、6、8、10、12周采血,分离血清,采用ELISA法检测小鼠血清中抗HBsAg IgG水平;试验期内,观察小鼠是否发生异常状况;14周后,取最佳剂量免疫组及阴性对照组小鼠心、肝、脾、肺组织做组织切片,进行病理分析。结果阴性对照组在各时间点均未检测到抗HBsAg IgG抗体,除联合佐剂12组外,其余各组血清抗HBsAg IgG抗体水平均在末次免疫后第6周达峰值,随着时间的延长,抗体水平呈下降趋势;联合佐剂14组(HBsAg 2μg+氢氧化铝100μg+NAD 2.5μg)产生的抗体水平最高,且持续时间较长,其对HBsAg的体液免疫增强效应显著优于单纯抗原对照组、单纯铝佐剂对照组及单纯NAD佐剂对照组(P<0.05)。试验期内,各组小鼠均未出现异常反应;最佳剂量免疫组(14组)及阴性对照组组织切片观察结果显示,均为发生病变。结论 NAD与氢氧化铝联合佐剂能显著增强HBsAg诱导的小鼠特异性体液免疫应答,在免疫剂量范围内,联合佐剂安全性良好。 展开更多

关键词 NAD 氢氧化铝 佐剂 乙型肝炎表面抗原 体液免疫应答

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壳寡糖佐剂对甲型肝炎病毒疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响 被引量：1

14

作者 李萍 孙静 +7 位作者 王陈芸 李彦涵 李建芳 乌美妮 王海漩 余柄廷 胡凝珠 胡云章 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第5期475-478,共4页

目的探讨壳寡糖(chitooligosaccharide,COS)佐剂对甲型肝炎病毒(hapatitis A virus,HAV)疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法将ICR小鼠随机分成9组:甲型肝炎减毒活疫苗Hep A-l 18 EU+不同剂量COS(100μg、500μg、1 mg、2.5 mg、5 mg... 目的探讨壳寡糖(chitooligosaccharide,COS)佐剂对甲型肝炎病毒(hapatitis A virus,HAV)疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法将ICR小鼠随机分成9组:甲型肝炎减毒活疫苗Hep A-l 18 EU+不同剂量COS(100μg、500μg、1 mg、2.5 mg、5 mg、10 mg)组、阴性对照组(生理盐水)、抗原对照组(Hep A-l 18 EU)和铝佐剂对照组[Hep A-l18 EU+Al(OH)3200μg],每组6只,各组均经皮下注射ICR小鼠,200μl/只。于免疫后的第4、8、12和16周,采用间接ELISA法检测小鼠血清中抗-HAV特异性Ig G抗体水平。在实验期间,观察小鼠的健康状况,并于免疫16周后,取COS最佳剂量组及阴性对照组小鼠肾脏、脾脏、肝脏、肺脏、心脏组织,制备病理切片,进行对比观察。结果除阴性对照组外,各组小鼠免疫4周后均产生抗-HAV Ig G抗体,并随着时间的延长呈上升趋势,在第8周时均达峰值,随后逐渐下降;COS 2.5 mg、5 mg和10 mg组小鼠血清在各时期的抗体水平均显著高于抗原对照组和铝佐剂对照组(P<0.05),且能维持较长时间,至16周抗体水平仍与铝佐剂对照组相当,差异无统计学意义(P>0.05),其中COS5 mg组在整个试验过程中产生的抗体水平均最高,且与2.5 mg组峰值水平差异有统计学意义(P<0.05),与10 mg组水平相当,至免疫后16周,COS 5 mg组与10 mg组抗体水平差异有统计学意义(P<0.05)。COS最佳剂量为5 mg/只。试验期内,观察小鼠各项生理指标未见异常,COS 5 mg组小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏组织均未观察到病变。结论 COS可显著增强HAV疫苗诱导小鼠的体液免疫应答,有望开发为一种可替代铝佐剂的新型佐剂。 展开更多

关键词 壳寡糖 佐剂 甲型肝炎病毒疫苗 体液免疫

原文传递

广谱流感噬菌体微球疫苗对豚鼠的免疫保护作用

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作者 王海漩 乌美妮 +7 位作者 汤洋 李建芳 李彦涵 胡云章 赵蕊蕊 沈霏 段志青 胡凝珠 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第8期942-944,共3页

目的探讨广谱流感噬菌体微球疫苗对分别感染H3N2、H1N1和B型流感病毒豚鼠的免疫保护作用。方法以广谱流感噬菌体微球疫苗免疫豚鼠,1个月后采血,间接ELISA法检测豚鼠血清中抗流感病毒IgG抗体的滴度;并于采血后3 d,经滴鼻途径分别攻击3个... 目的探讨广谱流感噬菌体微球疫苗对分别感染H3N2、H1N1和B型流感病毒豚鼠的免疫保护作用。方法以广谱流感噬菌体微球疫苗免疫豚鼠,1个月后采血,间接ELISA法检测豚鼠血清中抗流感病毒IgG抗体的滴度;并于采血后3 d,经滴鼻途径分别攻击3个型别的流感病毒,攻击后3 d,检测豚鼠鼻腔洗液和肺组织中的病毒滴度。结果免疫豚鼠血清中均能检测出抗H1N1、H3N2和B型流感毒株的IgG抗体;分别以H3N2、H1N1和B型流感病毒攻击后3 d,在疫苗组豚鼠鼻腔洗液中检出少量病毒,而肺组织中则未检出,空白对照组豚鼠鼻腔洗液和肺组织中均检出较大量的流感病毒。结论广谱流感噬菌体微球疫苗对感染H3N2、H1N1和B型流感病毒的豚鼠均具有一定的免疫保护效果。 展开更多

关键词 流感疫苗 流感病毒A型 H3N2亚型 流感病毒A型 H1N1亚型 流感病毒B型 噬菌体 豚鼠

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重组人LIF融合蛋白表达纯化及其活性鉴定

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作者 孙静 王斌 +4 位作者 段志青 胡凝珠 李建芳 李彦涵 胡云章 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期50-55,共6页

目的:原核表达重组hLIF融合蛋白并进行诱导表达、纯化及活性鉴定。方法:将hLIF基因克隆至pThioHisA载体,构建融合表达载体pThioHisA-hLIF,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经亲和层析后,Western blot检测目的蛋白的特异性... 目的:原核表达重组hLIF融合蛋白并进行诱导表达、纯化及活性鉴定。方法:将hLIF基因克隆至pThioHisA载体,构建融合表达载体pThioHisA-hLIF,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经亲和层析后,Western blot检测目的蛋白的特异性。用小鼠胚胎干细胞脱饲养层培养对纯化后的重组hLIF融合蛋白进行生物活性的鉴定。结果:降低诱导温度和延长诱导时间能增加hLIF融合蛋白的可溶性表达,纯化后的重组蛋白纯度大于95%,Western blot检测显示了良好的特异性。在脱饲养层细胞培养条件下,添加纯化的hLIF融合蛋白能够有效的维持小鼠胚胎干细胞的未分化状态。结论:重组hLIF融合蛋白可在大肠杆菌中高效表达,具有良好的特异性,为干细胞研究及hLIF蛋白的其他功能研究奠定了基础。 展开更多

关键词 重组人LIF融合蛋白 原核表达 纯化 小鼠胚胎干细胞 生物活性鉴定

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采用活体成像技术快速评价DNA疫苗载体在小鼠体内的表达

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作者 孙静 施建东 +7 位作者 侯爵 乌美妮 郝彦玲 胡凝珠 李彦涵 李建芳 王海漩 胡云章 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第8期870-874,共5页

目的采用活体成像技术快速评价DNA疫苗载体在小鼠体内的表达,为DNA疫苗载体的应用和改造提供参考。方法分别构建含有萤火虫荧光素酶基因(luciferase)及HIV-1CN54Gag基因DNA,且携带不同转录调控元件(posttranscriptional regulatory elem... 目的采用活体成像技术快速评价DNA疫苗载体在小鼠体内的表达,为DNA疫苗载体的应用和改造提供参考。方法分别构建含有萤火虫荧光素酶基因(luciferase)及HIV-1CN54Gag基因DNA,且携带不同转录调控元件(posttranscriptional regulatory element)HPRE/WPRE的疫苗载体(p DRVI1.0Luc、p DRVI1.0HLuc、p DRVI1.0WLuc、p DRVI1.0Gag、p DRVI1.0HGag和p DRVI1.0WGag),均经后肢胫骨前肌注射BALB/c小鼠,20μg/只。p DRVI-1.0Luc、p DRVI1.0HLuc和p DRVI1.0WLuc组仅免疫1次,于免疫后第1、7、14天采用活体成像技术检测小鼠体内荧光表达强度;p DRVI1.0Gag、p DRVI1.0HGag和p DRVI1.0WGag组分别于第0、2、4周进行免疫,于末次免疫后第2周进行体液(ELISA法)及细胞免疫检测(ELISPOT法)。结果 p DRVI1.0Luc、p DRVI1.0HLuc、p DRVI1.0WLuc组小鼠于免疫后第1及7天,体内荧光均局限分布于注射部位,未出现扩散转移的现象,且p DRVI1.0HLuc质粒发光强度最强(P<0.05),免疫第14天各组均未检测到明显的荧光素酶表达;p DRVI1.0HGag组小鼠血清中抗Gag蛋白特异性抗体水平和Gag蛋白特异的分泌IFNγ的脾淋巴细胞数均明显高于p DRVI1.0Gag和p DRVI1.0WGag组(P<0.05)。结论活体成像技术可用于快速评价DNA疫苗载体在小鼠体内的表达,为DNA疫苗载体改造及免疫策略的优化提供了一个良好的研究平台。 展开更多

关键词 活体成像 DNA疫苗

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氢氧化铝与黄连碱复合佐剂对甲肝疫苗诱导小鼠体液免疫影响 被引量：3

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作者 李思瑾 胡凝珠 +4 位作者 李彦涵 马静 何慧 乌美妮 胡云章 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期734-736,共3页

目的探讨氢氧化铝与黄连碱复合佐剂对甲肝疫苗诱导小鼠体液免疫的影响。方法选取6~8周龄雌性ICR小鼠49只,随机分为空白组、单纯抗原组、单纯黄连碱佐剂组、铝佐剂组及复合佐剂低、中、高剂量组,每组7只;在免疫后第4、8、12、16周,采用... 目的探讨氢氧化铝与黄连碱复合佐剂对甲肝疫苗诱导小鼠体液免疫的影响。方法选取6~8周龄雌性ICR小鼠49只,随机分为空白组、单纯抗原组、单纯黄连碱佐剂组、铝佐剂组及复合佐剂低、中、高剂量组,每组7只;在免疫后第4、8、12、16周,采用间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠分离血清中的抗HAV IgG抗体水平。结果在免疫后第4、8、12、16周,除空白组外,各组小鼠均能检测到抗HAV IgG抗体,且抗体水平随免疫后时间的延长均先升高而后降低;在免疫后第12周,各组小鼠血清中抗HAV IgG抗体水平达到峰值,单纯抗原组、单纯黄连碱佐剂组、铝佐剂组及复合佐剂低、中、高剂量组小鼠分别为log_(10)(2.908±0.413)、log_(10)(2.960±0.315)、log_(10)(3.460±0.295)、log_(10)(3.460±0.351)、log_(10)(3.470±0.251)、log_(10)(3.470±0.251);在免疫后第4周,复合佐剂低剂量组小鼠抗HAV IgG抗体水平均高于单纯抗原组和单纯黄连碱佐剂组(均P<0.05);在免疫后第8、12、16周,复合佐剂低、中、高剂量组小鼠抗HAV IgG抗体水平均高于单纯抗原组和单纯黄连碱佐剂组(均P<0.05);在免疫后第12周,铝佐剂组小鼠抗HAV IgG抗体水平均高于单纯抗原组和单纯黄连碱佐剂组(均P<0.05);在免疫后第16周,铝佐剂组小鼠抗HAV IgG抗体水平高于单纯抗原组(P<0.05)。结论适当配比的黄连碱和氢氧化铝复合佐剂可快速、显著提高甲肝疫苗诱导小鼠的体液免疫应答,有望成为一种新的人用疫苗佐剂。 展开更多

关键词 氢氧化铝 黄连碱 复合佐剂 甲肝疫苗 体液免疫 影响

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硫酸软骨素B佐剂对甲型肝炎病毒疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响 被引量：1

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作者 王陈芸 孙静 +7 位作者 李萍 余柄廷 李建芳 李彦涵 王海漩 乌美妮 胡凝珠 胡云章 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第4期344-347,共4页

目的探讨硫酸软骨素B(chondroitin sulfate B,CSB)佐剂对甲型肝炎病毒((hepatitis A virus,HAV)疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响,以评价其佐剂效果。方法将ICR小鼠随机分成9组:甲型肝炎减毒活疫苗Hep A-l18 EU+不同剂量CSB(5、25、45、6... 目的探讨硫酸软骨素B(chondroitin sulfate B,CSB)佐剂对甲型肝炎病毒((hepatitis A virus,HAV)疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响,以评价其佐剂效果。方法将ICR小鼠随机分成9组:甲型肝炎减毒活疫苗Hep A-l18 EU+不同剂量CSB(5、25、45、65、85、105μg)组、阴性对照组(生理盐水)、抗原对照组(Hep A-l 18 EU)和铝佐剂对照组[Hep A-l 18 EU+Al(OH)3300μg],每组8只,各组均经皮下注射ICR小鼠,200μl/只。于免疫后的第4、8、12和16周,采用间接ELISA法检测小鼠血清中抗-HAV特异性Ig G抗体水平。在实验期间,观察小鼠的健康状况,并于免疫16周后,取CSB 65μg组及阴性对照组小鼠肾脏、脾脏、肝脏、肺脏、心脏各主要器官,制备病理切片,进行对比观察。结果各组小鼠免疫后第4、8、12、16周,均产生抗-HAV Ig G抗体,除阴性对照组外,抗体水平均随时间的延长逐渐升高,于第8周达峰值,此后逐渐下降。CSB 65μg组抗体可长时间维持在高水平,至免疫后第12、16周,均高于抗原对照组(P<0.05),略高于铝佐剂对照组,最佳浓度为65μg/只。实验期间,各组小鼠均未出现异常;CSB65μg组小鼠肾脏、脾脏、肝脏、肺脏、心脏组织均未观察到病变。结论 CSB可明显增强HAV抗原诱导小鼠的体液免疫应答,具有成为新型疫苗佐剂的研发价值。 展开更多

关键词 硫酸软骨素B 佐剂 甲型肝炎病毒疫苗 体液免疫

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疫苗用氢氧化铝佐剂质量标准的初步建立 被引量：4

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作者 肖詹蓉 张娜 +7 位作者 潘殊男 杨溢尧 艾绪露 李彦涵 许文婷 孙宏亮 吴永林 杨明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第7期721-725,731,共6页

目的建立疫苗用氢氧化铝佐剂的质量标准。方法参照《欧洲药典》8.0和《中国药典》四部(2015版),选择5个实验室对6个厂家12批氢氧化铝佐剂样品同时进行17个理化项目的检测及分析,建立适合国内氢氧化铝佐剂的质量标准。结果初步建立了疫... 目的建立疫苗用氢氧化铝佐剂的质量标准。方法参照《欧洲药典》8.0和《中国药典》四部(2015版),选择5个实验室对6个厂家12批氢氧化铝佐剂样品同时进行17个理化项目的检测及分析,建立适合国内氢氧化铝佐剂的质量标准。结果初步建立了疫苗用氢氧化铝佐剂17项质量标准。经5个实验室检测,12批样品外观、溶解性能、鉴别试验、无菌、吸附率、硫酸盐含量、硝酸盐含量、铵盐含量、砷盐含量、铁盐含量、重金属含量、氯化钠含量、氯化物含量及细菌内毒素的结果均符合《欧洲药典》8. 0和《中国药典》四部(2015版)相关质量标准;而p H值、铝含量、沉降率检测结果不同厂家之间差异较大。结论建立了适合国内氢氧化铝佐剂的质量评价体系,为氢氧化铝佐剂的质量标准进入2015版《中国药典》增补版提供了方法细则和标准制定依据。 展开更多

关键词 疫苗 氢氧化铝 佐剂 质量标准

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