黑质内炎症反应对恒河猴多巴胺能神经元的毒性作用 被引量：2

1

作者 户乃丽 刘玉军 +1 位作者 徐群渊 张进禄 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期732-736,共5页

目的观察恒河猴黑质内脂多糖注射对多巴胺能神经元的损伤和小胶质细胞的激活以及炎性因子的释放情况,探讨脑内炎症反应在黑质多巴胺能神经元变性过程中的作用。方法成年恒河猴8只,分为急性实验组(3只)与慢性实验组(5只)。急性组单侧黑... 目的观察恒河猴黑质内脂多糖注射对多巴胺能神经元的损伤和小胶质细胞的激活以及炎性因子的释放情况,探讨脑内炎症反应在黑质多巴胺能神经元变性过程中的作用。方法成年恒河猴8只,分为急性实验组(3只)与慢性实验组(5只)。急性组单侧黑质脂多糖注射后存活1周。通过免疫印迹方法观察酪氨酸羟化酶(TH)表达量变化与炎性因子的释放情况。慢性组按注射后存活时间及注射药物的不同分为脂多糖注射后存活24周、48周和生理盐水注射后存活48周。上述5只动物于存活前0周、8周、16周,向右侧黑质分3次注射脂多糖或生理盐水。术后用免疫组织化学染色及高效液相色谱法观察黑质TH阳性神经元的变化和纹状体神经递质含量的改变。结果急性实验组注射侧与对照侧TH表达量无明显差异,但注射侧可见小胶质细胞活化,人类白细胞DR抗原表达量上调并有大量肿瘤坏死因子α、白介素1β、环氧化酶2(COX-2)生成。慢性实验组单侧黑质脂多糖注射24周和48周后,各个动物注射侧黑质阳性神经元数量以及纹状体神经递质含量有不同程度的减少,而生理盐水注射动物无变化。结论脂多糖注射后在1周内可引起黑质剧烈的炎症反应,但这种病理过程并不伴随大量多巴胺能神经元死亡。随病程的发展,炎症反应能引起恒河猴黑质多巴胺能神经元慢性进行性的损伤。该病理过程较好模拟了帕金森病的发病特点。 展开更多

关键词 脂多糖 黑质 炎性因子 神经递质 免疫组织化学 免疫印迹法 高压液相色谱法 恒河猴

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用7-AAD检测细胞DNA含量的流式细胞技术

2

作者 户乃丽 邹林樾 徐晓雪 《继续医学教育》 2011年第2期90-92,共3页

目的:探索利用荧光染料7-AAD检测细胞DNA含量的流式细胞技术。方法:利用7-AAD和PI两种荧光染料标记小鼠胸腺T淋巴细胞,通过流式细胞仪检测其G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较2种方法测定结果。结果:通过流式细胞仪对细胞周期进行分... 目的:探索利用荧光染料7-AAD检测细胞DNA含量的流式细胞技术。方法:利用7-AAD和PI两种荧光染料标记小鼠胸腺T淋巴细胞,通过流式细胞仪检测其G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较2种方法测定结果。结果:通过流式细胞仪对细胞周期进行分析显示:用7-AAD和PI两种荧光染料标记的小鼠胸腺T淋巴细胞呈现完整的细胞周期,G0/G1期细胞含量为73.2%±1.93%、73.9%±1.79%,S期细胞含量为23.6%±1.04%、22.6%±1.50%,G2/M期细胞含量为3.2%±0.28%、3.5%±0.21%,两种标记方法测定结果基本一致。结论:本文探讨的7-AAD染色检测DNA含量法与常用的PI标记法相比较结论一致,且操作上更为简单快捷,是一种值得推广的DNA周期分析染色方法。 展开更多

关键词 流式细胞术 DNA 细胞周期 7-AAD

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两种碘化丙啶染色DNA定量方法检测HL-60细胞凋亡结果的比较 被引量：2

3

作者 徐晓雪 户乃丽 +1 位作者 孙丽娜 孔璐 《首都医科大学学报》 CAS 2014年第6期823-826,共4页

碘化丙啶（propidium iodide,PI）是插入性核酸染料,直接插入双链核酸的2个碱基对之间,每5个碱基插入1个荧光分子,与核酸的结合均匀、稳定。细胞经过 RNA 酶处理后,PI 可以与细胞内 DNA 特异性结合,在流式细胞仪上经488 nm 激光激发,发... 碘化丙啶（propidium iodide,PI）是插入性核酸染料,直接插入双链核酸的2个碱基对之间,每5个碱基插入1个荧光分子,与核酸的结合均匀、稳定。细胞经过 RNA 酶处理后,PI 可以与细胞内 DNA 特异性结合,在流式细胞仪上经488 nm 激光激发,发出峰值610~620 nm 的荧光,可以准确的反映细胞群体中DNA 含量的分布情况,适用于 DNA 定量检测。 展开更多

关键词 HL-60细胞凋亡 碘化丙啶染色 定量检测 DNA 定量方法 双链核酸 特异性结合 流式细胞仪

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407nm激光流式细胞仪检测小鼠骨髓侧群细胞效果研究 被引量：1

4

作者 徐晓雪 邓君 +1 位作者 邹林樾 户乃丽 《继续医学教育》 2011年第11期63-66,共4页

流式细胞仪分选Hoechst 33342拒染侧群细胞是获得高纯度干细胞的重要方法,但由于检测技术单一,实验受客观条件限制大,无法广泛开展,本研究探讨了一种利用紫色激光和适当接收通道代替紫外激光检测侧群细胞的新方法,通过比较利血平阻断染... 流式细胞仪分选Hoechst 33342拒染侧群细胞是获得高纯度干细胞的重要方法,但由于检测技术单一,实验受客观条件限制大,无法广泛开展,本研究探讨了一种利用紫色激光和适当接收通道代替紫外激光检测侧群细胞的新方法,通过比较利血平阻断染料排出前后的检测结果验证这一方法的可靠性,结果提示此方法可以有效识别侧群细胞,可以作为紫外检测的替代方法。 展开更多

关键词 流式细胞术 干细胞 侧群细胞 407nm激光

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鸡红细胞标准品在胶质瘤细胞DNA周期检测中的意义 被引量：1

5

作者 邹林樾 徐晓雪 户乃丽 《继续医学教育》 2015年第10期152-153,共2页

目的自制鸡红细胞标准品在脑胶质瘤细胞周期检测中的应用。方法选2例病理2级和2例4级脑胶质瘤患者术中切除的新鲜肿瘤组织提取单细胞悬液,加入自制鸡红细胞做内参,70%乙醇过夜,用PI荧光染料标记细胞,用流式细胞仪检测DNA含量。结果鸡红... 目的自制鸡红细胞标准品在脑胶质瘤细胞周期检测中的应用。方法选2例病理2级和2例4级脑胶质瘤患者术中切除的新鲜肿瘤组织提取单细胞悬液,加入自制鸡红细胞做内参,70%乙醇过夜,用PI荧光染料标记细胞,用流式细胞仪检测DNA含量。结果鸡红细胞替代正常二倍体细胞与肿瘤细胞同时染色,4例脑胶质瘤DNA检测结果为1例2级患者可见肿瘤细胞和鸡红细胞G0/G1期峰荧光道数值分别为83.411和27.779,DI值1.000 9;另1例2级患者为82.545和27.811,DI值0.989 4。1例胶质瘤WHO 4级患者肿瘤细胞和鸡红细胞G0/G1期峰道数值分别为87.562和26.275,DI值1.111 0。这3例患者的DNA直方图上除鸡红细胞G0/G1期峰外只见1个患者细胞的G0/G1期峰。另1例胶质瘤WHO 4级患者直方图上可见鸡红细胞和三个倍体峰,G0/G1期峰道数值分别为81.682、96.075、120.243和23.806,DI值分别为1.143 7、1.345 2、1.686 1。结论鸡红细胞为内参,可以准确计算并识别脑胶质瘤细胞DNA各个倍体,甚至内参照是计算DI值必不可少的参照物。这4例DNA周期分析结果和病理结果完全吻合,是一种客观的辅助诊断手段,可以推广至各种肿瘤的检测中,并可用于仪器的评估和校准。 展开更多

关键词 流式细胞术 鸡红细胞 脑胶质瘤 DNA

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鸡红细胞标准品制备及其在流式细胞仪DNA周期检测中的应用 被引量：1

6

作者 邹林樾 徐晓雪 户乃丽 《继续医学教育》 2013年第2期52-55,共4页

目的:制备鸡红细胞标准品并探索其在流式细胞仪DNA周期检测中的应用。方法:采集鸡红细胞制成纯净红细胞,然后用乙醇固定,放于4℃冰箱备用。用PI荧光染料标记鸡红细胞和分别加入鸡红细胞的人结肠癌细胞SW480、人喉癌细胞系Hep2、人肺腺... 目的:制备鸡红细胞标准品并探索其在流式细胞仪DNA周期检测中的应用。方法:采集鸡红细胞制成纯净红细胞,然后用乙醇固定,放于4℃冰箱备用。用PI荧光染料标记鸡红细胞和分别加入鸡红细胞的人结肠癌细胞SW480、人喉癌细胞系Hep2、人肺腺癌细胞A5494,用流式细胞仪检测DNA含量。结果:鸡红细胞替代正常二倍体细胞与肿瘤细胞同时染色,直方图显示两种细胞G0/G1期峰位置相差大,可清晰分辨,得到肺腺癌细胞A549的G0/G1期峰道数和鸡红细胞峰道数比值为4.712 0,喉癌细胞系Hep2的G0/G1期峰道数和鸡红细胞峰道数比值为7.096 2,结肠癌细胞SW480的G0/G1期峰道数和鸡红细胞峰道数比值为4.523 4。结论:利用流式细胞术,以鸡红细胞为内标标记,可以准确计算并识别多种肿瘤细胞DNA倍体,并且可以辅助流式检测的质量控制,此方法简便易行值得推广。 展开更多

关键词 流式细胞术 鸡红细胞 DNA

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首都医科大学中心实验室

7

作者 户乃丽 《基础医学教育》 2024年第5期F0003-F0003,共1页

首都医科大学中心实验室成立于2005年,是我校重要的专业技术公共服务平台,负责学校科研技术共享平台的建设和管理,承担大型仪器设备的运行和开放共享,为学校的教学和科研提供技术支撑服务。中心实验室位于首都医科大学科研北楼地下2层至... 首都医科大学中心实验室成立于2005年,是我校重要的专业技术公共服务平台,负责学校科研技术共享平台的建设和管理,承担大型仪器设备的运行和开放共享,为学校的教学和科研提供技术支撑服务。中心实验室位于首都医科大学科研北楼地下2层至6层,下设:电子显微镜研究平台、流式细胞研究平台、光学显微镜研究平台、机能学研究平台、基因组学研究平台、蛋白质组学研究平台、药学研究平台和医学影像学研究平台。截止目前,中心实验室拥有140余台大中型先进的科研仪器设备,各类仪器设备总价值达3.1亿元。中心实验室拥有一支稳定的专业技术队伍,现有各类技术人员40人,硕士及以上学历占比70%,中级及以上技术职称占比97%,其中高级技术职称占比57.25%。经过近20年的发展,中心实验室形成了持续有效的专业技术服务能力,每年为校本部、附属医院以及高等院校、科研院所等50余家单位提供测试服务及技术支撑。同时,中心实验室承担着学校研究生、本科生现代生物研究技术(大型仪器设备使用)课程教学,涉及专业为医学实验技术、基础医学专业、阶平班-临床医学和阶平班-口腔医学。 展开更多

关键词 专业技术队伍 学校科研 技术职称 大型仪器设备 校本部 医学影像学 测试服务 专业技术服务

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医学院校开展流式细胞技术培训的应用与体会

8

作者 户乃丽 徐晓雪 邹林樾 《基础医学教育》 2024年第4期315-317,共3页

流式细胞术是一项功能强大的生物检测分析技术,在医学科研中应用广泛。文章详细介绍了近年来结合流式技术特点,首都医科大学中心实验室通过理论讲座和实践操作,对用户开展分层次、渐进式、有针对性的细胞检测和分选的技术培训模式,包括... 流式细胞术是一项功能强大的生物检测分析技术,在医学科研中应用广泛。文章详细介绍了近年来结合流式技术特点,首都医科大学中心实验室通过理论讲座和实践操作,对用户开展分层次、渐进式、有针对性的细胞检测和分选的技术培训模式,包括分级课程设计、模块化教学和培训效果评估,并探讨性地提出目前培训中存在的问题及可能的解决方案,力争将大型仪器的共享与资源利用最大化。 展开更多

关键词 基础医学 实验教学 流式技术 开放共享 模块化教学 分级培训

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脂多糖注入黑质对恒河猴运动行为和多巴胺能神经元的影响 被引量：1

9

作者 陈庆友 刘玉军 +3 位作者 鲁强 户乃丽 徐群渊 张进禄 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期481-487,共7页

目的观察恒河猴黑质内注射脂多糖后运动行为和黑质多巴胺能神经元的变化,探讨脑内炎症反应在黑质多巴胺能神经元慢性变性过程中的作用。方法成年恒河猴5只,分别定位注射生理盐水(对照,编号M5)和脂多糖(存活24周:编号M1和M2,存活48周:编... 目的观察恒河猴黑质内注射脂多糖后运动行为和黑质多巴胺能神经元的变化,探讨脑内炎症反应在黑质多巴胺能神经元慢性变性过程中的作用。方法成年恒河猴5只,分别定位注射生理盐水(对照,编号M5)和脂多糖(存活24周:编号M1和M2,存活48周:编号M3和M4)。上述注射均在存活前0周、8周、16周,向右侧黑质部位注射3次,每次40μl(2.5g/L)。术后观察猴行为改变(包括随意运动和上肢活动),免疫组织化学染色观察黑质部位酪氨酸羟化酶阳性神经元的变化及小胶质细胞的激活情况。结果1.猴全身运动:注射脂多糖24周和48周后,各个动物运动距离和平均速度与术前自身相比随观察时间呈减少趋势,对照组动物两个指标与术前比较无变化。2.猴上肢活动:猴M1和M2,注射对侧前臂取食时间术后24周较术前分别延长了36.1%、27.1%,手爪抓取食物时间分别延长了41.2%、28.6%。猴M3和M4,注射对侧前臂取食时间术后48周较术前分别延长了76.5%(P<0.01)、50%(P<0.01),手爪抓取食物时间分别延长了81.8%(P<0.01)、55.6%(P<0.01),4只实验动物同侧上肢未见影响。3.注射脂多糖各个动物注射侧黑质阳性神经元数量与对侧相比较,有不同程度的减少,存活48周动物神经元减少更加明显;对照动物两侧黑质部位神经元数量无变化。4.注射脂多糖各个动物注射侧黑质部位小胶质细胞出现不同程度的激活,在24周组较明显。结论脂多糖诱导的炎症反应能引起猴黑质部位多巴胺能神经元的变性损伤和行为学的改变,这些改变呈慢性进展的特点,行为改变与多巴胺能神经元损伤程度相关。 展开更多

关键词 脂多糖 黑质 行为 酪氨酸羟化酶 免疫组织化学 恒河猴

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流式细胞仪分选小鼠Kupffer细胞方法的建立与评价

10

作者 户乃丽 徐晓雪 +2 位作者 邹林樾 田蜜 赵君朋 《分析仪器》 CAS 2021年第6期130-134,共5页

目的:建立流式细胞仪分选小鼠肝脏Kupffer细胞(KCs)的方法。方法:小鼠肝脏经胶原酶灌注后密度梯度离心法分离非实质细胞,流式细胞分选仪分选单细胞悬液中7-AAD-CD45^(+)CD11b^(+)F4/80^(+)肝脏KCs并检测分选后细胞纯度,台盼蓝染色检测... 目的:建立流式细胞仪分选小鼠肝脏Kupffer细胞(KCs)的方法。方法:小鼠肝脏经胶原酶灌注后密度梯度离心法分离非实质细胞,流式细胞分选仪分选单细胞悬液中7-AAD-CD45^(+)CD11b^(+)F4/80^(+)肝脏KCs并检测分选后细胞纯度,台盼蓝染色检测细胞活力,荧光微球吞噬实验检测细胞吞噬功能,CD86、CD206染色鉴定KCs细胞分型,脂多糖(LPS)刺激后检测炎性因子TNF-α、IL-1β的表达情况。结果:经过密度梯度分离和流式细胞分选,获得的7-AAD-CD45^(+)CD11b^(+)F4/80^(+)细胞纯度为(96.1±1.8)%,细胞存活率(96.5±2.1)%,分选后CD86^(+)和CD206^(+)所占比例分别为(92.3±1.6)%、(2.1±0.8)%,吞噬荧光微球的细胞百分比为(84.7±3.6)%,LPS刺激8h后,培养上清液中TNF-α、IL-1β显著升高(P<0.001)。结论:流式细胞分选仪可快速高效分离小鼠肝脏KCs,分选后的KCs保持良好细胞活性和吞噬功能,LPS刺激可诱导其分泌大量炎性因子。 展开更多

关键词 流式细胞 分选 KUPFFER 细胞

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流式细胞术分选小鼠骨髓造血干细胞的技术方案

11

作者 户乃丽 《分析仪器》 CAS 2022年第5期61-65,共5页

流式细胞术是检测和分选造血干细胞的重要手段,根据其表型和功能,目前有多种不同组合的表面标记物用于识别小鼠的骨髓造血干细胞。但是由于其含量极低,因此在实验操作中存在着一定难度。本实验以目前公认度较高的LSK方案结合SLAM家族分... 流式细胞术是检测和分选造血干细胞的重要手段,根据其表型和功能,目前有多种不同组合的表面标记物用于识别小鼠的骨髓造血干细胞。但是由于其含量极低,因此在实验操作中存在着一定难度。本实验以目前公认度较高的LSK方案结合SLAM家族分离策略为依据,首先对小鼠骨髓细胞分群及亚型检测,而后结合生物素标记的免疫磁珠对样品进行预纯化,再经流式分选,得到了纯度和活性均高于90%的LSK阳性造血干细胞。本文详细介绍了染色的方案及具体操作,以及流式分选的技术细节。 展开更多

关键词 造血干细胞 免疫磁珠分选 流式分选

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流式分选仪在医学院校教学科研中的应用和共享

12

作者 户乃丽 《医学教育管理》 2022年第S01期174-176,共3页

目前流式细胞分选技术广泛应用于生物学研究的各领域,本文以首都医科大学中心实验室分选型流式细胞仪BD FACSAriaⅢ为对象,对其近5年来在教学和科研中的应用现状进行了统计分析和总结,并探讨了今后仪器维护和技术培训方面的工作模式,为... 目前流式细胞分选技术广泛应用于生物学研究的各领域,本文以首都医科大学中心实验室分选型流式细胞仪BD FACSAriaⅢ为对象,对其近5年来在教学和科研中的应用现状进行了统计分析和总结,并探讨了今后仪器维护和技术培训方面的工作模式,为仪器的深度开放共享和科学管理提出建议。 展开更多

关键词 流式分选仪 开放共享 使用现状

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流式微球捕获蛋白定量检测技术的原理与应用 被引量：1

13

作者 徐晓雪 户乃丽 +1 位作者 邹林樾 赵君朋 《继续医学教育》 2022年第9期129-132,共4页

流式微球捕获蛋白定量检测技术也被称为悬浮点阵技术、液态芯片技术,是基于流式检测技术和荧光微球捕获技术的液相、高通量、多重蛋白定量技术,基本原理是在荧光编码捕获微球表面进行的荧光标记液相抗原抗体反应,具有流式技术检测速度... 流式微球捕获蛋白定量检测技术也被称为悬浮点阵技术、液态芯片技术,是基于流式检测技术和荧光微球捕获技术的液相、高通量、多重蛋白定量技术,基本原理是在荧光编码捕获微球表面进行的荧光标记液相抗原抗体反应,具有流式技术检测速度快、定量准确、多参数、高通量的特点,检测所需样品量小,可同时检测一个样品中数种到数十种可溶性蛋白,具有良好的可重复性,是固相酶联免疫吸附检测的一项良好的替代技术,在病毒感染、各类炎症、过敏性疾病、自身免疫病、肿瘤、移植、药物研发等相关的研究领域具有应用价值,在儿科危重病患儿的诊断和治疗、急性公共传染性疾病的研究和临床诊治中具有特殊意义。文章主要介绍流式微球捕获蛋白定量检测技术的技术原理、特点、应用与局限性。 展开更多

关键词 流式细胞术 液相多重蛋白定量技术 蛋白捕获微球 酶联免疫吸附技术 细胞因子 炎症因子

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流式细胞术双标记法细胞凋亡检测方法的探讨 被引量：6

14

作者 田蜜 徐晓雪 +2 位作者 邹林樾 户乃丽 赵君朋 《包头医学》 2019年第4期42-44,共3页

目的:研究流式细胞术磷脂结合蛋白Ⅴ/碘化丙啶(Annexin Ⅴ/PI)双染方法来检测细胞凋亡合理实验流程及样品制备方法。方法:正常培养A549细胞随机分为H2O2诱导细胞凋亡的实验组和正常培养的对照组。实验组与对照组均分别采用,弃培养基和... 目的:研究流式细胞术磷脂结合蛋白Ⅴ/碘化丙啶(Annexin Ⅴ/PI)双染方法来检测细胞凋亡合理实验流程及样品制备方法。方法:正常培养A549细胞随机分为H2O2诱导细胞凋亡的实验组和正常培养的对照组。实验组与对照组均分别采用,弃培养基和留培养基的方式制备单细胞悬液。然后样本中先后加入Annexin Ⅴ和PI,最后加入工作液流式细胞仪检测。结果:A549细胞经H2O2诱导细胞凋亡率明显增加,采用保留培养基的方式收集制备样本的凋亡率明显高于弃置培养基的凋亡率。结论:凋亡样品制备过程中,必须收集凋亡细胞培养基上清,并与胰酶消化所得样品细胞悬液混合离心制备单细胞悬液,以避免凋亡细胞丢失造成实验结果的失真。 展开更多

关键词 流式细胞术 细胞凋亡 ANNEXIN Ⅴ

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雷公藤甲素对脑胶质瘤细胞凋亡的影响及机制探讨 被引量：1

15

作者 邹林樾 徐晓雪 户乃丽 《继续医学教育》 2018年第9期145-147,共3页

目的研究雷公藤甲素(TP)对脑胶质瘤细胞u87的细胞凋亡、线粒体膜电位和ROS生成的影响,探讨其诱导细胞凋亡的机制。方法体外培养U87细胞,用10,50,250,1 250 nmol/L四个浓度雷公藤甲素作用于细胞24小时后,流式细胞仪检测细胞凋亡,细胞线... 目的研究雷公藤甲素(TP)对脑胶质瘤细胞u87的细胞凋亡、线粒体膜电位和ROS生成的影响,探讨其诱导细胞凋亡的机制。方法体外培养U87细胞,用10,50,250,1 250 nmol/L四个浓度雷公藤甲素作用于细胞24小时后,流式细胞仪检测细胞凋亡,细胞线粒体膜电位,以及活性氧。结果随着药物浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加,线粒体膜电位检测到绿色荧光区域细胞比例逐渐增多,细胞活性氧生成水平逐渐升高,与对照组比差异有统计学意义,TP对细胞凋亡的诱导作用与药物浓度呈正相关。结论雷公藤甲素可体外诱导U87细胞凋亡,机制可能与线粒体信号通路参与了TP诱导的细胞凋亡,同时通过细胞氧化应激反应,升高ROS,诱导细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 雷公藤甲素 脑胶质瘤细胞 细胞凋亡 线粒体膜电位 活性氧

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高校大型仪器设备平台流式细胞仪的开放共享 被引量：4

16

作者 邹林樾 徐晓雪 +1 位作者 户乃丽 田蜜 《医学教育管理》 2021年第S01期112-115,共4页

流式细胞术是对单个细胞或生物颗粒进行多参数定量分析和分选的技术,已广泛应用于科学研究的各个领域。为了充分实现大型仪器设备的开放共享,自流式细胞仪开放使用以来,我室分层次开设了流式细胞术的培训课程,对技术重点难点的多色实验... 流式细胞术是对单个细胞或生物颗粒进行多参数定量分析和分选的技术,已广泛应用于科学研究的各个领域。为了充分实现大型仪器设备的开放共享,自流式细胞仪开放使用以来,我室分层次开设了流式细胞术的培训课程,对技术重点难点的多色实验和荧光补偿重点培训,对进入实验室的课题研究者采取“一对一”的老师指导流式检测和分选过渡到学生独立使用仪器的全开放模式,同时保障仪器高效正常使用,帮助学生掌握流式细胞术,提高科研分析及解决问题的能力,为学生在科研实验中应用流式细胞术打下良好的基础。 展开更多

关键词 流式细胞术 开放使用 培训

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图像流式检测细胞周期有丝分裂中期细胞比例的方法 被引量：1

17

作者 徐晓雪 邹林樾 +1 位作者 户乃丽 田蜜 《继续医学教育》 2017年第11期133-134,共2页

图像流式技术结合图像采集与处理技术和流式分析技术检测,使流式检测的指标更加丰富,分析方法更加复杂,分析的数据对应图像验证更为客观可靠,不仅可以应用其进行更为客观精确的流式检测,也可以利用图像所提供的形态和位置信息开展传统... 图像流式技术结合图像采集与处理技术和流式分析技术检测,使流式检测的指标更加丰富,分析方法更加复杂,分析的数据对应图像验证更为客观可靠,不仅可以应用其进行更为客观精确的流式检测,也可以利用图像所提供的形态和位置信息开展传统流式无法完成的检测。将其应用于经典的流式细胞周期检测可以对同样的标记样品进行更加深入的分析,介绍了如何使用图像流式分析技术对经典碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色样品进行图像细胞周期分析,检测样品各周期细胞比例及确定有丝分裂中期细胞比例的方法,解决了经典流式细胞周期分析中仅凭荧光强度参数无法识别有丝分裂中期细胞的难题。 展开更多

关键词 图像流式细胞术 细胞周期 有丝分裂

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GFP阳性细胞在不同荧光通道下的凋亡检测比较

18

作者 邹林樾 徐晓雪 +2 位作者 户乃丽 田蜜 赵君朋 《继续医学教育》 2021年第9期164-165,共2页

目的比较GFP阳性细胞在不同荧光通道下的凋亡检测效果。方法使用流式细胞技术选用Annexin V-PE/7-AAD双标法检测GFP阳性细胞的凋亡,采用三色均用488 nm激光激发,和GFP用488 nm激光激发,PE、7-AAD用561 nm激光激发两种方案。结果仅使用48... 目的比较GFP阳性细胞在不同荧光通道下的凋亡检测效果。方法使用流式细胞技术选用Annexin V-PE/7-AAD双标法检测GFP阳性细胞的凋亡,采用三色均用488 nm激光激发,和GFP用488 nm激光激发,PE、7-AAD用561 nm激光激发两种方案。结果仅使用488 nm激光器,可见GFP/PE/7-AAD三色之间漏光严重,均需补偿且补偿值极大,样品管补偿前后的PE/7-AAD双参数散点图形态改变极大。而第二种方案可见GFP往PE和7-AAD漏光少,补偿值极小甚至不用补偿,PE与7-AAD之间补偿极大,样品管补偿前后的PE/7-AAD双参数散点图形态改变大,但形态改变明显小于均用488 nm激光器激发的图形。用两个方案检测的凋亡率基本一致。结论实验室应根据所拥有流式细胞仪的激光和荧光通道滤光片的配置来选择最适合的凋亡试剂盒。如果仪器允许,尽量采用多激光激发减少光谱重叠。若有561 nm激光器,其拓展了荧光通道的选择,减少了补偿带来的麻烦,有更多的优势。若只有488 nm未配561 nm激光的小型流式细胞仪,可通过齐全的单阳管设置,合适的荧光补偿调节也可以获得满意的检测结果。 展开更多

关键词 流式细胞术 细胞凋亡 GFP阳性细胞 绿色荧光蛋白(GFP) 荧光补偿 荧光通道

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组合多峰标准品在空气激发型流式细胞仪信号校准中的应用

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作者 徐晓雪 邹林樾 +2 位作者 户乃丽 田蜜 薛冰 《继续医学教育》 2017年第9期139-140,共2页

目的为提高流式检测信号的精确程度,研究快速、准确手动校准库尔特Moflo^(TM)XDP分选仪多激光信号的方法。方法分别采用单峰标准微球分步校准方法和组合多峰微球同步校准方法,进行仪器校准,比较两种不同的校准策略下得到的小鼠骨髓侧群... 目的为提高流式检测信号的精确程度,研究快速、准确手动校准库尔特Moflo^(TM)XDP分选仪多激光信号的方法。方法分别采用单峰标准微球分步校准方法和组合多峰微球同步校准方法,进行仪器校准,比较两种不同的校准策略下得到的小鼠骨髓侧群细胞检测结果。结果组合多峰微球校准后检测结果优于单峰微球校准后结果。结论为了准确的检测和分选,需要同时校准仪器的各项参数,复杂标准品的校准精确度优于简单标准品。 展开更多

关键词 流式细胞术 细胞分选 仪器校准 侧群细胞

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利用405nm激光激发Hoechst33342染色细胞DNA的流式细胞技术 被引量：4

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作者 户乃丽 徐晓雪 +1 位作者 邹林樾 杨巍巍 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第33期6406-6409,共4页

目的:探讨流式细胞仪上405 nm激光激发Hoechst33342染色细胞DNA的效果及影响检测结果的因素。方法:SW480和A549两种细胞经Hoechst33342染色后,流式细胞仪405 nm激光激发检测DNA含量,利用软件计算出处于G0/G1期、S期和G2/M期细胞的百分比... 目的:探讨流式细胞仪上405 nm激光激发Hoechst33342染色细胞DNA的效果及影响检测结果的因素。方法:SW480和A549两种细胞经Hoechst33342染色后,流式细胞仪405 nm激光激发检测DNA含量,利用软件计算出处于G0/G1期、S期和G2/M期细胞的百分比,以PI染色法结果作为对照。结果:SW480和A549细胞经Hoechst33342染色后各期的细胞百分比与PI染色法基本一致,无明显差异(P>0.05)。结论:405 nm激光激发Hoechst33342染色细胞DNA结果可靠,可作为紫外检测的替代方法。 展开更多

关键词 405 nm激光 HOECHST33342 流式细胞术 细胞周期

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