摘要
目的探讨MicroRNA-26b(miR-26b)和转录因子叉头框蛋白O1(FOXO1)对人颗粒细胞KGN凋亡的影响,并初步探讨其潜在的作用机制。方法将人颗粒细胞KGN作为研究对象,分为miR-26b过表达组及过表达对照组、miR-26b抑制剂组及抑制剂对照组、FOXO1特异性干扰RNA组(FOXO1-siRNA组)及FOXO1特异性干扰RNA对照组(FOXO1-siRNA NC组)、miR-26b抑制剂和FOXO1-siRNA共转染组,Real-time PCR检测miR-26b转染率、FOXO1转染率,双荧光素酶报告基因检测miR-26b与FOXO13'UTR的靶向关系,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测FOXO1、胰岛素生长因子1受体(IGF-1R)、胰岛素受体底物1(IRSl)、胰岛素受体底物2(IRS2)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)的蛋白表达水平。结果双荧光素酶基因检测报告证实miR-26b与FOXO1存在靶向关系。流式细胞术显示:miR-26b过表达组早期凋亡率为[(4.58±0.59)%],高于过表达对照组[(2.78±0.43)%]和miR-26b抑制剂组[(3.41±0.39)%](P均<0.05);miR-26b抑制剂组与抑制剂对照组差异无统计学意义(P>0.05);FOXO1-siRNA组颗粒细胞KGN细胞早期凋亡率升高,且高于miR-26b过表达组(P均<0.01);miR-26b抑制剂和FOXO1-siRNA共转染组的凋亡率高于miR-26b抑制剂组(P<0.05)。蛋白免疫印迹实验显示:与FOXO1-siRNA NC组相比,FOXO1-siRNA组中FOXO1和PI3K蛋白表达水平下降,IGF-1R、IRS1、IRS2蛋白表达水平增高(P<0.05)。结论miR-26b通过靶向FOXO1调控人颗粒细胞KGN的凋亡,可能与IGF-lR/PI3K信号通路相关。
出处
《福建医药杂志》
2024年第8期71-74,共4页
Fujian Medical Journal
基金
福建省自然科学基金资助项目(2021J011319)。
