应用变性高效液相色谱筛查颅内静脉系统血栓形成AT-Ⅲ基因突变及多态性 被引量：5

1

作者 汪丽萍 裘毓雯 +6 位作者 尹爱兰 马云燕 刘柯玲 熊丽 余艳红 钟梅 王辰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1982-1986,共5页

目的应用变性高效液相色谱(DHPLC)方法筛查生育期女性颅内静脉系统血栓形成(CVT)AT-Ⅲ基因的突变及多态性。方法标本来自于2006年6月～2007年12月南方医院生育期女性CVT患者,及52例严格配伍的健康女性外周静脉血。提取所有受试者全血DNA... 目的应用变性高效液相色谱(DHPLC)方法筛查生育期女性颅内静脉系统血栓形成(CVT)AT-Ⅲ基因的突变及多态性。方法标本来自于2006年6月～2007年12月南方医院生育期女性CVT患者,及52例严格配伍的健康女性外周静脉血。提取所有受试者全血DNA,PCR扩增后应用变性高效液相色谱(DHPLC)技术分析抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)基因的启动子区,第1～6外显子及其侧翼序列的基因变异情况。结果DHPLC技术分析发现病例组出现6种异常峰形,经测序证实1例致病突变为Exon6 G13328A的杂合突变,1例新发现的同义突变Exon4+243G>A;SNP位点6个,其中4个SNP库已报道的SNP位点,2个新发现的SNP位点。对照组发现一种异常峰型(三峰)。结论DHPLC是一种自动、快速、高通量的基因突变及SNP位点的筛查方法,AT-Ⅲ基因突变可能是导致生育期非妊娠女性CVT的遗传因素之一,功能性SNP位点也可能参与了该人群VTE的发生。 展开更多

关键词 变性高效液相色谱 静脉血栓栓塞 单核苷酸多态性 基因突变 AT-Ⅲ基因

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Wnt信号通路的生物学效应及其与肺部疾病的关系 被引量：16

2

作者 于晓敏 王辰 王军 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第2期182-184,共3页

Wnt信号转导通路(Wnt通路)是一条在进化上保守的信号途径,它主要由经典Wnt/β-catenin信号途径和非经典的Wnt信号途径(Wnt/平面细胞的极性途径和Wnt/Ca2+途径)组成。其生物学效应广泛,可调控细胞的黏附、迁移、增生和凋亡等。作为一条... Wnt信号转导通路(Wnt通路)是一条在进化上保守的信号途径,它主要由经典Wnt/β-catenin信号途径和非经典的Wnt信号途径(Wnt/平面细胞的极性途径和Wnt/Ca2+途径)组成。其生物学效应广泛,可调控细胞的黏附、迁移、增生和凋亡等。作为一条与多种疾病密切关系的信号转导通路,其在肺部疾病发生、发展中所起的重要作用也逐渐被揭示。 展开更多

关键词 WNT信号 肺动脉高压 哮喘 特发性肺纤维化 肺癌

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肺孢子菌肺炎19例临床分析 被引量：15

3

作者 乔建勤 童朝晖 +4 位作者 尹玉东 王臻 曹彬 王亚杰 龚娟妮 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第5期552-557,共6页

目的回顾性分析首都医科大学附属北京朝阳医院住院肺孢子菌肺炎(pneumocystis pneumon ia,PCP)患者的临床表现,探讨导致PCP的高危因素与诊断治疗和预防措施。方法回顾分析2004年4月至2008年9月19例PCP患者的临床资料。结果26.3%(5/19)的... 目的回顾性分析首都医科大学附属北京朝阳医院住院肺孢子菌肺炎(pneumocystis pneumon ia,PCP)患者的临床表现,探讨导致PCP的高危因素与诊断治疗和预防措施。方法回顾分析2004年4月至2008年9月19例PCP患者的临床资料。结果26.3%(5/19)的PCP患者有获得性免疫缺陷综合征;73.4%(14/19)的病例患有基础疾病。19例患者中男性12例、女性7例,平均年龄41.53±9.22岁。起病急骤7例,起病缓慢12例。11例患者肺呼吸音正常或稍粗,6例患者肺底闻及局限湿啰音,2例患者肺底闻及爆裂音(考虑与肺纤维化有关)。胸部影像学主要表现为弥漫性网状阴影、片絮影、斑片影。7例患者痰或支气管肺泡灌洗液六胺银染色找到包囊,1例支气管镜肺活检(TBLB)六胺银染色找到包囊,7例患者痰或支气管肺泡灌洗液聚合酶链反应(PCR)阳性检出PC病原体的特异性基因片段和结合临床特征而诊断,其余4例为临床诊断。100%患者服用复方磺胺甲基异恶唑片(TMP-SMZco)和84.2%(16/19)患者合并肾上腺糖皮质激素治疗,14例存活,5例死亡,其中3例死于多脏器功能衰竭,2例死于急性呼吸窘迫综合征。结论随着HIV感染越来越多,现代医学技术的发展,如器官移植肿瘤放化疗及免疫抑制剂的应用等,PCP在临床上已不属于少见病。因其临床表现无明显特异性,病死率较高,应引起临床高度重视,尤其对高危人群应考虑使用预防性治疗。 展开更多

关键词 肺孢子菌肺炎 获得性免疫缺陷综合征 非HIV免疫缺陷

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慢性肺动脉栓塞的外科治疗 被引量：7

4

作者 任华 苏丕雄 +4 位作者 顾松 王辰 张超纪 马国涛 于洪泉 《中国胸心血管外科临床杂志》 CAS 2003年第3期171-173,共3页

目的　总结肺动脉切开取栓和肺动脉内膜剥脱术治疗慢性肺动脉栓塞的方法、围手术期处理经验 ,以提高慢性肺动脉栓塞外科治疗的安全性。　方法　 5例慢性肺动脉栓塞患者均在深低温低流量或深低温停循环下行肺动脉切开取栓及肺动脉内膜剥... 目的　总结肺动脉切开取栓和肺动脉内膜剥脱术治疗慢性肺动脉栓塞的方法、围手术期处理经验 ,以提高慢性肺动脉栓塞外科治疗的安全性。　方法　 5例慢性肺动脉栓塞患者均在深低温低流量或深低温停循环下行肺动脉切开取栓及肺动脉内膜剥脱术。　结果　术后即刻 3例患者肺动脉压下降了 2 0～ 4 0 mm Hg(1k Pa=7.5 mm Hg) ,5例均有不同程度的肺水肿 ,1例术后 19天死于再次肺动脉栓塞 ,其余 4例临床症状减轻 ,活动能力均明显提高。结论　肺动脉切开取栓和内膜剥脱术是治疗慢性肺动脉栓塞的有效方法 ,手术结果可能受多种因素的影响 ,需要用规范化的评估系统进行随访、测评。 展开更多

关键词 慢性肺动脉栓塞 外科手术 治疗 安全性 围手术期 肺动脉切开取栓术 肺动脉内膜剥脱术

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噻托溴铵联合沙美特罗/氟替卡松治疗哮喘-慢阻肺重叠综合征122例 被引量：33

5

作者 倪敏讷 童朝晖 《中国生化药物杂志》 CAS 2017年第8期206-207,共2页

目的 探析噻托溴铵联合沙美特罗/氟替卡松治疗哮喘-慢阻肺重叠综合征的临床疗效。方法 选取122例在本院进行治疗的哮喘-慢阻肺重叠综合征患者,以随机信封法分为2组,试验给予噻托溴铵联合沙美特罗/氟替卡松进行治疗,参照组则给予复方异... 目的 探析噻托溴铵联合沙美特罗/氟替卡松治疗哮喘-慢阻肺重叠综合征的临床疗效。方法 选取122例在本院进行治疗的哮喘-慢阻肺重叠综合征患者,以随机信封法分为2组,试验给予噻托溴铵联合沙美特罗/氟替卡松进行治疗,参照组则给予复方异丙托溴铵联合沙美特罗/氟替卡松进行治疗,观察其临床效果。结果 治疗前,2组患者的肺功能各项指标差异均无统计学意义;治疗后,试验患者的肺功能各项指标的改善程度明显较参照组高（P〈0.05）,急性发作次数与发作时间均优于参照组（P〈0.05）。结论 噻托溴铵联合沙美特罗/氟替卡松治疗哮喘-慢阻肺重叠综合征效果显著,对改善肺功能、降低发作频率等具有一定的临床优势。 展开更多

关键词 噻托溴铵 沙美特罗 氟替卡松 哮喘-慢阻肺重叠综合征

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低氧通过Ca^(2+)-NFAT信号通路促进肺动脉平滑肌细胞增生 被引量：3

6

作者 李积凤 王丛 +3 位作者 刘杰 王跃秀 王军 王辰 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第2期172-176,共5页

目的通过观察低氧对肺动脉平滑肌细胞增生的影响及作用机制,探讨低氧在肺动脉高压发病过程中的作用,为肺动脉高压的进一步干预治疗提供可靠的理论依据。方法培养人肺动脉平滑肌细胞(human pulmonary artery smooth muscle cell,HPASMCs... 目的通过观察低氧对肺动脉平滑肌细胞增生的影响及作用机制,探讨低氧在肺动脉高压发病过程中的作用,为肺动脉高压的进一步干预治疗提供可靠的理论依据。方法培养人肺动脉平滑肌细胞(human pulmonary artery smooth muscle cell,HPASMCs)并分为以下几组:正常对照组、低氧组(24h、48h、72h)、低氧并处理组(低氧48h并在细胞外液中加入EDTA2mmol/L或VIVIT4μmol/L)。分别应用细胞计数法检测细胞的增生情况、荧光钙成像法测定细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)、激光共聚焦显微镜观察活化T细胞核因子c3(nuclear factor of activated Tcells,NFATc3)在细胞核内外分布的变化。结果低氧呈时间依赖性促进HPASMCs增生;低氧处理的细胞静息[Ca2+]i和库容性钙内流(capacitative calcium entry,CCE)显著升高,NFATc3的核转位增多。EDTA(Ca2+螯合剂)或VIVIT(NFAT特异性抑制剂)能够明显抑制低氧诱导的细胞增生现象。结论低氧能促进HPASMCs的增生,其机制可能是通过增加静息[Ca2+]i和库容性钙内流,使HPASMCs内的Ca2+异常升高并导致NFATc3转位至核内,进而促进与增生有关的基因的表达。 展开更多

关键词 低氧 肺动脉平滑肌细胞 肺动脉高压 库容性钙内流 活化T细胞核因子

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AT-Ⅲ基因突变及多态性与颅内静脉系统血栓形成的相关性 被引量：2

7

作者 汪丽萍 尹爱兰 +6 位作者 王硕石 尹倩 刘柯玲 熊丽 余艳红 钟梅 王辰 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期337-340,共4页

目的探讨AT-Ⅲ基因突变及多态性与女性颅内静脉系统血栓形成(cerebral venous thrombosis,CVST)的相关性。方法采集南方医院生育期女性CVST住院患者50例及严格配伍的健康女性52例外周静脉血。采用ELISA法及发色底物法分别检测AT-Ⅲ抗原... 目的探讨AT-Ⅲ基因突变及多态性与女性颅内静脉系统血栓形成(cerebral venous thrombosis,CVST)的相关性。方法采集南方医院生育期女性CVST住院患者50例及严格配伍的健康女性52例外周静脉血。采用ELISA法及发色底物法分别检测AT-Ⅲ抗原水平(AT-Ⅲ:Ag)、AT-Ⅲ血浆活性水平(AT-Ⅲ:A)。提取所有受试者全血DNA,PCR扩增后应用变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)技术分析抗凝血酶-Ⅲ(antithrombin,AT-Ⅲ)基因的启动子区,第1～6外显子及其侧翼序列的基因变异情况。结果病例组与对照组比较,AT-Ⅲ抗原含量水平相当(F=0.754,P=0.472),AT-Ⅲ活性明显降低(P<0.001)。DHPLC筛查发现突变位点1个已报道的致病突变Intron1 5+5 G>A突变,SNP位点5个,其中4个为SNP库已报道的SNP位点,1个为新发现的SNP位点。对照组亦发现4个为SNP库已报道的SNP位点。结论AT-Ⅲ基因突变可能是导致生育期女性CVST的遗传因素之一,功能性SNP位点也可能参与了该人群CVST的发生。 展开更多

关键词 变性高效液相色谱 颅内静脉系统血栓形成 单核苷酸多态性 基因突变 AT-Ⅲ基因

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肺动脉高压发病机制及治疗进展(1) 被引量：16

8

作者 张洪玉 邝士光 《中国医刊》 CAS 2004年第5期5-7,共3页

关键词 肺动脉高压 发病机制 治疗 诊断

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肺泡蛋白沉积症行全肺灌洗1例 被引量：2

9

作者 张杰 郭伟 +3 位作者 李红杰 徐莉莉 张洪玉 王辰 《中国医刊》 CAS 2002年第9期52-52,共1页

关键词 肺泡蛋白沉积症 全肺灌洗 治疗 CT检查

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肺动脉高压发病机制及治疗进展(2) 被引量：4

10

作者 张洪玉 邝土光 《中国医刊》 CAS 2004年第6期4-7,共4页

关键词 肺动脉高压 发病机制 治疗 检测

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高压氧治疗肝肺综合征大鼠的实验研究 被引量：3

11

作者 李宁 郝建宇 +1 位作者 庞宝森 刘福佳 《肝脏》 2007年第2期103-107,共5页

目的研究高压氧治疗对大鼠肝肺综合征(HPS)的作用。方法采用胆总管结扎术(CBDL)制备HPS动物模型。44只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术对照组(Sham组)8只、单纯造模组(CBDL5w组)12只、治疗1周组(HBOT1w组)12只、治疗2周组(HBOT2w组)12只... 目的研究高压氧治疗对大鼠肝肺综合征(HPS)的作用。方法采用胆总管结扎术(CBDL)制备HPS动物模型。44只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术对照组(Sham组)8只、单纯造模组(CBDL5w组)12只、治疗1周组(HBOT1w组)12只、治疗2周组(HBOT2w组)12只。两治疗组在造模成功后送入高压氧舱治疗,分别治疗1周和2周。Sham组和CBDL5w组大鼠在术后5周,HBOT1w组和HBOT2w组在治疗结束后,进行血气分析、肝功能以及血清一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)浓度检测,肝、肺病理检查,并使用激光多普勒血流仪检测肝、肺微循环。结果CBDL5w组大鼠肝功能检测中ALB降低,ALT、AST、ALP、γ-GT、TBIL及TBA均升高,血气分析中PaO2降低,PA-aO2增大,与Sham组相比均有显著差异(P<0.01),且病理检查CBDL5w组大鼠的肝脏组织可见胆汁性肝纤维化表现,肺组织可见肺毛细血管扩张、充血,证实HPS大鼠模型制成;同时与Sham组相比,CBDL5w组大鼠血清NO及ET-1浓度均升高(P<0.01),肝脏毛细血管血流量降低(P<0.01),肺脏毛细血管血流量增大(P<0.01)。经高压氧治疗后,HBOT1w组大鼠与CBDL5w组相比,以上指标均好转(P<0.01)。HBOT2w组大鼠与CBDL5w组相比,除血清NO水平和肺脏毛细血管血流量无统计学差异(P>0.05)外,其余指标的差异有显著性意义(P<0.01)。结论高压氧治疗大鼠HPS可通过降低血清NO、ET-1浓度,提高组织氧含量及改善肝、肺微循环等,有效改善肝、肺功能及病理,且治疗前期效果更好。 展开更多

关键词 肝肺综合征 胆总管结扎 高压氧

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VEGF反义寡核苷酸与低分子肝素联合应用对小鼠Lewis肺癌生长和肺血栓栓塞症的影响 被引量：1

12

作者 张予辉 王辰 +2 位作者 张黎明 翟振国 庞宝森 《首都医科大学学报》 CAS 2006年第1期38-42,共5页

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)反义寡核苷酸(ASODN)与低分子肝素(LMWH)联合应用对小鼠Lewis肺癌生长、凝血及肺血栓栓塞症(PTE)的影响及其机制。方法复制Lewis肺癌模型小鼠40只,随机分为对照组、VEGF-ASODN组、VEGF错义寡核苷酸(M... 目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)反义寡核苷酸(ASODN)与低分子肝素(LMWH)联合应用对小鼠Lewis肺癌生长、凝血及肺血栓栓塞症(PTE)的影响及其机制。方法复制Lewis肺癌模型小鼠40只,随机分为对照组、VEGF-ASODN组、VEGF错义寡核苷酸(MSODN)组、LMWH组及联合治疗组,每组8只,分别给予生理盐水、VEGF-ASODN、VEGF-MSODN、LMWH(法安明)及VEGF-ASODN+法安明皮下注射,隔日1次,共15次。检测皮下移植瘤的变化。应用免疫组织化学方法检测肿瘤组织微血管密度(MVD)。应用酶联免疫吸附方法检测血浆中VEGF和凝血激活剂组织因子(TF)的质量浓度。应用组织HE染色方法检查肿瘤组织、心、肺、脑、肾、肝等组织脏器的血栓和栓塞情况。应用Western blot方法检查肿瘤组织VEGF和TF蛋白表达。结果ASODN、LMWH和联合治疗组的抑瘤率分别为47.34%、27.31%和59.03%,这3组的抑瘤率和MVD与对照组和MSODN组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。ASODN组和联合治疗组的血浆VEGF质量浓度分别为(9.66±1.02)ng/L、(9.39±2.26)ng/L,较对照组[(14.39±3.76)ng/L]显著降低(P<0.05);LMWH组和联合治疗组血浆TF质量浓度分别为(20.00±1.26)ng/L、(23.50±5.62)ng/L,较对照组[(27.08±5.40)ng/L]显著降低(P<0.05)。对照组、ASODN组、MSODN组、LMWH组、联合治疗组PTE的发生率分别为37.5%、50.0%、37.5%、25.0%和25.0%;ASODN组肿瘤组织中VEGF蛋白表达较弱,而TF表达较强。结论VEGF-ASODN和LMWH联合有协同抗肿瘤作用;但VEGF-ASODN有促凝作用,使PTE的风险增加,而LMWH可降低高凝倾向。 展开更多

关键词 血管内皮细胞生长因子 低分子肝素 肺肿瘤 肺血栓栓塞症

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伴特发性肺纤维化的胃食管反流病患者夜间酸暴露特点 被引量：1

13

作者 梁秀霞 尚占民 +2 位作者 代华平 黄皖农 郝建宇 《胃肠病学》 2010年第11期669-671,共3页

背景：胃食管反流是特发性肺纤维化（IPF）发生的危险因素之一．夜间反流在胃食管反流病（GERD）食管外表现中起重要作用。目的：研究伴IPF的GERD患者夜间食管酸暴露的特点。方法：选取2006年12月～2008年1月北京朝阳医院收治的16例IPF... 背景：胃食管反流是特发性肺纤维化（IPF）发生的危险因素之一．夜间反流在胃食管反流病（GERD）食管外表现中起重要作用。目的：研究伴IPF的GERD患者夜间食管酸暴露的特点。方法：选取2006年12月～2008年1月北京朝阳医院收治的16例IPF．GERD患者、32例GERD患者和16例健康志愿者（非GERD）。各组患者行24h食管pH监测，对夜间8h内（10pm-6am）的酸暴露程度，包括pH〈4的时间百分比、酸清除时间、反流次数、长反流（〉5min）次数、最长反流时间等指标进行分析。结果：14例（87．5％）IPF-GERD患者存在夜间酸暴露，其程度高于非GERD组（P〈0．05）．而与GERD患者无明显差异（P〉0．05）。IPF—GERD组患者前半夜pH〈4的时间百分比显著高于后半夜（12.2％±3．9％对1.1％±0．5％．P〈0．05）．GERD组两者无明显差异（10．8％±2．7％对5．1％±1．8％，P〉0．05）。结论：大部分IPF—GERD患者存在夜问酸暴露．其主要发生于前半夜。 展开更多

关键词 胃食管反流病 肺纤维化 夜间酸暴露 食管PH监测

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小鼠骨髓内皮祖细胞的培养与鉴定 被引量：1

14

作者 万钧 王军 +3 位作者 徐晓雪 刘杰 翟振国 王辰 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第2期177-181,共5页

目的建立分离小鼠骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)的方法。方法通过密度梯度分离法从小鼠骨髓中分离单个核细胞,行流式细胞检测,培养7d后,行DIL-acLDL和FITC-UEA-1双荧光染色、细胞移行实验和血管内皮网络掺入实验。... 目的建立分离小鼠骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)的方法。方法通过密度梯度分离法从小鼠骨髓中分离单个核细胞,行流式细胞检测,培养7d后,行DIL-acLDL和FITC-UEA-1双荧光染色、细胞移行实验和血管内皮网络掺入实验。结果流式细胞技术检测结果显示,骨髓来源的CD34/CD133/VEGFR2三阳细胞为0.029%±0.008%;细胞培养7d后,可见梭形细胞呈优势生长;DIL-acLDL与FITC-UEA-1荧光标记的双阳性细胞占细胞总数的比例为86.085%±5.622%;细胞移行实验结果可见平均每视野移行细胞数为(19.458±2.251)个;血管内皮网络掺入实验结果为,每视野掺入细胞数平均为(67.750±8.823)个。结论用流式细胞技术检测分离小鼠骨髓单个核细胞不同表面标志物的表达,用选择性内皮生长体系培养EPC,再通过细胞免疫及细胞功能检测所分离的细胞,是一种较为理想的分离与鉴定EPC的方法。 展开更多

关键词 小鼠 内皮祖细胞 流式细胞术

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肺动脉高压发病机制及治疗进展(3) 被引量：2

15

作者 张洪玉 邝土光 《中国医刊》 CAS 2004年第7期2-4,共3页

关键词 肺动脉高压 发病机制 治疗 内皮素受体阻滞剂

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慢性咳嗽患者经手术证实支气管类癌1例 被引量：1

16

作者 张杰 张洪玉 《中国医刊》 CAS 2003年第4期49-50,共2页

关键词 慢性咳嗽 支气管类癌 诊断 治疗 外科手术

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感染中毒症、急性肺损伤与凝血抗凝纤溶异常 被引量：7

17

作者 姜利 王辰 《国外医学（呼吸系统分册）》 2004年第2期76-79,共4页

感染中毒症和急性肺损伤时机体强烈的炎症反应可诱导凝血 抗凝 纤溶异常。已发现抗凝蛋白活化蛋白C、抗凝血酶 Ⅲ和组织因子途径抑制物在炎症反应中起重要调节作用。应用外源性抗凝物质替代治疗 ,可以改善有关疾病预后 (活化蛋白C)或... 感染中毒症和急性肺损伤时机体强烈的炎症反应可诱导凝血 抗凝 纤溶异常。已发现抗凝蛋白活化蛋白C、抗凝血酶 Ⅲ和组织因子途径抑制物在炎症反应中起重要调节作用。应用外源性抗凝物质替代治疗 ,可以改善有关疾病预后 (活化蛋白C)或临床表现 (抗凝血酶 Ⅲ和组织因子途径抑制物 ) 。 展开更多

关键词 感染中毒症 急性肺损伤 蛋白C 组织因子途径抑制物 抗凝血酶-Ⅲ 炎症反应 急性呼吸窘迫综合征

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重组尿激酶原对人肺动脉内皮细胞u-PA系统的影响

18

作者 刘毅 王辰 +5 位作者 杨媛华 庞宝森 黄秀霞 辛萍 侯晓莉 王军 《首都医科大学学报》 CAS 2007年第4期467-470,共4页

目的 探讨重组尿激酶原对体外培养的正常人肺动脉内皮细胞(HPAECs)尿激酶型纤溶酶原激活物系统表达的影响.方法 将重组尿激酶原0或150 IU/mL与人肺动脉内皮细胞共同孵育8 h,收集培养上清并应用ELISA方法检测其中尿激酶型纤溶酶原激活物... 目的 探讨重组尿激酶原对体外培养的正常人肺动脉内皮细胞(HPAECs)尿激酶型纤溶酶原激活物系统表达的影响.方法 将重组尿激酶原0或150 IU/mL与人肺动脉内皮细胞共同孵育8 h,收集培养上清并应用ELISA方法检测其中尿激酶型纤溶酶原激活物受体(u-PAR)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的含量;将重组尿激酶原(0～150 IU/mL)分别与HPAECs共同孵育(0～24 h),提取细胞总RNA并应用RT-PCR技术检测尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)mRNA表达的变化.结果 细胞培养上清ELISA实验表明,与对照组相比,重组尿激酶原150 IU/mL组细胞培养液中u-PAR的含量显著增加[(0.51±0.04)μg/L vs (0.58±0.05) μg/L,P=0.005];PAI-1的含量显著下降[(66.75±7.92) μg/L vs (53.38±12.18) μg/L,P=0.009].RT-PCR结果表明,HPAECs与重组尿激酶原150 IU/mL共同培养后0 h、4 h、8 h、12 h和24 h 5个时间点u-PA条带与GAPDH条带平均光密度之比分别为(0.34±0.11)、(0.51±0.12)、(0.58±0.12)、(0.50±0.18)和(0.35±0.10).其中8 h组与对照组相比差异有统计学意义,8 h组与24 h相比P=0.053.结论 重组尿激酶原能够明显促进HPAECs释放u-PAR并显著抑制PAI-1的表达和释放.重组尿激酶原能够呈时间依赖性提高u-PA mRNA在HPAECs的表达.重组尿激酶原直接影响人肺动脉内皮细胞u-PA系统的表达,该作用可能是增强药物本身溶栓疗效的一种重要途径. 展开更多

关键词 重组尿激酶原 肺动脉内皮细胞 尿激酶型纤溶酶原激活物 尿激酶型纤溶酶原激活物受体 纤溶酶原激活物抑制物-1 纤维蛋白溶解

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内皮素通过增强库容性钙内流促进肺血管平滑肌细胞增生

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作者 王丛 王辰 +3 位作者 王跃秀 刘杰 李积凤 王军 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第2期161-166,共6页

目的通过观察内皮素-1(ET-1)诱导人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)增生的作用机制及细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)变化,探讨ET-1在肺动脉高压(PAH)发病过程中的作用,为进一步干预治疗提供有效的基础依据。方法体外培养HPASMCs并分为:正常对照... 目的通过观察内皮素-1(ET-1)诱导人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)增生的作用机制及细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)变化,探讨ET-1在肺动脉高压(PAH)发病过程中的作用,为进一步干预治疗提供有效的基础依据。方法体外培养HPASMCs并分为:正常对照组和内皮素组(ET-1:0.01μmol/L,0.1μmol/L,1.0μmol/L)。分别应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和细胞计数检测细胞的增生情况,荧光钙成像法测定[Ca2+]i,运用RealTime-PCR、WesternBlotting检测编码钙库操控性钙通道(SOC)的规范瞬时受体电位1(TRPC1)基因及蛋白表达情况。结果ET-1可促进HPASMCs增生,且ET-1诱导的细胞增生依赖于细胞外Ca2+的内流,ET-1处理的细胞中[Ca2+]i和库容性钙内流(CCE)显著升高,同时TRPC1基因转录与蛋白表达也明显增加。结论ET-1能显著促进肺血管平滑肌细胞增生,其机制可能与上调编码SOC的TRPC1表达、增加库容性钙内流使肺血管平滑肌细胞的[Ca2+]i异常升高有关。 展开更多

关键词 操纵性通道 瞬时受体电位通道 肺动脉平滑肌细胞 肺动脉高压

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瞬时感受器电位香草酸受体1在低氧诱导肺动脉平滑肌细胞内钙升高中的作用

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作者 王跃秀 王辰 +2 位作者 王丛 刘杰 王军 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第2期167-171,共5页

目的观察记录低氧条件培养的人肺动脉平滑肌细胞中瞬时感受器电位香草酸受体1(transient potential vanilloid receptor1,TRPV1)对细胞内Ca2+浓度(用340nm/380nm的荧光强度比值表示)的影响,探讨TRPV1在低氧性肺动脉平滑肌细胞增生中的... 目的观察记录低氧条件培养的人肺动脉平滑肌细胞中瞬时感受器电位香草酸受体1(transient potential vanilloid receptor1,TRPV1)对细胞内Ca2+浓度(用340nm/380nm的荧光强度比值表示)的影响,探讨TRPV1在低氧性肺动脉平滑肌细胞增生中的作用。方法应用4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色、流式细胞周期测定以及细胞内Ca2+浓度测定的方法检测细胞增生及细胞内Ca2+浓度变化。结果低氧能明显促进人肺动脉平滑肌细胞的增生,升高人肺动脉平滑肌细胞内静息Ca2+浓度,显著加强环并偶氮酸(cyclopiazonic acid,CPA)诱发的库容性Ca2+内流(capacitative Ca2+entry,CCE),上述效应均可被TRPV1阻断剂Capsazepine(CPZ)所抑制。结论在人肺动脉平滑肌细胞中,TRPV1可能是低氧所致细胞内Ca2+浓度增加、CCE增强和细胞过度增生的重要途径或调制因素。 展开更多

关键词 肺动脉平滑肌细胞 瞬时感受器电位香草酸受体1 钙库操控性通道

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