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重组鼠MANF通过激活SIRT1/AMPK信号通路参与脓毒症诱导心肌损伤的保护作用
1
作者
何浩
李成
+3 位作者
胡赛
夏风强
张弛
王静
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2024年第11期1981-1988,共8页
目的探讨中脑星形胶质细胞来源的神经营养因子(MANF)通过激活SIRT1/AMPK信号通路在脓毒症诱导心肌损伤中的保护作用。方法48只小鼠随机分为4组:对照组、重组鼠MANF(rmMANF)组、盲肠结扎穿刺(CLP)组和CLP+rmMANF组,每组12只。CLP后8 h检...
目的探讨中脑星形胶质细胞来源的神经营养因子(MANF)通过激活SIRT1/AMPK信号通路在脓毒症诱导心肌损伤中的保护作用。方法48只小鼠随机分为4组:对照组、重组鼠MANF(rmMANF)组、盲肠结扎穿刺(CLP)组和CLP+rmMANF组,每组12只。CLP后8 h检测存活率、脓毒症评分、肛温、血生化指标、心肌损伤病理指标及内质网应激(ERS)相关蛋白表达。将H9C2细胞分为对照(Con)组、脂多糖(LPS)组、LPS+rmMANF组、LPS+rmMANF+EX527组和LPS+rmMANF+Cpd C组。LPS处理24 h,收集细胞,分析细胞中ERS蛋白表达和凋亡情况。结果与CLP组比较,CLP+rmMANF组脓毒症评分及血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、血尿素氮(BUN)水平降低(P<0.01),肛门温度、血清白蛋白(ALB)水平升高(P<0.05);CLP+rmMANF组心脏组织中MANF表达显著增加(P<0.01),葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)表达及TUNEL阳性细胞百分比显著降低(P<0.05)。体外实验中,LPS刺激下调了H9C2细胞中SIRT1和AMPK的表达,而rmMANF进一步增加了SIRT1和AMPK的表达水平。与LPS+rmMANF组比较,LPS+rmMANF+EX527组和LPS+rmMANF+Cpd C组H9C2细胞中GRP78、CHOP蛋白表达和细胞凋亡率增加(P<0.05)。结论rmMANF通过激活SIRT1/AMPK信号通路抑制脓毒症诱导心肌损伤相关ERS,进而保护心肌损伤。
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关键词
内质网应激
中脑星形胶质细胞来源的神经营养因子
脓毒症
心肌损伤
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职称材料
RNF99通过TAK1/NF-κB信号通路参与泛素化与脓毒症性休克的潜在联系
2
作者
张弛
胡赛
+3 位作者
王静
夏凤强
程晓英
甘泽英
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2024年第5期615-620,626,共7页
目的 探讨环指蛋白99(RNF99)介导的转化生长因子激酶1(TAK1)/核因子-κB(NF-κB)信号通路参与泛素化与脓毒症性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的潜在联系。方法 进行质粒和siRNA转染以过表达或敲低小鼠肺泡上皮细胞(MLE12)中RNF99,分析磷酸p6...
目的 探讨环指蛋白99(RNF99)介导的转化生长因子激酶1(TAK1)/核因子-κB(NF-κB)信号通路参与泛素化与脓毒症性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的潜在联系。方法 进行质粒和siRNA转染以过表达或敲低小鼠肺泡上皮细胞(MLE12)中RNF99,分析磷酸p65和p65蛋白表达。免疫沉淀分析RNF99与TRAF6和TAK1的蛋白相互作用关系。将40只小鼠随机分成WT+PBS、WT+LPS、RNF99特异性表达(TG)+PBS和TG+LPS组,每组10只。通过腹膜内注射30 mg/kg LPS诱导脓毒症。结果 与Vector组相比,RNF99组MLE12细胞中TRAF6和TAK1的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。泛素化TRAF6蛋白在RNF99敲低的MLE12细胞中增加。与LPS+Vector组相比,在LPS+RNF99组MLE12细胞中p65的磷酸化水平明显降低(P <0.05)。与si-NC组相比,si-RNF99组MLE12细胞中RNF99、IκBα的蛋白表达水平显著降低(P <0.05)。与LPS+si-NC组相比,在LPS+si-RNF99组MLE12细胞中p65的磷酸化水平明显增加(P <0.05)。TG+LPS组小鼠肺组织中CD68巨噬细胞染色百分比较WT+LPS组显著降低(P <0.05)。TG+LPS组小鼠肺组织中p65的磷酸化水平显著低于WT+LPS组小鼠(P <0.05)。结论 RNF99通过与NF-κB信号通路的关键调节因子(TRAF6/TAK1)相互作用来调节NF-κB信号通路,并改善小鼠腹腔注射LPS后肺损伤。
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关键词
环指蛋白99
转化生长因子激酶1
核因子-ΚB
脂多糖
肺泡上皮细胞
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职称材料
题名
重组鼠MANF通过激活SIRT1/AMPK信号通路参与脓毒症诱导心肌损伤的保护作用
1
作者
何浩
李成
胡赛
夏风强
张弛
王静
机构
长沙市
第四
医院
(
晓庄学院
附属
长沙
医院
)
重症
医学科
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2024年第11期1981-1988,共8页
基金
湖南省自然科学基金项目(编号:2021JJ70156)。
文摘
目的探讨中脑星形胶质细胞来源的神经营养因子(MANF)通过激活SIRT1/AMPK信号通路在脓毒症诱导心肌损伤中的保护作用。方法48只小鼠随机分为4组:对照组、重组鼠MANF(rmMANF)组、盲肠结扎穿刺(CLP)组和CLP+rmMANF组,每组12只。CLP后8 h检测存活率、脓毒症评分、肛温、血生化指标、心肌损伤病理指标及内质网应激(ERS)相关蛋白表达。将H9C2细胞分为对照(Con)组、脂多糖(LPS)组、LPS+rmMANF组、LPS+rmMANF+EX527组和LPS+rmMANF+Cpd C组。LPS处理24 h,收集细胞,分析细胞中ERS蛋白表达和凋亡情况。结果与CLP组比较,CLP+rmMANF组脓毒症评分及血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、血尿素氮(BUN)水平降低(P<0.01),肛门温度、血清白蛋白(ALB)水平升高(P<0.05);CLP+rmMANF组心脏组织中MANF表达显著增加(P<0.01),葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)表达及TUNEL阳性细胞百分比显著降低(P<0.05)。体外实验中,LPS刺激下调了H9C2细胞中SIRT1和AMPK的表达,而rmMANF进一步增加了SIRT1和AMPK的表达水平。与LPS+rmMANF组比较,LPS+rmMANF+EX527组和LPS+rmMANF+Cpd C组H9C2细胞中GRP78、CHOP蛋白表达和细胞凋亡率增加(P<0.05)。结论rmMANF通过激活SIRT1/AMPK信号通路抑制脓毒症诱导心肌损伤相关ERS,进而保护心肌损伤。
关键词
内质网应激
中脑星形胶质细胞来源的神经营养因子
脓毒症
心肌损伤
Keywords
endoplasmic reticulum stress
mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor
sepsis
myocardial injury
分类号
R459.7 [医药卫生—急诊医学]
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职称材料
题名
RNF99通过TAK1/NF-κB信号通路参与泛素化与脓毒症性休克的潜在联系
2
作者
张弛
胡赛
王静
夏凤强
程晓英
甘泽英
机构
长沙市
第四
医院
(
晓庄学院
附属
长沙
医院
)
重症
医学科
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2024年第5期615-620,626,共7页
基金
湖南省卫健委科研计划项目(编号:202202331255)。
文摘
目的 探讨环指蛋白99(RNF99)介导的转化生长因子激酶1(TAK1)/核因子-κB(NF-κB)信号通路参与泛素化与脓毒症性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的潜在联系。方法 进行质粒和siRNA转染以过表达或敲低小鼠肺泡上皮细胞(MLE12)中RNF99,分析磷酸p65和p65蛋白表达。免疫沉淀分析RNF99与TRAF6和TAK1的蛋白相互作用关系。将40只小鼠随机分成WT+PBS、WT+LPS、RNF99特异性表达(TG)+PBS和TG+LPS组,每组10只。通过腹膜内注射30 mg/kg LPS诱导脓毒症。结果 与Vector组相比,RNF99组MLE12细胞中TRAF6和TAK1的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。泛素化TRAF6蛋白在RNF99敲低的MLE12细胞中增加。与LPS+Vector组相比,在LPS+RNF99组MLE12细胞中p65的磷酸化水平明显降低(P <0.05)。与si-NC组相比,si-RNF99组MLE12细胞中RNF99、IκBα的蛋白表达水平显著降低(P <0.05)。与LPS+si-NC组相比,在LPS+si-RNF99组MLE12细胞中p65的磷酸化水平明显增加(P <0.05)。TG+LPS组小鼠肺组织中CD68巨噬细胞染色百分比较WT+LPS组显著降低(P <0.05)。TG+LPS组小鼠肺组织中p65的磷酸化水平显著低于WT+LPS组小鼠(P <0.05)。结论 RNF99通过与NF-κB信号通路的关键调节因子(TRAF6/TAK1)相互作用来调节NF-κB信号通路,并改善小鼠腹腔注射LPS后肺损伤。
关键词
环指蛋白99
转化生长因子激酶1
核因子-ΚB
脂多糖
肺泡上皮细胞
Keywords
ring finger protein 99
transforming growth factor kinase 1
nuclear factor-κB
lipopoly⁃saccharide
alveolar epithelial cells
分类号
R631.2 [医药卫生—外科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组鼠MANF通过激活SIRT1/AMPK信号通路参与脓毒症诱导心肌损伤的保护作用
何浩
李成
胡赛
夏风强
张弛
王静
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2024
0
在线阅读
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职称材料
2
RNF99通过TAK1/NF-κB信号通路参与泛素化与脓毒症性休克的潜在联系
张弛
胡赛
王静
夏凤强
程晓英
甘泽英
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2024
0
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职称材料
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