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南充市Rh阴性献血者血清学表型和不规则抗体调查 被引量：4
1
作者 杨松 张伶 +3 位作者 邹韬 杨兴明 赵冰海 陈科宇 《检验医学与临床》 CAS 2015年第8期1040-1041,共2页
目的调查南充市Rh阴性无偿献血者的血清学表型和不规则抗体情况。方法应用血型血清学方法对初检Rh阴性的献血者进行Rh阴性确认、血清学表型鉴定及不规则抗体筛选鉴定。结果在433份送检标本中共确认Rh阴性402份(92.8%),检出D变异体23份(5... 目的调查南充市Rh阴性无偿献血者的血清学表型和不规则抗体情况。方法应用血型血清学方法对初检Rh阴性的献血者进行Rh阴性确认、血清学表型鉴定及不规则抗体筛选鉴定。结果在433份送检标本中共确认Rh阴性402份(92.8%),检出D变异体23份(5.3%),其余8份(1.9%)为检验科RhD检测错误;共检出不规则抗体12份,在Rh确认阴性献血者中检出7份抗-D(1.7%);Rh阴性献血者的血清学表型分布结果主要以dccee和dCcee为主,其余为dCCee、dccEe和dCcEe。结论通过本次调查,掌握了南充市Rh阴性无偿献血者的血清学表型和不规则抗体的分布情况,保障了临床Rh阴性患者输血安全性、有效性和及时性。 展开更多
关键词 RH阴性 D变异体 血清学表型 不规则抗体
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PLCε特异性shRNA对人膀胱癌生物学行为的影响
2
作者 刘琪 欧俐苹 +3 位作者 赵懿 程洪林 张彦懿 罗春丽 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第33期3342-3345,I0001,共5页
目的探讨人源磷脂酶Cε(PLCε)特异性短发夹RNA(shRNA)对人膀胱癌增殖、凋亡、侵袭、转移能力的影响。方法用携带PLCεshRNA基因的真核表达质粒pGenesil-PLCε转染BIU-87细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测各组细... 目的探讨人源磷脂酶Cε(PLCε)特异性短发夹RNA(shRNA)对人膀胱癌增殖、凋亡、侵袭、转移能力的影响。方法用携带PLCεshRNA基因的真核表达质粒pGenesil-PLCε转染BIU-87细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测各组细胞PLCεmRNA和蛋白的变化。分别用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、流式细胞术和免疫组化检测BIU-87细胞及裸鼠移植瘤增殖情况和细胞周期的变化;采用RT-PCR检测各组细胞Bcl-2、Bax mRNA的变化;采用Transwell小室体外侵袭法及明胶酶谱分析细胞的侵袭能力。结果转染pGenesil-PLCε质粒的细胞可明显抑制PLCε基因和蛋白表达水平(P<0.05);MTT、流式细胞术与免疫组化检测结果表明转染pGenesil-PLCε质粒的细胞生长明显受抑制(P<0.05),且细胞周期阻滞于G0/G1期;转染pGenesil-PLCε质粒的细胞Bcl-2/Bax mRNA明显降低(P<0.05);明胶酶谱及侵袭实验显示转染pGenesil-PLCε质粒的细胞侵袭、转移能力明显下降(P<0.05)。结论特异性shRNA干扰PLCε基因可抑制膀胱癌的生长,其作用机制可能与抑制肿瘤增殖、诱导细胞凋亡及抑制侵袭转移有关,PLCε为膀胱癌基因治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 细胞增殖 肿瘤浸润 短发夹RNA 磷脂酶Cε
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生物传感器在肠道致病菌临床快速检测中的新进展
3
作者 庄稚佳 丁世家 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第1期75-77,共3页
肠道致病菌是引起感染性腹泻的主要原因之一,主要包括大肠埃希菌、沙门菌属、金黄色葡萄球菌等。传统的细菌培养技术耗时繁琐、检测灵敏度低,无法满足临床上所需的精准快速鉴定。因此,如何快速、灵敏地检测肠道致病菌在疾病预防与控制... 肠道致病菌是引起感染性腹泻的主要原因之一,主要包括大肠埃希菌、沙门菌属、金黄色葡萄球菌等。传统的细菌培养技术耗时繁琐、检测灵敏度低,无法满足临床上所需的精准快速鉴定。因此,如何快速、灵敏地检测肠道致病菌在疾病预防与控制以及临床诊断中具有重要的意义。 展开更多
关键词 生物传感器 肠杆菌属 纳米粒子
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比较两种方法对牛鲍氏计数板中细胞计数结果的影响 被引量：2
4
作者 张明昊 蔡晓钟 +6 位作者 罗娟 薛白 曾娣 徐超 仲煜杰 徐增伟 左国伟 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第5期658-660,共3页
目的比较牛鲍氏计数板的传统计数方法和新计数方法对细胞计数结果的影响。方法用传统计数方法和新计数方法计数118份抗凝血标本中的红细胞,然后将结果与标准值对照。结果在109份有效样本中,有57份(52.29%)用新方法计数结果更准确,40份(3... 目的比较牛鲍氏计数板的传统计数方法和新计数方法对细胞计数结果的影响。方法用传统计数方法和新计数方法计数118份抗凝血标本中的红细胞,然后将结果与标准值对照。结果在109份有效样本中,有57份(52.29%)用新方法计数结果更准确,40份(36.70%)用传统方法计数结果更准确,12份(11.01%)用两种方法计数引出的误差相同。新方法计数误差的平均值为(0.071±0.005)×1012/L,明显低于传统方法计数误差的平均值(0.079±0.006)×1012/L,差异有统计学意义(P<0.01)。结论采用新方法在减小牛鲍氏计数板对细胞计数的误差方面可能有一定的作用。 展开更多
关键词 计数方法 标准值 牛鲍氏计数板 压线细胞 分布误差
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ICAT干扰慢病毒表达载体构建及稳转HL60细胞株的建立 被引量：1
5
作者 王晋蜀 王伟佳 +1 位作者 王婷 张彦 《国际检验医学杂志》 CAS 2016年第7期875-877,共3页
目的构建ICAT基因的干扰慢病毒表达载体,建立稳定转染的HL60细胞系。方法人工设计、合成针对ICAT基因干扰序列,退火后连接到PGLV3干扰载体上,与PG-p1-VSVG、PG-p1-REV、PG-p1-RRE共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染H... 目的构建ICAT基因的干扰慢病毒表达载体,建立稳定转染的HL60细胞系。方法人工设计、合成针对ICAT基因干扰序列,退火后连接到PGLV3干扰载体上,与PG-p1-VSVG、PG-p1-REV、PG-p1-RRE共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染HL60细胞,建立稳定细胞株;应用RT-PCR和Western Blot技术检测HL60稳定细胞中ICAT基因和蛋白表达情况,并与对照组进行比较。结果成功构建了针对ICAT基因的RNAi慢病毒表达载体,病毒滴度为2×10^8 TU/mL;建立稳定转染的HL60细胞株。有效干扰验证显示,shICAT能明显降低ICAT的mRNA及蛋白水平（P〈0.001）。结论成功构建ICAT基因的shRNA慢病毒表达载体,建立稳定干扰ICAT表达的HL60细胞株。 展开更多
关键词 ICAT基因 RNA干扰 HL60细胞
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高效液相色谱法测定A549细胞中的胆固醇水平研究
6
作者 魏思宇 卢蕾 +4 位作者 蔺晓菁 何芸芸 丁世家 阮雄中 练雪梅 《检验医学与临床》 CAS 2017年第7期903-905,908,共4页
目的建立检测A549细胞内胆固醇水平的高效液相色谱(HPLC)方法,为以胞内胆固醇相对水平变化作为指标鉴定组织细胞泡沫化程度及特定组织细胞泡沫化对组织损伤提供技术支持。方法用氢氧化钾乙醇溶液和三氯乙酸分别除去细胞裂解液中的三酰... 目的建立检测A549细胞内胆固醇水平的高效液相色谱(HPLC)方法,为以胞内胆固醇相对水平变化作为指标鉴定组织细胞泡沫化程度及特定组织细胞泡沫化对组织损伤提供技术支持。方法用氢氧化钾乙醇溶液和三氯乙酸分别除去细胞裂解液中的三酰甘油和蛋白,用正己烷-异丙醇的混合溶剂提取细胞内的胆固醇。胆固醇水平采用HPLC法测定,色谱柱为ZORBAX SB-C18(4.6mm×150.0mm,5μm),流动相为乙腈-异丙醇(67∶33,V/V),流速为1mL/min,检测波长为206nm。结果细胞内胆固醇在5~100ng/μL内线性关系良好(r=0.999 9);相对标准偏差(RSD)均低于3.0%,平均加样回收率为94.89%,RSD为2.86%(n=6)。结论 HPLC法简便、准确、重复性好,可用于泡沫细胞程度鉴定,为探讨脂质代谢异常与器官损伤及进一步研究胆固醇代谢紊乱与肺损伤奠定基础。 展开更多
关键词 高效液相色谱 A549细胞 胆固醇
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高效液相色谱法同时测定人尿液中布洛芬和吲哚美辛的浓度
7
作者 刘丰 周辉 袁泰先 《中国药房》 CAS 北大核心 2017年第26期3631-3634,共4页
目的:建立同时测定人尿液中布洛芬和吲哚美辛浓度的方法。方法:尿液样品经乙腈沉淀蛋白后,采用高效液相色谱法测定。色谱柱为Discovery C_(18),流动相为乙腈-20 mmol/L乙酸铵溶液(85∶15,V/V,用冰醋酸调节pH至3.5),紫外检测波长为220nm... 目的:建立同时测定人尿液中布洛芬和吲哚美辛浓度的方法。方法:尿液样品经乙腈沉淀蛋白后,采用高效液相色谱法测定。色谱柱为Discovery C_(18),流动相为乙腈-20 mmol/L乙酸铵溶液(85∶15,V/V,用冰醋酸调节pH至3.5),紫外检测波长为220nm,流速为1.0 mL/min,柱温为室温,进样量为80μL。结果:布洛芬和吲哚美辛的尿药浓度均在0.1~50.0μg/mL范围内线性关系良好(r分别为0.999 6、0.999 5,n=3),定量下限均为0.1μg/mL,最低检测限均为0.03μg/mL;日内、日间RSD均小于10%(n=5),准确度为94.7%~97.2%;布洛芬和吲哚美辛的提取回收率分别为89.5%~91.8%、90.2%~92.4%(RSD均小于10%,n=15)。结论:该方法简便、快速,且选择性、精密度、准确度良好,适用于人尿液中布洛芬和吲哚美辛浓度的同时测定。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 布洛芬 吲哚美辛 尿药浓度
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4种血清肿瘤标志物及粪便隐血的联合检测在Dukes B期结肠癌诊断中的应用 被引量：38
8
作者 汤军 欧俐苹 +3 位作者 陈玲 翁亚光 徐增伟 张明昊 《重庆医学》 CAS 北大核心 2017年第22期3073-3076,共4页
目的探讨血清癌胚抗原(CEA)、糖链抗原199(CA199)、糖链抗原125(CA125)、甲胎蛋白(AFP)和粪便隐血联合检测在Dukes B期结肠癌中的诊断价值。方法检测2013年3月至2015年8月56例结肠癌患者(结肠癌组)、35例结肠息肉良性疾病患者(息肉组)... 目的探讨血清癌胚抗原(CEA)、糖链抗原199(CA199)、糖链抗原125(CA125)、甲胎蛋白(AFP)和粪便隐血联合检测在Dukes B期结肠癌中的诊断价值。方法检测2013年3月至2015年8月56例结肠癌患者(结肠癌组)、35例结肠息肉良性疾病患者(息肉组)、41例体检健康者(健康对照组)的上述指标及其对应的阳性检出率。分析5项指标单个检测和联合检测的灵敏度、特异度。结果结肠癌组的血清CEA、CA125、CA199及粪便隐血水平均明显高于息肉组和健康对照组(P<0.05)。与息肉组相比,AFP水平及其血清阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。血清CEA、CA125、CA199及粪便隐血入选Logistic回归方程,对应的曲线下面积分别为0.745、0.886、0.792、0.864,阳性检出率分别为48.2%、35.7%、39.3%和78.6%;联合检测可使灵敏度、特异度、曲线下面积分别提高到87.5%、92.1%、0.957,显著优于单项检测。结论 CEA、CA199、CA125、隐血联合检测能为早期诊断结肠癌提供有力的依据。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 Logistic模型 癌胚抗原 甲胎蛋白类 受试者特征曲线 粪便隐血
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RP-HPLC法测定人血浆中血管紧张素Ⅱ的浓度 被引量：1
9
作者 袁泰先 万涛 +2 位作者 于天晓 李青 丁世家 《中国药房》 CAS CSCD 2012年第22期2053-2055,共3页
目的:建立以反相高效液相色谱(RP-HPLC)-荧光法检测人血浆中血管紧张素Ⅱ浓度的方法。方法:采用固相萃取法纯化血浆样本,以荧光胺柱前衍生后进样测定。以乙腈-10mmol·L-1三羟甲基氨基甲烷盐缓冲液(pH8.5)作为流动相,梯度洗脱,流速... 目的:建立以反相高效液相色谱(RP-HPLC)-荧光法检测人血浆中血管紧张素Ⅱ浓度的方法。方法:采用固相萃取法纯化血浆样本,以荧光胺柱前衍生后进样测定。以乙腈-10mmol·L-1三羟甲基氨基甲烷盐缓冲液(pH8.5)作为流动相,梯度洗脱,流速为1mL·min-1,色谱柱为LunaC5,激发波长为273nm,发射波长为476nm。结果:血管紧张素Ⅱ血药浓度在10～200ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9995),最低检出限(S/N=3)为5ng·mL-1,日内、日间RSD分别为1.65%和4.20%。结论:本方法快速、灵敏、准确、重复性好,可用于血浆中血管紧张素Ⅱ浓度的检测。 展开更多
关键词 反相高效液相色谱法 荧光检测 柱前衍生 血管紧张素Ⅱ 荧光胺 血药浓度
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慢性乙型肝炎及乙型肝炎性肝硬化患者色氨酸代谢变化及其相关性分析 被引量：2
10
作者 班艳娜 甄乾娜 +2 位作者 邓琳琳 何一帆 丁敏 《重庆医学》 CAS 北大核心 2017年第33期4622-4624,4627,共4页
目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)和乙型肝炎性肝硬化(HBC)患者色氨酸(Trp)代谢变化及相关性。方法选取2015年10月至2016年1月在重庆医科大学附属第一医院住院的CHB 81例和HBC 40例患者为研究对象,40例健康者为对照。采用高效液相色谱-荧光检... 目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)和乙型肝炎性肝硬化(HBC)患者色氨酸(Trp)代谢变化及相关性。方法选取2015年10月至2016年1月在重庆医科大学附属第一医院住院的CHB 81例和HBC 40例患者为研究对象,40例健康者为对照。采用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FD)对各组受试者血浆中Trp及代谢产物犬尿氨酸(Kyn)、5-羟色胺(5-HT)水平进行测定,实时荧光定量PCR检测HBV-DNA病毒复制数,分析3组间血清学指标差异,采用Pearson相关分析和Logistic回归分析筛选危险因素。结果与对照组比较,CHB组、HBC组受试者血浆中Trp和5-HT水平明显降低(P<0.01);HBC组受试者血浆中Kyn/Trp明显高于其他两组(P<0.01)。HBC组Kyn/Trp与A/G呈负相关(r=-0.686,P<0.01),CHB组Kyn/Trp与Log DNA呈正相关(r=0.784,P<0.01)。Logistic回归分析显示Kyn/Trp为CHB和HBC的危险因素。结论检测血浆中Trp及其代谢产物可作为辅助指标评估乙型肝炎进展情况。 展开更多
关键词 色氨酸 犬尿氨酸 5-羟色胺 乙型肝炎 乙型肝炎性肝硬化
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