目的:探讨小儿定喘颗粒治疗支气管哮喘的药效物质基础与潜在作用机制。方法:采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOFMS)对小儿定喘颗粒中的化学成分及入血成分进行分析,结合PubChem、TCMSP、SwissTargetPrediction数据库获...目的:探讨小儿定喘颗粒治疗支气管哮喘的药效物质基础与潜在作用机制。方法:采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOFMS)对小儿定喘颗粒中的化学成分及入血成分进行分析,结合PubChem、TCMSP、SwissTargetPrediction数据库获取入血成分的作用靶点;采用GeneCards、OMIM、TTD数据库获取哮喘的靶点信息;应用String平台构建靶蛋白相互作用网络;对交集靶点进行GO、KEGG通路富集分析,利用Auto Dock Vina软件对关键靶点及核心成分进行分子对接验证;利用Gromacs软件对最佳结合模型进行分子动力学模拟实验,采用Western blot法验证小儿定喘颗粒对哮喘富集关键通路相关蛋白表达的影响。结果:共识别出小儿定喘颗粒中107种化学成分(主要包括黄酮类及生物碱类)及小鼠血清中25种原型成分,疾病与入血成分具有269个交集靶点,主要涉及PI3K-Akt、MAPK、EGFR酪氨酸激酶抑制等信号通路,分子对接结果显示核心成分与关键靶点具有较好的结合能,分子动力学模拟结果表明黄芩素与TNF结合稳定且紧密,动物实验结果表明小儿定喘颗粒可以显著抑制哮喘引起的PI3K-Akt信号通路的激活,下调相关蛋白的表达,与网络药理学预测结果基本一致。结论:小儿定喘颗粒中的汉黄芩素、异甘草素、黄芩素、5,6-二羟基-7-甲氧基黄酮及去甲汉黄芩素等成分可通过调节AKT1、TNF、MAPK3等关键靶点干预PI3K-Akt、MAPK、EGFR酪氨酸激酶抑制等信号通路,从而通过多成分、多靶点、多通路的综合作用以有效治疗哮喘。展开更多
文摘目的:探讨小儿定喘颗粒治疗支气管哮喘的药效物质基础与潜在作用机制。方法:采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOFMS)对小儿定喘颗粒中的化学成分及入血成分进行分析,结合PubChem、TCMSP、SwissTargetPrediction数据库获取入血成分的作用靶点;采用GeneCards、OMIM、TTD数据库获取哮喘的靶点信息;应用String平台构建靶蛋白相互作用网络;对交集靶点进行GO、KEGG通路富集分析,利用Auto Dock Vina软件对关键靶点及核心成分进行分子对接验证;利用Gromacs软件对最佳结合模型进行分子动力学模拟实验,采用Western blot法验证小儿定喘颗粒对哮喘富集关键通路相关蛋白表达的影响。结果:共识别出小儿定喘颗粒中107种化学成分(主要包括黄酮类及生物碱类)及小鼠血清中25种原型成分,疾病与入血成分具有269个交集靶点,主要涉及PI3K-Akt、MAPK、EGFR酪氨酸激酶抑制等信号通路,分子对接结果显示核心成分与关键靶点具有较好的结合能,分子动力学模拟结果表明黄芩素与TNF结合稳定且紧密,动物实验结果表明小儿定喘颗粒可以显著抑制哮喘引起的PI3K-Akt信号通路的激活,下调相关蛋白的表达,与网络药理学预测结果基本一致。结论:小儿定喘颗粒中的汉黄芩素、异甘草素、黄芩素、5,6-二羟基-7-甲氧基黄酮及去甲汉黄芩素等成分可通过调节AKT1、TNF、MAPK3等关键靶点干预PI3K-Akt、MAPK、EGFR酪氨酸激酶抑制等信号通路,从而通过多成分、多靶点、多通路的综合作用以有效治疗哮喘。
