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LncRNA H19在THP-1来源泡沫细胞脂质蓄积中的作用及机制
1
作者 阿曼古丽·如则 王雪梅 +4 位作者 尼鲁帕尔·谢甫开提 赵翎 赵帮豪 霍强 高晓明 《新疆医科大学学报》 CAS 2023年第1期50-55,共6页
目的探讨长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)H19在人单核细胞THP-1源巨噬细胞脂质蓄积中的作用及可能的分子机制。方法THP-1细胞经佛波酯(PMA)和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育诱导成为泡沫细胞,构建体外动脉粥样硬化(泡沫细胞... 目的探讨长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)H19在人单核细胞THP-1源巨噬细胞脂质蓄积中的作用及可能的分子机制。方法THP-1细胞经佛波酯(PMA)和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育诱导成为泡沫细胞,构建体外动脉粥样硬化(泡沫细胞)模型。利用Lipofectamine TM 3000转染试剂,将H19小干扰RNA(siRNA)转染到THP-1细胞以沉默H19基因;油红O染色及异丙醇提取定量的方法检测细胞内脂质蓄积程度;实时荧光定量PCR检测LncRNA H19 mRNA表达水平;Western blot检测过氧化物酶体增殖激活受体(PPAR-α)蛋白表达水平。结果油红O染色及胆固醇检测结果提示泡沫细胞模型构建成功。RT-PCR检测显示,ox-LDL诱导成功的THP-1源泡沫细胞模型中LncRNA H19 mRNA相对表达量明显增加(P<0.01),而在H19 siRNA沉默后,THP-1源泡沫细胞中脂质含量明显减少(P<0.01)。Western blot检测结果发现,ox-LDL刺激后与对照组相比,PPAR-α蛋白表达水平明显降低,而在H19 siRNA沉默组,PPAR-α蛋白表达水平显著回升(P<0.01)。结论LncRNA H19在THP-1来源泡沫细胞中高表达,从而抑制PPAR-α的表达,进而增加THP-1来源巨噬细胞的脂质吞噬,可能成为治疗动脉粥样硬化的潜在靶点。 展开更多
关键词 LncRNA H19 人单核细胞THP-1 PPAR-Α 动脉粥样硬化
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CAFs条件培养液上调人肝内胆管癌HCCC-9810细胞中survivin基因表达 被引量：1
2
作者 马永红 谭姣 +3 位作者 雷静 石明娟 唐启胜 杨龙飞 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期542-547,共6页
目的:探讨肿瘤相关成纤维细胞(carcinoma-associatedbroblasts,CAFs)条件培养液对人肝内胆管癌HCCC-9810细胞中survivin基因表达的影响。方法:采用MTT法检测CAFs条件培养液对HCCC-9810细胞增殖能力的影响,FCM法检测CAFs条件培养液对HCC... 目的:探讨肿瘤相关成纤维细胞(carcinoma-associatedbroblasts,CAFs)条件培养液对人肝内胆管癌HCCC-9810细胞中survivin基因表达的影响。方法:采用MTT法检测CAFs条件培养液对HCCC-9810细胞增殖能力的影响,FCM法检测CAFs条件培养液对HCCC-9810细胞周期分布的影响,实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测CAFs条件培养液对HCCC-9810细胞中survivin mRNA和蛋白表达水平的影响。结果:CAFs条件培养液能够明显促进HCCC-9810细胞的增殖(P<0.05)。CAFs条件培养液处理组G0/G1期HCCC-9810细胞所占百分比低于RPMI 1640培养液培养的对照组(P<0.05),S期HCCC-9810细胞所占百分比高于对照组(P<0.05),G2/M期HCCC-9810细胞所占百分比与对照组间的差异无统计学意义(P>0.05)。CAFs条件培养液能够上调HCCC-9810细胞中survivin mRNA和蛋白表达水平(P值均<0.05)。结论:CAFs条件培养液能够促进HCCC-9810细胞的增殖和细胞周期进程,这一作用可能与上调survivin mRNA和蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 癌相关成纤维细胞 基因表达 SURVIVIN
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长链非编码RNA在内皮细胞损伤模型中的表达调控研究 被引量：2
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作者 张蕊 耿佳 王雪梅 《医学信息》 2020年第22期71-74,95,共5页
目的研究不同应激条件下的内皮细胞(HUVECs)损伤模型中lncRNAs的表达变化。方法将HUVECs分为正常对照组、H2O2干预组、LPS诱导组及ox-LDL干预组,正常对照组细胞常规培养,H2O2干预组采用200μmol/L浓度的H2O2孵育12 h,LPS诱导组采用100 n... 目的研究不同应激条件下的内皮细胞(HUVECs)损伤模型中lncRNAs的表达变化。方法将HUVECs分为正常对照组、H2O2干预组、LPS诱导组及ox-LDL干预组,正常对照组细胞常规培养,H2O2干预组采用200μmol/L浓度的H2O2孵育12 h,LPS诱导组采用100 ng/ml LPS诱导6 h,ox-LDL干预组使用浓度为50μg/ml ox-LDL的培养液诱导内皮细胞损伤48 h。建立模型后分别检测心梗相关lncRNA H19、MAIT、MALAT1、ANRIL在脐静脉内皮细胞中的m RNA表达;实时荧光定量法测定HUVECs中lncRNAs的表达,以及炎性因子VCAM-1、MCP-1和抗炎因子eNOS、IL-10、Arginine的m RNA表达;ELISA法检测培养上清液中促炎因子及抗炎因子的表达。结果与对照组相比,ox-LDL干预组lncRNA H19、MAIT、ANRIL的表达均上调,差异有统计学意义(P<0.05);炎性因子MCP-1和VCAM-1的m RNA表达水平均上调(P<0.05),eNOS的m RNA表达下调(P<0.05),细胞上清液中的MCP-1、VCAM-1的表达增加(P<0.05)。ox-LDL干预组的HUVECs细胞上清液中的eNOS活性低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 lncRNA H19、MIAT、MALAT1、ANRIL参与调控了内皮细胞的脂质代谢。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 动脉粥样硬化 人脐静脉内皮细胞 氧化型低密度脂蛋白
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SPOC联合RBL教学方式在外科学临床见习教学中的应用 被引量：4
4
作者 张海华 唐笛 +3 位作者 高贵洲 苏旋 张艳达 张涛 《中华医学教育杂志》 2022年第8期717-720,共4页
目的:探讨小规模限制性在线课程(small private online course,SPOC)联合基于研究学习(research-based learning,RBL)在外科学临床见习教学课程中的应用效果。方法:选取2020年5月和2021年8月在空军军医大学第二附属医院胸腔外科进行临... 目的:探讨小规模限制性在线课程(small private online course,SPOC)联合基于研究学习(research-based learning,RBL)在外科学临床见习教学课程中的应用效果。方法:选取2020年5月和2021年8月在空军军医大学第二附属医院胸腔外科进行临床见习的空军军医大学2017级与2018级临床医学专业194名学员作为研究对象。2018级学员作为试验组,实施SPOC联合RBL教学方式;2017级学员作为对照组,实施传统教学方式。见习结束后对两组学员进行理论考试和问卷调查。考核评分组间比较采用 t检验,问卷调查组间比较采用χ^(2)检验。 结果:试验组学员优良率理论考核成绩高于对照组学员[35.4%(34/96)比22.4%(22/98)],其差异具有统计学意义( P=0.047)。试验组学员主观案例分析题成绩高于对照组学员[(52.5±19.8)分比(47.9±8.6)分],其差异具有统计学意义( P=0.037)。问卷调查结果显示,试验组学员在提高学习兴趣、提高创新能力等方面评价优于对照组学员[87.5%(84/96)比56.1%(55/98), 69.8%(67/96)比32.7%(32/98)] ,其差异均具有统计学意义(均 P<0.001)。 结论:SPOC联合RBL教学方式能够有效提升教学效果与质量,有助于提升学员主动探索能力。 展开更多
关键词 外科学 见习教学 小规模限制性在线课程 基于研究学习
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长链非编码RNA MIAT在2型糖尿病外周血单核细胞中的表达及相关性分析
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作者 耿佳 刘芬 +2 位作者 曹莹 邢远 王雪梅 《医学信息》 2021年第12期5-8,共4页
目的研究2型糖尿病(T2DM)患者外周血单核细胞中长链非编码RNA心肌梗死相关转录本(MIAT)表达及其T2DM的相关性,评估了lncRNA MIAT作为T2DM生物标志物的潜在应用价值。方法选取2017年8月~2018年2月在新疆医科大学第一临床附属医院入院进... 目的研究2型糖尿病(T2DM)患者外周血单核细胞中长链非编码RNA心肌梗死相关转录本(MIAT)表达及其T2DM的相关性,评估了lncRNA MIAT作为T2DM生物标志物的潜在应用价值。方法选取2017年8月~2018年2月在新疆医科大学第一临床附属医院入院进行就诊的100例汉族T2DM患者作为T2DM组,另选100名健康受试者做对照组。分别收集临床资料和外周血,完成血生化指标的测定,用淋巴细胞分离液分离单核细胞,提取总RNA,应用实时荧光定量PCR法检测lncRNA MIAT的表达。评价lncRNA作为T2DM生物标志物的诊断价值,分析相关危险因素。结果T2DM组外周血单核细胞中lncRNA MIAT的mRNA水平高于对照组(1.90±0.85 vs 1.11±0.66),差异有统计学意义(P<0.05);受试者操作特征曲线分析显示,lncRNA MIAT对T2DM具有良好的诊断价值(AUC=0.753,95%CI:0.686~0.820),多元回归分析显示lncRNA MIAT是T2DM的危险因素(OR=1.527,95%CI=1.130~1.919,P=0.004)。lncRNA MIAT的表达与年龄、体重指数、低密度脂蛋白、总胆固醇、三油甘酯、空腹血糖、餐后2h血糖水平正相关,与性别、高血压、高密度脂蛋白水平负相关,其中具有显著相关性的是低密度脂蛋白(r=0.201、P<0.05)、总胆固醇(r=0.221,P<0.05)、空腹血糖(r=0.385,P<0.05),餐后2h血糖(r=0.342,P<0.05)。结论外周血单核细胞的lncRNA MIAT表达和T2DM正相关,MIAT参与调控糖尿病的病理发生。 展开更多
关键词 2型糖尿病 外周血单核细胞 长链非编码RNA
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