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白癜风患者血清前黑素小体蛋白17自身抗体的检测 被引量：3
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作者 呼蕾 孙丽君 +6 位作者 李元 李慧瑾 梁导艳 孙晶莹 王鑫 胡军 谢鑫 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期411-413,417,共4页
目的获取重组前黑素小体蛋白17(Pmel 17)并用于检测白癜风患者血清中Pmel 17自身抗体的分布。方法通过RT-PCR从原代黑素细胞中获得人的Pmel 17基因,先后插入克隆载体pMD19-T和表达载体pGEX-4T-1,以构建重组质粒。IPTG诱导Pmel 17蛋白表... 目的获取重组前黑素小体蛋白17(Pmel 17)并用于检测白癜风患者血清中Pmel 17自身抗体的分布。方法通过RT-PCR从原代黑素细胞中获得人的Pmel 17基因,先后插入克隆载体pMD19-T和表达载体pGEX-4T-1,以构建重组质粒。IPTG诱导Pmel 17蛋白表达后以亲和层析法进行纯化。间接ELISA检测白癜风患者血清中抗Pmel 17自身抗体的阳性率。结果重组质粒经测序,与预期设计完全一致,同时Pmel 17蛋白成功表达和纯化。ELISA检测进展期白癜风患者血清中抗Pmel 17自身抗体阳性率为22%,稳定期白癜风患者阳性率仅为2%,健康对照组未检测到抗Pmel 17自身抗体,进展期和稳定期阳性率差异具有统计学意义。结论成功表达了Pmel 17重组蛋白,证明Pmel 17自身抗体与白癜风的疾病严重程度有一定关系。 展开更多
关键词 前黑素小体蛋白17 原核表达 白癜风
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Toll样受体4的活化抑制人表皮原代黑素细胞的黑素合成 被引量：2
2
作者 孙丽君 孙晶莹 +4 位作者 霍雪萍 李亚萍 李元 谢鑫 胡军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1466-1470,共5页
目的探讨黑素细胞Toll样受体4(TLR4)的活化对黑素细胞黑素合成的影响。方法以原代培养的黑素细胞为研究对象,采用TLR4的激动剂脂多糖(LPS)刺激细胞,首先检测黑素含量的变化,其次用实时定量PCR和Western blot法检测前黑素体蛋白(Pmel17)... 目的探讨黑素细胞Toll样受体4(TLR4)的活化对黑素细胞黑素合成的影响。方法以原代培养的黑素细胞为研究对象,采用TLR4的激动剂脂多糖(LPS)刺激细胞,首先检测黑素含量的变化,其次用实时定量PCR和Western blot法检测前黑素体蛋白(Pmel17)、酪氨酸酶(TYR)、小眼畸形相关转录因子(MITF)的表达变化;最后用电镜观察黑素小体的变化。结果 LPS刺激细胞后,黑素含量明显减少,黑素合成相关蛋白Pmel17和TYR的表达降低,且这种变化依赖于MITF转录因子的调控,同时电镜结果显示黑素小体合成被抑制。结论 TLR4的活化降低黑素细胞的黑素合成,提示细菌的产物可以通过天然免疫影响黑素合成。 展开更多
关键词 TOLL样受体4 黑素细胞 黑素合成
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