基因重组人骨形成蛋白-2对培养骨髓细胞的生物学效应 被引量：17

1

作者 陈富林 任卫红 +2 位作者 蒲勤 毛天球 杨连甲 《第四军医大学学报》 1999年第2期143-145,共3页

目的：骨髓是机体重要的造血器官，其中的单个核细胞主要是单核细胞和巨噬细胞，骨髓组织在骨损伤修复过程中也发挥重要的作用．为提高骨形成蛋白（BMP）修复骨缺损的能力，方法：本实验观察了基因重组人骨形成蛋白-2（re－combinanthum... 目的：骨髓是机体重要的造血器官，其中的单个核细胞主要是单核细胞和巨噬细胞，骨髓组织在骨损伤修复过程中也发挥重要的作用．为提高骨形成蛋白（BMP）修复骨缺损的能力，方法：本实验观察了基因重组人骨形成蛋白-2（re－combinanthumanBoneMorphogeneticProtein－2，rhBMP2）对培养骨髓细胞生物学活性的影响．结果：低浓度的rhBMP2（＜0．16mg／L）对培养骨髓细胞的碱性磷酸酶活性、蛋白质含量均有明显的促进作用，且呈剂量依赖性，高浓度的rhBMP2（＞0．16mg／L）对培养骨髓细胞的增殖也有一定促进作用结论：本研究的结果进一步证实，骨髓细胞也是BMP重要的靶细胞，BMP不仅促进骨髓细胞向成骨细胞的表型转化，而且可以促进骨髓细胞的增殖，因此在使用复合BMP的植骨材料进行骨缺损修复时，如能辅以骨髓细胞植入，将会大大提高骨缺损的修复效果． 展开更多

关键词 RHBMP2 骨髓细胞 细胞分裂 生物学 骨形成蛋白

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克隆MCF-7细胞凋亡差异表达基因的一种方法 被引量：4

2

作者 晏伟 朱峰 +6 位作者 赵忠良 柴玉波 岳文 邵晨 路凡 李青 王成济 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期35-37,共3页

目的克隆人乳腺癌ＭＣＦ－７细胞凋亡相关基因，分析验证所用方法的特点。方法采用基于ＰＣＲ的消减杂交技术，在已建立的全反式维甲酸诱导人乳腺癌ＭＣＦ－７细胞的凋亡模型中，克隆ＭＣＦ－７细胞凋亡的相关基因。结果从１３个克隆中... 目的克隆人乳腺癌ＭＣＦ－７细胞凋亡相关基因，分析验证所用方法的特点。方法采用基于ＰＣＲ的消减杂交技术，在已建立的全反式维甲酸诱导人乳腺癌ＭＣＦ－７细胞的凋亡模型中，克隆ＭＣＦ－７细胞凋亡的相关基因。结果从１３个克隆中，共筛选出５个表达的基因。其中４个为已知基因，１个为新基因。新基因命名为ａｐｍｃｆ－１，Ｇｅｎｂａｎｋ登录号为ＡＦ１４１８８２。４个已知基因中３个与凋亡关系密切。结论这种改良的基于ＰＣＲ的消减杂交技术，为克隆差异表达基因提供了一种新的方法和思路。 展开更多

关键词 MCF-7细胞 细胞凋亡 基因表达 聚合酶链反应

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稳定表达人骨形成蛋白2成纤维细胞的建立与鉴定 被引量：10

3

作者 司晓辉 杨连甲 金岩 《第四军医大学学报》 1999年第2期127-129,共3页

目的：探讨BMP对细胞分化的调节作用，为BMP基因疗法的建立提供依据．方法：构建了含有人BMP2开放阅读框（1．2kb）的真核表达载体PBK－B2，利用脂质体转染方法将其导入NIH3T3细胞，通过G－418筛选获得阳性细胞克隆．细胞原位杂交和免... 目的：探讨BMP对细胞分化的调节作用，为BMP基因疗法的建立提供依据．方法：构建了含有人BMP2开放阅读框（1．2kb）的真核表达载体PBK－B2，利用脂质体转染方法将其导入NIH3T3细胞，通过G－418筛选获得阳性细胞克隆．细胞原位杂交和免疫组化检测BMP2基因的稳定转染及表达情况．结果：转染细胞内有BMP2mRNA的转录及其蛋白的表达．结论：人BMP2基因在NIH3T3细胞中得到稳定有效的表达． 展开更多

关键词 骨形成蛋白2 基因转染 基因表达 成纤维细胞

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异体骨基质明胶颗粒骨水泥复合牛骨形态发生蛋白修复兔挠骨缺损 被引量：5

4

作者 胡运生 范清宇 +4 位作者 杨连甲 周勇 蒋维中 裘秀春 文艳华 《第四军医大学学报》 1999年第12期1071-1074,共4页

探讨异体骨基质明胶颗粒、骨水泥作为bBMP载体及释放系统修复兔烧骨缺损的成骨方式及诱导成骨能力．方法：复合材料及自体骨分别移植于成年新西兰兔烧骨基准大小骨缺损，术后不同时期进行X线、组织形态学、ECT，扫描电镜观察，比较复合... 探讨异体骨基质明胶颗粒、骨水泥作为bBMP载体及释放系统修复兔烧骨缺损的成骨方式及诱导成骨能力．方法：复合材料及自体骨分别移植于成年新西兰兔烧骨基准大小骨缺损，术后不同时期进行X线、组织形态学、ECT，扫描电镜观察，比较复合材料修复骨缺损的方式及能力．结果：复合材料修复成年新西兰兔挠骨基准大小骨缺损，与新鲜自体骨移植相比，修复程度及愈合率无显著差异；复合材料和新鲜自体骨移植的愈合过程及成骨方式相同．结论：异体骨基质明胶颗粒、骨水泥是bBMP的良好载体，两者复合后有良好诱导成骨能力，用于修复兔挠骨缺损，效果良好． 展开更多

关键词 异体骨基质明胶 自体骨移植 桡骨缺损 兔

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细胞周期素依赖激酶4在颌骨软骨肉瘤的表达及意义 被引量：5

5

作者 司晓辉 金岩 +2 位作者 杨连君 杨连甲 TipoeGL 《第四军医大学学报》 2000年第8期929-931,共3页

目的　分析细胞周期素依赖激酶 4(CDK4)在颌骨软骨肉瘤的表达及意义 .方法　利用免疫组化法检测 CDK4在2 0例颌骨软骨肉瘤、8例骨软骨瘤和 8例骨质增生中的表达 .结果　 6 5 .0 % (13/ 2 0 )的软骨肉瘤中 CDK4呈阳性表达 ,CDK4表达率随... 目的　分析细胞周期素依赖激酶 4(CDK4)在颌骨软骨肉瘤的表达及意义 .方法　利用免疫组化法检测 CDK4在2 0例颌骨软骨肉瘤、8例骨软骨瘤和 8例骨质增生中的表达 .结果　 6 5 .0 % (13/ 2 0 )的软骨肉瘤中 CDK4呈阳性表达 ,CDK4表达率随病理学分级的升高呈增高趋势 ,但未见统计学差异 (P>0 .0 5 ) ;CDK4在骨软骨瘤和骨质增生中的阳性表达率分别为 12 .5 % (1/ 8)和 0 (0 / 8) ,且均与软骨肉瘤有显著性差异 (P<0 .0 5 ) .结论　 CDK4在颌骨软骨肉瘤中过表达并与其发生发展相关 . 展开更多

关键词 细胞周期素依赖激酶4 免疫组化 颌骨软骨肉瘤

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人骨形成蛋白2反义RNA对骨肉瘤细胞OS-9901生物学活性的影响 被引量：2

6

作者 张殿忠 岳文 +3 位作者 范清宇 杨连甲 张惠中 裘秀春 《第四军医大学学报》 1999年第12期S123-S125,共3页

探讨骨形成蛋白（BMP）对人骨肉瘤细胞的作用及意义．方法：将重组人BMPZ基因的反义核酸逆转录病毒表达载体PDOR－AB用脂质体导入BMP表达阳性的骨肉瘤细胞OS－99OI，观察骨肉瘤细胞OS－99OI的BMP表达、增殖活性、肿瘤抑制基因＂m23的表... 探讨骨形成蛋白（BMP）对人骨肉瘤细胞的作用及意义．方法：将重组人BMPZ基因的反义核酸逆转录病毒表达载体PDOR－AB用脂质体导入BMP表达阳性的骨肉瘤细胞OS－99OI，观察骨肉瘤细胞OS－99OI的BMP表达、增殖活性、肿瘤抑制基因＂m23的表达、细胞周期和电镜下形态改变．结果：转染后，OS－99o1细胞中内源性的BMP表达产物明显下降；增殖活性明显下降；肿瘤转移抑制基因＂m23表达未见改变；细胞周期分析表明：GI期细胞比例上升，S期比例下降；电镜观察可见细胞质中溶酶体增多，染色质有断裂现象．结论：反义核酸技术阻断BMPZ在OS－99o1细胞中的表达后，肿瘤细胞的增殖活性降低，证实骨肉瘤细胞中BMP的表达增加了肿瘤细胞的增殖活性． 展开更多

关键词 骨形成蛋白 骨肉瘤 反义RNA 细胞转染

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Neu／c─erbB─2癌基因在颊粘膜上皮良性及恶性病变中的表达及其定量研究 被引量：3

7

作者 金岩 杨连甲 +2 位作者 Tipoe GL Prinz J White FH 《第四军医大学学报》 1996年第6期462-466,共5页

目的：观察Ｎｅｕ／ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因在颊粘膜上皮良性、癌前以及癌变状态下的表达，并确立图像分析系统定量的方法．方法：用三种抗Ｎｅｕ抗体，通过微波暴露抗原，进行标准化的ＥｌｉｔｅＡＢＣ染色，并通过半定量及图像分析系... 目的：观察Ｎｅｕ／ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因在颊粘膜上皮良性、癌前以及癌变状态下的表达，并确立图像分析系统定量的方法．方法：用三种抗Ｎｅｕ抗体，通过微波暴露抗原，进行标准化的ＥｌｉｔｅＡＢＣ染色，并通过半定量及图像分析系统确立Ｎｅｕ基因在不同标本病变中的表达．结果：Ｎｅｕ基因在恶变组有高表达（６３．５％），以转移和复发的病变反应强度最高．此外，在癌前病变中也有较高的表达（５６．３％）．结论：本研究建立的免疫组化定量方法检测Ｎｅｕ基因表达的系统精确、可靠、重复性好，选取的指标可充分反映Ｎｅｕ基因表达的量以及细胞的阳性表达率．结果证实了Ｎｅｕ基因与口腔鳞癌的癌变关系密切，在癌变的早期以及转移和复发的病变中有较高的表达． 展开更多

关键词 颊粘膜肿瘤 癌基因 免疫组化

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C-myc癌基因在炎症、白斑及颊癌变中的表达分析

8

作者 梅陵宣 蒋勇 金岩 《安徽医科大学学报》 CAS 1999年第4期256-257,共2页

目的　用免疫组织化学定量方法观察在上皮癌变过程中 Ｃｍｙｃ 的表达及意义。方法　标本取自病人颊粘膜，包括白斑（ Ｏ Ｌ Ｋ） 、慢性炎症（ Ｉ Ｆ） 、鳞状细胞癌（ Ｓ Ｃ Ｃ） 。采用免疫组化（ Ａ Ｂ Ｃ） 法，一抗为 Ｃｍｙ... 目的　用免疫组织化学定量方法观察在上皮癌变过程中 Ｃｍｙｃ 的表达及意义。方法　标本取自病人颊粘膜，包括白斑（ Ｏ Ｌ Ｋ） 、慢性炎症（ Ｉ Ｆ） 、鳞状细胞癌（ Ｓ Ｃ Ｃ） 。采用免疫组化（ Ａ Ｂ Ｃ） 法，一抗为 Ｃｍｙｃ 单抗。用网格测试法对ｍｙｃ阳性反应细胞计数，可得出上皮ｍｙｃ 的阳性指数。结果　显示ｍｙｃ 在口腔上皮癌过程中有较高的表达，从 Ｉ Ｆ、 Ｏ Ｌ Ｋ 到 Ｓ Ｃ Ｃ 组，有逐渐增大的趋势。结论　 Ｃｍｙｃ 其表达程度主要与肿瘤细胞的分化关系密切，是判断细胞分化程度的一个参考指标。 展开更多

关键词 癌基因 基因表达 上皮癌 炎症 白斑

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肿瘤抑制基因p53在牙源性肿瘤及囊肿中的表达及其意义

9

作者 金岩 杨连甲 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 1996年第4期208-209,共2页

为了观察ｐ５３癌蛋白与牙源性肿瘤的关系，本文用免疫组织化学（经微波处理暴露抗原）方法观察了ｐ５３在牙源性肿瘤中的过表达。结果显示，在１６例成釉细胞瘤中有９例出现ｐ５３的表达，在１／２成釉细胞纤维瘤及１／１成釉细胞结维... 为了观察ｐ５３癌蛋白与牙源性肿瘤的关系，本文用免疫组织化学（经微波处理暴露抗原）方法观察了ｐ５３在牙源性肿瘤中的过表达。结果显示，在１６例成釉细胞瘤中有９例出现ｐ５３的表达，在１／２成釉细胞纤维瘤及１／１成釉细胞结维肉瘤中有过表达。阳性反应在不同类型的牙源性肿瘤中部位不同、阳性反应程度也不同。此外，对于牙源性囊肿的观察发现，３／６的牙源性角化囊肿、２／６的含牙囊肿的衬里上皮中发现ｐ５３的阳性表达、而６例根尖囊肿均为阴性。本研究结果显示，ｐ５３在牙源性肿瘤中、尤其是成釉细胞瘤中有较高的表达率，其阳性表达部位有助于认识不同的牙源性肿瘤和病变的来源、类型以及生物学行为。 展开更多

关键词 肿瘤抑制基因 P53 基因 牙源性肿瘤 囊肿

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H－ras在颊粘膜正常、良性、癌前及恶性变上皮中的表达：免疫组织化学定量研究

10

作者 金岩 杨连甲 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 1996年第1期31-35,126,共6页

本文通过建立图象分析方法对免疫组织化学反应结果进行定量，检测观察Ｈ－ｒａｓ在口腔颊粘膜上皮在正常（Ｎ）、慢性炎症（ＩＦ）、癌旁上皮（ＥＡＣ）和鳞癌（ＳＣＣ）的变化过程中的表达并进行分析。结果显示Ｈ－ｒａｓ在ＳＣＣ组中... 本文通过建立图象分析方法对免疫组织化学反应结果进行定量，检测观察Ｈ－ｒａｓ在口腔颊粘膜上皮在正常（Ｎ）、慢性炎症（ＩＦ）、癌旁上皮（ＥＡＣ）和鳞癌（ＳＣＣ）的变化过程中的表达并进行分析。结果显示Ｈ－ｒａｓ在ＳＣＣ组中，以中等分化的ＳＣＣ无论是Ｈ－ｒａｓ表达的量还是细胞阳性率都较高。此外，组织学观察显示，Ｈ－ｒａｓ在处于分化末期但尚未角化的正常上皮细胞中有较高的表达。本文结果显示了Ｈ－ｒａｓ的过表达与上皮细胞的会化程度密切相关。本研究还显示，所采用的阳性区域透光值、平均总透光值及阳性反应区域与阴性反应区域比值可靠并有相关性。这进一步说明了用免疫组化定量方法检测Ｈ－ｒａｓ癌基因表达的精确和可靠性。 展开更多

关键词 颊粘膜H-ras 图象分析 癌前病变 恶性变 免疫组织化学

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VEGF及其受体FIK-1的表达和血管发生与喉粘膜上皮癌变的关系

11

作者 邓志宏 黄维国 +1 位作者 邱建华 金岩 《耳鼻咽喉（头颈外科）》 1998年第5期314-317,共4页

血管生成在机体出生前后的生理及病理过程中是至关重要的因素。肿瘤组织的生长在多方面也依赖于肿瘤内新生的血管,目前已有实验证实了微血管定量与乳腺癌、黑色素瘤等肿瘤的发生和转移有关。但是,血管的生长受到多种因素的影响,血管内... 血管生成在机体出生前后的生理及病理过程中是至关重要的因素。肿瘤组织的生长在多方面也依赖于肿瘤内新生的血管,目前已有实验证实了微血管定量与乳腺癌、黑色素瘤等肿瘤的发生和转移有关。但是,血管的生长受到多种因素的影响,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)作为主要的血管生成因子在血管的发生中发挥着重要的作用。VEGF无论在组织器官的发生。 展开更多

关键词 VEGF 受体 FIK-1 血管发生 喉粘膜上皮 癌变

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转染反义细胞周期蛋白A的舌癌细胞系的建立与鉴定 被引量：1

12

作者 周峻 杨连甲 +2 位作者 金岩 董绍忠 赵宇 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期287-289,293,共4页

目的 :研究反义细胞周期蛋白 (cyclinA)基因对舌癌细胞周期的调控作用 ,为cyclinA在基因治疗方面提供理论基础。方法 :采用阳离子脂质体转染方法将已构建成功含人全长cyclinA(1 77kb)的反义真核表达载体pAS_A导入舌癌细胞系 (Tca8113) ,... 目的 :研究反义细胞周期蛋白 (cyclinA)基因对舌癌细胞周期的调控作用 ,为cyclinA在基因治疗方面提供理论基础。方法 :采用阳离子脂质体转染方法将已构建成功含人全长cyclinA(1 77kb)的反义真核表达载体pAS_A导入舌癌细胞系 (Tca8113) ,经G418选择性培养液筛选 ,获得阳性克隆细胞 ,通过细胞原位杂交检测cyclinA基因的稳定转染情况。结果 :pAS_A成功转染进入Tca8113,转染后细胞内cyclinAmRNA的转录和蛋白表达明显降低。结论 展开更多

关键词 细胞周期蛋白A 反义技术 基因转染 舌癌

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骨形成蛋白mRNA的表达与腭裂形成之间的关系 被引量：3

13

作者 吕红兵 金岩 李鑫 《第四军医大学学报》 1999年第2期124-126,共3页

目的：检测正常胎鼠和腭裂胎鼠的腭突中骨形成蛋白5mRNA表达的变化，探讨骨形成蛋白5（BMPS）在腭裂形成中的作用．方法:采用原位杂交技术观察在不同发育时期，正常胎鼠和腭裂胎鼠腭突中BMP5mRNA的表达情况．结果：正常组和腭裂组比较... 目的：检测正常胎鼠和腭裂胎鼠的腭突中骨形成蛋白5mRNA表达的变化，探讨骨形成蛋白5（BMPS）在腭裂形成中的作用．方法:采用原位杂交技术观察在不同发育时期，正常胎鼠和腭裂胎鼠腭突中BMP5mRNA的表达情况．结果：正常组和腭裂组比较结果表明，妊娠期第14日和第15日，正常组腭突的未分化间充质细胞和上皮细胞中BMP5mRNA的表达呈强阳性，而腭裂组为弱阳性．妊娠第16日，两组腭突中BMR5mRNA的表达都较弱．结论：BMP5mR－NA在未分化间充质细胞中的弱表达与腭裂的形成密切相关． 展开更多

关键词 骨形成蛋白 腭裂形成 组织化学 原位杂交 MRNA

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骨形成蛋白在颌骨骨折愈合过程中的表达及mRNA水平分析 被引量：8

14

作者 金岩 司晓辉 +1 位作者 杨连甲 刘新平 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期353-355,共3页

目的：观察骨形成蛋白（ＢＭＰ）在骨折愈合过程中的基因表达及发挥作用方式．方法：在建立兔颌骨骨折愈合模型的基础上，用免疫组织化学及原位杂交的方法在骨折愈合的不同时间分别检测ＢＭＰ表达产物和ＢＭＰ２ｍＲＮＡ转录水平．结果... 目的：观察骨形成蛋白（ＢＭＰ）在骨折愈合过程中的基因表达及发挥作用方式．方法：在建立兔颌骨骨折愈合模型的基础上，用免疫组织化学及原位杂交的方法在骨折愈合的不同时间分别检测ＢＭＰ表达产物和ＢＭＰ２ｍＲＮＡ转录水平．结果：在骨折愈合早期由受创伤的骨基质释放的ＢＭＰ在骨膜及骨断端骨髓中的骨诱导中发挥着重要的作用；此外，受到诱导刺激的细胞在分化为具有成骨及成软骨能力的细胞的同时，也具有合成及分泌ＢＭＰ的能力，这种能力保证了正常骨组织的形成．结论：本实验结果进一步证实了ＢＭＰ骨诱导贯穿于骨折愈合整个过程。 展开更多

关键词 骨形成蛋白 骨折 愈合 基因 表达 颌骨骨折 MRNA

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