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基于单细胞测序的草酸钙肾结石大鼠髓袢细胞亚群基因表达谱特征分析
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作者 许婷 张颖 +2 位作者 邓琼 梁辉 王铸 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2024年第2期104-110,共7页
目的:探讨草酸钙肾结石大鼠模型肾脏组织髓袢细胞亚群基因表达谱特征。方法:应用乙二醇氯化铵诱导法构建草酸钙肾结石大鼠模型,通过Von Kossa′s组织染色验证模型构建成功。单细胞测序方法鉴定髓袢细胞,对比分析草酸钙肾结石大鼠模型肾... 目的:探讨草酸钙肾结石大鼠模型肾脏组织髓袢细胞亚群基因表达谱特征。方法:应用乙二醇氯化铵诱导法构建草酸钙肾结石大鼠模型,通过Von Kossa′s组织染色验证模型构建成功。单细胞测序方法鉴定髓袢细胞,对比分析草酸钙肾结石大鼠模型肾脏组织髓袢细胞亚群基因表达谱特征,应用生物信息学方法进行差异表达基因的GO、KEGG以及GSEA富集分析。结果:相较于对照组,实验组大鼠肾脏组织中发现钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色,表明草酸钙肾结石大鼠模型构建成功。单细胞测序分析发现,在实验组髓袢细胞亚群共有差异表达基因3 510个,其中880个表达上调,2 630个表达下调;其中LOC499584,白介素7(interleukin 7,Il7),双特异性磷酸酶1(dual specificity phosphatase 1,Dusp1)以及基质Gla蛋白(matrix Gla protein,Mgp)表达上调最为显著;HORMA结构域蛋白质2(HORMA domain containing 2,Hormad2),LOC361914,JUN二聚体蛋白2(Jun dimerization protein 2,Jdp2)以及生长抑素-B和血小板反应蛋白1型结构域蛋白(somatomedin-B and thrombospondin type-1 domain-containing protein,Sbspon)表达下调最为显著。KEGG分析发现实验组髓袢细胞亚群氧化磷酸化、代谢途径、丙酸代谢、自噬、溶酶体以及胞吞作用等信号通路发生显著改变。结论:本研究首次揭示了草酸钙肾结石大鼠模型肾脏组织髓袢细胞亚群基因表达谱特征,为肾结石的形成及其介导的肾损伤研究提供了一定的参考依据。 展开更多
关键词 肾结石 单细胞测序 表达谱 髓袢 生物信息学
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单细胞核测序揭示人肾上腺皮质腺瘤细胞组成及其基因表达谱特征
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作者 王铸 邓琼 +3 位作者 张建文 赖裕林 邓迪豪 梁辉 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2024年第10期916-922,共7页
目的基于单细胞转录组测序探讨肾上腺皮质腺瘤(ACA)细胞组成及其基因表达特征。方法收集2022年7—8月深圳市龙华区人民医院的2例ACA患者术后切除样本,通过单细胞转录组测序法分离鉴定细胞组成,采用特异性的皮质细胞亚群标志物细分肾上... 目的基于单细胞转录组测序探讨肾上腺皮质腺瘤(ACA)细胞组成及其基因表达特征。方法收集2022年7—8月深圳市龙华区人民医院的2例ACA患者术后切除样本,通过单细胞转录组测序法分离鉴定细胞组成,采用特异性的皮质细胞亚群标志物细分肾上腺皮质亚群,并研究其特征性基因表达谱。结果通过2例ACA样本的单细胞转录组测序分析发现,ACA主要包括肾上腺皮质细胞(78.62%)、内皮细胞(1.91%)、成纤维细胞(3.09%)、巨噬细胞(14.34%)以及T细胞(2.05%)。将皮质细胞进一步细分发现,除球状带(ZG)细胞(1.77%)、束状带(ZF)细胞(94.98%)以及网状带(ZR)细胞(2.17%)之外还存在一群未定义细胞(1.08%),这些未定义细胞特征性高表达细胞间黏附分子1、生长停滞和DNA损伤诱导蛋白β、肿瘤坏死因子α诱导蛋白3以及CD36分子。根据基因表达相关性分析发现,这群未定义细胞与ZF细胞亚群相关性最高。差异表达基因(DEGs)GO富集分析发现代谢过程富集指数最高;Reactome富集分析发现免疫系统细胞因子信号反应最为显著,KEGG信号通路分析发现DEGs主要参与Th17细胞分化相关通路;DO富集分析发现DEGs与病毒感染相关性最大。结论本研究揭示了ACA细胞亚群基因表达谱特征,为ACA机制研究提供了一定的参考依据。 展开更多
关键词 单细胞核测序 肾上腺皮质腺瘤 肾上腺 基因表达 生物信息学
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TRB-3在母儿外周血及母胎界面组织的表达水平及其在临床诊断妊娠期糖尿病的应用价值
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作者 陈幼花 陈婕 +4 位作者 张桂丽 钟雪莉 罗丽琼 彭菊兰 王铸 《兰州大学学报(医学版)》 2024年第12期58-65,共8页
目的探讨母胎外周循环系统和母胎界面组织中Tribbles同源蛋白3(TRB-3)的表达水平与妊娠期糖尿病(GDM)的相关性,为阐明GDM发病的分子机制及其临床诊断提供新的依据。方法选取2022年1—12月于深圳市龙华区人民医院产科行择期剖宫产术的32... 目的探讨母胎外周循环系统和母胎界面组织中Tribbles同源蛋白3(TRB-3)的表达水平与妊娠期糖尿病(GDM)的相关性,为阐明GDM发病的分子机制及其临床诊断提供新的依据。方法选取2022年1—12月于深圳市龙华区人民医院产科行择期剖宫产术的32例GDM产妇及同期32例行剖宫产术的健康孕产妇,采集其分娩前48 h外周血、分娩时脐静脉血、胎盘组织和脐带组织,用于制作石蜡切片并进行TRB-3免疫组织化学检测;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定母体外周血及脐静脉血中的TRB-3水平。结果TRB-3主要表达在母胎界面的滋养层细胞及脐静脉内皮细胞;GDM组的胎盘及脐带组织中TRB-3的表达水平高于健康对照组;GDM组外周血浆及其胎儿的脐静脉血中TRB-3的水平高于健康对照组;母体外周血TRB-3水平与孕妇年龄、1 h餐后血糖(PBG)水平、2 h PBG呈正相关关系,与糖化血红蛋白水平、新生儿体重呈负相关关系;孕妇分娩孕周和PBG与脐静脉组织TRB-3的表达呈正相关关系,新生儿体重与脐静脉组织TRB-3表达呈负相关关系。结结论母胎外周血的TRB-3及胎盘组织、脐静脉组织中TRB-3在临床诊断GDM中具有一定的参考意义和应用价值。 展开更多
关键词 Tribbles同源蛋白3 妊娠期糖尿病 胎盘 脐带 诊断 母胎界面
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通过渗透微泵稳定抑制小鼠血浆CD26/DPPIV分子酶活性的研究
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作者 薛兴奎 韩新华 +2 位作者 蔡思齐 陈晓玲 Melody Y.Zeng 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第3期424-428,共5页
目的研究采用皮下植入渗透微泵给予西他列汀对小鼠体内CD26/DDPIV蛋白酶活性的作用效果与持续时间。方法将灌注西他列汀药物的渗透泵经手术植入BL6/C57小鼠皮下,通过高效液相色谱-质谱监测小鼠体内血液药物浓度,酶标法检测小鼠血浆DPPI... 目的研究采用皮下植入渗透微泵给予西他列汀对小鼠体内CD26/DDPIV蛋白酶活性的作用效果与持续时间。方法将灌注西他列汀药物的渗透泵经手术植入BL6/C57小鼠皮下,通过高效液相色谱-质谱监测小鼠体内血液药物浓度,酶标法检测小鼠血浆DPPIV蛋白酶活性,流式细胞术观察小鼠脾T细胞CD26分子的表达,利用Transwell小室检测小鼠T细胞迁移能力。取渗透泵周围皮肤,病理切片检查小鼠皮下病理损害或炎性反应。结果B6/C57小鼠在植入渗透泵后,体内药物浓度比采用直接皮下注射法稳定,持续时间久,血浆DPPIV蛋白酶活性抑制程度与血药浓度明显相关。给药24 h后,小鼠脾T细胞CD26分子表达无明显变化,渗透泵组迁移能力较对照组明显降低。皮下植入渗透泵小鼠组饮食活动度无明显改变,皮肤病理检查未见炎性反应与病理损害。结论通过渗透泵给予小鼠药物能够保持西他列汀血药浓度稳定,持续抑制体内DPPIV活性,降低T细胞迁移能力,为CD26/DPPIV分子功能与免疫体内研究提供更方便有效的途径。 展开更多
关键词 CD26/DPPIV分子 西他列汀 渗透泵 T细胞
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CD26基因敲除小鼠异基因骨髓移植的研究
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作者 薛兴奎 韩新华 +2 位作者 蔡思齐 陈晓玲 Melody Y.Zeng 《海南医学》 CAS 2019年第10期1230-1233,共4页
目的研究CD26基因敲除对建立异基因骨髓移植模型的影响。方法分别提取CD26基因敲除C57BL/6小鼠(CD26^(-/-))骨髓细胞和脾T细胞,输注经过900 cGy剂量照射的BALB/C小鼠,进行异基因小鼠骨髓移植。根据回输的细胞不同分为骨髓细胞组(BM组)... 目的研究CD26基因敲除对建立异基因骨髓移植模型的影响。方法分别提取CD26基因敲除C57BL/6小鼠(CD26^(-/-))骨髓细胞和脾T细胞,输注经过900 cGy剂量照射的BALB/C小鼠,进行异基因小鼠骨髓移植。根据回输的细胞不同分为骨髓细胞组(BM组)、小鼠骨髓加脾脏T细胞组(BM+SP组)。采用流式细胞术检测异基因小鼠移植的嵌合体。移植后监测小鼠体质量、活动度、弓背情况、毛发等,统计移植物抗宿主病(GVHD)指数。取小鼠肝脏、皮肤、肠道组织,制备病理切片,镜下观察病理变化。结果敲除CD26的造血干细胞顺利植入受者小鼠体内,BM组、BM+SP组在第8周嵌合率[(71.16±7.34)%vs (66.72±6.02)%]比较差异无统计学意义(P>0.05);植入的供者造血干细胞能在受者体内引起GVHD的发生,在移植后第35天,BM组、BM+SP组小鼠体质量分别平均下降2.2%与28.5%,GVHD分数分别为0.30±0.44与5.2±1.01,差异均有统计学意义(P<0.05);提取小鼠肝脏、皮肤、肠道组织,病理切片评估,结果显示,BM组和BM+SP组均有明显的病理损害,提示有GVHD的发生。结论 CD26基因敲除小鼠造血干细胞能够顺利植入受者小鼠并构建异基因骨髓移植模型,导致GVHD发病,为研究CD26在异基因骨髓移植中的作用机制提供有效方法。 展开更多
关键词 CD26 移植物抗宿主疾病 异基因骨髓移植 嵌合体 基因敲除
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