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甘露聚糖结合凝集素对调节性T细胞诱导分化及功能的影响 被引量：5
1
作者 张卫斌 陈晨 +7 位作者 李昊典 王艳 杨琳 何全中 陈露露 王帅 王凡平 王明永 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期112-117,共6页
目的 探讨甘露聚糖结合凝集素（mannan-binding lectin,MBL）对调节性T细胞（regu-latory T cell,Treg）诱导分化及功能的影响.方法 采用免疫磁珠分选法分选出脐血CD4＋CD25-T细胞,对照组用anti-CD3 McAb和anti-CD28 McAb活化细胞并加... 目的 探讨甘露聚糖结合凝集素（mannan-binding lectin,MBL）对调节性T细胞（regu-latory T cell,Treg）诱导分化及功能的影响.方法 采用免疫磁珠分选法分选出脐血CD4＋CD25-T细胞,对照组用anti-CD3 McAb和anti-CD28 McAb活化细胞并加入适当浓度的TGF-β1作为诱导剂,在对照组基础上加入不同浓度的MBL作为实验组,细胞培养72 h后,荧光活化细胞分选法（FACS）分析各组中适应性调节性T细胞（induced regulatory T cell,iTreg）比例变化情况;RT-PCR方法分析新鲜脐血单个核细胞（cord blood mononuclear cell,CBMC）、纯化的CD4＋CD25-T细胞、未加MBL对照组及MBL组Foxp3 mRNA表达的水平;CCK-8法测定MBL对iTreg调节异体CD4＋CD25-T细胞增殖的影响.结果 FACS分析表明,经体外72 h培养,与对照组相比,超生理浓度MBL能够增强CD4＋CD25-T细胞向Treg细胞诱导分化;RT-PCR结果显示MBL能够增强iTreg高表达Foxp3 mRNA;体外抑制试验显示,iTreg以浓度依赖方式抑制异体CD4＋CD25-T细胞的增殖,培养体系中加入MBL后增强了iTreg对CD4＋CD25-T细胞的增殖抑制效应.结论 MBL能够促进Treg诱导分化,而且对Treg抑制效应T细胞的增殖具有一定的协同调控作用. 展开更多
关键词 甘露聚糖结合凝集素 调节性T细胞 脐血单个核细胞 效应T细胞 诱导分化
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甘露聚糖结合凝集素对白假丝酵母菌感染鼠体内Treg/Th17细胞免疫平衡的调节作用 被引量：8
2
作者 王艳 张卫斌 +6 位作者 杨泳慧 陈晨 杨婧文 雷一鸣 张伟 王凡平 王明永 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期57-65,共9页
目的研究甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin,MBL)对白假丝酵母菌感染鼠体内Th17、Treg细胞分化的调节。方法MBL基因敲除型(MBL^-/-)和野生型(WT)C57BL/6小鼠分4组,2×10^7CFU白假丝酵母菌(C.albicans)对感染组小鼠腹腔注射... 目的研究甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin,MBL)对白假丝酵母菌感染鼠体内Th17、Treg细胞分化的调节。方法MBL基因敲除型(MBL^-/-)和野生型(WT)C57BL/6小鼠分4组,2×10^7CFU白假丝酵母菌(C.albicans)对感染组小鼠腹腔注射;感染3d后取小鼠肝脏和肾脏病理切片,HE染色和PAS染色观察小鼠病理组织学变化;7d后摘除小鼠眼球取静脉血流式细胞术分析小鼠体内Treg和Th17细胞;静脉抗凝血ELISA检测小鼠体内细胞因子IL-10和IL-17A的含量;颈椎脱臼处死小鼠后取脾脏细胞MACS磁性分选获得CD4^+T细胞,提取总RNA,qRT-PCR检测其体内Foxp3、RORγtmRNA的表达;取小鼠脾脏CD4^+T细胞,提取总蛋白,Western blot检测Foxp3、RORγt蛋白表达水平。结果成功建立了C.albicans感染鼠模型,和WT感染组相比较:流式分析显示MBL^-/-感染组小鼠体内Th17细胞亚型数目比例增高,Treg细胞亚型数目比例降低;ELISA结果显示MBL^-/-感染组小鼠体内IL-17A水平明显增高,IL-10水平降低;qRT-PCR结果显示MBL^-/-感染组小鼠体内转录因子RORγtmRNA表达升高,转录因子Foxp3mRNA表达降低;Western blot印迹结果表明MBL^-/-感染组小鼠体内RORγt蛋白表达量明显增多,而Foxp3蛋白表达量减少。结论在C.albicans感染中,MBL促进了CD4^+T细胞向Treg细胞亚型诱导分化,抑制了CD4^+T细胞向Th17细胞亚型的诱导分化,从而调节了C.albicans感染鼠体内Treg/Th17细胞的免疫平衡。 展开更多
关键词 甘露聚糖结合凝集素(MBL) MBL基因敲除小鼠(MBL^-/-) 白假丝酵母菌(C. albicans) THL7细胞 Treg细胞
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甘露聚糖结合凝集素对Th17细胞诱导分化的影响 被引量：1
3
作者 陈晨 张卫斌 +5 位作者 王艳 杨琳 马俊维 王帅 王凡平 王明永 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期666-673,共8页
目的 研究甘露聚糖结合凝集素（mannan-binding lectin,MBL）对辅助性T细胞17（T helper cell 17,Th17）诱导分化的影响.方法 通过MACS分选器从人新鲜脐带血液中分选获得CD4＋T细胞,对照组用anti-CD3 McAb和anti-CD28 McAb活化CD4＋T细... 目的 研究甘露聚糖结合凝集素（mannan-binding lectin,MBL）对辅助性T细胞17（T helper cell 17,Th17）诱导分化的影响.方法 通过MACS分选器从人新鲜脐带血液中分选获得CD4＋T细胞,对照组用anti-CD3 McAb和anti-CD28 McAb活化CD4＋T细胞并加入适当浓度的IL-6和TGF-β1作为诱导剂,在对照组的基础上加入不同浓度的MBL作为实验组,细胞培养72 h后,利用流式细胞术（FACS）检测各组中Th17细胞比例变化情况;Q-PCR分别检测未加MBL对照组和不同浓度MBL实验组Th17细胞核转录因子维甲酸孤儿受体-γt（retinoid-related orphan receptor-γ-t,RORγt）mRNA表达水平;ELISA检测各组细胞上清液中IL-17A的含量;FACS检测Th17细胞在MBL-/-小鼠和WT小鼠中的变化.结果 FACS分析表明,经体外72 h培养,与对照组相比,MBL能够显著降低Th17细胞的比例;Q-PCR结果显示,MBL能够显著降低RORγt mRNA的表达;ELISA结果显示,MBL能够显著降低IL-17A的表达水平;动物实验结果表明,与WT小鼠相比,MBL-/-小鼠CD4＋RORγt＋Th17细胞比例显著上升.结论 MBL能够抑制CD4＋T细胞向Th17细胞诱导分化. 展开更多
关键词 甘露聚糖结合凝集素(MBL) CD4^+T细胞 THL7细胞 诱导分化
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