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miR-199a-3p通过调控BRCA1影响小细胞肺癌细胞对阿帕替尼敏感性的研究
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作者 张静 李唯源 +1 位作者 胡国志 郭艺航 《检验医学与临床》 2025年第6期760-767,共8页
目的探讨miR-199a-3p通过调控人乳腺癌易感基因1(BRCA1)影响小细胞肺癌(SCLC)细胞对阿帕替尼敏感性的机制。方法选择人SCLC细胞系H446、H1688以及正常支气管上皮细胞BEAS-2B进行培养,构建阿帕替尼耐药SCLC细胞系(H446/APA和H1688/APA),... 目的探讨miR-199a-3p通过调控人乳腺癌易感基因1(BRCA1)影响小细胞肺癌(SCLC)细胞对阿帕替尼敏感性的机制。方法选择人SCLC细胞系H446、H1688以及正常支气管上皮细胞BEAS-2B进行培养,构建阿帕替尼耐药SCLC细胞系(H446/APA和H1688/APA),将H446/APA和H1688/APA细胞分为未转染和转染(转染的核酸分子包括miR-199a-3p mimics、miR-NC、sh-BRCA1、sh-NC)。采用反转录实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测正常支气管上皮细胞BEAS-2B、H446、H1688、H446/APA、H1688/APA及转染miR-199a-3p mimics、转染miR-NC的H446/APA、H1688/APA细胞中miR-199a-3p表达水平。采用蛋白质印迹法检测正常支气管上皮细胞BEAS-2B、H446、H1688、H446/APA、H1688/APA及转染不同核酸分子的H446/APA、H1688/APA细胞中BRCA1蛋白表达水平。采用噻唑蓝溴化四唑(MTT)法测定H446、H1688、H446/APA、H1688/APA及转染不同核酸分子的H446/APA、H1688/APA细胞对阿帕替尼的半数最大抑制浓度(IC 50)值,测定转染不同核酸分子的H446/APA、H1688/APA细胞活力。通过集落形成测定分析转染不同核酸分子的H446/APA和H1688/APA细胞集落数。通过流式细胞术检测转染不同核酸分子的H446/APA和H1688/APA细胞的凋亡率。通过Transwell实验测定转染不同核酸分子的H446/APA、H1688/APA细胞的迁移和侵袭情况。通过双荧光素酶报告基因检测系统测定荧光素酶报告基因载体的荧光素酶活性,分析miR-199a-3p与BRCA1之间的联系。结果与正常支气管上皮细胞BEAS-2B相比,人SCLC细胞系H446、H1688、H446/APA、H1688/APA细胞中miR-199a-3p表达水平均降低(P<0.05),而BRCA1蛋白表达水平均升高(P<0.05)。与对应的亲代细胞相比,H446/APA和H1688/APA细胞中miR-199a-3p表达水平均降低(P<0.05),并且BRCA1蛋白表达水平均升高(P<0.05)。转染不同核酸分子的同一细胞系(H446/APA、H1688/APA)中:转染miR-199a-3p mimics的细胞中miR-199a-3p表达水平均明显高于转染miR-NC的细胞(P<0.05);转染miR-199a-3p mimics的细胞中BRCA1蛋白水平、IC 50值、细胞活力、细胞集落数、细胞凋亡率、细胞迁移数、细胞侵袭数与转染miR-199a-3p mimics+sh-NC的细胞相比,差异均无统计学意义(P>0.05);转染miR-NC、转染miR-199a-3p mimics+sh-BRCA1的细胞中BRCA1蛋白水平、IC 50值、细胞活力、细胞集落数、细胞迁移数、细胞侵袭数均高于转染miR-199a-3p mimics、转染miR-199a-3p mimics+sh-NC的细胞(P<0.05),细胞凋亡率均低于转染miR-199a-3p mimics、转染miR-199a-3p mimics+sh-NC的细胞(P<0.05);与转染miR-NC的细胞相比,转染miR-199a-3p mimics+sh-BRCA1的细胞凋亡率明显升高(P<0.05),而细胞集落数、细胞迁移数、细胞侵袭数明显降低(P<0.05),但转染miR-NC与转染miR-199a-3p mimics+sh-BRCA1的细胞中BRCA1蛋白水平、IC 50值、细胞活力比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。荧光素酶基因报告结果显示,转染miR-199a-3p mimics的H446/APA、H1688/APA细胞中含有WT-BRCA1报告基因质粒的荧光素酶活性均低于转染miR-NC的同一细胞系(P<0.05)。结论miR-199a-3p可通过靶向调控BRCA1水平而增强SCLC细胞对阿帕替尼的敏感性,为改善SCLC的化疗效果提供潜在的靶点。 展开更多
关键词 miR-199a-3p 小细胞肺癌 阿帕替尼 化疗耐药 敏感性 机制
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咪达唑仑复合芬太尼对全胸腔镜肺叶切除术治疗支气管扩张症患者血氧饱和度及血流动力学的影响 被引量：14
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作者 郎捷 杨瑞东 +2 位作者 刘泽宇 李文奇 邢树山 《中国医药》 2021年第11期1664-1668,共5页
目的研究咪达唑仑复合芬太尼对全胸腔镜肺叶切除术治疗支气管扩张症患者血氧饱和度及血流动力学的影响。方法选取2019年3月至2020年3月于唐山市人民医院行全胸腔镜肺叶切除术治疗的140例支气管扩张症患者,按随机数字表法分为对照组和观... 目的研究咪达唑仑复合芬太尼对全胸腔镜肺叶切除术治疗支气管扩张症患者血氧饱和度及血流动力学的影响。方法选取2019年3月至2020年3月于唐山市人民医院行全胸腔镜肺叶切除术治疗的140例支气管扩张症患者,按随机数字表法分为对照组和观察组,各70例。对照组静脉推注芬太尼麻醉;观察组静脉推注咪达唑仑联合芬太尼麻醉。比较2组不同时点[麻醉前(T_(0))、麻醉后切皮前(T_(1))、切皮后1 h(T_(2))、手术结束(T_(3))]的血氧饱和度(SpO_(2))、血流动力学指标(舒张压、收缩压、心率),以及术后不同时点[T_(3)、术后2 h(T_(4))、术后24 h(T_(5))、术后48 h(T_(6))]的疼痛视觉模拟量表(VAS)评分和应激指标[丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)]水平、围术期指标(胸腔引流管放置时间、恢复清醒时间与住院时间),记录2组术后并发症发生情况。结果观察组T_(1)、T_(2)、T_(3)时点SpO_(2)、舒张压、收缩压水平均高于对照组,心率水平低于对照组(均P<0.05)。观察组T_(4)、T_(5)、T_(6)时点VAS评分均低于对照组(均P<0.05)。T_(4)时点观察组丙二醛水平低于对照组,SOD水平高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。观察组患者恢复清醒时间、住院时间均短于对照组[(2.4±1.2)min比(4.8±2.6)min、(9.4±2.0)d比(11.5±3.2)d],差异均有统计学意义(均P<0.001);但2组胸腔引流管放置时间比较,差异无统计学意义(P=0.792)。对照组与观察组并发症发生率比较[11.4%(8/70)比7.1%(5/70)],差异无统计学意义(P=0.382)。结论对全胸腔镜肺叶切除术治疗支气管扩张症患者应用咪达唑仑复合芬太尼麻醉,可减轻对呼吸循环系统抑制作用,稳定血流动力学,降低应激反应,且患者术后清醒快,住院时间短。 展开更多
关键词 支气管扩张症 咪达唑仑 芬太尼 全胸腔镜肺叶切除术 血流动力学
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尼妥珠单抗联合吉西他滨和替吉奥方案用于晚期胰腺癌的疗效观察及对癌组织中E钙黏蛋白和β-连环蛋白表达的影响 被引量：5
3
作者 马艳荣 赵莉 +3 位作者 王永增 张静 王立鹏 李唯源 《中国医药》 2021年第10期1480-1484,共5页
目的探讨尼妥珠单抗联合GS(吉西他滨+替吉奥)方案用于晚期胰腺癌的疗效及对癌组织中E钙黏蛋白、β-连环蛋白表达的影响。方法选取2017年1月至2019年12月唐山工人医院收治的136例晚期胰腺癌患者,根据药物治疗方式不同分为对照组和观察组,... 目的探讨尼妥珠单抗联合GS(吉西他滨+替吉奥)方案用于晚期胰腺癌的疗效及对癌组织中E钙黏蛋白、β-连环蛋白表达的影响。方法选取2017年1月至2019年12月唐山工人医院收治的136例晚期胰腺癌患者,根据药物治疗方式不同分为对照组和观察组,各68例。对照组采用GS方案治疗,观察组采用尼妥珠单+GS方案治疗,21 d为1个周期。治疗2个周期后对2组患者临床疗效及安全性进行评估。比较2组治疗前和治疗2个周期后病灶组织中表皮生长因子受体(EGFR)、人类表皮生长因子受体2(HER2)、细胞增殖核抗原Ki-67(Ki-67)、E钙黏蛋白和β-连环蛋白表达情况及预后随访结果。结果治疗2个周期后,观察组客观缓解率、疾病控制率均明显高于对照组[41.2%(28/68)比27.9%(19/68)、82.4%(56/68)比66.2%(45/68)],差异均有统计学意义(均P <0.05)。2组治疗后EGFR、HER2、Ki-67和β-连环蛋白表达水平均低于治疗前,且观察组均低于对照组,E钙黏蛋白表达水平高于治疗前,且观察组高于对照组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。2组Ⅰ~Ⅱ级和Ⅲ~Ⅳ级不良反应发生率比较差异均无统计学意义(均P> 0.05)。观察组、对照组中位无进展生存期分别为10.4和7.2个月,组间比较差异有统计学意义(P <0.05);观察组1年生存率、1年无进展生存率均明显高于对照组[70.6%(48/68)比42.6%(29/68)、39.7%(27/68)比20.6%(14/68)](均P <0.05)。结论尼妥珠单抗联合GS化疗方案治疗晚期胰腺癌患者的效果优于单纯GS化疗方案治疗,联合治疗提高了病灶组织中E钙黏蛋白表达水平,降低了β-连环蛋白表达水平,抑制肿瘤进展,延长患者生存期,且不会增加不良反应发生率。 展开更多
关键词 胰腺癌 尼妥珠单抗 吉西他滨 替吉奥 E钙黏蛋白 Β-连环蛋白
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