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抗periostin人源化单克隆抗体的制备及鉴定
1
作者 李雪娇 赵航 +6 位作者 张朔 康慧颖 周艳楠 贾爽 路旭 赵洪礼 海洋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2628-2633,共6页
目的:制备抗periostin人源化单克隆抗体,建立稳定的细胞株。方法:以本实验室自主研发的抗periostin鼠单抗为基础,提取细胞总RNA,经RT-PCR扩增VH和VL基因测序获得可变区序列,将小鼠抗体CDR区域移植到人源抗体框架受体区域,基因合成后亚... 目的:制备抗periostin人源化单克隆抗体,建立稳定的细胞株。方法:以本实验室自主研发的抗periostin鼠单抗为基础,提取细胞总RNA,经RT-PCR扩增VH和VL基因测序获得可变区序列,将小鼠抗体CDR区域移植到人源抗体框架受体区域,基因合成后亚克隆到表达载体PATX-GS2,稳定转染CHO细胞,经MSX加压筛选、有限稀释获得单克隆细胞株。结果:经RT-PCR扩增V_(H)和V_(L)基因,确定轻重链可变区序列,通过CDR移植方法,成功对鼠源单抗进行人源化改造,并构建了真核质粒载体,经转染至CHO细胞表达,成功获得人源化抗periostin抗体,ELISA和Western blot结果证明,制备的人源化抗体具有良好的活性和亲和力。结论:本研究成功制备了抗periostin人源化单克隆抗体,且该人源化抗体可以与体内periostin蛋白特异性结合,具有生物学活性,为精准治疗视网膜纤维化病变、组织器官纤维化病变及恶性肿瘤提供了科学数据。 展开更多
关键词 PERIOSTIN 人源化单克隆抗体 视网膜纤维化
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辽宁省牛羊养殖场户布鲁氏菌病“知信行”调查 被引量：2
2
作者 张力国 李佳瑞 +5 位作者 宋满满 马晓威 闫海滨 邓新 陈瑶 顾贵波 《中国动物检疫》 CAS 2024年第1期1-6,45,共7页
为了解辽宁省牛羊养殖场户布鲁氏菌病(简称“布病”)“知信行”水平,以便为今后调整和完善畜间布病综合防控策略提供依据,基于问卷调查的横断面研究,对辽宁省牛羊养殖场户进行抽样调查,数据录入“问卷星” APP,使用SPSS软件进行统计分析... 为了解辽宁省牛羊养殖场户布鲁氏菌病(简称“布病”)“知信行”水平,以便为今后调整和完善畜间布病综合防控策略提供依据,基于问卷调查的横断面研究,对辽宁省牛羊养殖场户进行抽样调查,数据录入“问卷星” APP,使用SPSS软件进行统计分析,查找影响“知信行”水平的因素。结果显示:牛羊养殖场户的布病平均知晓率为75.44%,布病防控态度积极率为51.31%,个人防护行为积极率较高,养殖环节防护行为积极率较低;单因素Logistic回归分析可见,牛羊养殖场户的“知信行”水平与其年龄、从事养殖年限以及牛羊购入方式有关(P<0.05);获得布病知识的主要途径是通过兽医、宣传资料和手机网络。结论表明:应加强患病动物临床症状、传播途径、流行特点等方面知识的宣讲,采用丰富的宣传渠道和宣传手段,以从源头有效防控布病。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 知信行 问卷调查 单因素分析
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玻璃膜疣主要成分胆固醇对人视网膜色素上皮细胞金属硫蛋白表达的影响 被引量：1
3
作者 张敏 张鹏 赵洪礼 《眼科学报》 CAS 2021年第2期128-132,共5页
目的:研究玻璃膜疣主要成分胆固醇对人视网膜色素上皮细胞ARPE-19中金属硫蛋白表达的影响。方法:体外培养ARPE-19细胞,将细胞分为对照组和胆固醇处理组(2.5 mg/mL),取样时间为0,6,12,24,48,72 h。通过实时定量PCR检测hMT1a,hMT2a和hMT3... 目的:研究玻璃膜疣主要成分胆固醇对人视网膜色素上皮细胞ARPE-19中金属硫蛋白表达的影响。方法:体外培养ARPE-19细胞,将细胞分为对照组和胆固醇处理组(2.5 mg/mL),取样时间为0,6,12,24,48,72 h。通过实时定量PCR检测hMT1a,hMT2a和hMT3在转录水平的表达,用蛋白质印迹法检测总金属硫蛋白的表达。结果:在转录水平上hMT1a,hMT2a和hMT3受到胆固醇影响mRNA表达上调,且hMT3上调倍数最大;总金属硫蛋白的蛋白表达随着胆固醇处理时间延长明显增多。结论:玻璃膜疣主要成分胆固醇可以上调人视网膜色素上皮细胞中金属硫蛋白的表达,提示金属硫蛋白表达可受到玻璃膜疣形成起始阶段的刺激,其检测是否能用于年龄相关性黄斑变性的早期发现及早期诊断还需深入探讨。 展开更多
关键词 金属硫蛋白 胆固醇 玻璃膜疣 人视网膜色素上皮细胞
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单纯疱疹病毒性角膜炎治疗方法研究进展 被引量：7
4
作者 康慧颖 曹启江 +1 位作者 张朔 海洋 《传染病信息》 2021年第4期365-369,共5页
单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus 1, HSV-1)是一种普遍存在的病原体,感染角膜可引起单纯疱疹病毒性角膜炎(herpes simplex keratitis, HSK)。HSV-1可潜伏于三叉神经胞体,易形成复发感染。多次反复恶化可造成角膜免疫-炎症反应损伤... 单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus 1, HSV-1)是一种普遍存在的病原体,感染角膜可引起单纯疱疹病毒性角膜炎(herpes simplex keratitis, HSK)。HSV-1可潜伏于三叉神经胞体,易形成复发感染。多次反复恶化可造成角膜免疫-炎症反应损伤,促进新生血管形成,进一步导致角膜浑浊、视力障碍甚至失明,是导致角膜盲的首要病因之一。目前,临床使用的抗病毒药物不能根除HSV-1,本文将汇总有关HSK的最新治疗进展,主要从抑制HSV-1入侵、增殖以及减少新血管生成两方面进行综述,以期为临床研究提供理论依据。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒1型 单纯疱疹病毒性角膜炎 治疗 综述
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胆固醇对人视网膜色素上皮细胞钙转运通道表达的影响
5
作者 张敏 张朔 +1 位作者 张鹏 赵洪礼 《眼科学报》 CAS 2021年第10期770-775,共6页
目的:玻璃膜疣主要成分胆固醇对人视网膜色素上皮细胞ARPE-19中细胞膜钙ATP酶1(plasma membrane Ca^(2+)ATPase 1,PMCA1)、L型电压依赖性钙离子通道(L-type voltage-dependent calcium channel,LVDCC)和细胞膜钠钙交换蛋白1(sodium calc... 目的:玻璃膜疣主要成分胆固醇对人视网膜色素上皮细胞ARPE-19中细胞膜钙ATP酶1(plasma membrane Ca^(2+)ATPase 1,PMCA1)、L型电压依赖性钙离子通道(L-type voltage-dependent calcium channel,LVDCC)和细胞膜钠钙交换蛋白1(sodium calcium exchange protein 1,NCX1)表达的影响。方法:体外培养ARPE-19细胞,将细胞分为对照组和胆固醇处理组(2.5 mg/mL),取样时间为0、6、12、24、48、72 h。通过实时定量PCR检测PMCA1、LVDCC和NCX1 mRNA的表达水平,用蛋白质印迹法检测蛋白质的表达水平。结果:主要负责细胞内钙离子外排的PMCA1的mRNA和蛋白表达水平在胆固醇处理下出现下调。在胆固醇处理下,钙流入通道LVDCC和钙稳态调控蛋白NCX1的mRNA和蛋白表达明显增多,并且呈现时间依赖性,都是在24 h或48 h表达最多后出现回落。其中LVDCC表达上调倍数较大。结论:玻璃膜疣主要成分胆固醇可以影响人视网膜色素上皮细胞中钙转运通道蛋白的表达,PMCA1的表达受到胆固醇抑制,LVDCC和NCX1的表达受到胆固醇处理上调。这可能会影响细胞内钙离子外排,引起钙离子内流,是否能进一步导致细胞内钙超载而引起细胞凋亡,值得探讨。 展开更多
关键词 钙离子通道 视网膜色素上皮细胞 胆固醇 玻璃膜疣
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