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大鼠肝癌细胞照射后非实质细胞影响肝癌细胞基因的变化
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作者 周乐源 张勇 +3 位作者 姚苏芮 殷媛 李杰 黄朝晖 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期1095-1098,共4页
目的探讨照射后微环境对残存的肝癌细胞转移能力影响及分子机制。方法分离大鼠肝脏非实质细胞（NPCs），贴壁后进行照射，然后收集培养上清液与照射过的大鼠肝癌细胞McA-RH7777-6 Gy共培养。经不同培液上清共培养McA-RH7777-6 Gy细胞得... 目的探讨照射后微环境对残存的肝癌细胞转移能力影响及分子机制。方法分离大鼠肝脏非实质细胞（NPCs），贴壁后进行照射，然后收集培养上清液与照射过的大鼠肝癌细胞McA-RH7777-6 Gy共培养。经不同培液上清共培养McA-RH7777-6 Gy细胞得到RH 6 Gy（与未照射NPCs上清液共培养）和RH 6 Gy-R（与照射后NPCs上清液共培养）细胞株。采用基因芯片技术检测RH 6 Gy和RH 6 Gy-R细胞中基因的表达。通过生物信息学对显著变化的基因进行分析，并利用DAVID数据库对这些变化的基因进行功能富集分析（GO-analysis）和信号转导通路富集分析（KEGG-analysis，BIOCARTA-analysis）。进行细胞划痕实验，比较RH 6 Gy细胞和RH 6 Gy-R细胞的运动迁移能力。结果基因芯片检测结果显示，RH 6 Gy-R与RH 6 Gy细胞比较，周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）、丝裂原活化蛋白激酶9（MAPK9）、细胞周期蛋白（Cyclin） A、Toll/白细胞介素-1受体相关蛋白（TIRAP）、3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1/2（PDK1/2）、磷酸肌醇3激酶（PI3K）等15个肿瘤发生发展相关基因的表达都显著高于未照射上清共培养组，且这些表达差异显著的基因多数富集在肿瘤转移相关通路，如腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信号通路、磷脂酰肌醇信号通路、Ras信号转导通路等。体外划痕实验显示，细胞划痕培养48 h后，RH 6 Gy细胞面积愈合率为（9.00±1.35）%，RH 6 Gy-R细胞面积愈合率为（41.30±6.32）%。结论经照射后的残存的肝癌表现出更强的转移能力，可能与其微环境中的NPCs相关，我们推测照射后的NPCs释放的某些细胞因子促进了肝癌残存细胞转移相关mRNA的表达，从而激活相关癌转移通路。 展开更多
关键词 肝非实质细胞 肝癌细胞 转移 功能富集分析 信号转导通路富集分析
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酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型3在结直肠癌组织中表达下调并受微小RNA-95调控
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作者 胡亚玲 黄朝晖 +1 位作者 游庆军 杜祥 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期2210-2212,共3页
目的 观察酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型3（PTPN3）在结直肠癌（CRC）中的表达,探讨其表达下调的机制.方法 用免疫组织化学方法检测112例CRC组织及其配对组织中的表达,荧光素酶实验分析微小RNA-95（miR-95）对PTPN3的调控作用,定量反转录.... 目的 观察酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型3（PTPN3）在结直肠癌（CRC）中的表达,探讨其表达下调的机制.方法 用免疫组织化学方法检测112例CRC组织及其配对组织中的表达,荧光素酶实验分析微小RNA-95（miR-95）对PTPN3的调控作用,定量反转录.聚合酶链反应（RT-PCR）技术及Western blot技术检测PTPN3的表达.结果 PTPN3蛋白在50.9％的CRC组织中（57/112）下调,并与肿瘤TNM分期负相关（r=-0.253,P＜0.01）,PTPN3强表达的患者生存期有缩短的趋势（P＞0.05）.荧光素酶结果显示PTPN3是miR-95的靶基因,在CRC细胞株中过表达miR-95后,PTPN3 mRNA和蛋白表达均下降,而抑制miR-95后PTPN3表达增加.结论 PTPN3表达在CRC组织中下调,可能与肿瘤进展相关;miR-95调控是PTPN3在结直肠中表达下调的关键机制。 展开更多
关键词 结直肠癌 酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型3 微小RNA-95
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