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高良姜素通过影响Hippo/YAP通路抑制宫颈癌Hela细胞迁移和侵袭
1
作者 严怡然 沈成万 +3 位作者 尚香玉 冯婵 李金秋 阿仙姑·哈斯木 《昆明医科大学学报》 2025年第1期36-42,共7页
目的探讨高良姜素对宫颈癌Hela细胞迁移、侵袭能力的影响及其潜在机制。方法用不同浓度的高良姜素(0、5、10、20、40、60、80、100μmol/L)干预宫颈癌细胞48 h,采用CCK-8实验检测高良姜素对细胞活力的影响及筛选高良姜素的半数致死量(IC... 目的探讨高良姜素对宫颈癌Hela细胞迁移、侵袭能力的影响及其潜在机制。方法用不同浓度的高良姜素(0、5、10、20、40、60、80、100μmol/L)干预宫颈癌细胞48 h,采用CCK-8实验检测高良姜素对细胞活力的影响及筛选高良姜素的半数致死量(IC50);将Hela细胞分为对照组(0μmol/L)和高良姜素组(40μmol/L处理)。划痕愈合实验和Transwell小室法分别检测各组细胞的迁移和侵袭能力,Western blot法检测各组细胞中E-cadherin、N-cadherin蛋白的表达;DIA定量蛋白质组学技术检测并筛选两组之间的差异表达蛋白质;利用KEGG Pathway、基因集富集分析(GSEA)方法对差异基因进行生物学功能富集分析;Western blot法验证富集的Hippo/YAP信号通路相关蛋白YAP和p-YAP表达水平。结果与对照组比较,高良姜素以浓度依赖性方式抑制宫颈癌Hela细胞活性(P<0.001);与对照组比较,高良姜素(40μmol/L)干预后宫颈癌Hela细胞的划痕愈合能力和侵袭能力明显降低(P<0.001);与对照组比较,高良姜素组(40μmol/L)E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)、N-cadherin蛋白表达降低(P<0.001);KEGG和GSEA富集结果发现,高良姜素抑制宫颈癌恶性进展与Hippo/YAP信号通路显著相关,Western blot验证发现Hippo信号通路中标志性蛋白p-YAP蛋白表达水平升高(P<0.01),YAP蛋白表达降低(P<0.05)。结论高良姜素作用于Hela细胞后,抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并表现出剂量依赖;其机制可能与Hippo/YAP信号通路激活相关。 展开更多
关键词 高良姜素 宫颈癌 迁移 侵袭 Hippo/YAP信号通路
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CD147通过Akt/mTOR信号通路调控脂肪酸合成对子宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响 被引量：2
2
作者 李金秋 尚香玉 +2 位作者 严怡然 艾丽努尔·艾尼 阿仙姑·哈斯木 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第3期261-267,共7页
目的探讨CD147的表达对子宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响和潜在的分子机制。方法分析UCSC数据库BSG基因(编码CD147蛋白)在子宫颈癌中的表达,采用Log-rank test法评估各组表达的预后差异。应用Western blot法检测CD147在Siha、Hela和H... 目的探讨CD147的表达对子宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响和潜在的分子机制。方法分析UCSC数据库BSG基因(编码CD147蛋白)在子宫颈癌中的表达,采用Log-rank test法评估各组表达的预后差异。应用Western blot法检测CD147在Siha、Hela和H8细胞中的表达,通过慢病毒转染Hela细胞下调CD147表达,并验证其转染效率。运用Western blot法检测各组细胞中p-Akt、p-mTOR、ACC1、FASN、E-cadherin和N-cadherin的表达;使用BODIPY染色和脂肪酸试剂盒检测细胞中脂肪酸含量;利用CCK-8、平板克隆和Transwell实验检测细胞增殖、侵袭和迁移能力。sh-CD147组经Akt激动剂(SC79)处理后,Western blot法检测细胞中p-Akt、p-mTOR、ACC1、FASN、E-cadherin和N-cadherin的表达;选用BODIPY染色和脂肪酸试剂盒检测细胞中脂肪酸含量;利用平板克隆实验和Transwell实验分别检测细胞增殖、侵袭和迁移能力。结果UCSC数据库显示CD147在子宫颈癌中的表达高于正常子宫颈组织(P<0.01);CD147过表达的患者预后不良。Western blot检测结果显示,与H8细胞相比,Siha和Hela细胞中CD147蛋白表达增高(P=0.011)。下调CD147表达后,与Hela组相比,sh-CD147组细胞中CD147、ACC1和FASN蛋白表达降低(P<0.001);BODIPY荧光染色减弱,脂肪酸含量下降(P<0.001);细胞集落形成能力、侵袭和迁移能力降低;sh-CD147组细胞中E-cadherin蛋白表达升高,N-cadherin、p-Akt和p-mTOR表达降低。与sh-CD147相比,经Akt激动剂SC-79剂处理后(sh-CD147-SC79)细胞内p-Akt、p-mTOR、ACC1、FASN和N-cadherin表达升高,E-cadherin表达降低,脂质染色和脂肪酸含量检测结果与关键酶表达一致(P<0.01),细胞增殖、侵袭迁移能力显著增强。结论CD147通过Akt/mTOR信号通路调控脂肪酸合成,促进子宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 脂肪酸合成 增殖 侵袭 迁移 CD147
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CD147通过AIM2炎症小体介导宫颈癌细胞焦亡和增殖
3
作者 王玲 秦祥川 +1 位作者 李金秋 阿仙姑·哈斯木 《昆明医科大学学报》 CAS 2024年第1期15-21,共7页
目的 探讨跨膜蛋白CD147表达量变化对AIM2炎症小体介导的宫颈癌细胞焦亡及增殖的影响。方法 采用Western blot实验检测CD147在宫颈癌细胞SiHa(HPV+)、C33a(HPV-)和正常宫颈上皮细胞H8(HPV+)、HCer Epic(HPV-)中的表达水平;通过慢病毒转... 目的 探讨跨膜蛋白CD147表达量变化对AIM2炎症小体介导的宫颈癌细胞焦亡及增殖的影响。方法 采用Western blot实验检测CD147在宫颈癌细胞SiHa(HPV+)、C33a(HPV-)和正常宫颈上皮细胞H8(HPV+)、HCer Epic(HPV-)中的表达水平;通过慢病毒转染SiHa细胞下调CD147的表达,根据不同处理分为SiHa组、阴性对照组(shCD147-NON)、敲低组1(shCD147-1)和敲低组2(shCD147-2),通过Western blot、RT-qPCR和观察细胞绿色荧光表达验证转染效果;通过Western blot和RT-qPCR检测CD147和AIM2炎症小体相关因子AIM2、Caspase-1、IL-18、GSDMD蛋白和mRNA的表达;检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)释放度,荧光倒置显微镜下观察细胞的形态;CCK-8实验检测细胞的增殖能力;细胞克隆实验检测细胞集落形成能力。结果 Western blot结果显示,与HCerEpic细胞比较,SiHa细胞中CD147蛋白表达最高(P <0.05);CD147低表达慢病毒有效下调了SiHa细胞CD147表达水平(P <0.05);Western blot及RT-qPCR实验结果表明,与SiHa组相比,shCD147-1组和shCD147-2组AIM2、Caspase-1、IL-18、GSDMD蛋白和mRNA表达明显升高(P <0.05);乳酸脱氢酶(LDH)释放实验显示,与SiHa组相比,shCD147组LDH释放度明显升高(P <0.05);荧光倒置显微镜下显示,shCD147组出现肿胀和空泡化,表现出典型的细胞焦亡现象;与SiHa组相比,shCD147-1组和shCD147-2组细胞增殖能力和集落形成能力明显降低(P <0.05)。结论 CD147低表达有效上调宫颈癌SiHa细胞AIM2炎症相关因子的表达,诱发细胞焦亡,抑制细胞的增殖和克隆。 展开更多
关键词 宫颈癌 CD147 AIM2炎症小体 细胞焦亡 增殖
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HPV E6通过Rap1信号通路影响宫颈癌细胞增殖、侵袭及迁移的研究
4
作者 秦祥川 李金秋 +2 位作者 黄晓婧 忽吐比丁·库尔班 阿仙姑·哈斯木 《昆明医科大学学报》 CAS 2024年第9期9-16,共8页
目的探讨人乳头瘤病毒E6蛋白(human papillomavirus E6 protein,HPV E6)对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和迁移的影响及潜在分子机制。方法基于Illumina Hiseq 4000转录组测序技术检测12例不同程度的宫颈病变组织之间的基因表达特征,筛选与... 目的探讨人乳头瘤病毒E6蛋白(human papillomavirus E6 protein,HPV E6)对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和迁移的影响及潜在分子机制。方法基于Illumina Hiseq 4000转录组测序技术检测12例不同程度的宫颈病变组织之间的基因表达特征,筛选与HPV相关的差异基因;利用GO、KEGG Pathway方法对差异基因进行生物学功能富集分析;Western blotting检测正常宫颈上皮细胞HCerEpic、宫颈癌细胞Hela中Rap、Rap1GAP蛋白表达水平;通过平板克隆实验、Transwell实验和划痕实验检测其增殖、侵袭及迁移能力;通过sh-E6慢病毒转染下调细胞内HPV E6表达,分为对照组(Hela细胞)、空载组(sh-NON)和sh-E6组(低表达HPV E6);下调HPV E6表达,采用平板克隆和CCK-8实验分别检测每组细胞增殖能力和细胞活力;Transwell和划痕实验检测细胞侵袭、迁移能力;Western blotting检测各组细胞中E6、Rap1、Rap1GAP、CyclinD1、E-cadherin、N-cadherin蛋白的表达水平。在sh-E6组基础上过表达Rap1,Western blot检测细胞中Rap1通路及相关蛋白的表达水平;平板克隆实验、Transwell实验和划痕实验分别检测细胞增殖、侵袭和迁移能力。结果测序结果显示,与正常宫颈HPV阴性比较,HPV阳性的正常宫颈、CIN、宫颈癌组织中差异上调表达的基因分别有340、864和1036个;3个数据集寻找共有差异基因共24个。GO|KEGG富集分析24个差异表达基因主要富集在Rap1相关信号通路。与HCerEpic细胞相比,Hela细胞内Rap1表达升高,Rap1GAP表达降低(P<0.01);其细胞的增殖、侵袭和迁移能力增强(P<0.01);下调HPV E6表达后,与Hela组比较,sh-E6组细胞的增殖、细胞集落形成、侵袭和迁移能力降低(P<0.001);Western blotting表明,与Hela组比较,sh-E6组细胞内Rap1、CyclinD1、N-cadherin蛋白表达降低,Rap1GAP和E-cadherin蛋白表达升高(P<0.001)。与sh-E6组相比,过表达Rap1组(sh-E6/OE Rap1)细胞内Rap1/Rap1GAP、CyclinD1、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达被恢复(P<0.001),细胞增殖、侵袭迁移能力被恢复(P<0.01)。结论在宫颈癌发展过程中,HPV E6通过激活Rap1信号通路促进宫颈癌细胞增殖、侵袭及迁移。 展开更多
关键词 HPV E6 宫颈癌 Rap1通路 增殖 侵袭 迁移
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RACK1对人宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制 被引量：5
5
作者 李金秋 徐丽秀 +2 位作者 朱佳瑜 夏依达·吐尔逊 阿仙姑·哈斯木 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期442-450,共9页
目的探讨激活性蛋白激酶C受体1(RACK1)对人宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其潜在的机制。方法收集2020年12月-2021年12月新疆医科大学第一附属医院24例患者的宫颈鳞癌(CSCC)组织及24例无宫颈病变的正常宫颈(NC)组织,采用qRT-PCR检测CSCC... 目的探讨激活性蛋白激酶C受体1(RACK1)对人宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其潜在的机制。方法收集2020年12月-2021年12月新疆医科大学第一附属医院24例患者的宫颈鳞癌(CSCC)组织及24例无宫颈病变的正常宫颈(NC)组织,采用qRT-PCR检测CSCC和NC组织中RACK1 mRNA的表达水平,并检测CSCC组织中增殖和凋亡相关基因c-myc、caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2 mRNA的表达水平;采用Spearman秩相关分析CSCC组织中RACK1 mRNA与增殖和凋亡相关基因mRNA表达的相关性。采用qRT-PCR及Western blotting检测RACK1在宫颈癌细胞C33a、SiHa和正常宫颈内皮细胞H8中的表达情况。通过慢病毒转染C33a、SiHa细胞以沉默RACK1的表达,根据不同处理分为正常对照组(NC)、空载组(sh-NON)和沉默组1(shRACK1-1)、沉默组2(shRACK1-2),并验证细胞转染效率,采用MTT法及平板克隆实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,qRT-PCR检测RACK1沉默后各组细胞中c-myc、caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2 mRNA的表达水平,Western blotting检测RACK1沉默后各组细胞中c-myc、caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2以及磷酸化Janus激酶2(p-JAK2)、JAK2、磷酸化细胞信号传导与转录活化因子3(p-STAT3)、STAT3蛋白的表达水平。结果CSCC组织RACK1 mRNA表达水平明显高于NC组织(P<0.001)。Spearman秩相关分析结果显示,宫颈癌组织中RACK1 mRNA的表达水平与caspase-3(r=–0.679,P<0.001)、caspase-9(r=–0.735,P<0.001)、Bax(r=–0.691,P<0.001)mRNA表达水平呈明显负相关,而与c-myc(r=0.713,P<0.001)、Bcl-2(r=0.846,P<0.001)mRNA表达水平呈明显正相关。qRT-PCR与Western blotting检测结果显示,与H8细胞比较,C33a、SiHa细胞中RACK1 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.001)。RACK1沉默后,与sh-NON组及NC组比较,shRACK1-1组及shRACK1-2组RACK1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.001)。与sh-NON组比较,shRACK1-1组及shRACK1-2组细胞增殖和集落形成能力也明显降低(P<0.001),而细胞凋亡率明显增高(P<0.001)。此外,与sh-NON组比较,shRACK1-1组及shRACK1-2组caspase-3、caspase-9、Bax mRNA和蛋白表达水平明显增高,p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平明显增高,而c-myc、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.001或P<0.01)。结论RACK1在宫颈癌组织及细胞中呈现高表达,靶向沉默RACK1基因可有效降低增殖相关蛋白c-myc与抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,但显著增加宫颈癌细胞中凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-9、Bax的表达,可能与激活JAK2/STAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 激活性蛋白激酶C受体1 细胞增殖 细胞凋亡
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食管癌的病因及miR133b-206在食管癌中的研究进展 被引量：2
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作者 吴怡娴 董娟娟 +1 位作者 哈晓丹 李秀梅 《现代诊断与治疗》 CAS 2023年第14期2088-2091,共4页
食管癌是人体较为常见的消化道恶性肿瘤,根据全球癌症统计学数据,食管癌在各国之间的发生率存在显著差异,其中中国、伊朗和非洲东部、南美洲发病率较高,然而,我国临床数据显示食管癌的发病率明显降低,这与食管癌早期临床症状并不显著有... 食管癌是人体较为常见的消化道恶性肿瘤,根据全球癌症统计学数据,食管癌在各国之间的发生率存在显著差异,其中中国、伊朗和非洲东部、南美洲发病率较高,然而,我国临床数据显示食管癌的发病率明显降低,这与食管癌早期临床症状并不显著有关,导致临床的诊断率较低,无法及时进行有效的治疗措施,因此临床应加强相关领域的研究和预防措施,降低食管癌的发病率和提升患者的生存率。微RNA-133b-206(miR133b-206)是一种潜在的生物标志物,可以通过检测组织样本或者体液中的miR133b-206水平,反映食管癌的临床病理特征、预后、及患者的生存率,临床用于诊断和鉴别早期食管癌具有一定价值。基于此,本文就食管癌的病因及miR133b-206在食管癌中研究进展进行综述。 展开更多
关键词 食管癌 病因 微RNA-133b-206
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Rap1GAP激酶通过AMPK信号通路影响宫颈癌细胞增殖、侵袭及迁移的研究
7
作者 李金秋 王玲 +1 位作者 秦祥川 阿仙姑·哈斯木 《解放军医学院学报》 CAS 北大核心 2023年第3期254-260,共7页
背景肿瘤细胞快速增殖和难以控制的盆腔淋巴结转移是造成晚期宫颈癌患者死亡的主要原因。Rap1 GTP酶激活蛋白(Rap1 GTPase-activating protein,Rap1GAP)低表达与肿瘤细胞增殖、侵袭和患者不良预后相关。目的探讨Rap1GAP对宫颈癌细胞SiHa... 背景肿瘤细胞快速增殖和难以控制的盆腔淋巴结转移是造成晚期宫颈癌患者死亡的主要原因。Rap1 GTP酶激活蛋白(Rap1 GTPase-activating protein,Rap1GAP)低表达与肿瘤细胞增殖、侵袭和患者不良预后相关。目的探讨Rap1GAP对宫颈癌细胞SiHa、C33a增殖、侵袭和迁移的影响及潜在的分子机制。方法从UCSC(https://xenabrowser.net)数据库中下载经统一标准化的泛癌数据集:TCGA TARGET GTEx(PANCAN,N=19131,G=60499),从中提取ENSG00000076864(Rap1GAP)基因在宫颈癌样本中的表达数据,对每一表达值进行log2(x+0.001)变换,得到Rap1GAP基因的表达;采用Western blot检测RAP1GAP在宫颈癌细胞SiHa、C33a和正常宫颈内皮细胞H8中的表达水平,通过慢病毒转染SiHa、C33a细胞分别上调/下调Rap1GAP的表达,根据不同处理分为正常对照组(SiHa、C33a细胞)、空载组(NC-Rap1GAP)、OERap1GAP组(过表达Rap1GAP)和sh-Rap1GAP组(低表达Rap1GAP),并验证细胞转染效率;采用平板克隆实验和Transwell实验分别检测细胞增殖、侵袭和迁移能力;采用Western blot及qRT-PCR检测上调/下调Rap1GAP表达后各组细胞中Rap1GAP、E-cadherin、N-cadherin蛋白及mRNA的表达;采用Western blot检测磷酸化AMPK(p-AMPK)、AMPK蛋白表达水平。结果从数据库观察到Rap1GAP在宫颈癌组织中的表达显著高于其在正常宫颈组织中的表达(P<0.05)。Western blot结果显示,与H8细胞比较,C33a细胞中Rap1GAP蛋白表达增高,SiHa细胞中Rap1GAP蛋白表达降低(P<0.05)。与SiHa组比较,OE-Rap1GAP组细胞集落形成能力、侵袭和迁移能力降低。与C33a组比较,sh-Rap1GAP组细胞集落形成能力、侵袭和迁移能力增强。Western blot及qRT-PCR实验结果表明,与SiHa组比较,OE-Rap1GAP组细胞内Rap1GAP、E-cadherin蛋白及mRNA表达升高,而N-cadherin、p-AMPK蛋白及mRNA表达降低(P<0.01);与C33a组比较,sh-Rap1GAP组细胞内Rap1GAP、E-cadherin蛋白及mRNA表达降低,而N-cadherin、p-AMPK蛋白及mRNA表达升高(P<0.01)。结论Rap1GAP抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,可能与AMPK信号通路有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 Rap1酶激活蛋白 增殖 侵袭 迁移
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