HIV-1 CRF01_AE重组型gp120 V1/V2结构域单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：4

1

作者 楚鹰 宫祥丹 +5 位作者 高建伟 苏艾荣 陈德燕 宋红勇 吴喜林 吴稚伟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期540-545,共6页

目的真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性。方法构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠... 目的真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性。方法构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选分泌抗V1/V2重组蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤,对单克隆抗体的特异性、型别以及效价进行鉴定。结果制备并获得一株稳定分泌抗HIV-1 AE亚型V1/V2结构域单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA测定腹水效价高达1∶81 000,单克隆抗体类型属于IgG1/κ型。Western blot结果表明该单克隆抗体同样能够识别不同亚型的HIV gp120蛋白。结论成功制备出抗HIV-1 AE重组型gp120蛋白V1/V2结构域的单克隆抗体。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) gp120可变区1/2 单克隆抗体 真核蛋白表达 疫苗

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HIV-1膜蛋白GP120V1/V2区域的真核表达、纯化和鉴定 被引量：3

2

作者 宋红勇 楚鹰 吴稚伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期142-145,共4页

目的:真核表达北美HIV-1分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2,并纯化、鉴定其生物活性,为血清学分析鉴别HIV-1感染病人抗体反应及性质提供实验基础。方法:本研究将HIV-1北美分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2基因序列定向... 目的:真核表达北美HIV-1分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2,并纯化、鉴定其生物活性,为血清学分析鉴别HIV-1感染病人抗体反应及性质提供实验基础。方法:本研究将HIV-1北美分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2基因序列定向克隆到多系统表达载体pTriEx-3 Hygro vector(Merck&Co.,Inc.)中,构建了表达质粒,并将表达质粒瞬时转染293T细胞,144小时后收获上清液,经浓缩、纯化后,SDS-PAGE电泳,Western blot检测蛋白的表达,ELISA检测其与HIV-1阳性病人血清的反应性。结果:经SDS-PAGE电泳、Western blot、ELISA方法证实确实得到了有免疫反应活性的V1V2蛋白,从表观分子量判断,表达的V1V2蛋白被糖基化修饰。使用V1V2蛋白作为抗原,分析发现中国HIV-1阳性病人体内比较广泛的存在着V1V2的抗体,为血清学的分析奠定了实验基础。 展开更多

关键词 HIV-1 V1V2 真核表达

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gp120蛋白多肽抗体的设计、制备与鉴定 被引量：2

3

作者 吴喜林 刘忠 +1 位作者 程林 吴稚伟 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2012年第3期286-290,共5页

目的:设计多肽免疫原,制备针对中国流行株B'亚型人类免疫缺陷病毒一型(HIV-1)gp120蛋白的抗血清和相应单克隆抗体。方法:通过蛋白抗原设计,设计出免疫原多肽,将多肽欧联载体蛋白免疫小鼠,制备小鼠多克隆抗血清和单克隆抗体;用ELISA... 目的:设计多肽免疫原,制备针对中国流行株B'亚型人类免疫缺陷病毒一型(HIV-1)gp120蛋白的抗血清和相应单克隆抗体。方法:通过蛋白抗原设计,设计出免疫原多肽,将多肽欧联载体蛋白免疫小鼠,制备小鼠多克隆抗血清和单克隆抗体;用ELISA实验、蛋白免疫印迹鉴定其活性和表位。结果:成功制备了能结合gp120蛋白的小鼠多克隆抗血清,并且获得4株分泌特异性抗免疫原的IgG1亚型的单克隆细胞株。结论:蛋白抗原设计是成功的,该多肽能诱导结合蛋白的抗体,有可能成为针对艾滋病病毒中国流行株的多肽疫苗。 展开更多

关键词 多肽免疫 人类免疫缺陷病毒 多肽 抗体

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4-苯乙烯磺酸马来酸酐共聚物抑制HSV-2感染研究 被引量：1

4

作者 陈钰 宋思维 +1 位作者 邱敏 吴稚伟 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2012年第5期563-566,共4页

目的:探索4-苯乙烯磺酸马来酸酐共聚物(PSM)对单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染细胞或小鼠的抑制作用。方法:建立Vero-ICP10细胞系,通过Luciferase检测不同浓度PSM对感染细胞中HSV-2的抑制作用,并通过In cell western技术检测HSV-2 gD蛋白表... 目的:探索4-苯乙烯磺酸马来酸酐共聚物(PSM)对单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染细胞或小鼠的抑制作用。方法:建立Vero-ICP10细胞系,通过Luciferase检测不同浓度PSM对感染细胞中HSV-2的抑制作用,并通过In cell western技术检测HSV-2 gD蛋白表达,确定不同PSM浓度对HSV-2 gD蛋白表达的抑制作用;建立HSV-2阴道感染小鼠模型,观察PSM对HSV-2经生殖道感染小鼠的抑制作用。结果:Luciferase实验和In cell western实验结果均表明PSM具有抗HSV-2感染细胞的作用;小鼠模型中,5%的PSM能有效防止小鼠感染HSV-2(P<0.001)。结论:PSM在体内和体外模型中均可以抑制HSV-2感染。 展开更多

关键词 4-苯乙烯磺酸马来酸酐共聚物 单纯疱疹病毒2型 HSV-2阴道感染小鼠模型 抗病毒

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功能性卵巢高雄患者雌激素合成影响因素分析

5

作者 曲军卫 王勇 +2 位作者 管群 周晓军 吴效科 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期991-992,共2页

目的探讨功能性卵巢高雄(FOH)患者雌激素合成的影响因素。方法18例FOH,患者分为2组:双侧小卵泡(Φ2～8mm)数量为8～11的为FOHⅠ组(9例),数量为12～24的为FOHⅡ组(9例)。8名正常妇女作为对照组。用人绝经期促性腺激素(150U)和绒毛膜促性... 目的探讨功能性卵巢高雄(FOH)患者雌激素合成的影响因素。方法18例FOH,患者分为2组:双侧小卵泡(Φ2～8mm)数量为8～11的为FOHⅠ组(9例),数量为12～24的为FOHⅡ组(9例)。8名正常妇女作为对照组。用人绝经期促性腺激素(150U)和绒毛膜促性腺激素(5000U)进行卵巢兴奋试验,试验后3,8,12,18,24h时检测血清睾酮(T)和雌二醇(E2)水平,计算芳香化酶功能状态和活性。结果3h时点FOHⅠ组E2水平显著高于对照组,而8,12,18,24h时点FOHⅡ组E2水平则显著高于FOHⅠ组,但芳香化酶功能状态和活性在各时点差异均无统计学意义。结论雄激素水平和卵泡数量均可影响卵巢兴奋试验后E2的合成,且具有协同作用,卵泡数量较多的患者对卵巢兴奋试验更加敏感。 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征 功能性卵巢高雄 雌激素

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mTSLP-V1/V2融合蛋白的真核表达与鉴定 被引量：1

6

作者 楚鹰 王亭亭 +6 位作者 芮昱文 宋思维 苏艾荣 程林 宋红勇 郑大同 吴稚伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期582-586,共5页

目的:将鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(mouse thymic stromal lymphopoietin,mTSLP)与人免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)B亚型分离株BAL的gp120 V1/V2结构域在293F真核细胞表达体系中进行融合表达。方法:以真... 目的:将鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(mouse thymic stromal lymphopoietin,mTSLP)与人免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)B亚型分离株BAL的gp120 V1/V2结构域在293F真核细胞表达体系中进行融合表达。方法:以真核表达质粒pCEP-Pu为载体,构建mTSLP与gp120BALV1V2融合基因的重组蛋白表达质粒pCTV1V2BAL。限制性酶切电泳与测序验证质粒构建正确后,使用PEI瞬时转染293F悬浮细胞,表达产物以SDS-PAGE与Western blot进行分析,并对纯化后重组蛋白的V1/V2抗原表位进行了ELISA分析。结果:SDS-PAGE、Western blot分析显示,在表观分子量35 kD至55 kD的范围内存在一条不均一的糖蛋白条带,并且能与抗mTSLP多克隆抗体和抗His标签单克隆抗体发生反应。HIV-1阳性病人血清能够识别mTSLP-V1/V2BAL上的HIV-1V1/V2抗原表位。结论:在293F中成功表达了mTSLP-V1/V2BAL融合蛋白,该蛋白具有HIV-1gp120BALV1/V2区的抗原表位,能够用于HIV-1 gp120 V1/V2亚单位疫苗的研究。 展开更多

关键词 人免疫缺陷病毒1型 gp120可变区1 2 鼠胸腺基质淋巴细胞生成素 293 F表达体系 融合蛋白

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稳定表达人CCR5基因CHO细胞系的建立及鉴定 被引量：1

7

作者 程林 吴喜林 +1 位作者 袁钟平 吴稚伟 《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期804-808,共5页

CC型趋化因子受体5(CCR5)是HIV-1感染机体所需的最重要的辅助受体和潜在的抗病毒药物靶点之一.将含有人CCR5基因的真核表达质粒pcDNA3.1-CCR5稳定转染CHO-K1细胞,G418筛选2周后,在96孔板内通过有限稀释法培养细胞单克隆,最后得到22个细... CC型趋化因子受体5(CCR5)是HIV-1感染机体所需的最重要的辅助受体和潜在的抗病毒药物靶点之一.将含有人CCR5基因的真核表达质粒pcDNA3.1-CCR5稳定转染CHO-K1细胞,G418筛选2周后,在96孔板内通过有限稀释法培养细胞单克隆,最后得到22个细胞克隆,用流式细胞术检测细胞表面CCR5蛋白,发现克隆10能够高表达人CCR5基因.使用RT-PCR鉴定克隆10CCR5基因转录情况,结果在预期的位置检测出目的条带.采用细胞ELISA的方法进一步鉴定克隆10细胞表面CCR5的表达,结果该克隆的405nm光密度值是对照组的13.6倍.结果表明,本研究建立的稳定转染人CCR5的CHO细胞系能够高效表达CCR5基因,为研究HIV-1共受体、筛选病毒中和抗体、以及抗病毒药物奠定了基础. 展开更多

关键词 CC型趋化因子受体5 稳定转染 细胞酶联免疫吸附实验 人类免疫缺陷病毒

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重组人内皮抑素DOPS胶束的制备及抑瘤效应研究 被引量：3

8

作者 邢静 樊燕蓉 +2 位作者 冯志英 王建军 徐根兴 《药学与临床研究》 2010年第6期516-519,523,共5页

目的:本研究采用二油基磷脂酰丝氨酸(DOPS)制备包载重组人内皮抑素的胶束,并考察其体内外抑瘤效应。方法:研究DOPS制备胶束的理化性质,考察重组人内皮抑素DOPS胶束对肿瘤细胞生长、鸡胚绒毛尿囊体内血管生长的影响及对H22肝癌荷瘤小鼠... 目的:本研究采用二油基磷脂酰丝氨酸(DOPS)制备包载重组人内皮抑素的胶束,并考察其体内外抑瘤效应。方法:研究DOPS制备胶束的理化性质,考察重组人内皮抑素DOPS胶束对肿瘤细胞生长、鸡胚绒毛尿囊体内血管生长的影响及对H22肝癌荷瘤小鼠的肿瘤抑制效果。结果:制备的重组人内皮抑素DOPS胶束的粒径为(117.7±21.4)nm,Zeta电位为+18.1 mV,包封率为96.54%。该胶束明显抑制MCF-7肿瘤细胞的生长和增殖,抑制率为32.02%;对鸡胚绒毛尿囊血管新生也有明显的抑制作用,剂量越大,抑制作用越强。与单独使用重组人内皮抑素相比,该胶束抑制H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤生长,抑制率达到55.42%。结论:以DOPS胶束作为药物载体可有效地增强重组人内皮抑素的抑瘤效应。 展开更多

关键词 DOPS 重组人内皮抑素 胶束 肿瘤

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人CCR5基因真核表达质粒的构建及其鉴定 被引量：1

9

作者 程林 宋红勇 +1 位作者 吴喜林 吴稚伟 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2012年第1期40-43,共4页

目的:构建人CCR5基因的真核表达质粒并对其进行功能鉴定。方法:PCR扩增人CCR5基因,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1内,构建含人CCR5基因的真核表达质粒pcDNA3.1-CCR5。使用RT-PCR、流式细胞术和HIV假病毒感染实验的方法,鉴定CCR5在真核... 目的:构建人CCR5基因的真核表达质粒并对其进行功能鉴定。方法:PCR扩增人CCR5基因,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1内,构建含人CCR5基因的真核表达质粒pcDNA3.1-CCR5。使用RT-PCR、流式细胞术和HIV假病毒感染实验的方法,鉴定CCR5在真核细胞中的表达和功能。结果:克隆的人CCR5基因与GenBank中已登记的基因序列100%同源。瞬时转染真核细胞后,RT-PCR在预期的位置检测出目的条带,流式细胞术检测到约25.6%的细胞表达CCR5蛋白,且该蛋白能介导HIV假病毒的感染。结论:成功构建了含人CCR5基因的真核表达质粒。 展开更多

关键词 CCR5基因 质粒 真核表达 人类免疫缺陷病毒

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羟丙基-β-环糊精包合物中尼非韦罗含量测定和稳定性考察 被引量：1

10

作者 郝彬彬 王芹 +2 位作者 任勇 王勇 吴稚伟 《医学研究生学报》 CAS 2011年第6期565-568,共4页

目的尼非韦罗是一种新型抗艾滋病药物,羟丙基-β-环糊精(hydroxypropyl-β-cyclodextrin,HP-β-CD)包合物增加尼非韦罗的水溶性和稳定性。文中采用反相高效液相色谱法测定环糊精包合物中尼非韦罗含量及考察其相关稳定性。方法采用GL Sci... 目的尼非韦罗是一种新型抗艾滋病药物,羟丙基-β-环糊精(hydroxypropyl-β-cyclodextrin,HP-β-CD)包合物增加尼非韦罗的水溶性和稳定性。文中采用反相高效液相色谱法测定环糊精包合物中尼非韦罗含量及考察其相关稳定性。方法采用GL Sciences Inertsil ODS柱(4.60×250 mm,5μm),检测波长265 nm,柱温30℃。以甲醇(A相)-复方醋酸缓冲液(B相,pH4.5)(65∶35,v/v)为洗脱流动相,采用等速度洗脱,流速为1 ml/min,采用外标法定量。结果尼非韦罗与各有关物质分离良好。在20.10~180.90μg/ml的浓度范围内,尼非韦罗峰面积与浓度具有良好线性关系(r=0.9999);重复性好[相对标准差(relative standard deviation,RSD)<1.5%];稳定性好(RSD<1.5%);加样回收率为100.5%(n=9)。结论此方法检测包合物中尼非韦罗含量操作简便、准确、灵敏度高、可靠。尼非韦罗经HP-β-CD包合后相关稳定性有明显提高。 展开更多

关键词 高效液相色谱法 羟丙基-Β-环糊精 尼非韦罗 含量 稳定性

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中国HIV-1B'亚型流行株gp120蛋白的表达与纯化 被引量：1

11

作者 楚鹰 宋红勇 吴稚伟 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2013年第6期742-745,共4页

目的:表达纯化中国HIV-1 B'亚型流行株gp120蛋白。方法:将gp120基因克隆至真核表达载体pTriEx-3 hygro,构建真核表达质粒pTriEx-3-gp120,转染CHO-K1细胞,96 h后收取上清,利用金属螯合层析的方法纯化该重组蛋白,并通过SDS-PAGE以及We... 目的:表达纯化中国HIV-1 B'亚型流行株gp120蛋白。方法:将gp120基因克隆至真核表达载体pTriEx-3 hygro,构建真核表达质粒pTriEx-3-gp120,转染CHO-K1细胞,96 h后收取上清,利用金属螯合层析的方法纯化该重组蛋白,并通过SDS-PAGE以及Western blotting验证重组蛋白的表达。结果:酶切及测序结果表明真核质粒表达构建正确,表达的重组蛋白可以被His标签抗体以及HIV-1阳性血清所识别,并从细胞转染上清中成功纯化了该蛋白。结论:我们成功构建了一个可用于免疫检测、疫苗设计以及其它相关研究的HIV-1免疫原。 展开更多

关键词 HIV-1 GP120 蛋白表达纯化

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siRNA的体内递送及药物代谢动力学特性 被引量：1

12

作者 郭佳佳 王建军 徐根兴 《药学与临床研究》 2010年第4期363-365,369,共4页

siRNA作为一种高效的RNA干扰药物在疾病治疗方面前景广阔。但其临床应用还需解决由于高负电荷和分子量等引起的体内递送系统、脱靶效应、免疫激活、毒副作用、改善其药物代谢动力学特性等问题。本文简要综述了siRNA的作用原理、体内递... siRNA作为一种高效的RNA干扰药物在疾病治疗方面前景广阔。但其临床应用还需解决由于高负电荷和分子量等引起的体内递送系统、脱靶效应、免疫激活、毒副作用、改善其药物代谢动力学特性等问题。本文简要综述了siRNA的作用原理、体内递送方式、药代动力学特性、安全问题及临床应用展望。 展开更多

关键词 小干扰RNA RNA干扰 药物代谢动力学

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脂质胶束介导VEGF基因对称和不对称siRNA的抑瘤效果

13

作者 郭佳佳 殷妍 +2 位作者 张昌栋 王建军 徐根兴 《药学与临床研究》 2011年第6期489-494,共6页

目的:探讨脂质胶束递送靶向VEGF基因的对称siRNA和不对称siRNA(asiRNA)的抑瘤效果。方法:通过RNA电泳等方法,筛选不同组分比例的脂质胶束,用Western blot、细胞板计数法、CCK-8实验检测对乳腺癌MCF-7细胞活力的影响。构建H22肝癌荷瘤小... 目的:探讨脂质胶束递送靶向VEGF基因的对称siRNA和不对称siRNA(asiRNA)的抑瘤效果。方法:通过RNA电泳等方法,筛选不同组分比例的脂质胶束,用Western blot、细胞板计数法、CCK-8实验检测对乳腺癌MCF-7细胞活力的影响。构建H22肝癌荷瘤小鼠模型,随机分为不同实验组,连续14天尾静脉注射给药,计算抑瘤率和小鼠生存率。结果:在4组不同RNA干扰片段中,asiRNA21/23组抑制VEGF蛋白表达效果最好。在H22荷瘤小鼠实验中,asiRNA21/23组显示了明显的抑瘤效果,且延长了荷瘤小鼠的生存期。结论:脂质胶束递送VEGF-asiRNA21/23降低了MCF-7细胞中VEGF基因的表达,且具有明显的肿瘤抑制效果。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 小干扰RNA(siRNA) 不对称小干扰RNA(asiRNA) 脂质胶束 肿瘤

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抗艾滋病药物F18和尼非韦罗在Solutol HS15形成复合制剂后的高效液相色谱测定

14

作者 刘超 袁钟平 吴稚伟 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2012年第5期600-602,共3页

目的:解决F18和尼非韦罗二者水溶性差的问题,并建立F18和尼非韦罗两种药物混合物的高效液相色谱(HPLC)检测条件。方法:采用GL Sciences Inertsil ODS柱(4.60 mm×250 mm,5μm),检测波长265 nm,柱温30℃。以甲醇(A相)-复方醋酸缓冲... 目的:解决F18和尼非韦罗二者水溶性差的问题,并建立F18和尼非韦罗两种药物混合物的高效液相色谱(HPLC)检测条件。方法:采用GL Sciences Inertsil ODS柱(4.60 mm×250 mm,5μm),检测波长265 nm,柱温30℃。以甲醇(A相)-复方醋酸缓冲液(B相,pH4.5)(65∶35,V/V)为洗脱流动相,采用等速度洗脱,流速为1 ml.min-1。结果:Solutol HS15能够很好地溶解F18和尼非韦罗,二者的出峰时间分别为34.3和14.2 min,最小检测限1μg.ml-1,20～180μg.ml-1的线性关系良好。结论:本研究所建立的分析检测条件为后续的研究提供有效的检测和分析手段,为以后的阴道杀微生物剂稳定制剂及联合用药奠定了基础。 展开更多

关键词 高效液相色谱 F18 尼非韦罗 Solutol HS15 人类免疫缺陷病毒 杀微生物剂

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靶向HIV-1细胞受体基因CCR5的不对称siRNA的稳定性和体内分布研究

15

作者 张昌栋 殷妍 +5 位作者 郭佳佳 梁晓飞 段友容 吴稚伟 王建军 徐根兴 《药学与临床研究》 2011年第5期391-396,共6页

目的:探讨靶向HIV-1细胞受体基因CCR5的不对称siRNA(asiRNA)在血清和动物体内的稳定性和在动物体内分布情况。方法:用内皮抑素同脂质胶束联合递送asiRNA,琼脂糖凝胶电泳法检测asiRNA的血清稳定性,ELISA法和活体荧光成像法检测asiRNA的... 目的:探讨靶向HIV-1细胞受体基因CCR5的不对称siRNA(asiRNA)在血清和动物体内的稳定性和在动物体内分布情况。方法:用内皮抑素同脂质胶束联合递送asiRNA,琼脂糖凝胶电泳法检测asiRNA的血清稳定性,ELISA法和活体荧光成像法检测asiRNA的体内分布。结果:改变合适的实验条件和asiRNA的修饰,可提高asiRNA的血清稳定性。用ELISA法检测出静脉给药15 min后双链asiRNA在血液、肝、肺和肾内浓度较高,用活体荧光成像法检测出静脉给药24 h后asiRNA向肾内汇集排泄,两种检测方法测得asiRNA在脾内浓度较低。结论:两种检测方法方便实用,灵敏度不同,均可用于阳离子脂质体递送asiRNA的体内分布检测。 展开更多

关键词 CCR5 SIRNA 不对称siRNA ELISA 活体荧光成像

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sIgA在抗病毒治疗中的研究进展 被引量：1

16

作者 黄碧莲 吴喜林 吴稚伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1532-1537,共6页

免疫球蛋白A(IgA)主要分为血清型和分泌型。分泌型IgA(sIgA)是机体黏膜防御系统的主要成分,防止病原体入侵机体的第一道防线。sIgA分子通过直接结合病原体抗原,中和或阻断一系列病毒的活性,并阻止它们附着在宿主细胞上。sIgA在抗病毒领... 免疫球蛋白A(IgA)主要分为血清型和分泌型。分泌型IgA(sIgA)是机体黏膜防御系统的主要成分,防止病原体入侵机体的第一道防线。sIgA分子通过直接结合病原体抗原,中和或阻断一系列病毒的活性,并阻止它们附着在宿主细胞上。sIgA在抗病毒领域的治疗潜力,使得sIgA在抗病毒领域备受关注,因此可能用于临床抗病毒治疗。本文重点对sIgA在抗病毒治疗中的应用现状及进展进行综述。 展开更多

关键词 IGA 抗病毒 黏膜免疫

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富硒转白细胞介素2基因双歧杆菌对小鼠移植瘤H22的治疗作用 被引量：7

17

作者 王庆晓 王建军 徐根兴 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2011年第9期788-791,796,共5页

目的评价富硒和转白细胞介素2(IL2)基因双歧杆菌对小鼠移植瘤H22的抑制效果。方法通过电转导将含IL2质粒导入到长双歧杆菌(Bifidobacterium longum,B.longum)中,将转IL2基因双歧杆菌接种到添加了亚硒酸钠(Na2SeO3)的培养基中,利用微生... 目的评价富硒和转白细胞介素2(IL2)基因双歧杆菌对小鼠移植瘤H22的抑制效果。方法通过电转导将含IL2质粒导入到长双歧杆菌(Bifidobacterium longum,B.longum)中,将转IL2基因双歧杆菌接种到添加了亚硒酸钠(Na2SeO3)的培养基中,利用微生物的富集及转化作用,形成富硒的含IL2基因质粒的双歧杆菌(Se-B.longum-IL2)。结果利用双歧杆菌的肿瘤厌氧区靶向性,通过荷肝癌H22的小鼠尾静脉注射Se-B.longum-IL2,取得了良好的抑瘤效果与荷肝癌小鼠生存延长效果。结论转IL2基因双歧杆菌和富硒联合后对小鼠肝癌有明显的基因治疗前景。 展开更多

关键词 长双歧杆菌 IL2 硒 肝癌

原文传递

人类免疫缺陷病毒-1型负向调节因子多肽特异性CD4＋T淋巴细胞克隆的建立和筛选

18

作者 宋培新 李彦磊 郑楠 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期215-219,共5页

目的 建立和筛选慢性HIV感染者体内HIV-1型负向调节因子（Nef）多肽特异性CD4＋T淋巴细胞克隆.方法 采集5例无症状期HIV感染者PBMC,Bulk培养,用Nef蛋白C末端的Nef末端多肽刺激,双荧光流式细胞术分析细胞表面CD4分子和细胞内γ干扰素表达... 目的 建立和筛选慢性HIV感染者体内HIV-1型负向调节因子（Nef）多肽特异性CD4＋T淋巴细胞克隆.方法 采集5例无症状期HIV感染者PBMC,Bulk培养,用Nef蛋白C末端的Nef末端多肽刺激,双荧光流式细胞术分析细胞表面CD4分子和细胞内γ干扰素表达.有限稀释法进行Nef末端多肽特异性CD4＋T淋巴细胞克隆,酶联免疫斑点法（ELISPOT）筛选特异性克隆,挑选生长最好的细胞扩大培养,完成克隆.结果 1例H1V感染者的PBMC中存在特异性CD4＋T淋巴细胞,成功建立T淋巴细胞克隆.经ELISPOT法确认为Nef末端多肽特异性CD4＋T淋巴细胞克隆.人白细胞抗原（HLA）-DRB1分型检测,提示该多肽表位可能为HLA-DRB1＊ 0406限制性.结论 成功建立Nef末端多肽特异性CD4＋T淋巴细胞克隆,发现并鉴定了Nef末端表位及其HLA限制性. 展开更多

关键词 HIV-1 负向调节因子多肽 CD4+T淋巴细胞克隆

原文传递

阴道用尼非韦罗凝胶的大、小鼠急性毒性和家兔刺激性研究

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作者 郝彬彬 王芹 +1 位作者 王勇 吴稚伟 《中国药房》 CAS CSCD 北大核心 2011年第29期2714-2716,共3页

目的:研究阴道用尼非韦罗凝胶的大、小鼠急性毒性和家兔刺激性。方法:取60只小鼠腹腔注射不同浓度(199、229、263、302、348、400mg·kg-1)的尼非韦罗凝胶进行全身急性毒性实验,计算半数致死量(LD50),观察14d内小鼠死亡数;对30只大... 目的:研究阴道用尼非韦罗凝胶的大、小鼠急性毒性和家兔刺激性。方法:取60只小鼠腹腔注射不同浓度(199、229、263、302、348、400mg·kg-1)的尼非韦罗凝胶进行全身急性毒性实验,计算半数致死量(LD50),观察14d内小鼠死亡数;对30只大鼠进行阴道急性毒性实验,分别阴道内给予尼非韦罗凝胶(5mg·kg-1)、空白凝胶,并设阴性对照,观察14d内大鼠体重变化、死亡数及生殖道形态学变化;对12只性成熟家兔进行阴道刺激性实验,分组为机械刺激组(生理盐水)、参比对照组(3%壬苯醇醚)、尼非韦罗凝胶组(1mg·kg-1)、空白凝胶组,阴道给予相应药物,连续给药10d,按Eckstein刺激性评价标准,以充血、水肿、炎性细胞浸润及上皮脱落为指标进行阴道刺激性评分。结果:尼非韦罗凝胶的小鼠LD50为303.37mg·kg-1,95%可信限为278.7～333.29mg·kg-1;大鼠14d内无死亡,体重无明显变化,生殖道未见异常分泌物;4组家兔阴道刺激性总分值比较无显著差异,刺激程度均在轻度以下。结论:尼非韦罗凝胶的全身急性毒性属中等毒性,阴道急性毒性和刺激性均在可接受范围内,总体评价较为安全,可作为阴道凝胶剂进行临床试验。 展开更多

关键词 尼非韦罗凝胶 半数致死量 大鼠 小鼠 家兔 阴道 急性毒性 刺激性

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