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刺槐EST-SSR标记PCR反应体系的优化 被引量：6
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作者 赵克奇 董黎 +7 位作者 王少明 孙宇涵 孙文婷 袁存权 荀守华 张江涛 王玉玲 李云 《中国农学通报》 CSCD 2014年第22期45-52,共8页
为建立一套适用于刺槐EST-SSR标记的PCR反应体系,采用L16(45)正交试验设计结合单因素试验,对刺槐EST-SSR PCR反应体系中的5个主要因素:引物、DNA模板、dNTPs、Mg2+和Taq DNA聚合酶进行优化试验。结果表明:在20μL反应体系中,各反应因素... 为建立一套适用于刺槐EST-SSR标记的PCR反应体系,采用L16(45)正交试验设计结合单因素试验,对刺槐EST-SSR PCR反应体系中的5个主要因素:引物、DNA模板、dNTPs、Mg2+和Taq DNA聚合酶进行优化试验。结果表明:在20μL反应体系中,各反应因素的最佳水平为0.5μmol/L引物、30 ng模板DNA、0.15 mmol/L dNTP、0.5 mmol/L Mg2+、1.0 UTaq DNA聚合酶。利用随机挑选的3个刺槐优良无性系品种和7对EST-SSR引物对优化体系进行验证,结果均能获得稳定、清晰的条带,证明该体系稳定可靠。此优化体系的建立为刺槐EST-SSR标记的开发以及利用EST-SSR标记深入研究和利用中国刺槐种质资源奠定基础。 展开更多
关键词 刺槐 EST-SSR PCR反应体系
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刺槐实时定量PCR分析中内参基因的选择 被引量：11
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作者 王金星 张利军 +7 位作者 廖资亿 张运根 邱乾栋 孙鹏 孙宇涵 胡瑞阳 卢楠 李云 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第9期167-172,共6页
实时荧光定量PCR 是由美国Applied Biosystems 公司于1996年在传统的PCR 技术基础上发展起来的一种新的核酸定量技术（ Mackay，2004），具有定量准确、灵敏度高、特异性强、重复性好及高通量等优点（Huggett et al．，2005），已成为... 实时荧光定量PCR 是由美国Applied Biosystems 公司于1996年在传统的PCR 技术基础上发展起来的一种新的核酸定量技术（ Mackay，2004），具有定量准确、灵敏度高、特异性强、重复性好及高通量等优点（Huggett et al．，2005），已成为医学、农学、林学、微生物学等众多领域中进行基因表达和转录组分析的常用技术之一（ Postollec et al．，2011；袁亚男等，2008）。 展开更多
关键词 刺槐 内参基因 实时荧光定量PCR GENORM NORMFINDER
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