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生物节律相关基因Cry1与肝癌的相关性探讨 被引量：2
1
作者 张艳 周筱梅 +4 位作者 李宏年 张萍萍 李锦军 万大方 顾健人 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期301-306,共6页
目的研究生物节律相关基因Cry1与肝癌发生发展的相关性。方法逆转录PCR、Northernblot和免疫组织化学方法检测Cry1在各种肿瘤细胞系、人正常组织及人肝癌与配对的癌旁组织中的表达。构建Cry1重组的真核表达质粒并转染肝癌细胞SMMC-7721... 目的研究生物节律相关基因Cry1与肝癌发生发展的相关性。方法逆转录PCR、Northernblot和免疫组织化学方法检测Cry1在各种肿瘤细胞系、人正常组织及人肝癌与配对的癌旁组织中的表达。构建Cry1重组的真核表达质粒并转染肝癌细胞SMMC-7721。生长曲线和软琼脂克隆形成试验检测Cry1过表达的SMMC-7721细胞的体外增殖速度。逆转录PCR检测与Cry1相互作用的生物节律基因在Cry1过表达的SMMC-7721中的表达。结果Cry1在人各种正常组织中均有不同程度的表达。Cry1在人肝癌癌旁组织中的表达水平高于癌组织中的表达。过表达Cry1对SMMC-7721细胞的体外增殖没有明显影响。结论生物节律相关基因Cry1与肝癌发生发展可能有一定的相关性。 展开更多
关键词 肝肿瘤 生物节律基因 基因表达 细胞分裂 SMMC-7721细胞
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肝癌和癌旁肝组织中癌基因多肽产物抗体的制备及初步应用研究 被引量：1
2
作者 杨冬华 刘为纹 +4 位作者 顾健人 万大方 马安卿 李宏年 曲淑敏 《临床肝胆病杂志》 CAS 1993年第3期128-130,共3页
采用Microgenie微机处理系统分析人胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)、IGF-Ⅱ受体和C-fms癌基因cDNA的核苷酸顺序亲水性及空间结构,选择不同的氨基酸之间亲水性密集片断,经多肽合成仪以固相法进行全合成。用合成的三种基因多肽片断为抗原,分... 采用Microgenie微机处理系统分析人胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)、IGF-Ⅱ受体和C-fms癌基因cDNA的核苷酸顺序亲水性及空间结构,选择不同的氨基酸之间亲水性密集片断,经多肽合成仪以固相法进行全合成。用合成的三种基因多肽片断为抗原,分别免疫家兔制备成抗IGF-Ⅱ、IGF-Ⅱ受体和C-fms基因多肽产物抗体。采用免疫印迹法对3例配对的肝癌及癌旁肝组织进行初步应用研究,结果提示三种基因的异常过量表达与肝癌的发生关系密切。 展开更多
关键词 受体 癌基因 免疫印迹 肝肿瘤
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利用集落形成实验和成瘤实验初步研究新基因的成瘤作用
3
作者 韩力薇 覃文新 +2 位作者 王晨 万大方 顾健人 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第4期334-336,339,共4页
目的　探讨新基因尤其是肝癌相关新基因的功能。方法　利用集落形成实验和成瘤实验初步分析HC90和HC3898基因的功能。结果　①HC90基因的转染能增加SMMC 772 1肝癌细胞形成的集落数量 ;②注射转染了HC90基因的SMMC 772 1细胞形成的肿瘤... 目的　探讨新基因尤其是肝癌相关新基因的功能。方法　利用集落形成实验和成瘤实验初步分析HC90和HC3898基因的功能。结果　①HC90基因的转染能增加SMMC 772 1肝癌细胞形成的集落数量 ;②注射转染了HC90基因的SMMC 772 1细胞形成的肿瘤平均瘤重大于注射SMMC 772 1细胞的自身对照组 ;③HC3898全长cDNA转染SMMC 772 1细胞能显著抑制集落的形成 ;④注射转染HC3898基因的SMMC 772 1细胞组平均瘤重小于注射SMMC 772 1细胞的自身对照组的瘤重 ,抑瘤率为 5 0 % ;⑤HC3898实验组瘤块切片检查可见凋亡细胞及凋亡小体 ,瘤块的组织DNA经 1.5 %琼脂糖电泳分析 ,可发现典型的凋亡“阶梯状DNA条带”。结论　HC90可能是与肝癌恶性表型相关的新基因 ,转染SMMC 772 1肝癌细胞后能促进肝癌细胞的生长。HC3898基因可能诱导凋亡并抑制肝癌细胞的生长。集落形成实验和成瘤实验是对基因功能进行初步分析的有效方法 。 展开更多
关键词 集落形成 成瘤 凋亡 新基因 HCC 肿瘤
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肝癌、癌旁肝组织IGF-Ⅱ、IGF-Ⅱ受体及CSF-1受体/c-fms癌基因产物的表达 被引量：3
4
作者 杨冬华 刘为纹 +6 位作者 顾健人 刘尚廉 万大方 马安卿 蒋惠秋 李岱宗 李宏年 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第6期517-524,共8页
本文采用免疫组织化学(ABC)法、Western印迹法和Northern印迹法从细胞、蛋白及转录水平观察17例肝癌及癌旁肝组织中IGF-Ⅱ、IGF-Ⅱ受体和CSF-1受体/c-fms癌基因产物的表达。结果表明,肝癌组织中3种基因产物的表达水平显著高于正常肝组织... 本文采用免疫组织化学(ABC)法、Western印迹法和Northern印迹法从细胞、蛋白及转录水平观察17例肝癌及癌旁肝组织中IGF-Ⅱ、IGF-Ⅱ受体和CSF-1受体/c-fms癌基因产物的表达。结果表明,肝癌组织中3种基因产物的表达水平显著高于正常肝组织;癌旁肝组织中IGF-Ⅱ和IGF-Ⅱ受体的表达水平显著高于肝癌组织;肝癌及癌旁肝组织IGF-Ⅱ基因呈胚胎型表达特点。但是,肝癌组织中CSF-1受体基因表达则显著高于癌旁肝组织。由此提示3种基因产物异常的过量表达与肝癌细胞自分泌生长刺激机制有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 IGF CSF 受体 癌旁 肝组织
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转染外源HC56基因对Jurkat细胞足叶乙甙作用敏感性的研究 被引量：2
5
作者 牧启田 王嵘 +3 位作者 吴向华 杜均样 万大方 顾建人 《实用癌症杂志》 2002年第5期458-459,465,共3页
目的　探讨HC5 6基因与化疗敏感性的关系。方法　把HC5 6基因转染Jurkat细胞 ,经G418筛选 ,获得稳定表达外源HC5 6基因的细胞克隆后 ,应用MTT法 ,观察HC5 6基因产物对Jurkat细胞拓扑异构酶Ⅱ抑制剂足叶乙甙 (etoposide ,VP16)敏感性的... 目的　探讨HC5 6基因与化疗敏感性的关系。方法　把HC5 6基因转染Jurkat细胞 ,经G418筛选 ,获得稳定表达外源HC5 6基因的细胞克隆后 ,应用MTT法 ,观察HC5 6基因产物对Jurkat细胞拓扑异构酶Ⅱ抑制剂足叶乙甙 (etoposide ,VP16)敏感性的影响。结果　HC5 6基因转染Jurkat细胞 ,在 1μg ml、10 μg ml、5 0 μg ml浓度的VP16作用下 ,对细胞生长的相对抑制率分别为 5 1.7%± 4.2 % ,45 .1%± 3 .7% ,79.6%± 6.2 % ,明显高于在相应的VP16浓度作用下的PBK CMV空载体转染的对照细胞(分别为 9.5 %± 0 .6% ,7.0 %± 0 .5 % ,10 .2 %± 0 .9% ) (P <0 .0 1)。结论　HC 5 展开更多
关键词 HC56基因 JURKAT细胞 足叶乙甙 化疗敏感性 基因转染 白血病 淋巴瘤
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HCAP1基因对Raji细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的作用 被引量：1
6
作者 牧启田 吴向华 +5 位作者 王嵘 杜均祥 郭列平 张海伟 万大方 顾建人 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2003年第4期1-5,共5页
目的 :研究外源HCAP1基因产物对Burkitt淋巴瘤细胞系Raji细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax/Bcl- 2的作用。方法 :用脂质体介导的基因转移方法 ,把外源HCAP1基因转染到Raji细胞中 ,用流式细胞术和Hochest 332 58荧光染色检测细胞凋亡 ;用Wester... 目的 :研究外源HCAP1基因产物对Burkitt淋巴瘤细胞系Raji细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax/Bcl- 2的作用。方法 :用脂质体介导的基因转移方法 ,把外源HCAP1基因转染到Raji细胞中 ,用流式细胞术和Hochest 332 58荧光染色检测细胞凋亡 ;用Westernblot检测外源HCAP1基因对凋亡相关蛋白Bax和Bcl- 2蛋白表达的调节。结果 :外源HCAP1基因导入Raji细胞 2 4、4 8和 96h后 ,细胞凋亡率增加。Westernblot显示Bax/Bcl- 2蛋白表达比值明显增高。结论 :转染外源性HCAP1基因可诱导Raji细胞凋亡 ,使Bax/Bcl- 2蛋白表达比例上调可能是HCAP1诱导凋亡的机制之一。 展开更多
关键词 HCAP1基因 RAJI细胞 细胞凋亡 Bax/Bel-2蛋白
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增强子结合蛋白家族一个新基因的3′-非编码区序列对肝癌细胞7721生长的影响
7
作者 徐砺新 王缨 +3 位作者 万大方 刘彦仿 隋延仿 顾健人 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期1-3,共3页
目的观察所获得的增强子结合蛋白家族一个新基因ＨＰ８的３′┐非编码区（３′ＵＴＲ）对肝癌细胞生长的影响。方法将３′ＵＴＲ序列亚克隆至真核表达载体ｐＢＫＣＭＶ中，运用磷酸钙沉淀法转染肝癌细胞７７２１。结果观察到细胞的生长... 目的观察所获得的增强子结合蛋白家族一个新基因ＨＰ８的３′┐非编码区（３′ＵＴＲ）对肝癌细胞生长的影响。方法将３′ＵＴＲ序列亚克隆至真核表达载体ｐＢＫＣＭＶ中，运用磷酸钙沉淀法转染肝癌细胞７７２１。结果观察到细胞的生长受到较明显抑制。结论表明该基因参与真核细胞转录调控，结合以前的实验结果（该基因在肝癌细胞中普遍高表达）。 展开更多
关键词 肝肿瘤 基因 肿瘤细胞 细胞分化
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多结节原发性肝癌和癌旁组织中多个癌基因表达的分析
8
作者 钱连芳 周筱梅 +2 位作者 夏晓琳 王凤英 顾健人 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期538-540,共3页
为寻找肝癌发生过程中较为重要的癌基因，并用于基因诊断作者应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法分析８例多结节肝癌及相应癌旁组织中的ＩＧＦ－Ⅱ，ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ３种癌基因的表达水平，结果发现３种癌基因在８例癌结节中呈不同程度... 为寻找肝癌发生过程中较为重要的癌基因，并用于基因诊断作者应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法分析８例多结节肝癌及相应癌旁组织中的ＩＧＦ－Ⅱ，ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ３种癌基因的表达水平，结果发现３种癌基因在８例癌结节中呈不同程度的过量表达。其中１例的各个癌结节中３个癌基因表达程度基本平行。ＩＧＦ－Ⅱ和ｃ－ｍｙｃ在癌旁组织呈过量表达，其中３例ＩＧＦ－Ⅱ的表达超过癌组织，而Ｎ－ｒａｓ在癌旁组织的表达都接近正常。提示ＩＧＦ－Ⅱ和ｃ－ｍｙｃ基因与肝细胞增生有关，而Ｎ－ｒａｓ过量表达具有诊断意义。 展开更多
关键词 基因 过量表达 肝肿瘤 多结节原发性
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信使RNA差异显示法比较正常结肠粘膜与结肠癌的基因表达
9
作者 王莉 陆玮 +2 位作者 陈员根 周筱梅 顾健人 《上海医科大学学报》 CSCD 1998年第6期469-469,共1页
信使ＲＮＡ差异显示技术是Ｌｉａｎｇ等［１］１９９２年首创的用于鉴别在某一细胞系、组织或某个发展阶段中特异表达的基因的新方法。其特点在于能迅速方便地获得大量候选的分子生物学信息。该技术在结肠癌研究中的应用尚未见报道。我... 信使ＲＮＡ差异显示技术是Ｌｉａｎｇ等［１］１９９２年首创的用于鉴别在某一细胞系、组织或某个发展阶段中特异表达的基因的新方法。其特点在于能迅速方便地获得大量候选的分子生物学信息。该技术在结肠癌研究中的应用尚未见报道。我们将该技术用于比较正常结肠粘膜与结... 展开更多
关键词 结肠肿瘤 结肠粘膜 信使RNA差异 基因表达
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FL6:一个肝癌内高表达的新基因的cDNA克隆
10
作者 李宝安 万大方 +1 位作者 刘彦仿 顾健人 《第四军医大学学报》 1997年第3期273-273,共1页
ＦＬ６：一个肝癌内高表达的新基因的ｃＤＮＡ克隆李宝安１万大方２刘彦仿１顾健人２（１第四军医大学病理学教研室西安７１００３３２上海市肿瘤研究所癌基因与相关基因国家重点实验室）关键词基因肝肿瘤分子克隆中图号Ｑ７５１癌基因... ＦＬ６：一个肝癌内高表达的新基因的ｃＤＮＡ克隆李宝安１万大方２刘彦仿１顾健人２（１第四军医大学病理学教研室西安７１００３３２上海市肿瘤研究所癌基因与相关基因国家重点实验室）关键词基因肝肿瘤分子克隆中图号Ｑ７５１癌基因和抑癌基因是细胞生长和转化的正负调... 展开更多
关键词 肝肿瘤 分子克隆 FL6基因
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人类染色体17p13.3位点新克隆基因HC56、HC71和HC90对Jurkat细胞活力的作用 被引量：6
11
作者 吴向华 王嵘 +4 位作者 万大方 杜均样 张海伟 郑佩娥 顾建人 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2002年第4期278-279,282,共3页
目的　探讨人类染色体 17p13.3位点新克隆基因HC5 6、HC71和HC90对T淋巴瘤细胞株Ju rkat细胞活力的作用。方法　应用脂质体介导的基因转染方法 ,将外源基因HC5 6、HC71和HC90分别导入Jurkat细胞 ,用苔盼兰拒染试验 ,观察基因的瞬时表达... 目的　探讨人类染色体 17p13.3位点新克隆基因HC5 6、HC71和HC90对T淋巴瘤细胞株Ju rkat细胞活力的作用。方法　应用脂质体介导的基因转染方法 ,将外源基因HC5 6、HC71和HC90分别导入Jurkat细胞 ,用苔盼兰拒染试验 ,观察基因的瞬时表达对细胞活力的作用。结果　Jurkat细胞瞬时转染HC5 6和HC71基因后 ,与转染PBK/CMV空载体的实验对照组比较 ,第 2 4、4 8、72和 96h ,细胞的活力明显受抑制 (P <0 .0 1) ;Jurkat细胞瞬时转染HC90基因后 ,仅在第 96h细胞的活力受抑制 (P <0 .0 5 ) ,而第 2 4、4 8和 72h ,未发现细胞的活力受抑制 (P >0 .0 5 )。结论　外源HC5 展开更多
关键词 染色体17p13.3 HC56基因 JURKAT细胞 基因转染 HC71基因 HC90基因 T淋巴瘤细胞株
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人类染色体17p13.3位点新克隆基因HC56,HC71和HC90在白血病细胞的表达 被引量：3
12
作者 王嵘 波西雁 +5 位作者 万大方 郁志 杜均祥 牧启田 张洹 顾建人 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第5期419-422,共4页
为研究人类染色体 1 7p1 3 .3位点新克隆的基因HC56 ,HC71和HC90在白血病细胞中的表达 ,应用同位素标记的、以 βM 2基因作为内参的半定量RT PCR法 ,检测 35例急性白血病和 4株白血病细胞系的HC56 ,HC70和HC90基因的表达。结果显示 ,急... 为研究人类染色体 1 7p1 3 .3位点新克隆的基因HC56 ,HC71和HC90在白血病细胞中的表达 ,应用同位素标记的、以 βM 2基因作为内参的半定量RT PCR法 ,检测 35例急性白血病和 4株白血病细胞系的HC56 ,HC70和HC90基因的表达。结果显示 ,急性淋巴系白血病病人的HC90基因和T淋巴系白血病细胞系Jurkat细胞HC90基因表达水平降低。急性髓系白血病病人HC71基因表达水平降低。HC56基因表达在急性白血病和正常对照间未见显著差异。结论 :在人类白血病有HC70和HC90的基因表达异常。 展开更多
关键词 人类 染色体17p13.3位点 白血病细胞 基因表达 HC56 HC71 HC90
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传染性法氏囊病病毒VP2基因高变区序列分析 被引量：5
13
作者 王永山 周宗安 +5 位作者 高健 刁振宇 邓小昭 赵新泰 李锦军 罗函禄 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第2期136-139,共4页
根据传染性法氏囊病病毒 (IBDV)VP2基因cDNA序列 ,在VP2基因高变区设计一对引物 ,用RT_PCR方法扩增IBDV分离株JS3和JS4。将扩增片段克隆后以双脱氧链末端终止法测定核苷酸序列。JS3和JS4的同源性最高达 98% ,与已发表的vvIBDV、IBDV变... 根据传染性法氏囊病病毒 (IBDV)VP2基因cDNA序列 ,在VP2基因高变区设计一对引物 ,用RT_PCR方法扩增IBDV分离株JS3和JS4。将扩增片段克隆后以双脱氧链末端终止法测定核苷酸序列。JS3和JS4的同源性最高达 98% ,与已发表的vvIBDV、IBDV变异株、IBDV经典株及IBDV弱毒株核苷酸序列的同源性在 92 %～ 98%之间。根据IBDV的大ORF推导出该片段编码蛋白的氨基酸序列 ,JS3和JS4的同源性最高达 97% ,与上述其它病毒的同源性在 91 %～ 97%之间 ;七肽区的氨基酸序列 ,在强毒株完全相同 ,而在弱毒株有一个丝氨酸突变成了其它氨基酸。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病 病毒 VP2基因高变区 同源性分析
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Jurkat细胞转染外源HCAP1基因后的增殖抑制 被引量：2
14
作者 吴向华 王嵘 +5 位作者 杜均样 牧启田 郭列平 郑佩娥 万大方 顾建人 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期454-457,共4页
HCAP1基因系人类染色体 17p13 .3区带克隆的新肝癌相关基因。已发现人类多种肿瘤存在此区带的杂合性缺失。本研究应用脂质体介导法将HCAP1基因转染T淋巴瘤Jurkat细胞系 ,经G418筛选 ,获得稳定表达外源HCAP1基因的细胞。用台盼蓝拒染试... HCAP1基因系人类染色体 17p13 .3区带克隆的新肝癌相关基因。已发现人类多种肿瘤存在此区带的杂合性缺失。本研究应用脂质体介导法将HCAP1基因转染T淋巴瘤Jurkat细胞系 ,经G418筛选 ,获得稳定表达外源HCAP1基因的细胞。用台盼蓝拒染试验计数活细胞 ,绘制生长曲线 ,进行软琼脂集落形成试验。结果显示 :与转染空载体质粒 pBK/CMV的细胞比较 ,转染外源HCAP1基因的Jurkat细胞增殖速率明显减慢 ,细胞倍增时间延长 ,在软琼脂上的集落形成能力下降 (P <0 .0 1)。结论 :外源HCAP1基因产物对Jurkat细胞的增殖有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 HCAP1基因 基因转染 Jurkat细胞系 细胞增殖
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HC56基因转染对淋巴瘤或白血病细胞株活力的作用 被引量：4
15
作者 吴向华 王嵘 +4 位作者 万大方 杜均样 牧启田 郭列平 顾建人 《临床血液学杂志》 CAS 2003年第3期125-126,129,共3页
目的:探讨外源HC56基因产物对B淋巴瘤细胞株Raji和髓系白血病细胞株K562细胞活力的作用。方法:应用脂质体介导的基因转染方法,将外源基因HC56分别导入Raji和K562细胞,用苔盼兰拒染试验,观察外源基因的瞬时表达对细胞活力的作用。结果:R... 目的:探讨外源HC56基因产物对B淋巴瘤细胞株Raji和髓系白血病细胞株K562细胞活力的作用。方法:应用脂质体介导的基因转染方法,将外源基因HC56分别导入Raji和K562细胞,用苔盼兰拒染试验,观察外源基因的瞬时表达对细胞活力的作用。结果:Raji和K562细胞转染HC56基因后,与转染PBK/CMV空载体的实验对照组比较,细胞的活力明显受到抑制(P<0.05)。结论:外源HC56基因产物可明显抑制淋巴瘤或白血病细胞株的活力。 展开更多
关键词 HC56基因 淋巴瘤 白血病 细胞活力
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HP8：增强子结合蛋白家族的一个新基因的cDNA克隆 被引量：1
16
作者 徐砺新 万大方 +4 位作者 刘彦仿 李宏年 张萍萍 隋延仿 顾健人 《第四军医大学学报》 1995年第6期423-428,共6页
以大鼠增强子结合蛋白（Ｃ／ＥＢＰ）ｃＤＮＡ为探针，筛选人胎肝ｃＤＮＡ文库，得到一个含有２４８０碱基命名为ＨＰ８的ｃＤＮＡ克隆，其中８４～１１０９位碱基属编码区，经基因数据库（ＥＭＢＬ，９５．６版本）查对未发现同源基因... 以大鼠增强子结合蛋白（Ｃ／ＥＢＰ）ｃＤＮＡ为探针，筛选人胎肝ｃＤＮＡ文库，得到一个含有２４８０碱基命名为ＨＰ８的ｃＤＮＡ克隆，其中８４～１１０９位碱基属编码区，经基因数据库（ＥＭＢＬ，９５．６版本）查对未发现同源基因。该基因编码的蛋白Ｃ－末端含有亮氨酸拉链结构（ｌｅｕｃｉｎｅｚｉｐｐｅｒｓｔｒｕｃｔｕｒｅ），和Ｃ／ＥＢＰ功能区（Ｃ－末端６０个氨基酸）同源性高达９７％，而上游编码区则与Ｃ／ＥＢＰ及其已知家族同源性很低，表明该基因属Ｃ／ＥＢＰ基因家族新成员。基因组Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实该基因为单拷贝基因，在１４种胎儿组织中显示小肠、皮肤高表达，肾上腺中度表达，肝、肺、肾、甲状腺、胆囊低表达。在５例正常成人肝组织中仅２例低表达，而在１３对肝癌及癌旁肝组织中显示９例癌组织及７例癌旁组织高表达。以上结果提示该基因可能与细胞增殖有关。它的详尽功能的研究正在进行中。 展开更多
关键词 C/EBP 亮氨酸拉链 CDNA 基因克隆
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传染性法氏囊病病毒不同分离株vp2基因部分核酸序列分析 被引量：1
17
作者 王永山 周宗安 +7 位作者 邓小昭 赵新泰 侯继波 何孔旺 丁铲 刘玉 高健 刁振宇 《中国病毒学》 CSCD 2003年第1期68-71,共4页
根据已报告的传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)cDNA序列,设计引物,用RT-PCR扩增CH(鸡)、DU(鸭)、GE(鹅)和SP(麻雀)四种不同源IBDV分离株的vp2基因高变区。核酸序列测定分析表明,四种不同源IBDV分离株vp2基因... 根据已报告的传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)cDNA序列,设计引物,用RT-PCR扩增CH(鸡)、DU(鸭)、GE(鹅)和SP(麻雀)四种不同源IBDV分离株的vp2基因高变区。核酸序列测定分析表明,四种不同源IBDV分离株vp2基因高变区的同源性为97％.推导编码蛋白氨基酸序列的同源性98％,两个亲水区和七肽区的氨基酸序列完全一致。本研究结果提示,自然感染IBDV的鸭、鹅和麻雀不仅可成为病毒携带者或传染源,而且在病毒变异中起一定作用。 展开更多
关键词 麻雀 鸭 鹅 传染性法氏囊病病毒 VP2 序列分析
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转染外源HCAP1基因对Raji细胞化疗敏感性的作用
18
作者 杜均祥 王嵘 +2 位作者 吴向华 万大方 顾建人 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2004年第6期330-332,共3页
目的　探讨外源HCAP1基因产物对B淋巴瘤 /白血病细胞系Raji细胞化疗敏感性的作用。 方法　用脂质体介导法 ,把HCAP1基因转染Raji细胞 ,经G4 18筛选后 ,分别与化疗药物DNR(daunoru bicin ,柔红霉素 )、VP16 (etoposide ,足叶乙甙 )和VCR(... 目的　探讨外源HCAP1基因产物对B淋巴瘤 /白血病细胞系Raji细胞化疗敏感性的作用。 方法　用脂质体介导法 ,把HCAP1基因转染Raji细胞 ,经G4 18筛选后 ,分别与化疗药物DNR(daunoru bicin ,柔红霉素 )、VP16 (etoposide ,足叶乙甙 )和VCR(vincristine,长春新碱 )联合培养 2 4小时 ,用苔盼兰拒染试验计数活细胞。结果　转染HCAP1的Raji细胞 ,在不同浓度的DNR(0 .0 1～ 10 .0 μg/ml)和VP16 (5～ 80 μg/ml)作用下 ,与转染空载体和未转染对照细胞比较 ,细胞活力的抑制作用明显增强 (P <0 .0 5 )、IC50 (半数抑制浓度 )值明显降低 ;但与不同浓度的VCR(12 .5～ 10 0 μg/ml)作用 ,细胞活力的抑制和IC50 值与对照细胞相似。结论　HCAP1过表达可明显增加Raji细胞对DNR、VP16作用的敏感性 。 展开更多
关键词 HCAP1基因 基因转染 细胞活力 RAJI细胞
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转染外源HCAP1基因对B淋巴瘤细胞株Raji细胞增殖的作用
19
作者 郭列平 王嵘 +5 位作者 吴向华 杜均祥 牧启田 孙奋勇 万大方 顾建人 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1879-1882,共4页
目的:HCAP1基因定位于人类染色体17p13．3,此区域在多种肿瘤组织呈杂合性缺失,本研究旨在探 讨HCAP1外源基因产物对B淋巴瘤细胞系Raji细胞增殖的作用。方法:应用脂质体介导法,将HCAP1基因转染Raji 细胞,经G418筛选、获得稳定表达外源HC... 目的:HCAP1基因定位于人类染色体17p13．3,此区域在多种肿瘤组织呈杂合性缺失,本研究旨在探 讨HCAP1外源基因产物对B淋巴瘤细胞系Raji细胞增殖的作用。方法:应用脂质体介导法,将HCAP1基因转染Raji 细胞,经G418筛选、获得稳定表达外源HCAP1基因的细胞,用台盼蓝活细胞计数、绘制生长曲线、软琼脂集落培养及 BrdU(5溴-2’脱氧尿嘧啶)标记法,观察HCAP1基因产物对Raji细胞增殖的作用。结果:与转染空载体的对照细胞 比较,稳定表达外源HCAP1基因的细胞生长速度明显减慢,倍增时间明显延长,细胞集落形成数明显减少,BrdU掺 人细胞比例降低。结论:外源HCAP1基因产物的过表达对Raji细胞的增殖有抑制作用。 展开更多
关键词 基因 HCAP1 淋巴瘤 RAJI细胞
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表达质粒pdBHhIL-4转化小鼠C127细胞的实验研究
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作者 王志华 田长富 +2 位作者 刘理 谭玉英 许秀兰 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 1993年第4期302-304,F003,共4页
为了使真核基因在真核细胞进行表达,我们将携带人白细胞介素4基因的表达质粒pdBHhIL-4转化哺乳动物细胞小鼠的C127细胞,该表达质粒由原始质粒pdKCR和牛乳头瘤病毒(pdBPV-1)及人IL-4 cDNA构建而成,再经酶切和凝胶电泳分析加以证实。细胞... 为了使真核基因在真核细胞进行表达,我们将携带人白细胞介素4基因的表达质粒pdBHhIL-4转化哺乳动物细胞小鼠的C127细胞,该表达质粒由原始质粒pdKCR和牛乳头瘤病毒(pdBPV-1)及人IL-4 cDNA构建而成,再经酶切和凝胶电泳分析加以证实。细胞转化采用改进的磷酸钙沉淀法和甘油休克的方法,转化后的细胞逐渐呈现形态学上的改变,经活性测定其培养上清中具有人IL-4的表达。 展开更多
关键词 白细胞介素4 质粒 转化 C127细胞
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