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烟草香气相关基因CRISPR/Cas9编辑突变体库的构建
1
作者
曾婉俐
梁岗
+5 位作者
高茜
李元川
许力
蒋佳芮
许永
向海英
《广西植物》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第7期1278-1288,共11页
为探究CRISPR/Cas9基因编辑技术构建烟草突变体库的可行性,该研究以烤烟品种‘红花大金元’为实验材料筛选了100个可能参与烟草香气代谢的基因,设计相应的100个sgRNA并构建了由100个CRISPR/Cas9编辑载体组成的质粒库,获得转基因材料后...
为探究CRISPR/Cas9基因编辑技术构建烟草突变体库的可行性,该研究以烤烟品种‘红花大金元’为实验材料筛选了100个可能参与烟草香气代谢的基因,设计相应的100个sgRNA并构建了由100个CRISPR/Cas9编辑载体组成的质粒库,获得转基因材料后分析了载体的共转化率、靶向编辑率和脱靶编辑情况。结果表明:(1)通过农杆菌介导100个sgRNA的共转化后,在172个阳性转化株中检测到了其中的77个sgRNA,共转化率为77%。(2)在77个携带sgRNA的转基因后代中,69个sgRNA对目标基因进行了靶向编辑,编辑率为89.6%。(3)脱靶位点测序检测发现,只有1个sgRNA在非目标靶位点产生了脱靶编辑,表明CRISPR/Cas9基因编辑技术在烟草中的脱靶概率非常低。综上所述,利用CRISPR/Cas9载体库共转化对烟草基因进行高通量靶向编辑以构建突变体库的方法切实可行,并且该方法有共转化率高、编辑率高和脱靶编辑概率低等特点。
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关键词
烟草
CRISPR/Cas9
烟草香气
靶向编辑
脱靶编辑
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职称材料
烘烤温湿度对烟叶香气物质的影响
被引量:
35
2
作者
王凌
苗果园
+3 位作者
刘华山
张保全
韩锦峰
魏跃伟
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2007年第8期36-39,共4页
对不同烘烤处理条件下致香物质积累进行研究,结果表明:变黄期低温、低湿有利于香气前提物质生成积累;低温、低湿与高温、高湿相比,烤后烟叶致香物质种类多,许多重要的香气成分也只有在低温低湿下才能形成。温度、湿度对中性香气物质的...
对不同烘烤处理条件下致香物质积累进行研究,结果表明:变黄期低温、低湿有利于香气前提物质生成积累;低温、低湿与高温、高湿相比,烤后烟叶致香物质种类多,许多重要的香气成分也只有在低温低湿下才能形成。温度、湿度对中性香气物质的影响比酸性、碱性更为明显。
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关键词
烟草
温度
湿度
烘烤
香气物质
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职称材料
题名
烟草香气相关基因CRISPR/Cas9编辑突变体库的构建
1
作者
曾婉俐
梁岗
高茜
李元川
许力
蒋佳芮
许永
向海英
机构
云南中烟工业有限责任公司技术中心
中国科学院西双版纳热带植物园
云南农业大学
出处
《广西植物》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第7期1278-1288,共11页
基金
云南省烟草化学重点实验室开放课题(2021539200340248)
中国烟草总公司重大科技项目(110202101034[JY-11])。
文摘
为探究CRISPR/Cas9基因编辑技术构建烟草突变体库的可行性,该研究以烤烟品种‘红花大金元’为实验材料筛选了100个可能参与烟草香气代谢的基因,设计相应的100个sgRNA并构建了由100个CRISPR/Cas9编辑载体组成的质粒库,获得转基因材料后分析了载体的共转化率、靶向编辑率和脱靶编辑情况。结果表明:(1)通过农杆菌介导100个sgRNA的共转化后,在172个阳性转化株中检测到了其中的77个sgRNA,共转化率为77%。(2)在77个携带sgRNA的转基因后代中,69个sgRNA对目标基因进行了靶向编辑,编辑率为89.6%。(3)脱靶位点测序检测发现,只有1个sgRNA在非目标靶位点产生了脱靶编辑,表明CRISPR/Cas9基因编辑技术在烟草中的脱靶概率非常低。综上所述,利用CRISPR/Cas9载体库共转化对烟草基因进行高通量靶向编辑以构建突变体库的方法切实可行,并且该方法有共转化率高、编辑率高和脱靶编辑概率低等特点。
关键词
烟草
CRISPR/Cas9
烟草香气
靶向编辑
脱靶编辑
Keywords
tobacco
CRISPR/Cas9
tabacco aroma
on-target editing
off-target editing
分类号
Q943 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
烘烤温湿度对烟叶香气物质的影响
被引量:
35
2
作者
王凌
苗果园
刘华山
张保全
韩锦峰
魏跃伟
机构
山西农业大学
河南农业大学
杭州烟厂技术中心
出处
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2007年第8期36-39,共4页
基金
河南省烟草专卖局科技攻关项目(HYJK200202)
文摘
对不同烘烤处理条件下致香物质积累进行研究,结果表明:变黄期低温、低湿有利于香气前提物质生成积累;低温、低湿与高温、高湿相比,烤后烟叶致香物质种类多,许多重要的香气成分也只有在低温低湿下才能形成。温度、湿度对中性香气物质的影响比酸性、碱性更为明显。
关键词
烟草
温度
湿度
烘烤
香气物质
Keywords
tabacco
Temperature
Moisture
Flue-curing
aroma
matter
分类号
S572 [农业科学—烟草工业]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
烟草香气相关基因CRISPR/Cas9编辑突变体库的构建
曾婉俐
梁岗
高茜
李元川
许力
蒋佳芮
许永
向海英
《广西植物》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
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职称材料
2
烘烤温湿度对烟叶香气物质的影响
王凌
苗果园
刘华山
张保全
韩锦峰
魏跃伟
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2007
35
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职称材料
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