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题名应用Q-PCR定性检测KIR基因有无方法的建立
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作者
李宇楠
甄建新
梁爽
喻琼
邓志辉
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机构
深圳市血液中心输血医学研究所
深圳市宝安区妇幼保健院中心实验室
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出处
《中国输血杂志》
CAS
2024年第6期660-665,共6页
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基金
国家自然科学基金青年科学基金项目(82203291)
广东省基础与应用基础研究基金委员会项目(2022A1515011045)
+1 种基金
深圳市科技创新委员会基础研究项目(JCYJ20190806152001762)
深圳市医学重点学科(SZXK070)。
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文摘
目的建立定性检测KIR基因有无的Q-PCR方法。方法根据高分辨水平中国人群KIR等位基因的多态性,并参考国际IPD-KIR数据库,针对16种KIR基因及2DS4-Normal、2DS4-Deleted两种亚型,设计KIR基因特异性引物用于Q-PCR扩增反应;同时设置一孔阴性对照、一孔阳性对照(特异性扩增人体生长激素HGH基因片段),以监控假阳性、假阴性的结果。为验证Q-PCR方法的可靠性,随机选择302份已采用KIR PCR-SSP商品化试剂盒检测的标本,采用Q-PCR方法盲检和对比。结果300人份的Q-PCR检测结果与已知的PCR-SSP检测结果相符,有2份标本结果不一致,其中1例标本的2DS5基因Q-PCR检测结果为阴性,而PCR-SSP检测结果为阳性;另一例标本2DS1基因Q-PCR检测结果为阳性,而PCR-SSP检测结果为阴性。对2份标本分别进行2DS5、2DS1基因测序分型,证实Q-PCR定性检测结果正确。结论本文建立的KIR Q-PCR方法结果准确、可靠,可用于KIR基因有无的定性检测。
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关键词
杀伤细胞免疫球蛋白样受体(kir)
kir基因有无
实时荧光定量-PCR
序列特异性引物-PCR
测序分型
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Keywords
killer-cell immunoglobulin-like receptor(kir)
presence or absence of kir genes
quantitative real time-PCR(Q-PCR)
sequence specific primers-PCR(PCR-SSP)
sequencing-based typing(PCR-SBT)
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分类号
R457.1
[医药卫生—治疗学]
Q811.4
[生物学—生物工程]
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