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针刺调控脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织miR-301a-5p的表达
1
作者 刘晓月 江姗姗 +4 位作者 王瑶 谢灿明 向静 陈楚淘 田浩梅 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期613-618,共6页
目的:通过制备大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)模型探讨针刺对大鼠缺血侧海马组织miR-301a-5p表达的影响。方法:线栓法制备大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)大鼠模型,利用针刺进行干预。采用改良Garcia评分法检测大鼠神经功能,TTC染色法检测... 目的:通过制备大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)模型探讨针刺对大鼠缺血侧海马组织miR-301a-5p表达的影响。方法:线栓法制备大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)大鼠模型,利用针刺进行干预。采用改良Garcia评分法检测大鼠神经功能,TTC染色法检测脑梗死体积比,RT-qPCR检测缺血侧海马区miR-301a-5p的表达,并利用在线网站数据库TargetScan8.0、mi-RDB及miRWalk预测miR-301a-5p的靶基因,DAVID数据库对靶基因进行基因本体(GO)分析,HE染色观察细胞病理改变。结果:与MCAO/R组相比,MCAO/R+AC干预组大鼠Garcia评分升高(P<0.05),脑梗死体积减小(P<0.01),缺血侧海马区miR-301a-5p表达量显著增加(P<0.01)。预测miR-301a-5p有交集的靶基因101个,GO分析在生物进程(BP)中发现miR-301a-5p靶基因富集于白细胞介素-6(IL-6)的调控及糖皮质激素反应等相关炎症因子,且在MCAO/R组观察到细胞坏死,炎性细胞浸润,MCAO/R+AC组可见散在的炎性细胞浸润。结论:针刺可降低CIRI大鼠神经功能缺损症状,减少脑梗死体积,其机制可能与激活miR-301a-5p的表达抑制细胞炎症有关。 展开更多
关键词 针刺 脑缺血再灌注损伤 mir-301a-5p 炎症 大鼠
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MiR-301a-5p调节继发性甲状旁腺功能亢进症中甲状旁腺激素的分泌:基于调控钙敏感受体的表达 被引量：2
2
作者 柳丽丹 钱立元 +5 位作者 李珮婷 李俊 黄珊 易文君 柳双喜 吴唯 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1363-1370,共8页
目的探索继发性甲状旁腺功能亢进症(SHPT)中引起钙敏感受体(CaSR)低表达的miRNA及其对甲状旁腺激素(PTH)分泌的影响。方法对6例正常甲状旁腺组织标本和11例SHPT的甲状旁腺组织标本进行了全转录组测序,结合网站的预测,初步筛选了7个有可... 目的探索继发性甲状旁腺功能亢进症(SHPT)中引起钙敏感受体(CaSR)低表达的miRNA及其对甲状旁腺激素(PTH)分泌的影响。方法对6例正常甲状旁腺组织标本和11例SHPT的甲状旁腺组织标本进行了全转录组测序,结合网站的预测,初步筛选了7个有可能调控CaSR的miRNAs,通过双荧光素酶实验,选定出一个最可能调控CaSR的miRNA。采用qRT-PCR检测正常甲状旁腺组织与SHPT甲状旁腺组织中miR-301a-5p和CaSR信使RNA表达的差异,并分析其表达量与患者血清PTH水平的相关性。采用Western blot检测SHPT甲状旁腺原代细胞转染miR-301a-5p mimics、inhibitors及各自对照之后CaSR蛋白表达的情况,同时取其上清液测定PTH的分泌情况。结果初步选定了7个有可能调控CaSR的miRNAs,分别是:miR-15a-5p、miR-15b-5p、miR-16-5p、miR-221-3p、miR-222-3p、miR-301a-5p和miR-503-5p。与正常甲状旁腺组织相比,miR-301a-5p在SHPT中表达上调(P<0.05),其表达量与患者PTH水平呈正相关关系,但结果无统计学意义(P>0.05);而CaSR信使RNA表达下调(P<0.05),其表达量与患者PTH水平呈负相关关系,但结果无统计学意义(P>0.05)。在细胞实验中,当miR-301a-5p过表达时,SHPT甲状旁腺原代细胞中CaSR蛋白的表达较对照组减少(P<0.05);反之,当miR-301a-5p的表达被抑制时,CaSR蛋白的表达较对照组增加(P<0.05)。过表达miR-301a-5p后,PTH的分泌与对照组的差异无统计学意义(P>0.05),而拮抗miR-301a-5p的表达后,PTH的分泌较对照组增加(P<0.05)。结论miR-301a-5p可能通过调控SHPT中CaSR的表达而影响PTH的分泌。 展开更多
关键词 继发性甲状旁腺功能亢进症 钙敏感受体 甲状旁腺激素 mir-301a-5p
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miR-145a-5p调控慢性间歇性低氧诱导脂肪细胞炎症和凋亡的机制
3
作者 徐漫欢 任锡凯 +3 位作者 周娈 赵伊敏 余珏珂 苏苗赏 《温州医科大学学报》 2025年第3期173-178,共6页
目的:探究miR-145a-5p基因表达对慢性间歇性低氧(CIH)诱导脂肪细胞炎症和凋亡的影响及分子调控机制,并探索其可能的靶向结合基因通路。方法:体外培养3T3-L1前脂肪细胞,经7 d诱导分化后分为对照组和CIH组,并予相应处理。油红O染色观察细... 目的:探究miR-145a-5p基因表达对慢性间歇性低氧(CIH)诱导脂肪细胞炎症和凋亡的影响及分子调控机制,并探索其可能的靶向结合基因通路。方法:体外培养3T3-L1前脂肪细胞,经7 d诱导分化后分为对照组和CIH组,并予相应处理。油红O染色观察细胞形态与脂滴情况;q-PCR法检测miR-145a-5p基因表达;构建miR-145a-5p-mimic转染细胞后,流式细胞仪检测细胞凋亡率;ELISA法检测细胞上清液中IL-1β和IL-10水平;Western blot法检测p-AMPK、成纤维细胞生长因子4(FGF4)及凋亡相关蛋白表达情况。双荧光素酶实验检测miR-145a-5p与FGF4的靶向关系。结果:与对照组相比,CIH组细胞的miR-145a-5p基因表达下降(P<0.05),IL-1β和IL-10水平上升(P<0.05),p-AMPK、FGF4、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);转染后,转染组与CIH组相比,细胞凋亡率升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达、Bax/Bcl-2比值及FGF4蛋白表达升高(P<0.05),IL-1β水平降低(P<0.05)。双荧光素酶报告FGF4-WT+miR-145a-5p与FGF4-WT相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论:miR-145a-5p在脂肪细胞的表达受CIH影响,且对脂肪细胞炎症及凋亡有调节作用,该作用可能通过与FGF4靶向结合而实现。 展开更多
关键词 慢性间歇性低氧 脂肪细胞 炎症反应 凋亡 mir-145a-5p
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益气养阴化浊通络方通过调控miR-21a-5p/FoxO1/PINK1介导 的线粒体自噬减轻糖尿病肾病小鼠的足细胞损伤
4
作者 郭克磊 李颖利 +6 位作者 宣晨光 侯紫君 叶松山 李林运 陈丽平 韩立 卞华 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第1期27-34,共8页
目的探讨益气养阴化浊通络方(YYHT)对高糖诱导小鼠肾足细胞(MPC5)损伤的保护作用及潜在机制。方法大鼠分别灌胃19、38、76 g/kg YYHT及生理盐水1周制备低、中、高浓度含药血清和空白血清。体外培养MPC5,分为对照组(5.5 mmol/L D-葡萄糖+... 目的探讨益气养阴化浊通络方(YYHT)对高糖诱导小鼠肾足细胞(MPC5)损伤的保护作用及潜在机制。方法大鼠分别灌胃19、38、76 g/kg YYHT及生理盐水1周制备低、中、高浓度含药血清和空白血清。体外培养MPC5,分为对照组(5.5 mmol/L D-葡萄糖+miR-21a-5p-inhibitor-NC+空白血清)、模型组(30 mmol/L D-葡萄糖+miR-21a-5p-inhibitor-NC+空白血清)、YYHT-L(30 mmol/L D-葡萄糖+miR-21a-5p-inhibitor-NC+低浓度含药血清)、YYHT-M(30 mmol/L D-葡萄糖+miR-21a-5p-inhibitor-NC+中浓度含药血清)、YYHT-H(30 mmol/L D-葡萄糖+NC+高浓度含药血清)、miR-21a-5p抑制剂组(30 mmol/L D-葡萄糖+miR-21a-5pinhibitor+空白血清)。qRT-PCR检测miR-21a-5p表达及FoxO1、PINK1、Parkin的mRNA表达,Western blotting检测足细胞标志蛋白(Nephrin、Podocin)及FoxO1、PINK1、Parkin蛋白表达,MDC染色检测自噬荧光。将MPC5分为阴性对照组(30 mmol/L D-葡萄糖+miR-21a-5p-NC+空白血清)、miR-21a-5p-mimic组(30 mmol/L D-葡萄糖+miR-21a-5p-mimic+空白血清)、YYHT-L(30 mmol/L D-葡萄糖+miR-21a-5p-mimic+低浓度含药血清)、YYHT-M(30 mmol/L D-葡萄糖+miR-21a-5pmimic+中浓度含药血清)、YYHT-H(30 mmol/L D-葡萄糖+miR-21a-5p-mimic+高浓度含药血清),荧光素酶报告基因实验检测miR-21a-5p/FoxO1转录调控,RIP检测miR-21a-5p与靶基因FoxO1结合。结果与对照组相比,模型组miR-21a-5p表达升高(P<0.05),FoxO1、PINK1、Parkin mRNA表达降低(P<0.05),FoxO1、PINK1、Parkin、Nephrin、Podocin蛋白表达及自噬荧光降低(P<0.05);与模型组相比,不同剂量YYHT含药血清及miR-21a-5p-inhibitor促进Nephrin及Podocin蛋白表达(P<0.05),抑制miR-21a-5p表达(P<0.05),增强FoxO1、PINK1、Parkin的mRNA和蛋白表达及自噬荧光(P<0.05)。与miR-21a-5p-NC组相比,miR-21a-5p-mimic组抑制FoxO1转录(P<0.05),促进miR-21a-5p与FoxO1的结合(P<0.05);与miR-21a-5p组相比,YYHT含药血清组促进FoxO1转录(P<0.05),抑制miR-21a-5p与FoxO1的结合(P<0.05)。结论益气养阴化浊通络方可能通过调节miR-21a-5p/FoxO1/PINK1介导的线粒体自噬,减轻高糖诱导的小鼠肾足细胞损伤。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 益气养阴化浊通络方 线粒体自噬 足细胞损伤 mir-21a-5p/FoxO1/pINK1
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lncRNA SNHG6通过调节miR-26a-5p/CTGF轴影响心房颤动大鼠心肌纤维化的作用机制
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作者 袁孝伟 宣学习 +3 位作者 周芃 刘魁智 王豪 朱自强 《心血管病学进展》 2025年第2期186-192,共7页
目的探讨长非编码RNA(lncRNA)核仁小RNA宿主基因6(SNHG6)通过调节miR-26a-5p/结缔组织生长因子(CTGF)轴对心房颤动(AF)大鼠心肌纤维化的影响。方法验证lncRNA SNHG6与miR-26a-5p、miR-26a-5p与CTGF的关系。构建AF模型大鼠,将造模成功的6... 目的探讨长非编码RNA(lncRNA)核仁小RNA宿主基因6(SNHG6)通过调节miR-26a-5p/结缔组织生长因子(CTGF)轴对心房颤动(AF)大鼠心肌纤维化的影响。方法验证lncRNA SNHG6与miR-26a-5p、miR-26a-5p与CTGF的关系。构建AF模型大鼠,将造模成功的60只大鼠随机分为AF组、sh-NC组、sh-lncRNA SNHG6组、sh-lncRNA SNHG6+anti-miR-NC组、sh-lncRNA SNHG6+anti-miR-26a-5p组,每组12只。另取12只大鼠作为正常组。检测大鼠AF持续时间、AF发生率变化;qRT-PCR检测心房组织中lncRNA SNHG6、miR-26a-5p及CTGF mRNA水平;超氧化物阴离子荧光探针二氢乙锭(DHE)染色检测心房组织中活性氧(ROS)平均荧光强度;试剂盒检测心房组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;Masson染色检测心房组织中心肌纤维化;蛋白质印迹法检测心房组织中胶原蛋白Ⅰ(collagenⅠ)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、转化生长因子β1(TGF-β1)、CTGF蛋白。结果lncRNA SNHG6靶向调节miR-26a-5p/CTGF轴。与AF组、sh-NC组比较,sh-lncRNA SNHG6组心房组织呈蓝染的纤维化面积减少,AF持续时间、AF发生率、心房组织中lncRNA SNHG6水平、CTGF mRNA水平、ROS平均荧光强度、MDA水平及collagenⅠ、MMP-9、TGF-β1、CTGF蛋白水平降低,心房组织中miR-26a-5p水平、SOD水平升高(P<0.05);anti-miR-26a-5p逆转了沉默lncRNA SNHG6对AF大鼠心肌纤维化的改善作用。结论沉默lncRNA SNHG6可能通过调控miR-26a-5p/CTGF轴抑制氧化应激进而改善AF大鼠心肌纤维化。 展开更多
关键词 长非编码RNA 核仁小RNA宿主基因6 mir-26a-5p 结缔组织生长因子 心房颤动 心肌纤维化
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miR-181a-5p过表达慢病毒载体构建及其对OSCC细胞侵袭和迁移的影响
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作者 薛瑞 续国强 +3 位作者 杨钧婷 杨一言 吴学海 宋国华 《实用口腔医学杂志》 北大核心 2025年第2期193-199,共7页
目的:构建过表达miR-181a-5p的口腔鳞状细胞癌(OSCC)稳转细胞株,观察miR-181a-5p对OSCC细胞生物学行为的影响并探讨其潜在机制。方法:构建miR-181a-5p和对照慢病毒载体,分别转染CAL-27细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定转染miR-181a-5p的细胞株... 目的:构建过表达miR-181a-5p的口腔鳞状细胞癌(OSCC)稳转细胞株,观察miR-181a-5p对OSCC细胞生物学行为的影响并探讨其潜在机制。方法:构建miR-181a-5p和对照慢病毒载体,分别转染CAL-27细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定转染miR-181a-5p的细胞株(OE)和对照细胞株(NC);运用激光共聚焦显微镜观察稳转细胞株荧光;qRT-PCR检测稳转株中miR-181a-5p和Bcl-2的表达、Western blot检测靶蛋白Bcl-2的表达;运用细胞划痕、Transwell实验和克隆形成实验检测稳转株的侵袭、迁移和增殖能力;使用qRT-PCR检测细胞侵袭和迁移关键因子的表达。结果:OE细胞中miR-181a-5p的表达量显著高于NC和未转染的空白对照组(Control)(P<0.01),OE组中Bcl-2的表达显著降低;同时,OE细胞的侵袭、迁移和增殖能力降低。此外,OE细胞中MMP2、MMP9、Vimentin和Ki67表达水平降低,而E-cadherin升高(P<0.01)。结论:miR-181a-5p过表达可显著抑制口腔癌的增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 mir-181a-5p 稳转细胞株 口腔癌 侵袭 迁移
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circPRMT5靶向miR-376a-3p调控胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的作用机制
7
作者 黄超 方兴刚 陈璐 《中西医结合心脑血管病杂志》 2025年第4期547-554,共8页
目的:探讨circPRMT5对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法:选取2020年5月—2022年5月我院脑胶质瘤组织和颅脑外伤病人脑组织标本各37例;胶质瘤细胞U251分为si-NC组、si-circPRMT5组、pcDNA组、pcDNA-circPRMT5组、miR-NC组... 目的:探讨circPRMT5对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法:选取2020年5月—2022年5月我院脑胶质瘤组织和颅脑外伤病人脑组织标本各37例;胶质瘤细胞U251分为si-NC组、si-circPRMT5组、pcDNA组、pcDNA-circPRMT5组、miR-NC组、miR-376a-3p组、si-circPRMT5+anti-miR-NC组及si-circPRMT5+anti-miR-376a-3p组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测circPRMT5和miR-376a-3p表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测细胞增殖及凋亡相关蛋白表达。双荧光素酶报告实验检测circPRMT5和miR-376a-3p的靶向调控关系。结果:与颅脑外伤病人脑组织比较,胶质瘤组织中circPRMT5表达水平(2.55±0.18与1.00±0.07)升高,miR-376a-3p表达水平[(0.42±0.05与1.00±0.06)]降低(P<0.05)。抑制circPRMT5表达后,细胞活性(0.32±0.03与0.74±0.06)降低,细胞凋亡率[(22.37±1.83)%与(7.47±0.62)%]升高,周期蛋白D1(CyclinD1)及B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)蛋白相对表达量降低,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)及Bcl-2相关x蛋白(Bax)相对表达量升高(P<0.05)。过表达miR-376a-3p后,细胞活性(0.41±0.04与0.76±0.07)降低,细胞凋亡率[(19.51±1.40)%与(7.37±0.53)%]升高,CyclinD1及Bcl-2蛋白相对表达量降低,p21及Bax蛋白相对表达量升高(P<0.05)。miR-376a-3p组转染WT-circPRMT5的细胞荧光素酶活性显著低于miR-NC组(0.59±0.04与1.03±0.07,P<0.05),而转染MUT-circPRMT5的细胞荧光素酶活性无显著变化(1.00±0.05与1.02±0.08,P>0.05)。结论:抑制circPRMT5表达可能通过靶向上调miR-376a-3p抑制胶质瘤U251细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 胶质瘤 增殖 凋亡 circpRMT5 mir-376a-3p 实验研究
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miR-29a-3p靶向TRAF5抑制骨肉瘤细胞顺铂耐药
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作者 匡健 董文刚 +4 位作者 丁家云 谢晴 刘文毅 周志坚 刘军 《现代肿瘤医学》 2025年第4期576-582,共7页
目的:探究miR-29a-3p通过调控肿瘤坏死因子受体相关因子5(tumor necrosis factor receptor associated factor-5,TRAF5)的表达对骨肉瘤细胞顺铂耐药的影响。方法:采用real-time PCR实验检测骨肉瘤细胞系中miR-29a-3p表达水平,对骨肉瘤1... 目的:探究miR-29a-3p通过调控肿瘤坏死因子受体相关因子5(tumor necrosis factor receptor associated factor-5,TRAF5)的表达对骨肉瘤细胞顺铂耐药的影响。方法:采用real-time PCR实验检测骨肉瘤细胞系中miR-29a-3p表达水平,对骨肉瘤143B细胞施加顺铂药物处理,检测细胞随着药物作用时间、浓度的增加miR-29a-3p表达丰度的变化。对转染miR-29a-3p mimics的143B细胞施加顺铂处理,而后利用流式细胞术、Western blotting实验检测其对细胞凋亡的影响,并通过CCK-8实验检测细胞增殖的变化。利用生物信息学网站TargetScan预测得到miR-29a-3p的靶基因TRAF5,通过双荧光素酶报告基因实验检测miR-29a-3p与TRAF5的靶向关系,而后利用real-time PCR和Western blotting实验检测miR-29a-3p与TRAF5的表达水平。结果:real-time PCR实验结果显示相比于成骨细胞系hFOB1.19,miR-29a-3p在骨肉瘤细胞系中低表达,且在143B细胞中表达水平最低。顺铂处理143B细胞后,miR-29a-3p表达呈时间、浓度依赖性下调。对转染miR-29a-3p mimics的143B细胞施加顺铂处理后,流式细胞术结果显示miR-29a-3p能够促进顺铂处理后的143B细胞凋亡,CCK-8实验结果表明miR-29a-3p能够抑制顺铂处理后的143B细胞增殖,Western blotting实验结果表明miR-29a-3p上调使顺铂处理后的143B细胞凋亡相关基因表达显著改变。生物信息学预测TRAF5是miR-29a-3p的靶基因,双荧光素酶报告基因实验证实miR-29a-3p可靶向抑制TRAF5。过表达miR-29a-3p后,143B细胞TRAF5表达水平下调。结论:miR-29a-3p可能通过下调TRAF5的表达抑制143B细胞顺铂耐药。 展开更多
关键词 骨肉瘤 mir-29a-3p TRAF5 顺铂耐药
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阴道用重组人干扰素α-2b栓联合宫颈环形电切术对宫颈癌前病变的应用效果及对miR-216a-5p、DEPDC1表达水平的影响
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作者 蔡慧玲 彭敏 《中华养生保健》 2025年第2期59-61,共3页
目的探讨阴道用重组人干扰素α-2b栓联合宫颈环形电切术对宫颈癌前病变的应用效果及对miR-216a-5p、DEP结构域蛋白1(DEPDC1)表达水平的影响。方法选取2020年5月—2023年5月重庆市巫山县人民医院收治的80例宫颈癌前病变患者作为研究对象... 目的探讨阴道用重组人干扰素α-2b栓联合宫颈环形电切术对宫颈癌前病变的应用效果及对miR-216a-5p、DEP结构域蛋白1(DEPDC1)表达水平的影响。方法选取2020年5月—2023年5月重庆市巫山县人民医院收治的80例宫颈癌前病变患者作为研究对象,根据患者治疗方案不同进行分组,将40例单纯接受宫颈环形电切术治疗的患者分为对照组,将40例接受阴道用重组人干扰素α-2b栓联合宫颈环形电切术治疗的患者分为观察组。就两组显效率、围术期指标、人乳头瘤病毒(HPV)载量、miR-216a-5p和DEPDC1表达水平等指标进行比较。结果观察组显效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组术后切口愈合、阴道出血以及阴道渗液等时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组HPV病毒载量均明显降低,但观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组miR-216a-5p表达水平均升高,但观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组DEPDC1表达水平均降低,但观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈癌前病变患者接受阴道用重组人干扰素α-2b栓与宫颈环形电切术联合进行治疗,效果显著,围术期指标、HPV载量等均明显改善,同时提高了miR-216a-5p表达水平、降低DEPDC1表达水平。 展开更多
关键词 阴道用重组人干扰素α-2b栓 宫颈环形电切术 宫颈癌前病变 mir-216a-5p DEpDC1
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黄芪甲苷经由miR-125a-5p/NLRP1轴减轻椎间盘突出髓核细胞损伤 被引量：1
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作者 王新立 刘汝银 +3 位作者 王西彬 岳宗进 许大勇 李云朋 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 2024年第7期929-938,共10页
目的在白介素-1β(IL-1β)诱导退变的人髓核细胞中,探究黄芪甲苷对miR-125a-5p及其靶基因介导的信号通路的作用,揭示黄芪甲苷(astragaloside IV,AS-IV)对髓核细胞增殖、凋亡以及炎症反应的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-12... 目的在白介素-1β(IL-1β)诱导退变的人髓核细胞中,探究黄芪甲苷对miR-125a-5p及其靶基因介导的信号通路的作用,揭示黄芪甲苷(astragaloside IV,AS-IV)对髓核细胞增殖、凋亡以及炎症反应的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-125a-5p和核苷酸寡聚化结构域(NOD)样受体蛋白1(nucleotide oligomerization domain(NOD)-like receptor protein 1,NLRP1)在椎间盘突出患者髓核组织中的表达,用IL-1β诱导髓核细胞退变,在20、50和80μg·mL^(-1)黄芪甲苷干预浓度下检测miR-125a-5p和NLRP1的表达,在IL-1β和80μg·mL^(-1)黄芪甲苷处理的髓核细胞中单独或共同转染miR-125a-5p模拟物和NLRP1过表达质粒,然后分别检测细胞增殖、凋亡和炎症因子分泌情况,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测细胞中信号通路相关蛋白p56和p38的磷酸化水平。结果椎间盘突出(lumbar disc herniation,LDH)患者的髓核组织中miR-125a-5p表达下调,NLRP1表达上调。黄芪甲苷促进IL-1β处理的髓核细胞中miR-125a-5p表达,减少NLRP1表达以及p56和p38蛋白的磷酸化水平。黄芪甲苷促进髓核细胞增殖,减少凋亡和炎症反应。结论黄芪甲苷通过上调miR-125a-5p表达,抑制NLRP1的表达和NF-κB/MAPK信号通路,减少IL-1β诱导的髓核细胞损伤。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 人髓核细胞 mir-125a-5p NLRp1 NF-κB/MApK 信号通路
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益气活血通络方对脊髓型颈椎病模型大鼠miR-126a-5p及VEGF信号通路的影响 被引量：1
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作者 刘丹 唐占英 +4 位作者 李攀 袁薇娜 李芳芳 陈倩 胡志俊 《天津医药》 CAS 2024年第3期273-277,共5页
目的探讨益气活血通络方对脊髓型颈椎病模型大鼠微小RNA-126a-5p(miR-126a-5p)及血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的影响。方法30只健康雄性SD大鼠按照随机数字表法均分为假手术组、模型组和中药组。模型组、中药组均制备脊髓型颈椎病模... 目的探讨益气活血通络方对脊髓型颈椎病模型大鼠微小RNA-126a-5p(miR-126a-5p)及血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的影响。方法30只健康雄性SD大鼠按照随机数字表法均分为假手术组、模型组和中药组。模型组、中药组均制备脊髓型颈椎病模型。中药组给予益气活血通络方灌胃,假手术组、模型组给予生理盐水灌胃,均为12周。各组干预结束后进行大鼠行为学测试,测定机械性刺激阈值和热刺激回缩时间。处死大鼠,HE染色观察各组椎间盘软骨终板结构的差异。TUNEL染色观察大鼠椎间盘纤维环细胞变化。实时荧光定量聚合酶链式反应检测大鼠椎间盘纤维环组织miR-126a-5p和VEGF mRNA。采用Western blot法检测大鼠椎间盘纤维环组织VEGF蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠椎间盘血管芽数目减少,大鼠椎间盘纤维环细胞破坏明显、大量凋亡且细胞密度降低;模型组和中药组机械性刺激阈值降低,热刺激回缩时间缩短,miR-126a-5p水平降低,VEGF mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,中药组大鼠椎间盘血管芽数目增加,大鼠椎间盘纤维环细胞破坏减轻,大鼠椎间盘纤维环细胞凋亡减少且细胞密度增加,机械性刺激阈值升高,热刺激回缩时间延长,miR-126a-5p水平增加,VEGF mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论益气活血通络方治疗脊髓型颈椎病的机制可能与上调miR-126a-5p、下调VEGF表达有关。 展开更多
关键词 颈椎病 血管内皮生长因子类 椎间盘 脊髓 益气活血通络方 mir-126a-5p
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miR-550a-5p诊断非小细胞肺癌脊柱骨转移的价值 被引量：1
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作者 徐昆 敖曼 +3 位作者 郝佳颖 曹胜 张义龙 王建华 《医学分子生物学杂志》 CAS 2024年第5期445-451,共7页
目的探究微小RNA(miR)-550a-5p诊断非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)脊柱骨转移的价值,为临床防治提供参考。方法选取2019年1月~2023年1月承德医学院附属医院收治的62例存在脊柱骨转移NSCLC患者,44例无脊柱骨转移NSCLC患... 目的探究微小RNA(miR)-550a-5p诊断非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)脊柱骨转移的价值,为临床防治提供参考。方法选取2019年1月~2023年1月承德医学院附属医院收治的62例存在脊柱骨转移NSCLC患者,44例无脊柱骨转移NSCLC患者,根据磁共振成像或CT检查证实,分别纳入脊柱骨转移组、无脊柱骨转移组。检测比较两组血清miR-550a-5p、肺肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19可溶性片段(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)]、骨代谢标志物[Ⅰ型胶原吡啶交联氨基末端肽(NTx)、骨转异性碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,BALP)、Ⅰ型胶原羧基末端肽(typeⅠcollagen carboxy-terminal cross-linked peptide,ICTP)]水平,比较不同临床特征NSCLC患者血清miR-550a-5p水平,分析NSCLC脊柱骨转移分级与血清miR-550a-5p水平的相关性,受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-550a-5p对NSCLC脊柱骨转移的诊断价值。结果脊柱骨转移组血清miR-550a-5p、CEA、NSE、CYFRA21-1、BALP、ICTP、NTx水平均高于无脊柱骨转移组(P<0.05);脊柱骨转移组不同肿瘤直径、分化程度、TNM分期、骨转移数量、淋巴结转移、骨相关事件、伴骨痛症状等临床特征NSCLC患者miR-550a-5p水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同骨转移分级NSCLC患者血清miR-550a-5p、NSE、BALP、CEA、ICTP、CYFRA21-1、NTx水平比较差异有统计学意义(P<0.05),随骨转移分级增加血清miR-550a-5p水平、肺肿瘤标志物、骨代谢标志物均呈升高趋势。Spearman相关性分析显示,血清miR-550a-5p水平与骨转移分级、CEA、NSE、CYFRA21-1、BALP、ICTP、NTx均呈正相关(P<0.05);血清miR-550a-5p、肺肿瘤标志物、骨代谢标志物联合诊断的AUC值0.941(95%CI:0.878~0.978)(P<0.05),大于肺肿瘤标志物、骨代谢标志物联合诊断的AUC值0.902(95%CI:0.829~0.951)。结论miR-550a-5p应用于NSCLC脊柱骨转移诊断的价值较高,其水平与骨转移分级、肺肿瘤标志物、骨代谢标志物联系密切,加入miR-550a-5p可提高诊断价值。 展开更多
关键词 mir-550a-5p 非小细胞肺癌 脊柱骨转移 CYFRA21-1 BALp ROC
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骨髓间充质干细胞来源的miR-199a-5p通过抑制ZIK1/MAP3K11调节肾细胞癌细胞的增殖和侵袭 被引量：1
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作者 志宏 刘锁 +3 位作者 塔娜 白乌恩毕力格 王磊 王超奇 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第12期2135-2140,共6页
目的:研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)来源的外泌体(exsome)中miR-199a-5p对肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)细胞增殖和侵袭的影响。方法:分离骨髓间充质干细胞来源的外泌体(BM-MSCs-Exo),电子... 目的:研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)来源的外泌体(exsome)中miR-199a-5p对肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)细胞增殖和侵袭的影响。方法:分离骨髓间充质干细胞来源的外泌体(BM-MSCs-Exo),电子显微镜观察外泌体形态,Western blot方法检测外泌体标志蛋白CD9和CD63。CCK-8法检测RCC细胞在不同条件下的增殖速度,Transwell法检测RCC细胞的侵袭能力,q-PCR法检测miR-199a-5p以及ZIK1和MAP3K11的mRNA表达,双荧光素酶实验验证miR-199a-5p以及ZIK1和MAP3K11基因的3’UTR区域靶向结合。结果:BM-MSCs-Exo电镜下呈圆形囊泡状,直径约100 nm,且高表达CD9和CD63,RCC细胞摄取BM-MSCs-Exo后增殖和侵袭能力均被抑制,过表达miR-199a-5p的BM-MSCs-Exo能显著抑制RCC细胞的增殖和侵袭能力,抑制BM-MSCs-Exo中的miR-199a-5p后能缓解BM-MSCs-Exo对RCC的抑制作用,且发现过表达miR-199a-5p的BM-MSCs-Exo能显著降低ZIK1和MAP3K11的mRNA表达,而在BM-MSCs-Exo中抑制miR-199a-5p有相反作用。结论:BM-MSCs-Exo通过向RCC细胞转运miR-199a-5p抑制ZIK1和MAP3K11的表达,进而抑制RCC细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 肾细胞癌 骨髓间充质干细胞 外泌体 mir-199a-5p
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胡黄连提取物通过miR-26a-5p/NF-κB通路影响缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激的实验研究 被引量：1
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作者 王元明 郭润民 +1 位作者 路映攀 王晓文 《中药材》 CAS 北大核心 2024年第1期208-213,共6页
目的:探究胡黄连提取物通过miR-26a-5p/NF-κB通路影响缺氧/复氧诱导心肌细胞凋亡和氧化应激的作用。方法:通过缺氧/复氧(H/R)诱导H9C2细胞建立心肌细胞损伤模型,细胞分为空白对照组、模型组、胡黄连提取物低浓度(250μg/mL)组、胡黄连... 目的:探究胡黄连提取物通过miR-26a-5p/NF-κB通路影响缺氧/复氧诱导心肌细胞凋亡和氧化应激的作用。方法:通过缺氧/复氧(H/R)诱导H9C2细胞建立心肌细胞损伤模型,细胞分为空白对照组、模型组、胡黄连提取物低浓度(250μg/mL)组、胡黄连提取物中浓度(500μg/mL)组、胡黄连提取物高浓度(1000μg/mL)组、miR-NC组、miR-26a-5p组、anti-miR-NC+胡黄连提取物高浓度组、anti-miR-26a-5p+胡黄连提取物高浓度组。CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡;Western Blot检测cleaved Caspase-3、Bax、p-NF-κB、NF-κB蛋白表达;ELISA检测MDA、SOD、CAT水平;qRT-PCR检测miR-26a-5p表达。结果:与空白对照组比较,模型组细胞凋亡率、MDA、p-NF-κB/NF-κB水平及cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达显著升高,细胞增殖能力、SOD、CAT水平及miR-26a-5p表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,胡黄连提取物可显著降低缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡率及MDA、p-NF-κB/NF-κB水平和cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达,显著升高细胞增殖能力及SOD、CAT水平和miR-26a-5p表达(P<0.05)。抑制anti-miR-26a-5p可逆转胡黄连提取物对缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激的影响。结论:胡黄连提取物可能通过调控miR-26a-5p/NF-κB通路抑制缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激。 展开更多
关键词 胡黄连提取物 mir-26a-5p NF-ΚB通路 心肌细胞 凋亡 氧化应激
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Linc01419调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖与侵袭
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作者 向威 吕磊 +2 位作者 郑福鑫 袁敬东 吴维 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第16期2921-2929,共9页
目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(rea... 目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Linc01419在不同膀胱癌细胞系、22例经病理证实为膀胱癌的手术患者的肿瘤组织及癌旁正常膀胱组织中的表达水平;应用细胞增殖/毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)实验和Transwell小室侵袭实验检测敲低Linc01419表达对膀胱癌细胞增殖与侵袭的影响;采用双荧光素酶报告基因检测法分析Linc01419与miR-34a-5p及miR-34a-5p与E2F3之间的靶向调控关系。结果:UALCAN数据库分析显示相较正常膀胱组织,Linc01419在膀胱癌组织中显著高表达(P<0.001);RT-qPCR分析结果显示相较癌旁正常膀胱组织,Linc01419在22例膀胱癌组织中表达明显上调(P<0.001),与UALCAN数据库分析结果一致;Linc01419在4株膀胱癌细胞中的表达明显高于正常膀胱上皮细胞(P<0.01);敲低Linc01419表达,可显著抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭及N-cadherin、PCNA蛋白的表达,而显著促进E-cadherin的蛋白表达(P<0.05);miR-34a-5p过表达对膀胱癌细胞具有类似的抑制作用;双荧光素酶报告基因实验、RIP及Pull-down实验证实Linc01419可靶向结合miR-34a-5p,而后者进一步介导了对E2F3的靶向调控;抑制miR-34a-5p表达,可显著削弱Linc01419沉默对膀胱癌细胞生物学行为及E-cadherin、N-cadherin、PCNA、E2F3表达的影响。结论:Linc01419在膀胱癌中异常高表达,其通过调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖和侵袭,很可能是膀胱癌发生、发展过程中的一个重要环节。 展开更多
关键词 膀胱癌 Linc01419 mir-34a-5p E2F3
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miR-25a-5p促进乳腺癌蒽环类药物治疗所致的心肌损伤
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作者 刘睿 吕雨桐 +2 位作者 姜翠红 王高兴 赵志正 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第1期26-31,共6页
目的:探讨蒽环类药物诱导心肌毒性的机制和新的治疗靶点。方法:106例乳腺癌患者根据超声心动图检查鉴别出肿瘤治疗相关心功能障碍,分为心功能障碍组及对照组。通过微阵列技术高通量筛选两组患者差异表达miRNA。体外构建蒽环类药物诱导H... 目的:探讨蒽环类药物诱导心肌毒性的机制和新的治疗靶点。方法:106例乳腺癌患者根据超声心动图检查鉴别出肿瘤治疗相关心功能障碍,分为心功能障碍组及对照组。通过微阵列技术高通量筛选两组患者差异表达miRNA。体外构建蒽环类药物诱导H9C2心肌细胞损伤模型,通过调控miR-25a-5p的表达,观察miR-25a-5p在蒽环类药物诱导H9C2心肌细胞损伤中的作用。结果:乳腺癌患者中9例发生肿瘤治疗相关心功能障碍,并从两组患者中鉴定出9个差异表达的miRNA。其中8个miRNA在体外模型中进一步得到验证,尤其是miR-25a-5p。通过上调miR-25a-5p,可进一步加重蒽环类药物诱导心肌细胞氧化损伤。结论:miR-25a-5p促进蒽环类药物诱导的心肌损伤,可能是新的生物标志物及治疗靶点。 展开更多
关键词 乳腺癌 蒽环类药物 肿瘤治疗相关心功能障碍 mir-25a-5p
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食管癌患者miR-34a-5P、miR-204变化及与预后的关系分析
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作者 张勇 赵园园 +1 位作者 张萍 任玉峰 《实用医院临床杂志》 2024年第6期129-131,共3页
目的分析食管癌患者miR-34a-5P、miR-204变化及与预后的关系。方法2019年5月至2022年12月山西省肿瘤医院收治的183例食管癌患者,根据食管癌分期分为早期组(n=76)、中期组(n=58)和晚期组(n=49),比较三组miR-34a-5P、miR-204水平。再根据... 目的分析食管癌患者miR-34a-5P、miR-204变化及与预后的关系。方法2019年5月至2022年12月山西省肿瘤医院收治的183例食管癌患者,根据食管癌分期分为早期组(n=76)、中期组(n=58)和晚期组(n=49),比较三组miR-34a-5P、miR-204水平。再根据治疗1年后患者预后情况分为未进展组(n=33)进展组(n=98)和死亡组(n=52),比较三组miR-34a-5P、miR-204水平。分析食管癌患者miR-34a-5P、miR-204水平与食管癌分期及预后的相关性。结果晚期组miR-34a-5P、miR-204水平低于中期组和早期组,中期组低于早期组(P<0.05);死亡组miR-34a-5P、miR-204水平低于进展组和未进展组,进展组低于未进展组(P<0.05);miR-34a-5P、miR-204水平与食管癌病情呈负相关、与食管癌患者预后呈正相关(P<0.05)。结论食管癌患者miR-34a-5P、miR-204水平随病情的加重逐渐降低,miR-34a-5P、miR-204低表达预示着患者预后情况越差。 展开更多
关键词 食管癌 mir-34a-5p mir-204 预后
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NONHSAT248596.1内源性竞争miR-146a-5p调控骨关节炎软骨退变的机制
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作者 杨光 李彦林 +6 位作者 王国梁 宁梓文 杨腾云 何任杰 熊波涵 杨兵 李黎 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第16期2512-2518,共7页
背景:目前已有针对lncRNA\miRNA\mRNA的共表达网络对骨关节炎发生发展调控机制的研究,课题组前期研究已通过数据库筛选出符合条件的NONHSAT248596.1和miR-146a-5p,尚缺乏体内实验来验证上述调控机制。目的:探究NONHSAT248596.1在基质细... 背景:目前已有针对lncRNA\miRNA\mRNA的共表达网络对骨关节炎发生发展调控机制的研究,课题组前期研究已通过数据库筛选出符合条件的NONHSAT248596.1和miR-146a-5p,尚缺乏体内实验来验证上述调控机制。目的:探究NONHSAT248596.1在基质细胞衍生因子1/4型趋化因子受体轴介导体内骨关节炎软骨退变进程中对miR-146a-5p发挥的竞争性内源性RNA调控作用。方法:取36只新西兰兔,通过向右侧后肢膝关节注射基质细胞衍生因子1溶液建立骨关节炎模型,采用随机数字表法分4组,lncRNA组、miRNA组、ceRNA组、对照组分别向造模膝关节内注射NONHSAT248596.1过表达的慢病毒载体、miR-146a-5p过表达的慢病毒载体、miR-146a-5p+NONHSAT248596.1过表达的慢病毒载体及空慢病毒载体。造模第4,8,12周,取膝关节软骨组织和软骨下骨组织进行相关检测。结果与结论:①苏木精-伊红与番红O固绿染色显示,4组软骨组织都有不同程度的退变表现,造模第4周时,lncRNA组软骨组织中的软骨细胞肿胀、细胞极性消失,细胞外基质破坏,出现表层糜烂、裂缝形成和软骨组织局部或全层缺失,并随时间延长软骨损伤程度逐渐加重,4组中miRNA组关节软骨炎症进展最缓慢;②qRT-PCR检测显示,相同时间点下,lncRNA组软骨组织中NONHSAT248596.1、4型趋化因子受体、基质金属蛋白酶3,9及13的mRNA表达量高于其他3组(P<0.05),miR-146a-5p、聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的mRNA表达量低于其他3组(P<0.05);造模后第8,12周,miRNA组软骨组织中的NONHSAT248596.1、4型趋化因子受体、基质金属蛋白酶3,9及13的mRNA表达量低于ceRNA组、对照组(P<0.05),miR-146a-5p、聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的mRNA表达量高于ceRNA组、对照组(P<0.05);③Western Blot检测显示,相同时间点下,lncRNA组软骨组织中的聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原蛋白表达量始终低于其他3组(P<0.05);miRNA组造模后第8,12周软骨组织中的聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原蛋白表达量高于ceRNA组、对照组(P<0.05);④结果表明,miR-146a-5p作为NONHSAT248596.1的作用靶点会受到其竞争性内源性RNA的作用造成活性被抑制,NONHSAT248596.1作用于miR-146a-5p后调控基质细胞衍生因子1/4型趋化因子受体轴,影响骨关节炎软骨组织中基质金属蛋白、Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖的表达,造成细胞外基质的降解及蛋白多糖的丢失。 展开更多
关键词 骨关节炎 lncRNA(NONHSAT248596.1) mir-146a-5p 基质细胞衍生因子1(SDF-1) 4型趋化因子受体(CXCR4) 软骨退变
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LncRNA MEG8通过靶向miR-15a-5p调控MICA/B介导结直肠癌细胞免疫逃逸
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作者 李鸷 吴迪 +2 位作者 田飞 刘洁 谢兴明 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1217-1221,1127,共6页
目的:探究长链非编码RNA母系表达基因8(LncRNA MEG8)通过靶向miR-15a-5p调控MHCⅠ类相关蛋白A/B(MICA/B)介导的结直肠癌(CRC)细胞免疫逃逸机制。方法:RT-qPCR、Western blot检测CRC组织和细胞系MEG8、miR-15a-5p、MICA、MICB、NKG2D蛋... 目的:探究长链非编码RNA母系表达基因8(LncRNA MEG8)通过靶向miR-15a-5p调控MHCⅠ类相关蛋白A/B(MICA/B)介导的结直肠癌(CRC)细胞免疫逃逸机制。方法:RT-qPCR、Western blot检测CRC组织和细胞系MEG8、miR-15a-5p、MICA、MICB、NKG2D蛋白水平;双荧光素酶实验验证MEG8对miR-15a-5p的调控关系;采用脂质体转染法将NC、MEG8、miR-NC、miR-15a-5p分别或共转染至SW480、SW620细胞,记为NC组、MEG8组、MEG8+miR-NC组、MEG8+miR-15a-5p组;将NK细胞分别与SW480、SW620细胞共培养;ELISA检测共培养液中TNF-α、IFN-γ水平;CCK-8、EdU染色、Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力;RT-qPCR、Western blot检测细胞MEG8、miR-15a-5p、MICA、MICB、NKG2D蛋白水平。结果:与癌旁组织或正常结肠上皮细胞相比,CRC组织和细胞系中MEG8、MICA、MICB、NKG2D mRNA和蛋白水平降低,miR-15a-5p水平升高(P<0.05)。MEG8靶向调控miR-15a-5p。共培养体系中,与NC组相比,MEG8组细胞MICA、MICB、NKG2D蛋白水平、共培养上清液中TNF-α、IFN-γ水平明显升高,培养1 d、2 d、3 d后,OD值、EdU阳性率、迁移和侵袭细胞数明显降低(P<0.05);过表达miR-15a-5p能部分逆转过表达MEG8对细胞MICA、MICB、NKG2D、TNF-α、IFN-γ水平和增殖、侵袭转移能力的影响(P<0.05)。结论:MEG8通过靶向miR-15a-5p调控MICA、MICB表达,促进NK细胞活性,抑制CRC细胞免疫逃逸。 展开更多
关键词 长链非编码RNA母系表达基因8 mir-15a-5p 结直肠癌 免疫逃逸 MHCⅠ类相关蛋白A/B
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miR-125a-5p通过靶向STAT3减轻戊四唑诱导的癫痫大鼠神经功能障碍和炎症反应
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作者 单萍 张继龙 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1373-1380,共8页
目的:探讨miR-125a-5p通过靶向信号转导与转录激活因子3(STAT3)对戊四唑(PTZ)诱导的癫痫大鼠神经功能障碍和炎症反应的影响。方法:采用PTZ点燃法建立大鼠癫痫模型,并将其随机分为6组:Con组、PTZ组、PTZ+agomir NC组、PTZ+miR-125a-5p ag... 目的:探讨miR-125a-5p通过靶向信号转导与转录激活因子3(STAT3)对戊四唑(PTZ)诱导的癫痫大鼠神经功能障碍和炎症反应的影响。方法:采用PTZ点燃法建立大鼠癫痫模型,并将其随机分为6组:Con组、PTZ组、PTZ+agomir NC组、PTZ+miR-125a-5p agomir组、PTZ+miR-125a-5p agomir+pcDNA组和PTZ+miR-125a-5p agomir+pc-STAT3组,评价miR-125a-5p对大鼠癫痫持续时间、潜伏期、惊厥次数和严重程度的影响。qRT-PCR检测miR-125a-5p和STAT3 mRNA表达;改良神经系统严重程度评分(mNSS)、开场实验和Rotarod测试评价癫痫大鼠的神经功能;Morris水迷宫实验评价癫痫大鼠的认知功能;免疫染色观察海马CA1和CA3区域神经元凋亡;ELISA检测海马组织炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-18)水平;Western blot检测海马组织中STAT3蛋白表达;双荧光素酶实验验证miR-125a-5p和STAT3的关系。结果:在PTZ诱导的癫痫大鼠中,miR-125a-5p表达上调,STAT3表达下调,且miR-125a-5p靶向抑制STAT3表达。与PTZ组相比,PTZ+miR-125a-5p agomir组癫痫大鼠的潜伏期缩短,癫痫评分降低,癫痫发作时间和次数减少,mNSS降低,掉落潜伏期及外围区域的移动距离、开放区域的总距离延长,逃避潜伏期显著降低,穿越平台次数及停留在目标象限的时间和游泳距离均增加,海马组织TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18表达降低,CA3和CA1区的NenN+细胞增多(P<0.05);STAT3过表达可逆转miR-125a-5p agomir对癫痫大鼠神经功能障碍及炎症反应的缓解作用(P<0.05)。结论:miR-125a-5p通过靶向下调STAT3,减轻PTZ诱导的癫痫大鼠神经功能障碍和炎症反应。 展开更多
关键词 mir-125a-5p 信号转导与转录激活因子3 戊四唑 癫痫 神经功能障碍 炎症
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