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mRNA疗法:过去、现在和未来
1
作者 孙梦泽 李鹏翠 胡晓青 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第2期178-189,共12页
信使mRNA(messenger RNA,mRNA)疗法是通过将效应分子以mRNA的形式递送至细胞内以治疗疾病的方法。mRNA各个部分序列高度可变的特点为高通量药物开发以及个性化治疗提供了潜在解决方案。本文从mRNA发展历程切入,概述了mRNA的发现发展及... 信使mRNA(messenger RNA,mRNA)疗法是通过将效应分子以mRNA的形式递送至细胞内以治疗疾病的方法。mRNA各个部分序列高度可变的特点为高通量药物开发以及个性化治疗提供了潜在解决方案。本文从mRNA发展历程切入,概述了mRNA的发现发展及其递送方法的演进过程。并针对mRNA所递送蛋白质的不同,分类别介绍mRNA在蛋白质替代疗法、癌症治疗、在体基因编辑和传染病预防中的应用。为将mRNA制剂应用于临床,需针对mRNA及其递送载体进行优化十分关键。本文进一步介绍如何通过核苷修饰和序列优化等方法提高mRNA的翻译效率以及稳定性,并系统比较新型环状mRNA与传统线性mRNA在疫苗开发方面的优劣。同时,针对mRNA的不同递送系统,本文总结脂质纳米颗粒等常用的递送手段,并详细阐述各个方法在靶向递送方面的最新进展。针对目前上市和在研的mRNA药物,本文系统总结其治疗的疾病、递送的效应分子以及所处的临床阶段。最后,本文展望了目前mRNA疗法所面临的问题以及能够潜在治疗的疾病,以期为mRNA疗法开发提供理论基础和参考依据。 展开更多
关键词 信使核糖核酸 mrna递送 mrna疗法
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猫传染性腹膜炎病毒mRNA疫苗转录载体的构建与鉴定
2
作者 卢娜 高钰 +3 位作者 赵嘉伟 苏迪 陈家磊 罗忠礼 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期803-813,共11页
本研究旨在设计猫传染性腹膜炎病毒(feline infectious peritonitis virus,FIPV)mRNA疫苗体外转录载体,并评估其转录出的FIPV mRNA疫苗的免疫原性。选取FIPV的核衣壳(nucleocapsid,N)蛋白,通过序列优化,结合CureVac mRNA技术平台,选择... 本研究旨在设计猫传染性腹膜炎病毒(feline infectious peritonitis virus,FIPV)mRNA疫苗体外转录载体,并评估其转录出的FIPV mRNA疫苗的免疫原性。选取FIPV的核衣壳(nucleocapsid,N)蛋白,通过序列优化,结合CureVac mRNA技术平台,选择合适的非编码序列、信号肽序列和poly A尾部。将构建完成的目的序列克隆到pBluescript II KS(+)载体上,经过载体的线性化单酶切后,在体外进行转录,合成编码FIPV N基因的mRNA,并经过加帽、纯化和琼脂糖凝胶电泳分析。通过体外转染试验验证抗原蛋白在细胞内的表达情况。在小鼠体内接种FIPV N-mRNA疫苗后,检测其体液免疫和细胞免疫反应。琼脂糖凝胶试验表明,设计的mRNA体外转录载体成功制备出稳定单一的mRNA序列。转染进细胞后,可在12~24 h内稳定表达目标抗原蛋白。ELISA试验结果显示FIPV N-mRNA疫苗在小鼠体内引起了强烈的体液免疫反应,其特异性抗体、IL-4、TNF-α水平明显高于对照组。Elispot试验结果显示FIPV N-mRNA组脾细胞分泌的IFN-γ的含量显著高于对照组。以FIPV N蛋白为抗原的体外转录载体所转录的mRNA疫苗,在细胞内能够高效表达目的蛋白,具有良好的免疫原性,有效引起小鼠的体液免疫和细胞免疫反应。FIPV N-mRNA疫苗有望成为猫传染性腹膜炎的潜在候选疫苗,mRNA体外转录载体的制备为传染性疾病mRNA疫苗的设计与研发提供了重要的参考价值。 展开更多
关键词 猫传染性腹膜炎 猫传染性腹膜炎病毒N蛋白 mrna疫苗 体外转录载体
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RNA-seq转录组测序分析青少年MDD患者外周血lncRNA、miRNA、mRNA表达差异
3
作者 姜洁 任真奎 +6 位作者 刘志国 张珺杰 尹利君 赵强 涂贵兰 孙建超 何军 《贵州医药》 2025年第2期171-176,共6页
目的RNA-seq转录组测序分析青少年重度抑郁症(major depression disease,MDD)患者外周血差异表达的lncRNA、miRNA、mRNA,为阐明青少年MDD发病机制提供理论补充。方法随机收集样本库4例青少年女性MDD患者与4例正常人对照外周血,TRizol试... 目的RNA-seq转录组测序分析青少年重度抑郁症(major depression disease,MDD)患者外周血差异表达的lncRNA、miRNA、mRNA,为阐明青少年MDD发病机制提供理论补充。方法随机收集样本库4例青少年女性MDD患者与4例正常人对照外周血,TRizol试剂处理后,提取RNA后进行RNA-seq转录组测序,根据P<0.05且|Log2FC|>1计算两组样本的表达差异,绘制差异lncRNA、miRNA、mRNA热图与火山图。通过TargetScan数据库可能预测差异miRNA调控的mRNA,并进行GO功能与KEGG信号通路聚类。结果MDD组和对照组两组间满足P<0.05且|Log2FC|>1差异条件的MDD组中1636个lncRNA上调和825个lncRNA下调,42个miRNAs上调和30个miRNAs下调,2469个mRNA上调和1398个mRNA下调。靶基因主要富集的GO功能:生物学过程(BP)、分子功能(MF)、细胞组分(CC)三个方面。靶基因主要富集的KEGG信号通路:差异表达的lncRNA多富集在Toll-like receptor信号通路、TNF信号通路、Salmonella intection和NF-kappa B信号通路等;差异表达的miRNA多富集在VEGF信号通路、Vasopressin-regulated water reabsorption、Vascular smooth muscle contraction、MAPK信号通路等;差异表达的mRNA靶基因多富集在泛素介导的蛋白质水解、T细胞受体信号通路和MAPK信号通路等。结论本研究结果提供了青少年女性MDD外周血中lncRNA、miRNA、mRNA表达变化的一般情况与可能调控的功能与通路,可能有助于阐明青少年MDD的潜在发病机制。 展开更多
关键词 青少年MDD RNA-seq转录组测序 LncRNA micoRNA mrna
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HupB诱导IL-6 mRNA与miR-144-3p特异性表达及其在结核病诊断中的应用
4
作者 周怀珩 张叶 +4 位作者 司马重园 魏毓彤 张其帆 余晓丽 刘晓倩 《武汉轻工大学学报》 2025年第1期35-40,78,共7页
HupB作为一种结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb)的核相关蛋白,在Mtb侵染宿主细胞的过程中,对Mtb的存活起关键作用,并同时参与调节宿主的免疫反应。本文探讨基于HupB特异性诱导IL-6 mRNA及miR-144-3p在外周血单个核细胞(Per... HupB作为一种结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb)的核相关蛋白,在Mtb侵染宿主细胞的过程中,对Mtb的存活起关键作用,并同时参与调节宿主的免疫反应。本文探讨基于HupB特异性诱导IL-6 mRNA及miR-144-3p在外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell, PBMC)中的表达及其应用,为结核病筛查、辅助诊断与免疫治疗提供理论依据。选取临床全血样本,用密度梯度离心法收集PBMC,经HupB不同时间诱导后,提取细胞总RNA并逆转录合成cDNA,使用q-PCR检测IL-6 mRNA及miR-144-3p表达水平,并进行ROC曲线分析;利用皮尔森相关系数分析HupB诱导PBMC后IL-6 mRNA和miR-144-3p的相关性。结果显示在HupB诱导PBMC后,IL-6 mRNA表达呈上升趋势,且在4 h时达到峰值(P<0.001),IL-6 mRNA的相对表达量在肺结核(Pulmonary tuberculosis, PTB)患者的PBMC中显著高于非肺结核肺部疾病(Non-pulmonary tuberculosis, nPTB)患者(P<0.001),此时AUC为0.712 8,最佳cut-off值为0.864 1;miR-144-3p表达量呈下降趋势,且在3 h时降幅最大(P<0.001),PTB组的miR-144-3p表达量最低(P<0.001),此时AUC为0.870 0,最佳cut-off值为1.877。皮尔森相关系数分析结果显示,HupB诱导PTB PBMC 3 h后IL-6 mRNA与miR-144-3p之间呈负相关(R=-0.64,P=0.02)。以上结果提示IL-6 mRNA可能成为肺结核与其他非结核肺部疾病的鉴别诊断标志物,miR-144-3p可能在IL-6 mRNA介导的结核免疫应答中发挥作用,且miR-144-3p有望用于肺结核疾病的筛查,具有成为疾病治疗靶点的潜力。 展开更多
关键词 结核病 HupB PBMC IL-6 mrna miR-144-3p 肺结核病诊断
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KRT18与mRNA及长链非编码RNA互作调控椎间盘髓核细胞损伤的机制
5
作者 刘钟元 李扬 张志文 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第2期312-321,共10页
背景:椎间盘中差异表达的RNA结合蛋白在椎间盘退变中发挥着关键作用,其中RNA结合蛋白KRT18水平的降低与椎间盘退行性病变相关,但其在椎间盘髓核细胞中的具体作用尚未完全确定。目的:探讨KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合互作对椎间盘髓... 背景:椎间盘中差异表达的RNA结合蛋白在椎间盘退变中发挥着关键作用,其中RNA结合蛋白KRT18水平的降低与椎间盘退行性病变相关,但其在椎间盘髓核细胞中的具体作用尚未完全确定。目的:探讨KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合互作对椎间盘髓核细胞的影响及机制。方法:对因腰部骨折或椎间盘退行性病变而接受椎间融合术的患者进行人体髓核组织取样获得正常髓核细胞和退变髓核细胞,并进行iRIP-seq、功能富集分析以及DNA微阵列分析,随后根据分析结果在髓核细胞中敲低KRT18,通过蛋白免疫印迹及qRt-PCR在蛋白和RNA水平检测相关基因水平的表达。结果与结论:通过iRIP-seq分析发现GUAAUC和AGCCUC序列中存在大量的KRT18结合位点,表明KRT18可参与调控RNA的转录、翻译、稳定性或在细胞信号传导途径中发挥作用。其能够与成熟的mRNA稳定结合,其中表达较高的基因包括CRLF1及IGFBP4等,同时与其结合的长链非编码RNA的峰值基因包括SNHG25、SNHG12、NEAT1、USP32、EIF4A2和CDH4,这些基因多涉及细胞凋亡、炎症等多种生物过程,并且能介导细胞外基质代谢的相关通路,KRT18能够调控它们的稳定性、转运、翻译、剪接等多个方面的功能,进而影响基因的表达和细胞功能。实验结果验证了在髓核细胞中敲低KRT18,细胞外基质代谢水平被抑制出现失衡,导致体外椎间盘退变。该研究首次从KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合的角度探讨其调控机制,并推测了KRT18在椎间盘退变发病机制中的潜在功能,为今后KRT18关键功能的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 椎间盘退行性变 RNA结合蛋白 KRT18 iRIP-seq mrna 长链非编码RNA
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大黄鱼AUF1基因克隆及其促TNF-αmRNA降解活性分析
6
作者 何志巧 汪慧娟 +3 位作者 郭盛泉 张晓林 严小军 申望 《水产学报》 北大核心 2025年第1期75-88,共14页
【目的】研究鱼类RNA结合蛋白AUF1对炎症因子mRNA表达的调节作用。【方法】采用cDNA末端快速扩增技术克隆大黄鱼AUF1 mRNA的全长cDNA序列,命名为LcAUF1,并采用实时荧光定量PCR技术(RTqPCR)检测Lcauf1基因的组织表达特异性、大黄鱼主要... 【目的】研究鱼类RNA结合蛋白AUF1对炎症因子mRNA表达的调节作用。【方法】采用cDNA末端快速扩增技术克隆大黄鱼AUF1 mRNA的全长cDNA序列,命名为LcAUF1,并采用实时荧光定量PCR技术(RTqPCR)检测Lcauf1基因的组织表达特异性、大黄鱼主要免疫器官脾脏和肾脏Lcauf1基因表达对副溶血弧菌攻毒的时序响应,以及通过构建四环素调控表达载体过表达LcAUF1,研究LcAUF1对TNF-α mRNA表达水平的调节作用。【结果】LcAUF1 mRNA全长cDNA由266 bp的5′-非翻译区、954 bp的开放阅读框和193 bp的3′-非翻译区组成,开放阅读框编码317个氨基酸残基;蛋白质序列分析显示,哺乳动物AUF1氨基酸序列和功能结构域在LcAUF1中高度保守;组织表达检测发现Lcauf1在大黄鱼机体中广泛表达,采集的9个组织中均检测到Lcauf1转录本,其中肌肉组织表达水平最高;副溶血弧菌攻毒2 h和12 h肾脏以及攻毒24 h脾脏中Lcauf1表达水平显著下调;RAW264.7细胞过表达Lcauf1显著下调LPS处理0.5、3.0和6.0 h时Tnf-α表达水平;进一步研究显示过表达LcAUF1促进RAW264.7细胞Tnf-α mRNA降解。【结论】AUF1在脊椎动物进化中结构和功能高度保守,LcAUF1也通过促进mRNA降解下调TNF-α mRNA表达水平,提示LcAUF1可能是大黄鱼炎症因子表达的重要调节蛋白,参与调节大黄鱼抗感染炎症因子表达平衡。本研究为深入探讨LcAUF1在大黄鱼抗感染炎症因子表达平衡调控中的作用及其在大黄鱼感染性养殖病害防治中的应用价值提供了参考数据。 展开更多
关键词 大黄鱼 RNA结合蛋白 AU富集元件RNA结合蛋白1 mrna降解 炎症因子
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预防用自扩增mRNA疫苗药学研究的考虑
7
作者 杨丹 赵欣 +2 位作者 胡琳 张东 李敏 《中国新药杂志》 北大核心 2025年第1期52-56,共5页
自扩增mRNA(self-amplifying, saRNA)从概念提出至今已经历了30年左右的发展,但由于其在药学和药效学研究等方面具有一定的复杂性,整体上其研发速度略滞后于非扩增mRNA。本文基于对saRNA疫苗研究进展及作用机制的介绍,进一步探讨其开发... 自扩增mRNA(self-amplifying, saRNA)从概念提出至今已经历了30年左右的发展,但由于其在药学和药效学研究等方面具有一定的复杂性,整体上其研发速度略滞后于非扩增mRNA。本文基于对saRNA疫苗研究进展及作用机制的介绍,进一步探讨其开发过程中结合产品工艺特点及产品特点的关注点,以期为预防用saRNA疫苗的药学研究提供参考。 展开更多
关键词 自扩增mrna 双链RNA 固有免疫应答 质量研究
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IgA血管炎儿童外周血ATP5B mRNA,UBA52 mRNA表达与肾损伤及疾病复发的关系研究
8
作者 潘晓涛 唐辉 《现代检验医学杂志》 2025年第1期99-104,共6页
目的 探究IgA血管炎(IgAV)儿童外周血ATP合成酶β5亚基(ATP5B)mRNA,泛素蛋白A52残基核糖体蛋白融合产物(UBA52)mRNA表达与肾损伤及疾病复发的关系。方法 选取2022年1月~2023年10月上海市奉贤区中心医院收治的143例IgAV患儿作为研究对象... 目的 探究IgA血管炎(IgAV)儿童外周血ATP合成酶β5亚基(ATP5B)mRNA,泛素蛋白A52残基核糖体蛋白融合产物(UBA52)mRNA表达与肾损伤及疾病复发的关系。方法 选取2022年1月~2023年10月上海市奉贤区中心医院收治的143例IgAV患儿作为研究对象,根据是否并发累及肾脏进一步分为IgAV肾损伤组(n=82)和IgAV肾非损伤组(n=61);根据术后随访情况将病例分为复发组(n=44)和未复发组(n=99);另选取同期60例健康体检者为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测ATP5B mRNA,UBA52 mRNA表达水平,对比两者在各组中表达情况。多因素Logistic回归分析IgAV患儿发生肾损伤的影响因素;通过受试者工作特征(ROC)曲线分析ATP5B mRNA,UBA52 mRNA表达对IgAV患儿发生肾损伤及疾病复发的预测价值。结果 对照组、IgAV肾非损伤组和IgAV肾损伤组外周血中ATP5B mRNA(1.01±0.21,1.24±0.26,1.46±0.35),UBA52mRNA(1.03±0.19,1.19±0.22,1.42±0.28),Scr(55.69±12.78μmol/L,62.85±13.92μmol/L,76.49±15.34μmol/L),BUN(11.85±2.91mmol/L,13.46±2.78mmol/L,17.54±3.45mmol/L)水平依次升高,组间比较差异具有统计学意义(F=39.666~64.417,均P<0.05)。与未复发组比较,复发组外周血中ATP5B mRNA(1.52±0.34 vs 1.19±0.20),UBA52 mRNA(1.49±0.31 vs1.08±0.21)表达升高,差异具有统计学意义(t=7.253,9.241,均P<0.001)。Logistic回归分析显示,Scr,BUN,ATP5B mRNA,UBA52 mRNA是IgAV发生肾损伤的独立危险因素(均P<0.05)。外周血中ATP5B mRNA联合UBA52 mRNA预测IgAV患儿发生肾损伤的AUC(95%CI)为0.823(0.607~0.914),明显高于两者单独预测(Z=1.952,2.021,均P<0.05);外周血中ATP5B mRNA联合UBA52 mRNA预测IgAV疾病复发的AUC(95%CI)为0.851(0.617~0.958),亦明显优于两者单独预测(Z=2.035,2.098,均P<0.05)。结论 IgAV患儿外周血中ATP5B mRNA,UBA52 mRNA表达水平与IgAV肾损伤和复发相关,两者可作为疾病诊断和预后评估的有效生物标志物。 展开更多
关键词 IgA血管炎 肾损伤 ATP合成酶β5亚基mrna 泛素蛋白A52残基核糖体蛋白融合产物mrna
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TCT联合HPV E6/E7 mRNA检测对子宫颈癌前早期病变诊断价值的meta分析 被引量：1
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作者 陈君君 郭培培 +4 位作者 路红春 梁宇鸣 沈婧 刘腾 王润洁 《齐齐哈尔医学院学报》 2024年第2期175-182,共8页
目的系统评价液基薄层细胞学检查(thinprep cytologic test,TCT)联合人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E6/E7 mRNA检测对子宫颈癌前早期病变的诊断价值。方法计算机检索CNKI、维普数据库(VIP)、万方数据库、中国生物医学文献数据... 目的系统评价液基薄层细胞学检查(thinprep cytologic test,TCT)联合人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E6/E7 mRNA检测对子宫颈癌前早期病变的诊断价值。方法计算机检索CNKI、维普数据库(VIP)、万方数据库、中国生物医学文献数据库(CBM)、PubMed、The Cochrane Library、Embase、Science数据库中关于TCT联合HPV E6/E7 mRNA检测诊断子宫颈癌前早期病变的相关文献,检索时限均为建库至2023年1月。由2位评价员按纳入标准和排除标准各自筛选文献、提取资料和评价质量后,应用RevMan 5.3、Stata 15.0、Meta-Disc 1.4统计软件分析TCT联合HPV E6/E7 mRNA检测对子宫颈癌前早期病变的诊断价值,计算诊断敏感性的Spearman相关系数验证阈值效应,进行异质性检验;计算合并敏感性、特异性、阳性似然比和阴性似然比、诊断比值比、SROC曲线下面积。结果共纳入15篇文献,合计6620例患者。Meta分析显示,合并敏感性、特异性、阳性似然比、阴性似然比、诊断比值比均不存在明显异质性(I^(2)=31.6%、14.2%、10.9%、16.7%、17.2%,P=0.1162、0.2947、0.3311、0.2663、0.2610),采用固定效应模型进行统计分析,其结果分别为0.95(95%CI:0.94~0.96)、0.87(95%CI:0.86~0.88)、6.86(95%CI:6.26~7.51)、0.06(95%CI:0.05~0.07)、113.23(95%CI:86.44~148.31)。SROC曲线下面积为0.9414。结论TCT联合HPV E6/E7 mRNA检测对诊断子宫颈癌前早期病变有重要价值。 展开更多
关键词 TCT HPV E6/E7 mrna 子宫颈癌前早期病变 诊断
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预防传染病mRNA疫苗原材料、原液质控要点分析
10
作者 孙巍 佟乐 +2 位作者 杨亚莉 王一平 杨振 《中国药事》 CAS 2024年第2期184-188,共5页
目的:梳理归纳预防传染病mRNA疫苗原材料和原液质控要点,为我国此类产品质量控制提供参考。方法:通过梳理世界卫生组织及相关标准和审评机构关于预防传染病mRNA疫苗原材料、原液质控指导文件,以及相关监管指南和文献,总结归纳预防传染病... 目的:梳理归纳预防传染病mRNA疫苗原材料和原液质控要点,为我国此类产品质量控制提供参考。方法:通过梳理世界卫生组织及相关标准和审评机构关于预防传染病mRNA疫苗原材料、原液质控指导文件,以及相关监管指南和文献,总结归纳预防传染病mRNA疫苗原材料和原液关键质量控制属性及相关要求。结果与结论:作为新型生物制品,mRNA疫苗核酸结构和脂质体包裹制剂的特性决定了该类疫苗质控特点,序列和完整性、含量及纯度、加帽率和包封率是mRNA疫苗特有的、决定有效性和安全性的关键质量参数。从原材料和原液制备阶段就建立多个与mRNA特性相关的质控要点及其检测方法,将有助于保障预防传染病mRNA疫苗安全有效、质量可控。 展开更多
关键词 预防传染病 mrna疫苗 世界卫生组织 质量控制 要点分析
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HPV E6/E7 mRNA联合细胞学检查用于子宫颈癌早期筛查的初步评价
11
作者 陈琼 涂媛 章培 《西部医学》 2024年第5期755-759,共5页
目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA联合液基薄层细胞学检查(TCT)用于宫颈癌早期筛查的初步评价。方法收集2015年10月—2019年7月在本院进行宫颈癌筛查患者825例,均进行HPV E6/E7 mRNA、TCT检测,以组织病理学为金标准,分析HPV E6/E7 m... 目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA联合液基薄层细胞学检查(TCT)用于宫颈癌早期筛查的初步评价。方法收集2015年10月—2019年7月在本院进行宫颈癌筛查患者825例,均进行HPV E6/E7 mRNA、TCT检测,以组织病理学为金标准,分析HPV E6/E7 mRNA与TCT联合检测用于评估患者宫颈病变风险的诊断效能。结果HPV E6/E7 mRNA检测和TCT检测不同病理分级患者宫颈慢性炎、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)、宫颈癌的阳性率分别为12.17%、39.04%、86.61%、87.88%和36.51%、82.89%、82.14%、81.82%。HPV E6/E7 mRNA检测的敏感性为86.90%,特异性为80.44%,准确性为81.58%。TCT检测的敏感性为82.07%,特异性为50.74%,准确性为56.24%。HPV E6/E7 mRNA联合TCT检测的敏感性为70.34%,特异性为83.68%,准确性为81.33%。HPV E6/E7 mRNA与TCT联合检测特异性高于单一检测,差异有统计学意义(P<0.001)。HPV E6/E7 mRNA与TCT两种检测方法的受试者工作特征曲线(ROC)曲线下面积(AUC)分别为0.837和0.664,两者联合检测的AUC为0.860,差异性显著(P<0.001),提示联合诊断可提高诊断宫颈HSIL的性能。结论HPV E6/E7 mRNA联合TCT能够更好预测宫颈病变的进展,且针对高级别病变的筛查具有更高的特异性,可为临床宫颈癌筛查提供参考。 展开更多
关键词 宫颈癌 筛查 人乳头瘤病毒 E6/E7 mrna 液基薄层细胞学检查
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动物mRNA疫苗生产厂房布局与工艺设计要点探究
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作者 刘业兵 吴涛 +3 位作者 夏应菊 陈紫昱 李佳昕 张存帅 《中国兽药杂志》 2024年第2期71-80,共10页
mRNA疫苗技术具备研发周期短、安全性优良、生产技术通用性强的特点,但由于mRNA疫苗的特殊工艺,传统的生物制品厂房设计已不能完全满足其制备要求。科学合理的厂房工艺设计是确保mRNA疫苗产能与质量的主要条件,因此,如何设计既符合工艺... mRNA疫苗技术具备研发周期短、安全性优良、生产技术通用性强的特点,但由于mRNA疫苗的特殊工艺,传统的生物制品厂房设计已不能完全满足其制备要求。科学合理的厂房工艺设计是确保mRNA疫苗产能与质量的主要条件,因此,如何设计既符合工艺要求又满足兽药GMP的动物mRNA疫苗生产厂房成为摆在我们面前急需探究的课题。鉴于不同国家在能源结构、环保要求、设计理念等方面存在差异,在借鉴欧美已有的mRNA疫苗规模化生产设施和我国人用mRNA疫苗厂房设计的基础上,提出了符合我国兽药GMP规范的mRNA疫苗厂房生产设施、工艺关键点和设计方案,以期为国内动物mRNA疫苗车间建设提供参考。 展开更多
关键词 动物 mrna疫苗 生产设施 工艺设计 GMP
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参芪复方对糖尿病GK大鼠肝脏组织mRNA、lncRNA表达谱的影响
13
作者 刘桠 张翕宇 +2 位作者 谢春光 徐刚 彭思涵 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第1期46-51,I0008-I0012,共11页
目的应用全转录组测序与实时聚合酶链锁反应(Real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)技术,探索参芪复方调控糖尿病GK大鼠肝脏信使RNA(messenger RNA,mRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)表达谱的机制研究。方法采... 目的应用全转录组测序与实时聚合酶链锁反应(Real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)技术,探索参芪复方调控糖尿病GK大鼠肝脏信使RNA(messenger RNA,mRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)表达谱的机制研究。方法采用高脂高糖饲料建立2型糖尿病模型,将GK大鼠随机分为模型组、参芪复方组和西药组。另将10只Wistar大鼠设为空白组,予普通饲料喂养。参芪复方组大鼠予参芪复方浸膏灌胃,西药组予西格列汀混悬液灌胃,模型组及空白组灌服生理盐水。干预12周,每周检测空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)。运用HE染色法观察大鼠肝脏组织病理形态,在空白组、模型组和参芪复方组中每组随机选取4只大鼠进行全转录组测序,构建mRNA、lncRNA差异表达谱,分析差异基因生物学功能,并进行RT-qPCR验证。结果与空白组相比,糖尿病GK大鼠FBG显著升高(P<0.05),模型组大鼠肝脏可见肝细胞排列紊乱,边界模糊,出现弥漫空泡状改变,呈中度脂肪变性,伴见炎性浸润、弥漫水肿;与模型组相比,参芪复方组大鼠FBG在12周时明显降低(P<0.05),肝脏组织排列较整齐,脂质沉积、细胞水肿及炎细胞浸润明显减轻。全转录组结果显示,与空白组相比,模型组大鼠mRNA、lncRNA表达谱存在显著差异,决定了糖尿病大鼠生理病理上的差异表现。参芪复方可广泛调控mRNA、lncRNA的差异表达,富集分析显示参芪复方通过调控多条内分泌系统及代谢过程相关信号通路改善糖尿病,包括胰岛素分泌、非酒精性脂肪性肝病、胆固醇代谢、鞘脂代谢、胰岛素抵抗等信号通路。RT-qPCR结果显示,基因Irf1、Trim30、Tmcc3、Insig1与转录组结果一致,转录组准确性较高。结论参芪复方发挥调节血糖及改善肝脏脂质沉积、水肿的作用,可能与广泛调控mRNA、lncRNA的差异表达有关。 展开更多
关键词 参芪复方 2型糖尿病 长链非编码RNA(lncRNA) 信使RNA(mrna)
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TLR9 mRNA在巨细胞病毒感染儿童外周血中的表达
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作者 张双红 胡清华 +3 位作者 李璟 康春枝 吴蔚 罗丽娟 《云南医药》 CAS 2024年第3期40-43,共4页
目的 探讨HCMV感染患儿外周血中TLR9 mRNA的表达。方法 选择2019年1月-2019年12月江西省儿童医院收治HCMV感染88例为研究对象,其中未给予更昔洛韦治疗23例为治疗前组,给予更昔洛韦治疗27例为治疗后组;同期未感染HCMV健康儿童38例为正常... 目的 探讨HCMV感染患儿外周血中TLR9 mRNA的表达。方法 选择2019年1月-2019年12月江西省儿童医院收治HCMV感染88例为研究对象,其中未给予更昔洛韦治疗23例为治疗前组,给予更昔洛韦治疗27例为治疗后组;同期未感染HCMV健康儿童38例为正常组。采用RT-PCR检测TLR9 mRNA表达,以2^(-△△Ct)方法对mRNA表达进行相对定量,对比分析各组指标的变化。结果 HCMV感染组和正常组外周血中TLR9 mRNA表达量平均值分别为1.986±0.306和3.001±0.543,2组间差异无统计学意义(t=1.724,P=0.088)。HCMV感染治疗前组和治疗后组外周血中TLR9 mRNA表达量平均值分别为1.778±0.312和2.163±0.504,2组间差异无统计学意义(t=0.624,P=0.536)。结论 TLR9 mRNA在HCMV感染儿童外周血中的表达降低,但其表达水平与不同治疗时期无相关性。 展开更多
关键词 儿童 巨细胞病毒 TLR9 mrna 外周血
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人乳头瘤病毒DNA、E6/E7 mRNA及液基薄层细胞学检查对女性宫颈癌的筛查价值
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作者 刘德美 董晓彤 +4 位作者 柳林 李秀凤 王慧 陈国华 张云香 《癌症进展》 2024年第13期1451-1455,1469,共6页
目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)DNA、E6/E7 mRNA及液基薄层细胞学检查(TCT)对女性宫颈癌的筛查价值。方法选取28021例体检女性,均接受HPV DNA、E6/E7 mRNA和TCT单项或多项检测,记录HPV DNA、E6/E7 mRNA、TCT单独及联合检测对宫颈癌的检出情... 目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)DNA、E6/E7 mRNA及液基薄层细胞学检查(TCT)对女性宫颈癌的筛查价值。方法选取28021例体检女性,均接受HPV DNA、E6/E7 mRNA和TCT单项或多项检测,记录HPV DNA、E6/E7 mRNA、TCT单独及联合检测对宫颈癌的检出情况。以组织活检结果为金标准,评估HPV DNA、E6/E7 mRNA、TCT单独或联合检测对宫颈癌的筛查价值。结果TCT、HPV DNA、E6/E7 mRNA对宫颈癌的检出率分别为8.8%、26.9%、29.7%。各方法单独检测时,TCT单独检测筛查宫颈癌的特异度最高(85.53%),但灵敏度最低(28.44%),HPV DNA单独检测筛查宫颈癌的灵敏度最高(60.25%)。两种方法联合检测时,HPV DNA+E6/E7 mRNA联合检测筛查宫颈癌的灵敏度最高(81.75%),特异度最低(26.34%),TCT+HPV DNA联合检测筛查宫颈癌的特异度(61.08%)和阴性预测值(57.11%)最高,任意两种方法联合检测筛查宫颈癌的灵敏度、特异度比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。TCT+HPV DNA+E6/E7 mRNA联合检测筛查宫颈癌的灵敏度、特异度与HPV DNA+E6/E7 mRNA检测比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05),但灵敏度高于TCT+E6/E7 mRNA联合检测,特异度低于TCT+E6/E7 mRNA联合检测,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论HPV DNA检测适合作为女性健康体检者宫颈癌筛查的首选方法,E6/E7 mRNA与TCT检测可作为宫颈癌进一步检查的优选。HPV DNA+E6/E7 mRNA联合检测具有较高的灵敏度和阳性预测值,可作为年轻女性宫颈癌筛查的优选方案,联合检测对提高阳性率及降低假阳性率有帮助。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒DNA E6/E7 mrna 液基薄层细胞学检查 宫颈癌 人乳头瘤病毒
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假尿苷修饰体外转录mRNA在翻译过程中发生的+1核糖体框架移码
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作者 于永利 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期269-273,共5页
为应对世界范围内的COVID-19疫情,假尿苷(Ψ)修饰的体外转录mRNA(Ψ-IVT-mRNA)被授权应用于SARS-Cov-2 mRNA疫苗。最近,Ψ-IVT-mRNA被发现在翻译蛋白质时发生核糖体“滞顿”,导致+1核糖体移码,在体外和体内翻译出异常的蛋白质。在接种SA... 为应对世界范围内的COVID-19疫情,假尿苷(Ψ)修饰的体外转录mRNA(Ψ-IVT-mRNA)被授权应用于SARS-Cov-2 mRNA疫苗。最近,Ψ-IVT-mRNA被发现在翻译蛋白质时发生核糖体“滞顿”,导致+1核糖体移码,在体外和体内翻译出异常的蛋白质。在接种SARS-Cov-2 mRNA疫苗的人群,这种异常蛋白可能激发脱靶T细胞反应或抗体反应或产生其它意想不到的副作用。这一发现对研制有效“安全”的mRNA疫苗/药物有“警示”和指导意义。 展开更多
关键词 SARS-CoV-2疫苗 体外转录mrna 假尿苷修饰 核糖体框架移码
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山东省滨州市不同年龄女性HPV高危型感染率及E6/E7 mRNA表达情况分析
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作者 李娜 杨田田 +1 位作者 司秀文 张海涛 《现代医药卫生》 2024年第22期3815-3820,共6页
目的探讨山东省滨州市不同年龄妇女人乳头瘤病毒(HPV)高危型感染率及HPV E6/E7 mRNA表达情况。方法选取2022年1-10月在该院妇产科就诊行HPV-DNA分型检测的女性患者10887例。按年龄分组(<30岁组2180例,30~<40岁组3222例,40~<50... 目的探讨山东省滨州市不同年龄妇女人乳头瘤病毒(HPV)高危型感染率及HPV E6/E7 mRNA表达情况。方法选取2022年1-10月在该院妇产科就诊行HPV-DNA分型检测的女性患者10887例。按年龄分组(<30岁组2180例,30~<40岁组3222例,40~<50岁组3438例,≥50岁组2047例)并统计HPV-DNA分型检测结果。在入选患者中分层随机选取HPV-DNA 16型阳性女性患者250例,各年龄组50例,统计其HPV E6/E7 mRNA检测结果,比较不同年龄组女性患者HPV-DNA分型及HPV E6/E7 mRNA表达的差异。结果10887例女性患者中阳性1666例,感染率为15.3%,其中高危型阳性1393例,占83.6%(1393/1666),低危型感染273例,占16.4%(273/1666)。HPV高危型阳性分布排前5位者依次为HPV 16、52、58、33、18型。不同年龄组女性患者感染率不同,HPV感染年龄分布曲线呈“V”形。不同年龄HPV-DNA 16型阳性女性患者HPV E6/E7 mRNA阳性率不同,40~<50岁组、≥50岁组女性患者HPV E6/E7 mRNA阳性率均高于30~<40岁组,差异均有统计学意义(P<0.05)。HPV-58型E6/E7 mRNA阳性率、拷贝值均高于HPV 16、18、52型,差异均有统计学意义(P<0.05)。HPV高危型混合感染与单一感染E6/E7 mRNA表达存在差异。结论通过开展HPV-DNA筛查工作及研究了解本地区HPV亚型的分布具有非常重要的价值。年轻妇女和围绝经期及以上妇女HPV感染风险较高。随年龄增加HPV 16型感染人群中HPV E6/E7 mRN阳性率逐渐升高,即发生宫颈病变的风险增加。不同HPV高危型感染E6/E7 mRNA阳性率、拷贝值均存在差异,且HPV高危型混合感染者E6/E7 mRNA阳性率、拷贝值均高于单一感染者。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 HPV-DNA 高危型感染 E6/E7 mrna 宫颈病变 山东
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p16/Ki-67双染检测、HPVE6/E7mRNA检测在宫颈病变诊断中的价值研究
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作者 彭海兰 梁土玉 +1 位作者 黄之文 李德峰 《黑龙江医药》 CAS 2024年第1期41-44,共4页
目的:探讨p16/Ki-67双染检测、HPVE6/E7mRNA检测在宫颈病变诊断中的价值。方法:选择2021年4月至2023年2月我院收治的605例高危型HPV阳性患者为研究对象,所有患者入院后均进行阴道镜检查与病理活检,取患者细胞学样本分别进行p16/Ki-67双... 目的:探讨p16/Ki-67双染检测、HPVE6/E7mRNA检测在宫颈病变诊断中的价值。方法:选择2021年4月至2023年2月我院收治的605例高危型HPV阳性患者为研究对象,所有患者入院后均进行阴道镜检查与病理活检,取患者细胞学样本分别进行p16/Ki-67双染检测、HPVE6/E7mRNA检测。比较两种方法单独检查与联合检测对宫颈病变阳性检出率的差异;比较三种检查方法对宫颈病变诊断效能的差异。结果:联合检测检出CIN1~3阳性率均高于p16/Ki-67双标记、HPVE6/E7mRNA检测(P<0.05);三种检测方式的浸润癌阳性检出率比较无明显差异(P>0.05)。Kappa检验分析结果显示,p16/Ki-67双标记与HPVE6/E7mRNA检查结果与病理诊断结果具有较好的一致性(Kappa值=0.719,P<0.05);联合检测结果与病理诊断结果具有高度的一致性(Kappa值=0.894,P<0.05)。联合检测对宫颈病变的诊断灵敏度、特异性与准确率高于p16/Ki-67双标记与HPVE6/E7mRNA检查(P<0.05)。结论:p16Ki-67双染与HPVE6/E7mRNA联合检测可准确检出宫颈病变程度,对宫颈病变疾病类型的鉴别可提供充足可靠的数据支持,联合检查的诊断效能较好,对患者后续相关治疗开展有积极指导意义。 展开更多
关键词 p16/Ki-67双标记 HHPVE6/E7mrna 宫颈病变 鉴别诊断 人乳头瘤病毒
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评价HPV E6/E7mRNA结合细胞倍体检查在宫颈癌筛查中的价值
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作者 朱科科 张科 +1 位作者 郭瑞丽 方卓宁 《新疆医学》 2024年第12期1438-1441,共4页
目的评价高危人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA结合宫颈细胞倍体检查在宫颈恶性肿瘤筛查中的意义。方法选择取得2020年3月至2021年3月在某人民医院妇科门诊就诊以及妇科住院部治疗进行宫颈癌筛查的女性患者628例,收集病人的宫颈脱落细胞,将... 目的评价高危人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA结合宫颈细胞倍体检查在宫颈恶性肿瘤筛查中的意义。方法选择取得2020年3月至2021年3月在某人民医院妇科门诊就诊以及妇科住院部治疗进行宫颈癌筛查的女性患者628例,收集病人的宫颈脱落细胞,将所有得到的细胞标本同时做两种化验,即HPV E6/E7 mRNA+宫颈细胞倍体检查,得到的检查结果中如果有一个提示阳性,那么再进一步在阴道镜指引下完成宫颈活检,活检的病理结果将作为最终的诊断,把得到的每一步检查结果进行逆向分析,探索只使用一项检查和选择两者结合时分别对宫颈肿瘤及早发现产生的不同评价。结果单一评价方法时:HPV E6/E7 mRNA检测敏感性(96.55%)最高,其特异性为(75.10%)、准确度为(79.10%),细胞倍体分析的阴性预测值(95.94%)最高。两者结合评价时:其特异性(84.98%)、阳性预测值(55.81%)和准确度(84.57%)最高。结论HPV E6/E7 mRNA和宫颈细胞倍体相结合共同评价时,看其在特异性、阳性预测值和准确性三方面的表现,呈现出的最后效果好于单一评价方法,建议将两者联合筛查应用于宫颈恶性肿瘤临床筛查中。 展开更多
关键词 宫颈癌筛查 HPV E6/E7mrna 宫颈细胞倍体检查 价值评价
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犀角地黄汤对脓毒症小鼠肺组织mRNA表达的影响
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作者 林名瑞 李红艳 +1 位作者 郭小艳 陈怀宇 《蛇志》 2024年第4期443-447,共5页
目的探讨犀角地黄汤对脓毒症小鼠肺组织mRNA表达的影响。方法将30只小鼠随机分为对照组、脓毒症组和脓毒症犀角地黄汤组,每组10只。小鼠腹腔注射脂多糖(LPS)10 mg/kg构建脓毒症模型,对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水。脓毒症犀角地黄汤... 目的探讨犀角地黄汤对脓毒症小鼠肺组织mRNA表达的影响。方法将30只小鼠随机分为对照组、脓毒症组和脓毒症犀角地黄汤组,每组10只。小鼠腹腔注射脂多糖(LPS)10 mg/kg构建脓毒症模型,对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水。脓毒症犀角地黄汤组于小鼠LPS干预前48 h开始给予犀角地黄汤0.3 ml灌胃,建模后每日2次继续胃饲1 d;对照组和脓毒症组给予等量生理盐水胃饲。干预后24 h每组随机选取5只小鼠麻醉后取部分肺组织进行病理检查,部分肺组织标本进行mRNA测序。应用生物信息学分析犀角地黄汤干预后小鼠肺组织相关基因表达情况。结果对照组的小鼠肺组织结构清晰,脓毒症组小鼠肺泡壁出现较多的炎性细胞浸润,脓毒症犀角地黄汤组小鼠则呈现出少量的炎性细胞浸润。相对于对照组,脓毒症组小鼠的肺组织mRNA表现出差异表达(LCN2、Ccl6、Ccl9、PDK4等),脓毒症犀角地黄汤组则出现缓解。结论犀角地黄汤可能通过下调LCN2、趋化因子C-C基序配体(Ccl6、Ccl9)、PDK4等基因的高表达起到抗脓毒性肺损伤的作用。 展开更多
关键词 犀角地黄汤 脓毒症 小鼠 肺 mrna
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