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基于iPBS标记的石斛兰杂交子代真实性鉴定 被引量:2
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作者 赵秋菊 崔学强 +3 位作者 邓杰玲 黄昌艳 李佳蔚 张自斌 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第6期1153-1160,共8页
石斛兰为石斛属所有植物的总称,是兰科植物中重要的花卉资源,具有极高的观赏和药用价值。杂交育种是培育石斛兰新品种的主要方法,但石斛兰的育种年限较长,整个育种周期通常需要几年的时间。种质资源的鉴定是育种工作的基础,本研究对石... 石斛兰为石斛属所有植物的总称,是兰科植物中重要的花卉资源,具有极高的观赏和药用价值。杂交育种是培育石斛兰新品种的主要方法,但石斛兰的育种年限较长,整个育种周期通常需要几年的时间。种质资源的鉴定是育种工作的基础,本研究对石斛兰杂交后代株系进行鉴定,以期为石斛兰杂种后代的早期选择及新品种(系)的快速鉴定提供分子依据,进一步缩短育种周期,加快石斛兰育种工作进程。iPBS标记作为一种新型的分子标记,无需预先获取LTR序列,相较于其他分子标记具有简单、高效且应用范围广等优点,本研究采用iPBS分子标记技术对广美石斛×黄钻戒石斛的19个杂种F_(1)株系进行杂种真实性鉴定,并进行遗传多样性和聚类分析。研究结果表明:从83条iPBS引物中筛选出7条扩增条带清晰、多态性高、重复性好的引物用于石斛兰杂交子代真实性鉴定;7条引物共扩增出69条条带,其中多态性条带为51条,多态性比率为73.91%;较多的父本遗传信息导入子代个体中,供试的19个杂种F_(1)株系均能扩增出父本特征性条带,鉴定为真杂种;聚类分析表明,绝大多数杂交后代在亲缘关系上先倾向于父本后倾向于母本;遗传相似系数分析结果表明,杂交后代与父本的平均遗传相似系数大于母本,说明供试杂交后代在遗传上更倾向于父本,与聚类结果吻合;该杂交组合子代植株偏父本遗传。研究结果证明,iPBS分子标记技术可作为石斛兰杂交育种早期杂交种筛选鉴定的有效方法。该研究结果为进一步揭示石斛兰种群亲本与子代间的遗传多样性提供科学依据。 展开更多
关键词 石斛兰 ipbs标记 杂交子代 真实性鉴定
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柿属植物iPBS标记的建立及优化 被引量:2
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作者 汤红 张平贤 +2 位作者 郭大勇 张青林 罗正荣 《中国南方果树》 北大核心 2018年第4期107-111,共5页
试验建立并优化了柿属植物的iPBS(inter Primer Band Site)标记PCR反应体系。最佳反应体系为1xEs Taq MasterMix,60ng DNA模板,10μmol/L终引物浓度,总体积12μL。共筛选出18个多态性较好的引物。基于iPBS标记的UPGMA分析结果与前人一... 试验建立并优化了柿属植物的iPBS(inter Primer Band Site)标记PCR反应体系。最佳反应体系为1xEs Taq MasterMix,60ng DNA模板,10μmol/L终引物浓度,总体积12μL。共筛选出18个多态性较好的引物。基于iPBS标记的UPGMA分析结果与前人一致,iPBS标记更简单、经济,可用于柿属植物种质资源的多样性评价和种质鉴定。 展开更多
关键词 柿属植物 ipbs标记 遗传多样性
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基于iPBS标记的石斛兰种质资源遗传多样性分析及DNA指纹图谱构建 被引量:10
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作者 崔学强 唐璇 +4 位作者 黄昌艳 邓杰玲 李秀玲 卢家仕 张自斌 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2021年第2期317-324,共8页
以48份石斛兰种质资源为对象,采用iPBS分子标记技术对其遗传多样性进行分析并构建DNA指纹图谱。结果表明:从83条iPBS引物中筛选出7条扩增条带清晰、多态性高、重复性好的引物;利用筛选出的引物对48份石斛兰基因组DNA进行PCR扩增,共获得... 以48份石斛兰种质资源为对象,采用iPBS分子标记技术对其遗传多样性进行分析并构建DNA指纹图谱。结果表明:从83条iPBS引物中筛选出7条扩增条带清晰、多态性高、重复性好的引物;利用筛选出的引物对48份石斛兰基因组DNA进行PCR扩增,共获得279条谱带,其中多态性条带279条,多态性比例为100%;采用GenAlEx 6.5软件计算48份石斛兰的平均观测等位基因数(N_(a))为2.000,平均有效等位基因数(N_(e))为1.202,平均Nei’s遗传多样性指数(H_(e))为0.153,平均Shannon信息多样性指数(I)为0.274,48份石斛兰表现出丰富的遗传多样性;采用NTSYS-pc 2.1软件计算得到48份石斛兰间的遗传相似系数为0.6667~0.9211,基于遗传相似系数进行UPGMA聚类,在相似系数0.75处,可将48份石斛兰划分为7个类群。利用2对引物构建的DNA指纹图谱可单独鉴别出48份石斛兰种质资源,该图谱可为石斛兰分类与鉴定提供科学依据。 展开更多
关键词 石斛兰 ipbs分子标记 遗传多样性 DNA指纹图谱
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石斛兰杂交后代iPBS标记鉴定及遗传分析
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作者 赵秋菊 崔学强 +3 位作者 邓杰玲 黄昌艳 殷文忆 张自斌 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期78-89,共12页
为获取性状优良的子代单株用于后续新品种培育和优质亲本的选配,采用iPBS与形态学双标记鉴定方法,对‘粉条纹’石斛(母本)与‘丹绒之星’石斛(父本)杂交组合进行遗传鉴定研究。结果表明:iPBS标记鉴定36个子代植株均为真杂种,在遗传距离0... 为获取性状优良的子代单株用于后续新品种培育和优质亲本的选配,采用iPBS与形态学双标记鉴定方法,对‘粉条纹’石斛(母本)与‘丹绒之星’石斛(父本)杂交组合进行遗传鉴定研究。结果表明:iPBS标记鉴定36个子代植株均为真杂种,在遗传距离0.71处,亲本及36个子代可分为3大类群,子代先与父本聚为一类再与母本聚合,两亲本与子代的遗传相似系数父本(0.6861)>母本(0.5105);形态学鉴定显示两亲本在各个性状上均存在较大差异,子代假鳞茎高度均值为25.48 cm,假鳞茎直径1.14 cm,叶片长度14.17 cm,叶片宽度3.45 cm,子代株型与叶型大小主要介于双亲间;子代花横径均值为4.96 cm,花纵径均值为5.75 cm,两者优于双亲的比例分别为16.67%和2.78%,多数子代植株花型较父母本偏小;在花部性状中,上萼宽、侧萼长宽和侧瓣长4个性状表现出一定超亲优势,唇瓣长和花梗数2个性状展现出较强的中亲优势,其余性状均呈现出不同程度的衰退趋势;子代在花色遗传上以父本的白紫色系为主,并在双亲花色色谱基础上展现梯度变化。综上,iPBS分子标记可有效提高鉴定石斛兰杂种的效率,形态学标记鉴定有助于高效选育性状优良的子代个体,2种标记方法均可有效缩短石斛兰杂交育种进程。 展开更多
关键词 石斛兰 子代鉴定 表型性状 ipbs标记 遗传表现
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枇杷iPBS分子标记的PCR体系优化与引物筛选 被引量:2
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作者 顾林平 张冰 +2 位作者 费艳 王化坤 王鹏凯 《中国南方果树》 北大核心 2019年第1期41-46,共6页
以枇杷的DNA为模板进行iPBS-PCR扩增,采用预备试验中效果较好的iPBS分子标记引物2241,对枇杷iPBS-PCR反应体系中的dNTP、Mg2+、引物、模板用量进行优化。根据检测结果确定枇杷iPBS-PCR使用10×Taq buffer 2μL,25mM Mg2+1.6μL,2.5m... 以枇杷的DNA为模板进行iPBS-PCR扩增,采用预备试验中效果较好的iPBS分子标记引物2241,对枇杷iPBS-PCR反应体系中的dNTP、Mg2+、引物、模板用量进行优化。根据检测结果确定枇杷iPBS-PCR使用10×Taq buffer 2μL,25mM Mg2+1.6μL,2.5mM dNTP 1.6μL,10μmol/L Primer 1μL,5U/μL Taq酶0.2μL,模板DNA 5ng的20μL反应体系。反应程序中的退火温度可以参考iPBS引物理论Tm值。对33条iPBS引物扩增测试的结果显示在该反应体系下可以筛选到谱带清晰、多态性好的引物22条,可用于枇杷的分子标记分析。 展开更多
关键词 枇杷 ipbs分子标记 体系优化 引物筛选
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枸杞种质资源遗传多样性的iPBS分析 被引量:10
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作者 尹跃 安巍 +4 位作者 赵建华 王亚军 何军 戴国礼 曹有龙 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第6期612-617,共6页
采用引物结合位点扩增(iPBS)分子标记技术对34份枸杞种质资源进行遗传多样性分析.从83条iPBS引物中筛选出11条引物分别对34份枸杞种质基因组DNA进行扩增,共检测到91条清晰谱带,其中,多态性条带89条,多态性比率为97.8%,平均多态信息含量... 采用引物结合位点扩增(iPBS)分子标记技术对34份枸杞种质资源进行遗传多样性分析.从83条iPBS引物中筛选出11条引物分别对34份枸杞种质基因组DNA进行扩增,共检测到91条清晰谱带,其中,多态性条带89条,多态性比率为97.8%,平均多态信息含量为0.46.采用POPGENE软件计算34份种质的平均有效等位基因数为1.570,平均Nei's基因多样性指数为0.327,平均Shannon信息指数为0.489,表明34份种质具有丰富的遗传多样性.采用NTSYS-pc软件计算得到34份种质间的遗传相似系数为0.56~0.93,非加权组平均法(UPGMA)聚类分析结果表明,遗传相似系数为0.65时,可将34份种质分成5大类群,反映出栽培品种与野生种质遗传差异大,亲缘关系较远.iPBS分子标记可有效用于枸杞种质资源遗传多样性分析. 展开更多
关键词 枸杞 ipbs分子标记 遗传多样性
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金花茶组植物种质资源遗传多样性的iPBS分析 被引量:4
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作者 卢家仕 黄展文 +5 位作者 李先民 孙明艳 余海娟 周锦业 李春牛 卜朝阳 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第8期1638-1644,共7页
【目的】分析24份金花茶组植物种质资源的遗传多样性和亲缘关系,为金花茶组植物种质资源的鉴定和杂交育种提供参考依据。【方法】以毛瓣金花茶和夏石金花茶DNA样品进行引物筛选,从50条iPBS(Inter primer binding site)引物中筛选出稳定... 【目的】分析24份金花茶组植物种质资源的遗传多样性和亲缘关系,为金花茶组植物种质资源的鉴定和杂交育种提供参考依据。【方法】以毛瓣金花茶和夏石金花茶DNA样品进行引物筛选,从50条iPBS(Inter primer binding site)引物中筛选出稳定、清晰的引物对所有供试材料进行PCR扩增,利用非加权平均距离法(UPGMA)构建系统发育进化树,采用iPBS分子标记技术分析其遗传多样性。【结果】从50条iPBS引物中筛选出10条多态性高、重复性好的引物,在24份金花茶组植物种质资源中共扩增出280条条带,平均每条引物扩增条带数为28条,多态性条带268条,多态性比率为92.68%,平均等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、Nei's基因多样性指数(H)和Shannon多样性信息指数(I)分别为1.9571、1.3544、0.2332和0.3767,表明金花茶组植物种质资源具有丰富的遗传多样性;24份金花茶组植物种质资源的遗传相似系数为0.543~0.836,在遗传相似系数0.680处,可将24份金花茶组植物种质资源聚为3组。【结论】iPBS分子标记多态性高,重复性好,便于操作,能有效进行金花茶组植物种质资源的遗传多样性分析,可供金花茶种质资源的品种鉴定、亲缘关系分析和分子辅助育种参考应用。 展开更多
关键词 金花茶组植物 种质资源 ipbs分子标记 遗传多样性 亲缘关系
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34份黄秋葵种质资源遗传多样性的iPBS分析 被引量:3
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作者 张景荣 张聪 +7 位作者 叶昌华 肖宇 刘玉珊 杨马进 韩菊兰 李臻 冯媛媛 卓明 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第15期5180-5188,共9页
为了探讨黄秋葵种质资源间的遗传关系,本研究利用引物结合位点扩增(inter-primer binding site,iPBS)标记对34份秋葵种质进行遗传多样性和亲缘关系分析。结果显示,12条iPBS引物共扩增出122条谱带,其中多态性谱带105条,多态性比率为80.45... 为了探讨黄秋葵种质资源间的遗传关系,本研究利用引物结合位点扩增(inter-primer binding site,iPBS)标记对34份秋葵种质进行遗传多样性和亲缘关系分析。结果显示,12条iPBS引物共扩增出122条谱带,其中多态性谱带105条,多态性比率为80.45%。运用PopGene 32软件计算得到34份种质资源的有效等位基因数(Ne)范围为1.6509~1.9899,平均值为1.9074;Nei's基因指数(H)范围为0.3943~0.4975,平均值为0.4746;Shannon's信息指数(I)范围为0.5833~0.6906,平均值为0.6673;采用NTsys 2.10e软件计算得到34份秋葵种质间的遗传相似系数在0.3936~0.9524之间;这些参数表明黄秋葵具有丰富的遗传多样性,且遗传变异水平较高。基于非加权组平均法(UPGMA)聚类结果表明,以遗传相似系数0.76为阈值,可将34份黄秋葵种质材料划分为6个组(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ和Ⅵ),其中,在遗传相似系数大概为0.78处,Ⅱ类又可分为4个亚类有20份种质;各种质之间的亲缘关系与地理来源有一定的相关性,但不完全一致,材料间存在交叉现象。研究结果表明,iPBS技术可用于黄秋葵种质的鉴别以及遗传多态性的研究。本研究为黄秋葵资源的有效利用、遗传育种中亲本组合选配提供参考。 展开更多
关键词 秋葵 ipbs标记 遗传多样性 聚类分析
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金钗石斛居群遗传多样性分析及DNA指纹图谱构建 被引量:1
9
作者 赵秋菊 崔学强 +4 位作者 邓杰玲 黄昌艳 欧美景 李红燕 张自斌 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第19期6434-6442,共9页
目的探讨不同地区金钗石斛Dendrobium nobile居群间的遗传多样性及遗传分化关系。方法基于引物结合位点间扩增(inter-primer binding site,iPBS)分子标记对广西5个县共35份金钗石斛进行遗传关系、遗传多样性和种群间遗传分化分析,并构... 目的探讨不同地区金钗石斛Dendrobium nobile居群间的遗传多样性及遗传分化关系。方法基于引物结合位点间扩增(inter-primer binding site,iPBS)分子标记对广西5个县共35份金钗石斛进行遗传关系、遗传多样性和种群间遗传分化分析,并构建能区分35份金钗石斛种质的DNA指纹图谱。数据分析使用NTSYS-pc 2.10e统计软件计算遗传相似系数并构建聚类分析图谱,采用Popgene 1.32软件计算遗传多样性指数与居群遗传分化系数。结果8条iPBS引物共扩增出158条条带,多态性条带为143条,多态条带百分率(percentage of polymorphic bands,PPB)为90.51%;在遗传距离0.70处,35份种质分为7大类群,居群在分子水平上出现明显分化;遗传相似系数(genetic similarity coefficient,Gs)变化范围为0.5590~0.9759,变幅为0.4169;平均观测等位基因数(observed number of alleles,Na)、平均有效等位基因数(effective number of alleles,Ne)、Nei’s基因多样性指数(Nei’s gene diversity index,He)、Shannon多样性信息指数(Shannon information index,I)分别为1.8987、1.5050、0.3007、0.4542,居群间存在丰富遗传多样性;基因多样度(total genetic diversity,Ht)、各居群基因分化系数(gene diversity within population,Hs)、居群间遗传分化系数(coefficient of gene differentiation,Gst)分别为0.2998、0.2149、0.2830,居群间遗传变异占总变异的28.30%,居群内的遗传变异占总变异的71.70%,遗传变异主要来源于居群内部;基因流(gene flow,Nm)为1.2665,居群间存在较高水平的基因交流。引物2219和2399可单独鉴别出35份种质,试验基于引物2399的“0,1”矩阵构建35份种质的指纹图谱,此图谱可为金钗石斛品种的分类与鉴定提供参考。结论金钗石斛居群间遗传多样性较丰富,总变异主要来源于居群内变异,居群间存在较高水平的基因交流。揭示了金钗石斛种质间的遗传关系及其居群遗传多样性,为野生金钗石斛种质的保护工作的开展奠定基础。 展开更多
关键词 金钗石斛 遗传多样性 遗传分化 DNA指纹图谱 ipbs标记
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四川加工型辣椒种质资源遗传多样性分析 被引量:2
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作者 张艳 孙婷 +6 位作者 刘玉珊 尚迪 张军 罗大刚 杨马进 陈肖肖 张景荣 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2023年第14期4702-4709,共8页
为了评估四川加工型辣椒种质资源的遗传多样性和亲缘关系,本研究以24份辣椒种质资源为研究对象,采用iPBS分子标记技术分析其遗传多样性和亲缘关系。结果表明,10条引物共扩增出171条谱带,多态性谱带103条,多态性比率为59.39%。对24份辣... 为了评估四川加工型辣椒种质资源的遗传多样性和亲缘关系,本研究以24份辣椒种质资源为研究对象,采用iPBS分子标记技术分析其遗传多样性和亲缘关系。结果表明,10条引物共扩增出171条谱带,多态性谱带103条,多态性比率为59.39%。对24份辣椒种质资源的遗传多样性进行分析,其遗传相似系数(GS)在0.713~0.901;根据果型将供试样本分为牛角椒、线椒、羊角椒和小椒4个群体,其中羊角椒群体的遗传多样性最高,其观测等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、Nei’s基因指数(H)和Shannon’s信息指数(I),分别为1.4737、1.3409、0.1892和0.2752。牛角椒群体的遗传多样性最低,其Na、Ne、H和I分别为1.2632、1.1679、0.0987和0.1470;按非加权组平均法(UPGMA)构建24份辣椒种质资源的iPBS标记聚类树状图,在遗传相似系数0.82处,可将24份材料分为4个组,与形态学的分类结果存在较大差异。综合分析结果表明,多数供试材料间的亲缘关系较近,而不同组材料间的亲缘关系相对较远,鉴于组间辣椒品种间的亲缘关系以及在产量、成熟期、品质等方面存在差异,故不同组间材料可进行杂交,以选育新品种。 展开更多
关键词 加工型辣椒 ipbs分子标记 遗传多样性 聚类分析
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