目的采用QuECHERS前处理技术,基于超高效液相色谱–四级杆–静电场轨道离子肼高分辨质谱法(Ultra performance liquid chromatography-quadrupole-electrostatic field orbitrap high resolution mass spectrometry,UPLC-QOrbitrap HRMS...目的采用QuECHERS前处理技术,基于超高效液相色谱–四级杆–静电场轨道离子肼高分辨质谱法(Ultra performance liquid chromatography-quadrupole-electrostatic field orbitrap high resolution mass spectrometry,UPLC-QOrbitrap HRMS)建立快速靶向筛查凉茶中非法添加14类140种药物的分析检测方法。方法样品加甲醇提取,用无水硫酸镁–醋酸钠、十八烷基键合硅胶–中性氧化铝粉末进行分散固相萃取净化,用色谱柱Waters BEH C_(18)(2.1 mm×50 mm,1.7μm)分离,通过0.2%甲酸水(V/V)溶液–0.2%甲酸乙腈(V/V)溶液和水–乙腈两个独立的流动相体系梯度洗脱,数据采集模式Full MS/dd–MS^(2),配置阴性基质标准曲线并采用外标法定量。结果有代表性的20种质控化合物在5.0~200 ng/mL质量浓度范围内线性关系良好(r^(2)>0.995),低中高三水平加标量下的平均回收率为83.1%~107.3%,相对标准偏差RSD<15.6%,检出限0.2~1.0 mg/kg。对市场上165批凉茶进行测定,其中12批阳性被检出,阳性成分为氯苯那敏、对乙酰氨基酚、双氯芬酸纳、布洛芬、地塞米松醋酸酯、红霉素和氟甲砜霉素。结论该方法操作简单、灵敏度高、筛查通量高,适用于凉茶等保健食品中非法添加药物的检测。展开更多
目的:探讨彝药黑根治疗类风湿性关节炎潜在的作用机制以及主要活性成分。方法:运用UPLC-Q-Orbitrap HRMS及GC-MS技术分析黑根的化学成分,利用Swiss Target进行活性成分的靶点筛选和预测,同时在Genecard、OMIM、Dis Ge NET等数据库中筛...目的:探讨彝药黑根治疗类风湿性关节炎潜在的作用机制以及主要活性成分。方法:运用UPLC-Q-Orbitrap HRMS及GC-MS技术分析黑根的化学成分,利用Swiss Target进行活性成分的靶点筛选和预测,同时在Genecard、OMIM、Dis Ge NET等数据库中筛选类风湿性关节炎相关靶点,利用Cytoscape3.9.0软件构建“活性成分-靶点”网络模型,运用String数据分析平台进行蛋白互作网络分析,并且利用基因富集分析在线工具对核心靶点进行GO富集分析和KEGG通路分析,最后使用分子对接对网络药理学内容进行初步验证。结果:共鉴定出黑根化学成分78个,筛选后活性成分50个,237个潜在作用靶点与类风湿性关节炎相关,包括STAT3、AKT1、EGFR等关键靶点。通路富集分析PI3K-Akt通路、JAK-STAT等信号通路可能是黑根发挥抗类风湿性关节炎的主要途径。通过分子对接技术得出主要活性成分(异绿原酸B、异绿原酸C)与关键靶点有较好结合力。结论:研究初步表明黑根通过多成分、多靶点、多途径治疗类风湿性关节炎的作用,为后续黑根物质基础研究提供了理论依据。展开更多
目的采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole/electrostatic field orbitrap high resolution mass spectrometry,UPLC-Q/Orbitrap HRMS)技术建立全血中60种天然...目的采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole/electrostatic field orbitrap high resolution mass spectrometry,UPLC-Q/Orbitrap HRMS)技术建立全血中60种天然毒素的快速筛查方法。方法分析并记录60种天然毒素标准品的色谱和质谱信息,构建筛查数据库。全血用蛋白沉淀法配合超声辅助分散进行前处理,使用Hypersil GOLD^(TM)C_(18)色谱柱,以5 mmol/L甲酸铵水溶液(含0.1%甲酸)和乙腈为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾电离正离子模式和全扫描/数据依赖二级扫描(Full MS/dd-MS^(2))模式下检测。基于构建的筛查数据库,采用TraceFinder软件实现全血中60种天然毒素的快速筛查。结果建立的全血中60种天然毒素的UPLC-Q/Orbitrap HRMS筛查方法,除氧化苦参碱(LOD为20ng/mL)和毒毛旋花子苷元(LOD为40ng/mL)外,其余58种天然毒素的LOD范围为0.05~5 ng/mL。结论该方法前处理简单、高效,可以实现对全血中60种天然毒素的快速筛查。展开更多
文摘目的:探讨彝药黑根治疗类风湿性关节炎潜在的作用机制以及主要活性成分。方法:运用UPLC-Q-Orbitrap HRMS及GC-MS技术分析黑根的化学成分,利用Swiss Target进行活性成分的靶点筛选和预测,同时在Genecard、OMIM、Dis Ge NET等数据库中筛选类风湿性关节炎相关靶点,利用Cytoscape3.9.0软件构建“活性成分-靶点”网络模型,运用String数据分析平台进行蛋白互作网络分析,并且利用基因富集分析在线工具对核心靶点进行GO富集分析和KEGG通路分析,最后使用分子对接对网络药理学内容进行初步验证。结果:共鉴定出黑根化学成分78个,筛选后活性成分50个,237个潜在作用靶点与类风湿性关节炎相关,包括STAT3、AKT1、EGFR等关键靶点。通路富集分析PI3K-Akt通路、JAK-STAT等信号通路可能是黑根发挥抗类风湿性关节炎的主要途径。通过分子对接技术得出主要活性成分(异绿原酸B、异绿原酸C)与关键靶点有较好结合力。结论:研究初步表明黑根通过多成分、多靶点、多途径治疗类风湿性关节炎的作用,为后续黑根物质基础研究提供了理论依据。
