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上调Twist基因对人结肠癌SW480细胞增殖凋亡及侵袭能力的影响 被引量：4
1
作者 张娟 王士杰 +3 位作者 王贵英 于跃明 史健伟 惠捷 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期540-546,共7页
目的:上调人结肠癌SW480细胞株中Twist基因的表达,观察其对细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法:将高表达Twist基因的质粒和空载质粒稳定转染SW480细胞,分别命名为转染组和对照组,MTT法、细胞划痕实验和Matrige1侵袭实验分别检测肿瘤... 目的:上调人结肠癌SW480细胞株中Twist基因的表达,观察其对细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法:将高表达Twist基因的质粒和空载质粒稳定转染SW480细胞,分别命名为转染组和对照组,MTT法、细胞划痕实验和Matrige1侵袭实验分别检测肿瘤细胞体外增殖、迁移及侵袭能力的变化。FCM检测细胞周期及凋亡情况。将肿瘤细胞接种至裸鼠皮下,对比转染前后肿瘤细胞的成瘤情况。结果:从第4天开始,转染组SW480细胞生长速度明显高于对照组(P<0.05):转染组SW480细胞的增殖指数(PI)和S期细胞比例[(61.279±1.709)%,(33.171±3.154)%]均高于对照组[(26.142±1.518)%,(14.112±2.137)%](P<0.05);转染组的细胞凋亡率(6.83I±1.624)%低于对照组(12.223±1.733)%(P<0.05);划痕24 h及48 h时后转染组细胞迁移率[(40.06±5.56)%,(75.77±8.06)%]均高于对照组[(25.25±2.65)%,(35.37±6.79)%](P<0.05);Matrige1侵袭实验结果显示转染组侵袭细胞个数明显高于对照组(p<0.05);将两组细胞分别接种裸鼠,16 d左右可见肿瘤结节,转染组肿瘤体积及瘤重均大于对照组(P<0.05)。结论:上调Twist基因可提高SW480细胞体外增殖、迁移和侵袭能力,降低SW480细胞凋亡率。 展开更多
关键词 结肠癌细胞 twist基因 增殖 侵袭 凋亡
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子宫颈上皮内瘤变和子宫颈鳞癌中Twist基因蛋白及Skp2表达 被引量：5
2
作者 何春年 张鸿瑞 +3 位作者 徐翠清 张秀智 赵焕芬 徐明堂 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期468-472,共5页
目的研究Twist和Skp2在子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及子宫颈鳞癌(squamous cell carci-noma,SCC)中的表达及其在癌变中的作用。方法 SP法检测Twist和Skp2在CIN和SCC中的表达,并与正常子宫颈鳞状上皮组对... 目的研究Twist和Skp2在子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及子宫颈鳞癌(squamous cell carci-noma,SCC)中的表达及其在癌变中的作用。方法 SP法检测Twist和Skp2在CIN和SCC中的表达,并与正常子宫颈鳞状上皮组对照。结果正常组、CIN1级组、CIN 2级组、CIN 3级组及SCC组的Twist和Skp2表达阳性率分别为:0、10%、42.3%、48.3%、52.5%,23.1%、46.5%、73.1%、93.1%和92.5%。Twist和Skp2在正常组与CIN组及SCC组间表达差异有显著性(P<0.005)。CIN1级组与CIN2级组间表达差异有显著性(P<0.005)。结论 Twist和Skp2随着CIN从轻到重至SCC,表达逐渐增强,表明两者在SCC癌变过程中起到协同性作用,共同参与CIN的进展及SCC癌变机制。检测到Twist和Skp2表达增强有助于SCC发生的判断及CIN1级与CIN2级分级的临床病理诊断。 展开更多
关键词 子宫颈鳞状细胞肿瘤 子宫颈上皮内瘤变 twist基因 S期激酶相关蛋白2
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Twist基因在卵巢癌中的研究进展 被引量：3
3
作者 洪莉 杨将 邢辉 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第32期4019-4022,共4页
卵巢癌是继子宫内膜癌和宫颈癌发病率居第三位的妇科恶性肿瘤,其病死率居妇科恶性肿瘤之首。碱性螺旋-环-螺旋(b HLH)转录因子家族成员Twist基因在卵巢癌组织中高度表达,其异常表达在卵巢癌的发生、发展及恶化过程中发挥着重要作用。对T... 卵巢癌是继子宫内膜癌和宫颈癌发病率居第三位的妇科恶性肿瘤,其病死率居妇科恶性肿瘤之首。碱性螺旋-环-螺旋(b HLH)转录因子家族成员Twist基因在卵巢癌组织中高度表达,其异常表达在卵巢癌的发生、发展及恶化过程中发挥着重要作用。对Twist基因沉默处理后,卵巢癌细胞的增殖及迁移将受到明显的影响。本文通过结合近年来国内外的研究成果,简述了Twist基因在卵巢癌发生、发展中最新的作用机制。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 twist基因 细胞增殖 综述
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肝癌细胞中Twist基因表达变化与WNT信号传导通路的关系 被引量：3
4
作者 刘瑞鸣 徐静 马晓飞 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第6期16-17,共2页
目的探讨肝癌细胞中Twist基因表达与WNT信号传导通路激活的关系。方法将0.05mol/L氯化锂加入人肝癌SMMC7721细胞中培养2h激活WNT通路,然后分别培养6、12、24h,分别为A1、A2、A3组;将0.1mol/L氯化锂加入人肝癌SMMC7721细胞中培养2h激活WN... 目的探讨肝癌细胞中Twist基因表达与WNT信号传导通路激活的关系。方法将0.05mol/L氯化锂加入人肝癌SMMC7721细胞中培养2h激活WNT通路,然后分别培养6、12、24h,分别为A1、A2、A3组;将0.1mol/L氯化锂加入人肝癌SMMC7721细胞中培养2h激活WNT通路,然后分别培养6、12、24h,分别为B1、B2、B3组;另设空白对照组。用RT-PCR及荧光定量PCR法检测各组细胞的TwistmRNA。结果RT-PCR法测得TwistmRNA在A1、A2、A3组分别为0.38±0.05、0.60±0.08、0.69±0.06,B1、B2、B3组分别为0.56±0.05、0.59±0.06、0.69±0.04,以上各组细胞TwistmRNA与对照组的0.18±0.03相比,P均<0.05。荧光定量法测得TwistmRNA在A1、A2、A3组分别为0.43±0.01、0.56±0.01、0.67±0.01,B1、B2、B3组分别为0.52±0.01、0.58±0.00、0.65±0.00,以上各组细胞TwistmRNA与对照组的0.21±0.00相比,P均<0.05。结论肝癌细胞中Twist基因的表达程度与WNT通路的激活有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞癌 twist基因 WNT通路 聚合酶链反应
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RNA干扰Twist基因对人膀胱癌T24细胞化疗敏感性的影响 被引量：2
5
作者 沈彬 管旌旌 +1 位作者 胡敬海 王春喜 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期952-953,共2页
目的构建转录因子Twist基因的短发卡状RNA(shRNA)质粒,转染人膀胱癌T24细胞株后检测T24细胞对羟基喜树碱(HCPT)的敏感性。方法体外构建Twist基因shRNA的表达质粒,脂质体法介导将其转染入T24细胞。实验分为正常对照组、非特异性转染组和... 目的构建转录因子Twist基因的短发卡状RNA(shRNA)质粒,转染人膀胱癌T24细胞株后检测T24细胞对羟基喜树碱(HCPT)的敏感性。方法体外构建Twist基因shRNA的表达质粒,脂质体法介导将其转染入T24细胞。实验分为正常对照组、非特异性转染组和特异性转染组。采用RT-PCR法和Western印迹法检测转染后Twist mRNA及蛋白的表达。使用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)及流式细胞术(FCM)测定Twist shRNA转染T24细胞后细胞对HCPT敏感性的改变。结果Twist shRNA转染组细胞Twist mRNA和蛋白的表达与其他两组相比明显下调(P<0.05);HCPT敏感性与正常对照组相比明显提高(P<0.05)。结论靶向Twist基因的序列特异性shRNA可增强T24细胞对HCPT的敏感性。 展开更多
关键词 RNA干扰 羟基喜树碱 短发卡样RNA twist基因
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Twist基因沉默对人胃癌SGC7901细胞凋亡的影响 被引量：2
6
作者 刘洪义 邢金 所剑 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第16期3464-3466,共3页
目的探讨Twist基因沉默对人胃癌SGC7901细胞凋亡的影响。方法以本课题组稳定转染pGenesil-Twist质粒的人胃癌SGC7901细胞作为研究对象,实验分为三组:对照组、空载体组、Twist基因沉默组。通过倒置显微镜和透射电镜观察Twist基因沉默对SG... 目的探讨Twist基因沉默对人胃癌SGC7901细胞凋亡的影响。方法以本课题组稳定转染pGenesil-Twist质粒的人胃癌SGC7901细胞作为研究对象,实验分为三组:对照组、空载体组、Twist基因沉默组。通过倒置显微镜和透射电镜观察Twist基因沉默对SGC7901细胞形态的影响;通过Rhodamine123染色后流式细胞仪检测各组细胞线粒体跨膜电位的变化;采用DAPI染色和TUNEL法观察Twist基因沉默对SGC7901细胞凋亡情况的影响。结果与对照和空载体组相比,倒置显微镜下观察显示基因沉默组细胞生长缓慢,细胞形态发生明显改变,有较多细胞呈圆形,细胞异型性小;透射电镜观察显示Twist基因沉默组细胞体积变小,微绒毛减少,细胞突触变短且增多,空泡增多,核质比例降低,异染色质团块状分布,核周间隙更大;Rhodamine123染色后流式细胞仪检测结果显示Twist基因沉默组阴性细胞数增高;DAPI染色结果显示细胞核边缘不规则,染色质凝集,着色较重,核固缩,核小体碎片增加;TUNEL法检测显示Twist基因沉默组可见明显细胞核棕黄色染色的阳性细胞。结论 Twist基因沉默促进SGC7901细胞凋亡,提示Twist在胃癌恶性进展中起重要作用,Twist可能成为肿瘤基因治疗的靶点。 展开更多
关键词 胃癌 RNAI twist基因 凋亡
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RNA干扰Twist基因真核表达载体的构建与筛选 被引量：1
7
作者 沈彬 胡敬海 +1 位作者 管旌旌 王春喜 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期59-63,195,共6页
目的:构建编码Twist mRNA的短发卡样RNA(shRNA)质粒表达载体,并筛选出基因沉默效果最明显的shRNA质粒表达载体。方法:以Twist mRNA编码区中第777位和第845位序列作为RNA干扰靶点,分别构建2个shRNA质粒表达载体和1个阴性对照质粒表达载体... 目的:构建编码Twist mRNA的短发卡样RNA(shRNA)质粒表达载体,并筛选出基因沉默效果最明显的shRNA质粒表达载体。方法:以Twist mRNA编码区中第777位和第845位序列作为RNA干扰靶点,分别构建2个shRNA质粒表达载体和1个阴性对照质粒表达载体,构建后通过PCR酶切电泳和质粒测序进行鉴定。经鉴定后分别转染稳定表达Twist基因的膀胱癌T24细胞,RT-PCR和Western blotting分别从mRNA和蛋白质水平检测抑制效果。结果:构建的质粒表达载体PCR鉴定均可扩增出400 bp的目的条带,插入片段测序结果与合成的shRNA结果一致。靶向Twist基因的shRNA对膀胱癌T24细胞中Twist基因mRNA抑制率为90%,蛋白质抑制率为86%,两种干扰质粒中shRNA1干扰效果最明显。结论:成功构建了靶向Twist基因的shRNA质粒表达载体,其中抑制效果最为明显的shRNA质粒表达载体为pGenesil-shRNA1质粒。 展开更多
关键词 RNA干扰 质粒 表达载体 短发卡样RNA twist基因
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shRNA Twist基因对人绒毛膜癌细胞JEG-3增殖、侵袭和凋亡的影响 被引量：3
8
作者 谢环 田洁 黄娅芬 《昆明医科大学学报》 CAS 2019年第5期18-23,共6页
目的 观察shRNA Twist基因对人绒毛膜癌细胞JEG-3增殖、侵袭和凋亡的影响。方法 以人源性绒毛膜癌细胞为种子细胞,构建shRNA-Twist小干扰RNA载体,通过慢病毒转染绒毛膜癌细胞,根据转染慢病毒质粒的不同分成3组,即空白对照组、空白质粒组... 目的 观察shRNA Twist基因对人绒毛膜癌细胞JEG-3增殖、侵袭和凋亡的影响。方法 以人源性绒毛膜癌细胞为种子细胞,构建shRNA-Twist小干扰RNA载体,通过慢病毒转染绒毛膜癌细胞,根据转染慢病毒质粒的不同分成3组,即空白对照组、空白质粒组和shRNA干扰组。RT-qPCR和Western Blot检测Twist和凋亡蛋白caspase-3和caspase-9的表达。Transwell法检测人绒毛膜癌细胞侵袭能力,CCK-8法检测人绒毛膜癌细胞增殖能力,AV-PI试剂盒检测人绒毛膜癌细胞凋亡水平。结果 RT-PCR结果显示,空白质粒组的Twist的mRNA的相对表达量(与空白对照组相比)为(1.011±0.125);shRNA干扰组的Twist的mRNA的相对表达量(与空白对照组相比)为(0.377±0.021),高于空白质粒组的mRNA表达水平(P < 0.05)。Caspase-3和Caspase-9的mRNA含量具有同样的趋势。Western-Blot结果显示,空白质粒组和shRNA干扰组的的Twist蛋白相对表达量(与空白对照组相比)分别为(7.211±0.934)和(0.213±0.091),2组比较差异具有统计学意义(P < 0.05)。Caspase-3和Caspase-9的蛋白含量具有同样的趋势。空白对照组、空白质粒组和shRNA干扰组的Transwell结果比较具有明显的统计学差异(F = 23.983,P < 0.05)。shRNA干扰组与空白质粒组的Transwell结果比较具有明显的统计学差异(q =10.322,P < 0.05)。CCK-8和AV-PI检测结果具有同样的趋势。结论 shRNA-Twist可以明显的抑制绒毛膜癌细胞的增殖和侵袭,促进细胞凋亡,可以作为绒毛膜癌新的治疗靶基因。 展开更多
关键词 twist基因 绒毛膜癌 细胞增殖 细胞侵袭 细胞凋亡
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TWIST基因甲基化在肿瘤发生发展中的研究进展 被引量：1
9
作者 高峰 薛明明 尹化斌 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期486-490,共5页
TWIST基因属于碱性螺旋-环-螺旋(bosic Helix-Loop-Helix farily,bHLH)转录因子家族成员之一,在多种种属的基因组中高度保守并调控胚胎发育。该基因的功能包括参与上皮-间质转变(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、抗细胞凋亡、... TWIST基因属于碱性螺旋-环-螺旋(bosic Helix-Loop-Helix farily,bHLH)转录因子家族成员之一,在多种种属的基因组中高度保守并调控胚胎发育。该基因的功能包括参与上皮-间质转变(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、抗细胞凋亡、促进肿瘤血管生成和导致染色体不稳定等,但是其在肿瘤发生发展中的调节机制仍不清楚。近年来,大量文献报道证实了表观遗传学为肿瘤发病重要机制之一,其中TWIST基因启动子的高甲基化与肿瘤的发生、进展以及临床病理特征都有关系,本文就此作一综述。 展开更多
关键词 twist基因 甲基化 肿瘤
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Twist基因在恶性肿瘤中的研究与进展 被引量：5
10
作者 朱皓皞 于晓红 《实用癌症杂志》 2012年第2期215-217,共3页
研究表明,人类恶性肿瘤的发生发展是细胞调控的癌基因、抑癌基因相互作用的结果,多基因变化导致细胞周期紊乱,从而引起细胞失控性生长。因此,近年来对于癌基因和抑癌基因的研究成为讨论肿瘤发生发展的热点。Twist就是近年来倍受关注的... 研究表明,人类恶性肿瘤的发生发展是细胞调控的癌基因、抑癌基因相互作用的结果,多基因变化导致细胞周期紊乱,从而引起细胞失控性生长。因此,近年来对于癌基因和抑癌基因的研究成为讨论肿瘤发生发展的热点。Twist就是近年来倍受关注的癌基因之一,因其参与肿瘤细胞的上皮-间质转变（epithelial-mesenchymal transition,EMT）过程,使肿瘤细胞能通过适应周围基质环境从而获得新的上皮特性,形成转移病灶, 展开更多
关键词 twist基因 肿瘤 上皮-间质转变
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胃癌组织Twist基因的荧光实时定量PCR检测 被引量：4
11
作者 曹笠 《中国现代医生》 2008年第33期20-21,36,共3页
目的探讨Twist基因在人胃癌组织、癌旁组织、胃癌转移灶组织中表达及临床意义。方法应用Trizol法提取总RNA,以总RNA为模板经逆转录合成cDNA,用实时荧光定量PCR的方法检测8例正常胃粘膜,27例胃癌原发灶,19例胃癌转移灶组织中TwistmRNA的... 目的探讨Twist基因在人胃癌组织、癌旁组织、胃癌转移灶组织中表达及临床意义。方法应用Trizol法提取总RNA,以总RNA为模板经逆转录合成cDNA,用实时荧光定量PCR的方法检测8例正常胃粘膜,27例胃癌原发灶,19例胃癌转移灶组织中TwistmRNA的表达情况并分析其与临床病理指标的关系。结果荧光实时定量PCR扩增结果显示,Twist基因在正常胃粘膜组织中表达量很低,而在原发性胃癌组、转移性胃癌组中均有较高的表达,原发性胃癌组织及腹膜转移组织中的表达明显高于正常胃粘膜组织(P<0.05);Twist基因在淋巴转移组织中的表达与原发组中的表达差异显著(P<0.05)。结论Twist基因在胃癌中过度表达可能促进胃癌的发生与发展,并与胃癌转移密切相关,又可能成为预测胃癌转移潜能的分子基础。 展开更多
关键词 胃癌 twist基因 实时荧光定量PCR
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Twist基因RT-PCR检测方法的建立 被引量：2
12
作者 刘晓燕 王丽 +2 位作者 张志霞 李娟 何涛 《西南军医》 2010年第4期625-627,共3页
目的建立Twist基因的逆转录聚合酶链式反应(Reverse tran scription polymerase chain reaction,RT-PCR)条件,为探讨Twist功能学研究奠定方法学基础。方法根据Genebank中的Twist(NM_000474)基因序列设计引物,以GAPDH为内参照基因(NM_002... 目的建立Twist基因的逆转录聚合酶链式反应(Reverse tran scription polymerase chain reaction,RT-PCR)条件,为探讨Twist功能学研究奠定方法学基础。方法根据Genebank中的Twist(NM_000474)基因序列设计引物,以GAPDH为内参照基因(NM_002046),用RNAsimple Total RNAkit提取培养的肾癌细胞总RNA,按照Quantscript RTkit Quant cDNA第一链合成试剂盒说明书合成cDNA,PCR扩增操作按照TAKARA公司的LA Taq with GC Buffer PCR试剂盒说明书,设置PCR反应体系并优化扩增反应条件,琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果。结果采用TAKARA的LA Taq with GC buffer PCR试剂盒并通过PCR扩增条件的优化,成功建立了Twist基因的RT-PCR方法,在肾癌细胞系786-0中扩增出大小为150bp左右清晰的目的条带。结论成功摸索出了具有复杂二级结构、富含GC的Twist基因的RT-PCR扩增方法,并证明在肾癌细胞系786-0中存在Twist基因的特异性表达。 展开更多
关键词 肿瘤 twist基因 RT-PCR
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RNA干扰沉默Twist基因对人膀胱癌T24细胞增殖的影响
13
作者 沈彬 管旌旌 +2 位作者 姚子明 胡敬海 王春喜 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期155-157,共3页
目的研究RNA干扰沉默Twist基因对人膀胱癌T24细胞周期和增殖的影响。方法体外构建Twist基因的shRNA表达载体,Li-pofectamin 2000介导转染膀胱癌T24细胞,采用RT-PCR和Western印迹方法检测特异性shRNA对Twist基因沉默效果,转染后采用MTT... 目的研究RNA干扰沉默Twist基因对人膀胱癌T24细胞周期和增殖的影响。方法体外构建Twist基因的shRNA表达载体,Li-pofectamin 2000介导转染膀胱癌T24细胞,采用RT-PCR和Western印迹方法检测特异性shRNA对Twist基因沉默效果,转染后采用MTT法检测shR-NA对细胞增殖的作用;应用PI单染流式细胞术分析细胞周期的改变。结果Twist基因的shRNA表达载体有效下调Twist基因表达(P<0.05)。与对照组比较,细胞增殖明显抑制(P<0.05);同时引起细胞G1期阻滞,RNA干扰后,G1期细胞从(48.17±1.62)%增加到(74.34±3.24)%(P<0.05),S期细胞从(33.71±3.54)%减少到(11.58±1.02)%(P<0.05)。结论Twist-shRNA表达载体可以特异高效地抑制膀胱癌T24细胞Twist基因的表达,从而调控肿瘤细胞周期,抑制肿瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 twist基因 RNA干扰 细胞增殖 细胞周期
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TWIST基因和蛋白与宫颈癌发生发展关系的研究
14
作者 朱志平 张一鸣 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1192-1195,共4页
目的:检测TWIST基因在宫颈癌组织和宫颈正常组织中的表达,探讨其与宫颈癌发生、发展的相关性及在宫颈癌诊疗中的意义。方法:收集56例宫颈癌组织和35例宫颈正常组织,用实时定量PCR检测TWIST mRNA的表达;用Western blot检测TWIST蛋白的表... 目的:检测TWIST基因在宫颈癌组织和宫颈正常组织中的表达,探讨其与宫颈癌发生、发展的相关性及在宫颈癌诊疗中的意义。方法:收集56例宫颈癌组织和35例宫颈正常组织,用实时定量PCR检测TWIST mRNA的表达;用Western blot检测TWIST蛋白的表达,并分析TWIST mRNA在宫颈癌中的表达水平与临床病理因素及高危型HPV病毒载量相关性。结果:实时定量PCR结果显示宫颈癌组织中TWIST mRNA表达高于宫颈正常组织,差异具有统计学意义(P<0.01);Western blot在蛋白质水平上证实了这一点(P<0.01)。宫颈癌组织中TWIST的表达与淋巴结转移相关(P=0.022),但与年龄、FIGO分期、肿瘤大小、病理类型、肿瘤分化程度无关(P均>0.05),Logistic回归分析显示,高水平的TWIST mRNA表达是淋巴结转移的独立危险因子(P<0.05)。而TWIST基因的相对表达水平与高危型HPV病毒载量无相关性(r=0.205,P>0.05)。结论:宫颈癌组织中TWIST的表达上调,且与是否有淋巴结转移相关,TWIST的表达可能对宫颈癌的发生、发展及转移有重要作用。 展开更多
关键词 twist基因 宫颈癌 人乳头瘤病毒
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Twist基因真核表达载体的构建和表达检测
15
作者 冯美燕 王宽 耿敬姝 《中国肿瘤》 CAS 2008年第7期603-605,共3页
[目的]构建Twist基因读码框架至真核表达载体pCDNA3.1,为进一步研究Twist蛋白的功能做材料准备。[方法]采用RT-PCR方法,以正常人子宫体组织cDNA为模板,扩增Twist基因全长读码框架,并构建到真核表达载体pCDNA3.1中。[结果]经过克隆测序... [目的]构建Twist基因读码框架至真核表达载体pCDNA3.1,为进一步研究Twist蛋白的功能做材料准备。[方法]采用RT-PCR方法,以正常人子宫体组织cDNA为模板,扩增Twist基因全长读码框架,并构建到真核表达载体pCDNA3.1中。[结果]经过克隆测序结果证实,成功将Twist基因读码框架插入真核表达载体pCDNA3.1的相应位置;将pCDNA-Twist载体转染细胞系后,发现Twist蛋白在细胞中得到高水平的表达。[结论]Twist真核表达载体的成功构建,为深入研究Twist蛋白对肿瘤转移的作用提供了理想的材料。 展开更多
关键词 twist基因 载体 真核表达
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乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-435S中Twist基因表达与紫杉醇耐药的实验研究
16
作者 张志霞 何涛 +1 位作者 董衍东 王丽 《西南军医》 2013年第6期662-664,共3页
目的探讨转移能力不同的两种人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-435S中Twist基因表达差异,及其与紫杉醇药物敏感性差异的相关性。方法用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,检测两种细胞中Twist基因的表达情况,MTT法检测两种细胞对紫杉醇的敏... 目的探讨转移能力不同的两种人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-435S中Twist基因表达差异,及其与紫杉醇药物敏感性差异的相关性。方法用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,检测两种细胞中Twist基因的表达情况,MTT法检测两种细胞对紫杉醇的敏感性。结果 (1)RT-PCR结果显示:两种细胞中均有Twist基因表达,在MDA-MB-435S细胞中的表达高于MCF-7(P<0.05);(2)紫杉醇对MDA-MB-435S细胞的抑制作用弱于对MCF-7细胞的抑制作用(P<0.05)。结论 Twist基因在转移能力强的MDA-MB-435S细胞中表达高于转移能力中等的MCF-7细胞,同时高转移的MDA-MB-435S细胞对紫杉醇的敏感性弱于中等转移性的MCF-7细胞,且更易出现耐药。 展开更多
关键词 twist基因 MCF-7 MDA—MB-435S 耐药性 紫杉醇
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Twist基因介导肿瘤细胞耐药的研究进展 被引量：4
17
作者 张煦 孙晓红 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期561-564,共4页
Twist属于高度保守的碱性螺旋-环-螺旋(basichelix-loop-helix,bHLH)结构的转录因子家族,在动物和人的胚胎发育、诱导细胞迁移以及组织塑形中起重要作用。Twist基因具有癌基因特征,在多种恶性肿瘤中高表达,不仅参与肿瘤的发生、侵袭和转... Twist属于高度保守的碱性螺旋-环-螺旋(basichelix-loop-helix,bHLH)结构的转录因子家族,在动物和人的胚胎发育、诱导细胞迁移以及组织塑形中起重要作用。Twist基因具有癌基因特征,在多种恶性肿瘤中高表达,不仅参与肿瘤的发生、侵袭和转移,而且与肿瘤细胞产生耐药性密切相关。Twist基因可以通过抗细胞凋亡、干扰抗微管类药物、诱发上皮-间质转型、诱导产生肿瘤干细胞样特性及影响肿瘤微环境等促使肿瘤细胞耐药,因此有望成为逆转肿瘤耐药的新靶点。 展开更多
关键词 twist基因 肿瘤 耐药 机制
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Twist基因在口腔鳞状细胞癌中的研究进展 被引量：1
18
作者 梁叶 王臻 谢思明 《海南医学》 CAS 2017年第4期630-633,共4页
Twist是一个进化上高度保守的II类碱性螺旋-环-螺旋(b HLH)转录因子,它影响细胞的凋亡、参与上皮-间质转转化(EMT)、对肿瘤的侵袭转移和耐药有重要的影响。口腔鳞状细胞癌(OSCC)是最常见的口腔恶性肿瘤,术后复发和转移导致口腔鳞状细胞... Twist是一个进化上高度保守的II类碱性螺旋-环-螺旋(b HLH)转录因子,它影响细胞的凋亡、参与上皮-间质转转化(EMT)、对肿瘤的侵袭转移和耐药有重要的影响。口腔鳞状细胞癌(OSCC)是最常见的口腔恶性肿瘤,术后复发和转移导致口腔鳞状细胞癌患者预后较差。根据Twist基因在口腔鳞状细胞癌发生发展过程中的作用,从肿瘤干细胞、上皮间质转化、肿瘤耐药和肿瘤的侵袭转移等方面作一综述,为今后口腔鳞状细胞癌的诊断、治疗与科学研究提供新的方向与指导。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 twist基因 肿瘤干细胞 侵袭 转移
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Twist基因在肝细胞癌中的表达水平及其对细胞增殖、侵袭和上皮间质转化的影响 被引量：2
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作者 李广洲 王栓铎 陈喜全 《中国现代普通外科进展》 CAS 2023年第4期267-272,共6页
目的:检测肝细胞癌(HCC)中Twist的表达水平,并分析其对HCC细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:qRT-PCR检测HCC组织和细胞中Twist mRNA相对表达水平,Western blotting实验检测HCC细胞中Twist蛋白表达水平。si-Twist质粒转染... 目的:检测肝细胞癌(HCC)中Twist的表达水平,并分析其对HCC细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:qRT-PCR检测HCC组织和细胞中Twist mRNA相对表达水平,Western blotting实验检测HCC细胞中Twist蛋白表达水平。si-Twist质粒转染至HepG2细胞中为实验组,同时设置阴性对照组(转染si-NC质粒)和对照组(无转染),qRT-PCR和Western blotting实验检测转染效率。MTT和集落形成实验、Transwell实验、Western blot实验分别检测Twist敲低后对细胞增殖、侵袭和EMT相关蛋白表达的影响。结果:HCC组织和细胞中Twist mRNA和蛋白表达水平增加;实验组Twist的2^(-ΔΔCt)值为0.32±0.08,明显低于对照组(1.00±0.10)和阴性对照组(1.02±0.09),差异有统计学意义(P<0.001)。实验组Twist蛋白灰度值为0.24±0.11,明显低于对照组(1.00±0.07)和阴性对照组(0.98±0.12),差异有统计学意义(P<0.001);实验组72 h的OD值为0.72±0.06,显著低于对照组(1.20±0.10)和阴性对照组(1.27±0.08),差异有统计学意义(P<0.001)。实验组形成的集落细胞数16.33±2.52显著低于对照组(44.67±4.51)和阴性对照组(47.12±4.05),差异有统计学意义(P<0.001);实验组发生侵袭的细胞数为54.33±9.50,低于对照组(102.14±12.50)和阴性对照组(105.62±14.35),差异有统计学意义(P<0.001);与对照组和阴性对照组相比,实验组E-钙黏着蛋白(E-cadherin)表达水平增加,波形蛋白(Vimentin)和N-钙黏着蛋白(N-cadherin)的表达水平降低。结论:Twist在肝癌组织中的表达水平增加,敲低其表达水平后可抑制细胞的增殖、侵袭和EMT。 展开更多
关键词 肝肿瘤 twist基因 增殖 侵袭 上皮间质转化
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Twist基因对结肠癌细胞系侵袭转移能力影响的体外研究 被引量：2
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作者 王多伟 Bikash Rai +2 位作者 王金淼 戚峰 刘彤 《天津医科大学学报》 2017年第6期510-515,共6页
目的:探讨Twist基因在SW480、HCT116和HT29结肠癌细胞系上皮-间质转化(EMT)中的作用,明确其对恶性肿瘤侵袭转移能力的影响。方法:利用重组质粒p Tracer-CMV/BSD-Twist和p Genesil1.2-Twist-shRNA转染SW480、HT29和HCT116;流式细胞术检... 目的:探讨Twist基因在SW480、HCT116和HT29结肠癌细胞系上皮-间质转化(EMT)中的作用,明确其对恶性肿瘤侵袭转移能力的影响。方法:利用重组质粒p Tracer-CMV/BSD-Twist和p Genesil1.2-Twist-shRNA转染SW480、HT29和HCT116;流式细胞术检测转染率;Real time-PCR和Western blot检测Twist、E-cadherin和Vimentin转录及蛋白表达水平;Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果:转染高表达Twist质粒后,各结肠癌细胞系中Twist和Vimentin表达水平显著升高(P<0.05),E-cadherin显著降低(P<0.05);转染低表达Twist质粒后,SW480和HT29中各指标均无显著变化(P>0.05),HCT116中Twist和Vimentin表达水平显著降低(P<0.05),E-cadherin无显著变化(P>0.05);Transwell实验表明抑制HCT116细胞系Twist表达后,其侵袭和迁移能力明显减弱(P<0.01)。结论:上调Twist表达可以促进EMT;抑制HCT116中Twist表达能减弱结肠癌细胞的侵袭和转移能力。 展开更多
关键词 twist基因 上皮间质转化 结肠癌 质粒 SHRNA 侵袭和转移
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