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SIRT2调控自噬的作用机制研究现状 被引量:2
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作者 秦天苗 房晓欢 李俊杰 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期513-520,共8页
沉默调节蛋白2(Sirtuin 2,SIRT2)是一种能够调节蛋白质乙酰化修饰的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖性去乙酰化酶,是沉默信息调节因子(Sirtuins)家族成员之一,具有多种生物学功能,其在神经退化、细胞分化、葡萄糖和脂质代谢、肿瘤发生... 沉默调节蛋白2(Sirtuin 2,SIRT2)是一种能够调节蛋白质乙酰化修饰的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖性去乙酰化酶,是沉默信息调节因子(Sirtuins)家族成员之一,具有多种生物学功能,其在神经退化、细胞分化、葡萄糖和脂质代谢、肿瘤发生、细胞自噬等过程中均发挥调节作用。细胞自噬是一种通过清除异常蛋白或细胞器来维持机体稳态的保护机制,具有促进细胞更新和保持质量的作用。细胞自噬可分为3种主要形式,包括巨自噬、微自噬和分子伴侣介导的自噬,均通过溶酶体来对受损的细胞器、错误折叠和聚集的蛋白质及其他大分子物质进行降解或回收。其中,巨自噬研究最多,分为非选择性巨自噬(即常说的自噬)和选择性巨自噬。线粒体自噬是真核细胞中选择性去除或降解受损和多余线粒体的主要途径,也是SIRT2在细胞中主要调控的一种选择性巨自噬。作者主要综述了SIRT2在自噬及线粒体自噬上的调控作用及机制,以期为后续更深入地研究SIRT2在哺乳动物生理上的更多调控功能及其在各类疾病上的治疗作用提供参考和方向。 展开更多
关键词 沉默调节蛋白2(sirt2) 自噬 线粒体自噬 调控机制
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2型糖尿病患者SIRT2基因多态性与肾损伤的相关性
2
作者 吴苏 易斌 +3 位作者 戴雅丽 廖祥玉 彭娟 李爱梅 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1005-1014,共10页
目的:遗传因素在糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)发病中发挥重要作用。研究表明SIRT2基因多态性与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)发病相关,但其在DKD中的作用尚不清楚。本研究旨在探讨SIRT2基因多态性与T2DM患者发... 目的:遗传因素在糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)发病中发挥重要作用。研究表明SIRT2基因多态性与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)发病相关,但其在DKD中的作用尚不清楚。本研究旨在探讨SIRT2基因多态性与T2DM患者发生肾损伤风险的相关性,为DKD的发病机制的研究提供新思路。方法:纳入2019至2021年在中南大学湘雅三医院就诊的T2DM患者205例,根据是否有肾损伤将其分为DKD组(n=100)和DM组(n=105),同时选取100名健康志愿者作为NC组。收集研究对象的临床资料,计算估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR);提取基因组DNA,采用Sanger双脱氧末端终止法进行SIRT2基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点(rs11879029、rs11879010和rs2241703)基因型的检测。比较3组间基因型/等位基因频率。采用Logistic回归分析SIRT2基因SNP位点基因型与2型糖尿病患者发生DKD风险的相关性。根据SIRT2基因rs11879029/rs11879010的基因型,分别将T2DM患者分为GG1/GG2组、GA1/GA2组、AA1/AA2组,比较不同基因型T2DM患者的临床资料。进行连锁不平衡分析和单体型分析。结果:与NC组和DM组比较,DKD组rs11879029、rs11879010位点的基因型分布和等位基因频率差异均有统计学意义(均P<0.05)。3组间rs2241703位点的基因型和等位基因频率差异均无统计学意义(均P>0.05)。在校正年龄、性别、收缩压、糖尿病病程、糖化血红蛋白、血清白蛋白后,rs11879029、rs11879010位点基因型仍与T2DM患者发生DKD的风险显著相关,rs11879029位点AA基因型患者发生DKD风险是GG基因型的6.27倍,rs11879010位点AA基因型患者发生DKD风险是GG基因型的4.72倍。AA1/AA2组eGFR水平均显著低于GG1/GG2组(均P<0.05)。连锁不平衡分析显示SIRT2基因rs11879029与rs11879010位点存在完全连锁不平衡,rs11879029、rs11879010分别与rs2241703之间存在较强连锁不平衡。单体型GGG可能降低T2DM患者发生DKD的风险(OR=0.53,95%CI 0.35~0.81,P=0.003),单体型AAG可能增加患者DKD风险(OR=1.80,95%CI 1.16~2.80,P=0.008)。结论:SIRT2基因rs11879029和rs11879010位点与T2DM患者DKD易感性相关,携带A等位基因能增加DKD的患病风险,AA基因型是DKD的遗传危险因素。 展开更多
关键词 2型糖尿病 糖尿病肾病 sirt2 单核苷酸多态性 基因型 易感性
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大黄素上调Sirt2减轻脂多糖致RAW264.7细胞的氧化应激反应
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作者 龙淳 毕红英 +3 位作者 杨昌珍 王家锴 唐艳 刘旭 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第13期1785-1790,共6页
目的探究大黄素(Emodin)对脂多糖(LPS)刺激的小鼠巨噬细胞系(RAW264.7)氧化应激反应的影响及其机制。方法利用LPS、RAW264.7细胞和大黄素进行研究。设空白对照(Control)组、LPS(1μg/mL)组、LPS(1μg/mL)+大黄素(15μmol/L预处理)组,在... 目的探究大黄素(Emodin)对脂多糖(LPS)刺激的小鼠巨噬细胞系(RAW264.7)氧化应激反应的影响及其机制。方法利用LPS、RAW264.7细胞和大黄素进行研究。设空白对照(Control)组、LPS(1μg/mL)组、LPS(1μg/mL)+大黄素(15μmol/L预处理)组,在予LPS处理后6、12、18 h检测丙二醛(MDA)含量、细胞内活性氧(ROS)水平以及沉默信息调节因子2(Sirt2)表达水平等。使用Sirt2抑制剂AGK2(20μmol/L)预处理RAW264.7细胞,仅在予LPS处理后6 h检测上述指标。结果与Control组相比,各时间点LPS组RAW264.7细胞的MDA含量、ROS水平及Sirt2 mRNA水平及蛋白表达水平均增加(P<0.05)。LPS+大黄素组与LPS组相比,各时间点的RAW264.7细胞Sirt2 mRNA水平及蛋白水平均显著升高(P<0.05),ROS水平均降低(P<0.05);6、18 h的MDA含量均降低(P<0.05)。与LPS+大黄素组相比,LPS+大黄素+AGK2组Sirt2 mRNA及蛋白表达水平均降低,且MDA含量、ROS水平均增加(P<0.05)。结论LPS刺激RAW264.7细胞后氧化应激反应显著增加,大黄素可通过Sirt2在LPS刺激RAW264.7细胞模型中抑制氧化应激反应。 展开更多
关键词 脓毒症 巨噬细胞 氧化应激 大黄素 sirt2
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白藜芦醇介导SIRT2干预地塞米松诱导的骨髓间充质干细胞线粒体自噬
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作者 李雨珊 王鹏皓 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第8期731-735,共5页
目的探讨白藜芦醇(Res)通过SIRT2干预地塞米松(Dex)诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)线粒体自噬的作用机制。方法应用Res、Dex和SIRT2拮抗剂(NAM)分别作用小鼠BMSCs;使用透射电子显微镜(TEM)观察细胞线粒体自噬小体;采用Western blotting和... 目的探讨白藜芦醇(Res)通过SIRT2干预地塞米松(Dex)诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)线粒体自噬的作用机制。方法应用Res、Dex和SIRT2拮抗剂(NAM)分别作用小鼠BMSCs;使用透射电子显微镜(TEM)观察细胞线粒体自噬小体;采用Western blotting和实时PCR测定SIRT2、LC-3、Beclin-1、TOM20和Hsp60 mRNA和蛋白活性表达水平。结果Res以剂量依赖性和时间依赖的方式增强了BMSCs中SIRT2的表达;10^(-6)mol/L的Dex抑制了BMSCs细胞的增殖和活力,并且显著下调了BMSCs细胞内SIRT2 mRNA和蛋白活性的表达,而Res(10^(-6)mol/L)显著抑制了Dex对BMSCs细胞增殖及SIRT2表达的负性调控作用;Res(10^(-6)mol/L)显著增加了LC-3 mRNA和Beclin-1 mRNA的表达(P<0.05),显著降低了TOM20和Hsp60蛋白的表达水平(P<0.05)。结论Res通过介导SIRT2参与调控Dex诱导的BMSCs线粒体自噬。 展开更多
关键词 白藜芦醇 地塞米松 sirt2 线粒体自噬 骨髓间充质干细胞
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组蛋白乙酰转移酶P300和去乙酰化酶SIRT2在乳腺浸润性导管癌中的表达
5
作者 段彦林 金柔 +3 位作者 梅思思 田世维 黄玉鑫 徐澍 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第2期221-227,共7页
目的 探讨乳腺浸润性导管癌中组蛋白乙酰转移酶P300(P300)和去乙酰化酶SIRT2(SIRT2)的表达及其与临床病理特征的关系。方法 选取385例乳腺浸润性导管癌组织为病例组,36例癌旁组织为对照组,制成组织芯片,采用免疫组化En Vision二步法检... 目的 探讨乳腺浸润性导管癌中组蛋白乙酰转移酶P300(P300)和去乙酰化酶SIRT2(SIRT2)的表达及其与临床病理特征的关系。方法 选取385例乳腺浸润性导管癌组织为病例组,36例癌旁组织为对照组,制成组织芯片,采用免疫组化En Vision二步法检测两组中P300和SIRT2的蛋白表达水平并比较其表达差异;分析病例组中P300和SIRT2蛋白水平与患者临床病理特征的关系,采用Spearman法分析乳腺癌患者中P300和SIRT2蛋白的相关性;采用Kaplan-Meier和Log rank test统计学方法分析P300和SIRT2蛋白与乳腺癌患者预后的关系。结果 病例组P300蛋白低表达率高于对照组、SIRT2蛋白低表达率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);乳腺癌组织中,P300蛋白在肿瘤最大径>5 cm的低表达率高于≤5 cm、在TNM分期Ⅲ~Ⅳ期的低表达率高于Ⅰ~Ⅱ期、在有淋巴结转移的低表达率高于无淋巴结转移、在Ki67高表达的低表达率高于Ki67低表达、在LuminalB型中的低表达率高于三阴性乳腺癌(TNBC),差异有统计学意义(P<0.05);SIRT2蛋白在组织学分级3级中的低表达率低于1~2级、在肿瘤最大径>5 cm的低表达率高于≤5 cm、在Ki67高表达的低表达率低于Ki67低表达、在LuminalA型和LuminalB型中的低表达率低于HER2阳性型和TNBC,差异有统计学意义(P<0.05);P300和SIRT2蛋白的表达呈负相关(r=-1.77,P<0.001);P300蛋白低表达比高表达总体无病生存率低(P=0.046)。结论 P300和SIRT2蛋白可能与乳腺浸润性导管癌的发生、发展相关,P300蛋白低表达可能提示乳腺浸润性导管癌患者预后较差。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 免疫组化 P300蛋白 sirt2蛋白 病理特征 组蛋白乙酰化
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SIRT2、P65和Survivin在乳腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系
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作者 梅思思 田世维 +7 位作者 段彦林 金柔 秦田 周增贵 杨宇石 杨冰清 尹明英 徐澍 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第6期819-825,共7页
目的通过检测SIRT2、P65和生存素(Survivin)蛋白在乳腺癌中的表达,探讨其在乳腺癌中的相互关系及与乳腺癌的临床病理特征的关系。方法384例乳腺浸润性癌患者作为乳腺癌组,31例乳腺纤维腺病患者作为对照组,采用免疫组化EnVision二步法检... 目的通过检测SIRT2、P65和生存素(Survivin)蛋白在乳腺癌中的表达,探讨其在乳腺癌中的相互关系及与乳腺癌的临床病理特征的关系。方法384例乳腺浸润性癌患者作为乳腺癌组,31例乳腺纤维腺病患者作为对照组,采用免疫组化EnVision二步法检测两组乳腺病变组织内SIRT2、P65、Survivin的蛋白表达,同时收集乳腺癌组患者相关临床病理特征资料(年龄、分子分型、TNM分期、组织学分级、淋巴结转移及月经情况),分析SIRT2、P65及Survivin蛋白在乳腺癌组中的表达与临床病理特征的关系,分析SIRT2、P65及Survivin蛋白在乳腺癌组表达的相关性。结果乳腺癌组中SIRT2、Survivin蛋白高表达,表达率均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);SIRT2、P65及Survivin蛋白在不同分子分型、TNM分期乳腺癌患者的高表达,差异有统计学意义(P<0.05);SIRT2蛋白在LuminalB1型中的高表达率高于其他分型(P<0.05),P65蛋白在LuminalA型中的高表达率高于其他分型(P<0.05),Survivin蛋白在HER-2阳性型的高表达率高于其他分型(P<0.05);SIRT2、P65及Survivin蛋白在TNM分期中Ⅲ~Ⅳ期高表达率较Ⅰ~Ⅱ期高(P<0.05);SIRT2和P65蛋白在淋巴结转移与非转移乳腺癌患者间的高表达,差异有统计学意义(P<0.05),其中转移的高表达率较非转移高;P65和Survivin蛋白在不同组织学分级乳腺癌患者间高表达,差异有统计学意义(P<0.05),其中Ⅰ级的高表达率较Ⅱ、Ⅲ级高;乳腺癌组中SIRT2与P65和Survivin蛋白表达均呈正相关(r分别为0.371和0.310,P<0.001),P65与Survivin蛋白表达呈正相关(r=0.466,P<0.001)。结论乳腺癌组织存在SIRT2及Survivin蛋白表达上调,这可能是影响乳腺癌组织学分级及TNM分期、分子分型等临床病理特征的机制。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 sirt2蛋白 P65蛋白 生存素蛋白 细胞增殖 信号通路
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雷公藤甲素调控SIRT2/p53信号通路诱导肺癌A549细胞凋亡
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作者 宝鲁日 刘秀兰 +4 位作者 王宇 徐鸣 袁宏伟 李时荣 王静媛 《内蒙古医科大学学报》 2024年第2期113-116,共4页
目的 体外培养肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)细胞A549,采用不同浓度雷公藤甲素(triptolide,TP)干预,研究其通过SIRT2通路诱导肺癌细胞凋亡的作用机制,为临床治疗肺腺癌患者提供新的策略和思路。方法 采用qRT-PCR检测不同浓度(0 nmo... 目的 体外培养肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)细胞A549,采用不同浓度雷公藤甲素(triptolide,TP)干预,研究其通过SIRT2通路诱导肺癌细胞凋亡的作用机制,为临床治疗肺腺癌患者提供新的策略和思路。方法 采用qRT-PCR检测不同浓度(0 nmol/L、60 nmol/L、80 nmol/L)TP对A549细胞中SIRT2相关基因表达水平;不同浓度TP对A549细胞中SIRT2相关蛋白的影响,采用Western Blot法检测。结果 基因表达水平检测结果显示,TP(60 nmol/L、80 nmol/L)与对照组TP(0 nmol/L)相比,SIRT2、MDM2、P300表达下调。同时,p53基因表达上调。Western Blot蛋白水平检测结果,TP(60 nmol/L、80 nmol/L)与对照组TP(0 nmol/L)相比,SIRT2、P300、MDM2蛋白在A549细胞中表达下降,p53蛋白表达上调,p53信号通路的Bcl-2蛋白表达抑制,增加Bax蛋白表达。结论 TP能够通过调控SIRT2/p53通路相关蛋白表达抑制肺腺癌细胞增殖并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 肺腺癌 A549 sirt2 P53
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小檗碱通过SIRT2介导NF-κB乙酰化对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响
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作者 秦田 杨宇石 +5 位作者 尹明英 杨冰清 金柔 石钰 黄瑾瑾 徐澍 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第5期658-664,共7页
目的探讨小檗碱(BBR)对三阴性乳腺癌(TNBC)MDA-MB-231细胞凋亡的影响及机制。方法采用细胞增殖毒性实验(CCK-8)检测BBR对MDA-MB-231细胞增殖活性的影响、计算IC_(50),并将0、1/2 IC_(50)、IC_(50)作为后续实验浓度;采用反转录-聚合酶链... 目的探讨小檗碱(BBR)对三阴性乳腺癌(TNBC)MDA-MB-231细胞凋亡的影响及机制。方法采用细胞增殖毒性实验(CCK-8)检测BBR对MDA-MB-231细胞增殖活性的影响、计算IC_(50),并将0、1/2 IC_(50)、IC_(50)作为后续实验浓度;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测BBR作用后MDA-MB-231细胞中促凋亡蛋白BAX、B淋巴细胞瘤-2(BCL-2)的mRNA表达水平,Western blot检测细胞内沉默信息调节因子2(SIRT2)蛋白、核转录因子NF-κB P65、乙酰化P65、BAX、BCL-2的表达水平;线粒体膜电位实验检测线粒体膜电位变化。结果CCK-8检测结果发现BBR能够抑制MDA-MB-231细胞的增殖活性(P<0.05),24 h的IC_(50)为(92.282±12.297)μmol/L,48 h的IC_(50)为(54.544±6.092)μmol/L;RT-PCR检测结果显示BBR作用后,MDA-MB-231细胞中BAX mRNA表达水平增加(P<0.05),BCL-2 mRNA水平下降(P<0.05);Western blot结果显示BBR降低SIRT2蛋白表达水平(P<0.05)、升高NF-κB(P65)蛋白表达(P<0.05),作为SIRT2底物的P65乙酰化修饰水平上升(P<0.05)、BAX增加(P<0.05)、BCL-2降低(P<0.05);线粒体膜电位随BBR浓度的增加而增加(P<0.05)。结论BBR能够抑制MDA-MB-231细胞的生长,其机制可能是BBR具有潜在的赖氨酸去乙酰转移酶(KDAC)抑制剂作用,抑制SIRT2的表达,改变P65乙酰化水平,诱导MDA-MB-231细胞线粒体途径相关的凋亡发生。 展开更多
关键词 小檗碱 sirt2 NF-ΚB 三阴性乳腺癌 细胞凋亡
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SIRT1和SIRT2基因多态性及合并基因型与秦川牛肉用性状的关联分析 被引量:9
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作者 桂林生 昝林森 +1 位作者 王洪宝 王洪程 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1741-1749,共9页
旨在探讨SIRT1和SIRT2基因的多态性与秦川牛肉用性状的关系,寻找与秦川牛肉用性状相关的分子标记。本研究利用DNA测序和PCR-PFLP方法检测秦川牛SIRT1和SIRT2基因的多态位点并对其进行基因分型,同时分析了单个多态位点不同基因型及合并... 旨在探讨SIRT1和SIRT2基因的多态性与秦川牛肉用性状的关系,寻找与秦川牛肉用性状相关的分子标记。本研究利用DNA测序和PCR-PFLP方法检测秦川牛SIRT1和SIRT2基因的多态位点并对其进行基因分型,同时分析了单个多态位点不同基因型及合并基因型与秦川牛肉用性状的关联性。结果发现,在SIRT1基因3′侧翼区检测到两个多态位点(G25764A和A25846G),同样在SIRT2基因3′侧翼区也检测到两个突变位点(C19501T和C19518T)。关联性分析表明,在本试验所选取的505头秦川牛样本中,G25764A位点上AA基因型个体的眼肌面积极显著高于AB基因型(P<0.01);A25846G位点上AA基因型个体的眼肌面积与AB和BB两组基因型分别存在显著性差异(P<0.05)和极显著性差异(P<0.01);C19501T位点的不同基因型对眼肌面积和肌间脂肪影响显著(P<0.05),优良基因型为AA;C19518T的BB基因型个体背膘厚显著高于AA基因型(P<0.05)。通过合并基因型发现,AB-BB-AA-BB的各个肉用性状表现最优(P<0.01或P<0.05)。以上结果提示,SIRT1和SIRT2基因单核苷酸多态性及合并基因型对秦川牛肉用性状有一定的影响,可以作为进行秦川牛肉用性状分子标记辅助选择的候选基因。 展开更多
关键词 秦川牛 SIRT1 sirt2 肉用性状 合并基因型
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SIRT2沉默对肝癌细胞的迁移和侵袭能力的影响 被引量:8
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作者 宋春丽 任吉华 +2 位作者 冉龙宽 李宛蔚 陈娟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第24期2634-2638,共5页
目的探讨慢病毒介导的沉默信息调节因子2(silent information regulator2,SIRT2)基因沉默对肝癌细胞的迁移和侵袭能力的影响。方法 Western blot分析SIRT2在多个肝癌细胞系和永生化肝细胞中的表达,通过慢病毒介导的shRNA干扰技术靶向沉... 目的探讨慢病毒介导的沉默信息调节因子2(silent information regulator2,SIRT2)基因沉默对肝癌细胞的迁移和侵袭能力的影响。方法 Western blot分析SIRT2在多个肝癌细胞系和永生化肝细胞中的表达,通过慢病毒介导的shRNA干扰技术靶向沉默SIRT2的表达,并通过Real-time PCR和Western blot验证SIRT2基因的沉默效果。细胞迁移及侵袭实验检测SIRT2基因沉默对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响,Western blot检测上皮细胞间充质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)指标蛋白(E-cadherin、α-catenin、α-SMA、N-cadherin)的表达。结果 SIRT2在多个肝癌细胞系中蛋白表达水平明显上调;慢病毒介导的shRNA能显著抑制细胞SIRT2的表达水平(P<0.05)。SIRT2基因沉默能抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01),并使上皮属性蛋白E-cadherin、α-catenin表达水平升高,使间质属性蛋白α-SMA、N-cadherin表达水平降低。结论 SIRT2基因沉默可以通过抑制肝癌细胞上皮细胞间充质转化从而抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 sirt2 肝癌 迁移 侵袭
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sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞衰老的抑制作用 被引量:4
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作者 马珊珊 崔渊博 +5 位作者 姚宁 邢衢 韩康 宋及时 张彦婷 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第1期10-14,共5页
目的:观察sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)衰老的影响。方法:扩增人sirt2 ORF序列,利用腺病毒载体构建sirt2基因高表达的重组腺病毒(p Ad-sirt2),空斑法测定病毒滴度;感染h UC-MSCs,倒置荧光显微镜下观察荧光表达情况;... 目的:观察sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)衰老的影响。方法:扩增人sirt2 ORF序列,利用腺病毒载体构建sirt2基因高表达的重组腺病毒(p Ad-sirt2),空斑法测定病毒滴度;感染h UC-MSCs,倒置荧光显微镜下观察荧光表达情况;实验分为P3组(第3代h UC-MSCs)、P15组(第15代h UC-MSCs)和感染组(用p Ad-sirt2腺病毒感染第15代h UC-MSCs),CCK-8检测细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞周期变化,β-半乳糖苷酶染色后检测阳性细胞率。结果:成功制备p Ad-sirt2重组腺病毒,病毒滴度为1.8×1011pfu/L;荧光观察证实Sirt2蛋白在h UC-MSCs中有效表达;与P15组相比,sirt2高表达可促进h UC-MSCs增殖,并将细胞周期阻滞在S期,β-半乳糖苷酶阳性细胞率降低(P均<0.05)。结论:sirt2基因高表达可促进h UC-MSCs增殖,延长细胞周期,并有效抑制h UC-MSCs的衰老。 展开更多
关键词 sirt2 腺病毒 人脐带间充质干细胞 衰老
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干扰Sirt2促进C2C12成肌细胞分化 被引量:4
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作者 吴国芳 路宏朝 +4 位作者 贾龙 宋成创 史新娥 杨公社 孙世铎 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期714-720,共7页
Sirt2是组蛋白去乙酰化酶(HDAC III)家族成员之一,对细胞周期、自噬、脂肪细胞分化、神经细胞存活等生物学过程的调节发挥重要作用.目前,Sirt2在肌肉发育过程中的研究尚未见报道.本文通过构建Sirt2慢病毒干扰载体,侵染C2C12成肌细胞,并... Sirt2是组蛋白去乙酰化酶(HDAC III)家族成员之一,对细胞周期、自噬、脂肪细胞分化、神经细胞存活等生物学过程的调节发挥重要作用.目前,Sirt2在肌肉发育过程中的研究尚未见报道.本文通过构建Sirt2慢病毒干扰载体,侵染C2C12成肌细胞,并用细胞免疫荧光化学、real-time PCR和Western印迹方法,检测其对成肌分化标志基因及相关信号通路因子的影响.结果显示,干扰质粒shRNA-663处理C2C12细胞后,Sirt2 mRNA及蛋白质表达水平与对照相比显著下调(P<0.01);C2C12细胞分化第4 d,MyoD,MyoG,MyHC mRNA及蛋白质表达均显著增加(P<0.01);PI3K,AKT,FoxO1磷酸化水平明显升高.结果表明,Sirt2可通过PI3K/AKT/FOXO1信号通路来促进成肌细胞分化,是肌生成的一个潜在调节因子. 展开更多
关键词 sirt2 成肌分化 C2C12 干扰载体
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SIRT1、SIRT2和IL-37在子宫内膜异位症患者异位内膜组织的表达 被引量:3
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作者 张红霞 任春娥 +2 位作者 王晓静 张勇 王桂丽 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第4期425-427,I0002,共4页
目的探讨Sirtuin1(SIRT1)、Sirtuin2(SIRT2)及白细胞介素-37(IL-37)在正常子宫内膜组织及异位子宫内膜组织表达的差异。方法收集正常人子宫内膜组织及异位症患者异位内膜组织各30例,采用免疫组织化学染色检测SIRT1、SIRT2及IL-37蛋白的... 目的探讨Sirtuin1(SIRT1)、Sirtuin2(SIRT2)及白细胞介素-37(IL-37)在正常子宫内膜组织及异位子宫内膜组织表达的差异。方法收集正常人子宫内膜组织及异位症患者异位内膜组织各30例,采用免疫组织化学染色检测SIRT1、SIRT2及IL-37蛋白的表达情况。结果子宫内膜异位症患者异位内膜组织中SIRT1、SIRT2、IL-37的阳性表达率分别为33.0%、20.0%、36.7%,均较正常子宫内膜组织(分别为90.0%、86.7%、86.7%)显著降低(P<0.05)。不同月经周期对子宫内膜SIRT1、SIRT2及IL-37的表达无明显影响(P>0.05)。结论子宫内膜异位症患者异位内膜中SIRT1、SIRT2及IL-37表达水平较低,提示子宫内膜异位症患者的异位内膜组织可能存在炎症反应。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 炎症 SIRT1 sirt2 IL-37 免疫组织化学
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湘村黑猪sirt2基因多态性及其与肉质性状的关联分析和组织表达研究 被引量:2
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作者 崔清明 张星 +9 位作者 彭英林 高峰 陈晨 邓缘 任慧波 胡雄贵 朱吉 罗璇 刘莹莹 左剑波 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第4期1086-1093,共8页
本研究旨在探索沉默信号调节子家族(silent information regulator 1-7,SIRT1-7)sirt2基因在湘村黑猪不同组织间的表达及其多态性与肉质性状间的关联性,以期寻找与湘村黑猪肉质性状相关的分子标记。采用PCR-RFLP方法和基因测序技术对湘... 本研究旨在探索沉默信号调节子家族(silent information regulator 1-7,SIRT1-7)sirt2基因在湘村黑猪不同组织间的表达及其多态性与肉质性状间的关联性,以期寻找与湘村黑猪肉质性状相关的分子标记。采用PCR-RFLP方法和基因测序技术对湘村黑猪sirt2基因多态位点进行分析,采用实时荧光定量PCR技术对sirt2基因在湘村黑猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、后腿肌和背最长肌8个组织中的相对表达量进行分析,利用SAS 9.4软件对sirt2基因突变位点不同基因型与肌肉色值、pH_(45 min)、pH_(24 h)、滴水损失、失水率、肌内脂肪、嫩度和眼肌面积进行关联分析。结果显示,在湘村黑猪sirt2基因第8外显子扩增片段中的240 bp处发现1处C→T碱基突变,编码氨基酸由精氨酸(Arg)变为半胱氨酸(Cys),为错义突变,并形成CC、CT和TT 3种基因型,CC基因型为优势基因型,C为优势等位基因,经χ~2检验表明该突变位点偏离哈代-温伯格平衡;该位点群体纯合度较高,有效等位基因数为1.301,多态信息含量为0.205,为低度多态(PIC<0.25)。基因多态性与肉质性状关联分析结果表明,TT基因型肉色L~*值和滴水损失显著低于CC和CT基因型(P<0.05),CC基因型失水率显著高于CT和TT基因型(P<0.05)。sirt2基因在湘村黑猪8个组织中均有表达,其中在背最长肌中相对表达量最高,与肺脏中表达量差异不显著(P>0.05),但显著高于心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胰腺和后腿肌(P<0.05),且心脏、肝脏、脾脏、肾脏和胰腺中相对表达量差异均不显著(P>0.05)。本试验结果表明,sirt2基因对湘村黑猪肉质性状的发育有一定影响,可作为影响湘村黑猪肉质性状的候选基因进行深入研究。 展开更多
关键词 湘村黑猪 sirt2基因 肉质性状 组织表达 关联分析
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文山牛SIRT2基因的克隆、表达及亚细胞定位 被引量:2
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作者 卢徐斌 绪欣 +7 位作者 王文强 李明勋 陈志 黄必志 亐开兴 张慧敏 毛永江 杨章平 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第6期1427-1436,共10页
试验旨在克隆文山牛SIRT2基因,检测SIRT2基因在文山牛不同组织中的表达谱并进行序列分析,鉴定其在293A细胞系中的亚细胞定位。参照GenBank中牛SIRT2基因序列(登录号:NM_001113531.1),在其保守区设计1对特异性引物,以cDNA为模板克隆文山... 试验旨在克隆文山牛SIRT2基因,检测SIRT2基因在文山牛不同组织中的表达谱并进行序列分析,鉴定其在293A细胞系中的亚细胞定位。参照GenBank中牛SIRT2基因序列(登录号:NM_001113531.1),在其保守区设计1对特异性引物,以cDNA为模板克隆文山牛SIRT2基因,进行同源性和系统进化分析;以GAPDH基因为内参分析SIRT2基因在文山牛心脏、肝脏、肾脏、肺脏、胃、结肠、肌肉、脂肪8个组织中的表达水平;构建pDsRed-SIRT2真核表达载体并转染到293A细胞系中表达,观察融合蛋白的亚细胞定位。结果表明,文山牛SIRT2基因开放阅读框全长1 173bp,编码390个氨基酸,分子质量为43.3ku,理论等电点为4.985;SIRT2编码蛋白整体表现为亲水性,带有负电荷。文山牛与水牛、白豚、蹄蝠等哺乳动物具有较高的同源性,在系统发育树中距离最近,但与树袋熊距离稍远,推测有袋目哺乳动物在进化过程中过早地与其他哺乳动物产生了遗传差异,在哺乳动物遗传相关的研究中需特殊考虑有袋目哺乳动物。实时荧光定量PCR结果显示,SIRT2基因在文山牛8个组织中均有表达,在肌肉和肝脏中的表达水平较高,与其他组织存在显著差异(P<0.05)。pDsRed-SIRT2融合蛋白主要定位于293A细胞的细胞质中,可能参与部分细胞器的运作及细胞内物质的运输,调节细胞稳态并在细胞繁殖过程中提供必要的能量物质。本试验结果为进一步探究牛SIRT2基因功能提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 文山牛 sirt2基因 表达谱 序列分析 亚细胞定位
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RNAi技术敲减乳腺癌MDA-MB-231细胞SIRT2基因的研究 被引量:1
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作者 张舟 邓小冲 +2 位作者 章骏 夏振华 房林 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第2期245-249,共5页
目的研究去乙酰化蛋白2(SIRT2)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移能力的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测SIRT2在乳腺癌MDA-MB-231细胞中mRNA的表达情况。使用小RNA干扰技术(siRNA)处理MDA-MB-231细胞,实验组转染靶向SI... 目的研究去乙酰化蛋白2(SIRT2)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移能力的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测SIRT2在乳腺癌MDA-MB-231细胞中mRNA的表达情况。使用小RNA干扰技术(siRNA)处理MDA-MB-231细胞,实验组转染靶向SIRT2的siRNA,对照组转染阴性对照序列,分别使用MTT比色法和平板细胞克隆形成实验检测MDA-MB-231细胞的增殖情况,使用细胞划痕实验检测MDA-MB-231细胞的迁移能力。结果转染SIRT2-siRNA的MDA-MB-231细胞SIRT2 mRNA表达低于阴性对照组(P<0.01);转染SIRT2-siRNA后,MDA-MB-231细胞的增殖能力、克隆形成能力以及迁移能力均减低(P<0.05)。结论敲减SIRT2后乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖与迁移能力受到抑制,SIRT2在三阴性乳腺癌中起着促癌基因的作用。 展开更多
关键词 sirt2 乳腺癌 MDA-MB-231细胞 增殖 迁移
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SIRT2对白细胞介素-1β诱导的兔关节软骨细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 范忠诚 王琮仁 李杨 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第18期4488-4492,共5页
目的明确沉默信息调节因子(SIRT) 2对白细胞介素(IL)-1β诱导的关节软骨细胞凋亡的影响。方法分离培养兔关节软骨细胞,以IL-1β处理细胞,Realtime PCR和Western印迹方法检测SIRT2表达。关节软骨细胞感染SIRT2过表达慢病毒,检测IL-1β诱... 目的明确沉默信息调节因子(SIRT) 2对白细胞介素(IL)-1β诱导的关节软骨细胞凋亡的影响。方法分离培养兔关节软骨细胞,以IL-1β处理细胞,Realtime PCR和Western印迹方法检测SIRT2表达。关节软骨细胞感染SIRT2过表达慢病毒,检测IL-1β诱导后细胞中SIRT2表达。MTT检测细胞增殖,流式细胞术测定凋亡,Western印迹方法分别测定线粒体和胞质中细胞色素(Cytochrome) C蛋白水平。结果 IL-1β处理细胞后的兔关节软骨细胞中SIRT2表达水平降低,感染SIRT2过表达慢病毒能够提高细胞中SIRT2的表达水平。IL-1β处理后的兔关节软骨细胞增殖活性降低,细胞凋亡增多,细胞线粒体中Cytochrome C蛋白水平降低,胞质中Cytochrome C蛋白水平升高。过表达SIRT2的关节软骨细胞经IL-1β诱导后,细胞增殖活性升高,细胞凋亡率降低,细胞线粒体中Cytochrome C蛋白水平升高,胞质中Cytochrome C蛋白水平降低,与单纯经IL-1β诱导的细胞比较,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论过表达SIRT2减少IL-1β诱导的关节软骨细胞凋亡,提高细胞增殖活性,作用机制与抑制线粒体释放Cytochrome C有关。 展开更多
关键词 关节软骨细胞 sirt2 凋亡 白细胞介素-1Β
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苏姜猪组织中SIRT2基因表达分布研究 被引量:2
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作者 王利红 张伟 陈章言 《江苏农业科学》 2019年第13期55-58,共4页
SIRT2作为第三类去乙酰化酶Sirtuins家族一员,通过催化不同的底物去乙酰化参与细胞周期调控、细胞代谢、细胞凋亡、基因沉默等许多生物学过程。在苏姜猪14个组织样中均检测到SIRT2mRNA的表达,其中在心脏、肌肉、肝脏和脂肪组织中的表达... SIRT2作为第三类去乙酰化酶Sirtuins家族一员,通过催化不同的底物去乙酰化参与细胞周期调控、细胞代谢、细胞凋亡、基因沉默等许多生物学过程。在苏姜猪14个组织样中均检测到SIRT2mRNA的表达,其中在心脏、肌肉、肝脏和脂肪组织中的表达较丰富;SIRT2免疫阳性细胞主要分布于肌细胞、黏膜层细胞和脂肪细胞中,表明SIRT2在苏姜猪组织中的表达具有广泛性,且是许多生物学过程的重要参与因素之一。 展开更多
关键词 sirt2基因 苏姜猪 组织表达谱 免疫组化
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SIRT2在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 张明华 陶兆武 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期588-593,共6页
目的探讨沉默信息调节因子2(SIRT2)蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组化法检测2011年1月至2013年12月243例NSCLC组织及120例癌旁组织中SIRT2的表达,分析其表达水平与临床病理特征的关... 目的探讨沉默信息调节因子2(SIRT2)蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组化法检测2011年1月至2013年12月243例NSCLC组织及120例癌旁组织中SIRT2的表达,分析其表达水平与临床病理特征的关系,采用Cox风险比例回归模型分析影响预后的因素。结果SIRT2在NSCLC组织中的高表达率为31.3%(76/243),低于癌旁组织的57.5%(69/120),差异有统计学意义(P<0.001)。SIRT2表达与分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤大小和TNM分期均无关(P>0.05)。SIRT2高表达患者的中位无病生存期(DFS)为37.0个月(95%CI:25.3~48.7个月),长于低表达者的31.0个月(95%CI:27.3~34.8个月),差异有统计学意义(P=0.026);SIRT2高表达患者的中位总生存期(OS)为54.0个月(95%CI:40.7~67.3个月),长于低表达者的41.0个月(95%CI:33.6~48.5个月),差异有统计学意义(P=0.023)。Cox多因素回归分析结果显示,分化程度、淋巴结转移是影响NSCLC患者DFS和OS的独立因素(P<0.05),而SIRT2表达对NSCLC患者的预后无独立预测作用(P>0.05)。结论SIRT2在NSCLC组织中低表达,其高表达与NSCLC更好的临床病理特征及预后有关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌(NSCLC) 沉默信息调节因子2(sirt2) 临床病理特征 预后
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Sirt2基因的克隆及其在HEK293中的表达
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作者 王涛 王伟 +2 位作者 徐清 关路媛 张斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期970-972,共3页
目的:克隆大鼠Sirt2基因,构建其真核表达载体并在HEK293细胞中表达。方法:利用RT-PCR从大鼠脑组织总RNA中扩增出包含Sirt2编码区的cDNA片段,产物纯化后T-A克隆连接至pMD20-T载体。以此为模板,将该基因编码区克隆入真核表达载体pcDNA3.1m... 目的:克隆大鼠Sirt2基因,构建其真核表达载体并在HEK293细胞中表达。方法:利用RT-PCR从大鼠脑组织总RNA中扩增出包含Sirt2编码区的cDNA片段,产物纯化后T-A克隆连接至pMD20-T载体。以此为模板,将该基因编码区克隆入真核表达载体pcDNA3.1myc-his(-)中,转染HEK293细胞检测其表达。结果:测序证实所克隆的Sirt2编码区cDNA正确地插入pcDNA3.1myc-his(-)中,经免疫荧光检测证实其在HEK293细胞中得到表达。结论:成功克隆了大鼠Sirt2 cDNA,构建了其真核表达载体,并在HEK293细胞中得到有效表达,为进一步研究大鼠Sirt2的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 sirt2 真核表达 克隆 CDNA
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