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细胞周期蛋白激酶抑制调控蛋白p21在HHV-8病毒裂解复制周期的作用
1
作者 张庆 秦苏萍 +3 位作者 李小翠 王晓天 刘晓梅 周峰 《徐州医科大学学报》 CAS 2024年第2期95-99,共5页
目的研究细胞周期蛋白激酶抑制调控蛋白p21对人类疱疹病毒8型(human herpesvirus 8,HHV-8)病毒裂解复制周期的影响。方法组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂SAHA预处理后,倒置荧光显微镜观察红色荧光蛋白(RFP)阳性的iSLK... 目的研究细胞周期蛋白激酶抑制调控蛋白p21对人类疱疹病毒8型(human herpesvirus 8,HHV-8)病毒裂解复制周期的影响。方法组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂SAHA预处理后,倒置荧光显微镜观察红色荧光蛋白(RFP)阳性的iSLK.219细胞数,实时定量PCR检测TREx-K-Rta BCBL-1细胞中HHV-8病毒相关基因的mRNA水平。脂质体转染p21-siRNA后,免疫印迹法检测iSLK.219和TREx-K-Rta BCBL-1细胞中p21蛋白表达,计算RFP阳性iSLK.219细胞百分率,检测TREx-K-Rta BCBL-1细胞中ORF50和PAN的mRNA水平,CCK-8法和台盼蓝染色观察细胞存活情况。结果SAHA显著增强iSLK.219细胞RFP阳性率、TREx-K-Rta BCBL-1细胞中HHV-8裂解复制周期相关基因ORF50、PAN及K8.1的mRNA水平和p21蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05)。siRNA沉默p21后,iSLK.219细胞RFP阳性率、TREx-K-Rta BCBL-1细胞中HHV-8裂解复制周期相关基因ORF50和PAN mRNA水平显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),且保护SAHA介导的TREx-K-Rta BCBL-1细胞死亡。结论抑制HDAC活性通过调控p21促进HHV-8病毒裂解复制。 展开更多
关键词 人类疱疹病毒8型 病毒裂解复制周期 组蛋白去乙酰化酶 细胞周期蛋白激酶抑制调控蛋白p21 细胞死亡
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卵黄高磷蛋白α-淀粉酶抑制肽的制备、鉴定及酶抑制动力学分析
2
作者 薛天睿 吕彬斐 +2 位作者 张铭冉 李灿 张晓维 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2025年第1期152-162,共11页
为探索卵黄高磷蛋白肽(phosvitin phosphopeptide,PPP)对α-淀粉酶的抑制作用,使其能够调控血糖水平从而缓解Ⅱ型糖尿病,本研究以α-淀粉酶抑制率为指标酶解卵黄高磷蛋白制备PPP,利用酶抑制动力学实验分析PPP对α-淀粉酶的抑制类型,采... 为探索卵黄高磷蛋白肽(phosvitin phosphopeptide,PPP)对α-淀粉酶的抑制作用,使其能够调控血糖水平从而缓解Ⅱ型糖尿病,本研究以α-淀粉酶抑制率为指标酶解卵黄高磷蛋白制备PPP,利用酶抑制动力学实验分析PPP对α-淀粉酶的抑制类型,采用液质联用鉴定后用分子对接筛选出高活性的α-淀粉酶抑制肽,最后验证其活性。结果表明,最优酶解条件为先经胰蛋白酶(加酶量7000 U/g)再经胃蛋白酶(加酶量60000 U/g)分别酶解6 h,制得的PPP在浓度7.81×10-3 mg/mL时具有最高α-淀粉酶抑制率70.69%±1.71%。PPP对α-淀粉酶的抑制类型为混合型抑制。鉴定筛选出了两种新型的高活性α-淀粉酶抑制肽FGTEPDAK和IWGR,经验证其IC50值分别为(0.80±0.14)×10-3 mg/mL和(1.80±0.31)×10-3 mg/mL,极显著低于阳性对照阿卡波糖(3.17±0.47)×10-3 mg/mL(P<0.01)。本研究揭示PPP可作为新型降糖物质,应用于缓解Ⅱ型糖尿病的功能性食品开发中。 展开更多
关键词 卵黄高磷蛋白肽 复合酶解 Α-淀粉酶抑制剂 分子对接 酶抑制动力学
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超声辅助酶解制备大米蛋白黄嘌呤氧化酶活性抑制肽的工艺条件优化
3
作者 张薇 李爱琳 李书国 《中国粮油学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期51-58,共8页
以大米蛋白为原料,研究碱性蛋白酶酶解法制备黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase,XOD)活性抑制肽,并对其体外功能活性进行评价。研究了蛋白酶种类、底物质量分数、酶解温度、加酶量、酶解pH、酶解时间对大米蛋白水解度(degree of hydrolysis... 以大米蛋白为原料,研究碱性蛋白酶酶解法制备黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase,XOD)活性抑制肽,并对其体外功能活性进行评价。研究了蛋白酶种类、底物质量分数、酶解温度、加酶量、酶解pH、酶解时间对大米蛋白水解度(degree of hydrolysis,DH)及酶解产物对黄嘌呤氧化酶活性抑制率的影响,探讨了不同超声处理方式对酶解过程的影响,通过响应面法对实验条件进行了优化结果为:采用碱性蛋白酶,底物质量分数5%,酶解温度为56℃,加酶量为8000 U/g,酶解pH为10,超声功率70 W,超声酶解60 min,对所制备的大米蛋白黄嘌呤氧化酶活性抑制肽的功能活性进行了评价。在最优条件下其黄嘌呤氧化酶抑制活性的IC_(50)为1.55 mg/mL,ABTS自由基清除作用、羟基自由基清除作用、DPPH自由基清除作用的IC_(50)值分别为0.49、12.48、3.88 mg/mL。 展开更多
关键词 大米蛋白 黄嘌呤氧化酶抑制肽 酶解 生物活性
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H_2O_2对大豆蛋白酶解过程色变的抑制 被引量：1
4
作者 班玉凤 郭洪臣 朱海峰 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期47-49,共3页
引入过氧化氢以抑制大豆蛋白酶水解反应中伴随的美拉德反应 ,减少色素生成。结果表明 ,在水解条件下 ,过氧化氢能有效抑制美拉德反应在大豆蛋白水解过程中的发生 ,减少色素生成 ,而不影响大豆蛋白的降解率和水解液的水解度。向水解体系... 引入过氧化氢以抑制大豆蛋白酶水解反应中伴随的美拉德反应 ,减少色素生成。结果表明 ,在水解条件下 ,过氧化氢能有效抑制美拉德反应在大豆蛋白水解过程中的发生 ,减少色素生成 ,而不影响大豆蛋白的降解率和水解液的水解度。向水解体系中加入 1‰过氧化氢 ,水解液色素抑制率可达到 36 %。并且通过水解物氨基酸组成分析得到 。 展开更多
关键词 H2O2 大豆蛋白 美拉德反应 酶水解 色素抑制 色变
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组蛋白去乙酰化酶抑制剂ACY1215通过调控能量代谢酶保护脂多糖/D-氨基半乳糖诱导的急性肝衰竭小鼠机制研究
5
作者 张小雅 石春霞 +4 位作者 郭金 王钰鲲 张丹眉 沈起艳 龚作炯 《实用肝脏病杂志》 CAS 2024年第6期812-815,共4页
目的探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂ACY1215对急性肝衰竭(ALF)小鼠的保护作用及其可能的作用机制。方法将30只小鼠随机分为对照组、模型组和ACY1215处理组,采用脂多糖和D-氨基半乳糖联合腹腔注射诱导小鼠ALF模型,常规行血生化和组织... 目的探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂ACY1215对急性肝衰竭(ALF)小鼠的保护作用及其可能的作用机制。方法将30只小鼠随机分为对照组、模型组和ACY1215处理组,采用脂多糖和D-氨基半乳糖联合腹腔注射诱导小鼠ALF模型,常规行血生化和组织病理学检查,采用Western blot法检测肝组织苹果酸脱氢酶1(MDH1)、异柠檬酸脱氢酶(IDH1)和果糖-2,6-二磷酸酶2(PFKFB2)及白介素-1β(IL-1β)和IL-18分子蛋白的表达。结果肝组织病理学检查显示,ALF模型制备成功,而ACY1215干预组肝组织病理学损害显著减轻;模型组血清ALT、AST和TBIL水平分别为(3743.5±655.9)U/L、(2539.4±488.1)U/L和(89.56±7.2)μmol/L,显著高于对照组【分别为(34.5±7.6)U/L、(32.3±9.3)U/L和(6.2±2.4)μmol/L,P<0.05】,而ACY1215处理组各项指标均显著降低【分别为(951.5±328.9)U/L、(475.3±131.24)U/L和(38.41±9.5)μmol/L,P<0.05】;模型组小鼠肝组织MDH1和IDH1表达较对照组显著减弱,PFKFB2、IL-18和IL-1β表达较对照组显著增强,而ACY1215干预组肝组织MDH1和IDH1表达较模型组显著增强,而PFKFB2、IL-18和IL-1β表达较模型组显著减弱。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂ACY1215可以通过对能量代谢酶的调节发挥保护ALF小鼠的作用。 展开更多
关键词 急性肝衰竭 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 脂多糖和D-氨基半乳糖 苹果酸脱氢酶1 异柠檬酸脱氢酶1 果糖-2 6-二磷酸酶2 小鼠
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组蛋白甲基转移酶2抑制剂BAY-598和阿霉素在骨肉瘤中的协同抗癌作用
6
作者 蔡风 陶绪长 +5 位作者 刘鲁华 熊晒 黎腾 刘浪 曾铎 廖琦 《实用癌症杂志》 2024年第10期1571-1577,共7页
目的探讨组蛋白的甲基转移酶2抑制剂BAY-598和阿霉素在骨肉瘤中的协同抗癌作用。方法通过细胞的增殖、迁移、侵袭和集落形成实验,评估两种药物单独或联合使用后对骨肉瘤细胞恶性特征的抑制作用。采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期... 目的探讨组蛋白的甲基转移酶2抑制剂BAY-598和阿霉素在骨肉瘤中的协同抗癌作用。方法通过细胞的增殖、迁移、侵袭和集落形成实验,评估两种药物单独或联合使用后对骨肉瘤细胞恶性特征的抑制作用。采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期情况。结果组蛋白甲基转移酶2抑制剂和阿霉素联合治疗可协同抑制细胞的生长、迁移、侵袭,诱导细胞凋亡,导致OS细胞细胞周期阻滞。进一步的机制探索表明,JAK-STAT信号通路可能是协同作用的关键。结论组蛋白甲基转移酶2抑制剂和阿霉素对骨肉瘤具有协同抗癌作用,它们的联合使用可能是一种很有前途的骨肉瘤治疗策略。 展开更多
关键词 阿霉素 组蛋白甲基转移酶2抑制剂 骨肉瘤 协同作用
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酶解燕麦蛋白制备ACE抑制肽的研究 被引量：12
7
作者 张晓平 赵世锋 +3 位作者 蒋琼 董银卯 刘永国 任清 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第11期189-193,共5页
本研究以燕麦蛋白为原料,分别选用Alcalase、Neutrase和Protamex进行单独或联合水解,经活性炭YD-303脱色、大孔吸附树脂DA-201CⅡ脱盐及分级纯化、SephadexG-25凝胶色谱柱进一步分离,以获得高纯度、高活性的血管紧张素转化酶(angiotensi... 本研究以燕麦蛋白为原料,分别选用Alcalase、Neutrase和Protamex进行单独或联合水解,经活性炭YD-303脱色、大孔吸附树脂DA-201CⅡ脱盐及分级纯化、SephadexG-25凝胶色谱柱进一步分离,以获得高纯度、高活性的血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽。结果表明:单酶反应时,Alcalase水解2h所获得的产物对ACE的抑制率可达85.40%;YD-303处理燕麦蛋白酶解液脱色最优工艺为添加量1.5%(W/V)、pH3.5、温度40℃、脱色时间75min。利用75%乙醇洗脱大孔吸附树脂DA-201CⅡ所获得的组分ACE抑制活性最高,其经SephadexG-25进一步分离纯化,得到四个分离组分,第四组分的ACE抑制活性最高,抑制率为95.6%。 展开更多
关键词 燕麦蛋白 酶解 ACE抑制肽 脱色 脱盐
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红曲糟源酶解蛋白肽的功能性评价 被引量：2
8
作者 侯蕊 梁璋成 +3 位作者 林晓婕 林晓姿 张秀红 何志刚 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期354-361,共8页
【目的】研究不同蛋白酶对红曲糟酶解的效果,并对其酶解液进行功能性评价,为红曲糟源蛋白肽的研发制备提供理论支持。【方法】以提高蛋白含量后的红曲糟为原料,利用碱性蛋白酶、胰蛋白酶、动物蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胃蛋白... 【目的】研究不同蛋白酶对红曲糟酶解的效果,并对其酶解液进行功能性评价,为红曲糟源蛋白肽的研发制备提供理论支持。【方法】以提高蛋白含量后的红曲糟为原料,利用碱性蛋白酶、胰蛋白酶、动物蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胃蛋白酶、复配酶制剂F106、酵母抽提酶等不同蛋白酶进行酶解,考察其酶解率、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除抗氧化能力、黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase,XOD)和血管紧张素转化酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)抑制活性等生物活性功能。【结果】蛋白酶解率最高的为动物蛋白酶和胰蛋白酶酶解处理,分别为(71.43±1.03)%和(70.20±0.32)%。DPPH自由基清除抗氧化能力最优的是胃蛋白酶、碱性蛋白酶和酵母抽提酶酶解处理,蛋白肽的半数效应浓度(Median effective concentration,EC50)分别为(2.78±0.34)mg·mL^(-1)、(3.02±0.03)mg·mL^(-1)、(3.24±0.65)mg·mL^(-1);ABTS自由基清除抗氧化能力、XOD抑制活性能力最优的均为胃蛋白酶和碱性蛋白酶酶解液,其蛋白肽的EC50值分别为(1.54±0.07)mg·mL^(-1)、(6.45±0.27)mg·mL^(-1)和(10.71±0.06)mg·mL^(-1)、(17.68±0.04)mg·mL^(-1),二者的XOD半数抑制指数分别为(1.28±0.01)、(1.78±0.03);ACE抑制活性最优的为碱性蛋白酶酶解液和木瓜蛋白酶酶解液,蛋白肽的EC50值均为(0.27±0.01)mg·mL^(-1),半数抑制指数分别为(118.40±3.53)、(98.35±1.95)。【结论】红曲糟源蛋白经不同蛋白酶酶解后的肽段具有不同的生物活性,其中以胃蛋白酶酶解的XOD抑制活性能力较强,碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解的ACE抑制活性较优。 展开更多
关键词 红曲酒糟 酶解蛋白肽 酶解率 DPPH自由基清除抗氧化能力 ABTS自由基清除抗氧化能力 XOD抑制活性 ACE抑制活性
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超声波对麦胚蛋白性质及其酶解物ACE抑制活性的影响 被引量：11
9
作者 赵伟睿 马海乐 +2 位作者 贾俊强 李云亮 杨会丽 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期177-182,共6页
为了提高麦胚分离蛋白酶解产物的降血压活性,采用超声波处理麦胚分离蛋白。研究了超声波功率对麦胚分离蛋白的溶解度、表面疏水性、荧光光谱、巯基含量变化、水解度和酶解产物对血管紧张素转换酶(ACE)相对抑制活性的影响。结果表明:经... 为了提高麦胚分离蛋白酶解产物的降血压活性,采用超声波处理麦胚分离蛋白。研究了超声波功率对麦胚分离蛋白的溶解度、表面疏水性、荧光光谱、巯基含量变化、水解度和酶解产物对血管紧张素转换酶(ACE)相对抑制活性的影响。结果表明:经超声波处理后,小麦胚芽球蛋白的荧光光谱和巯基含量均发生了显著的变化。麦胚分离蛋白的溶解度和表面疏水残基含量随着超声波功率的增加而提高,但当超声功率达到800 W后,增幅趋于平缓。经超声波前处理后,ACE抑制活性明显提高,而麦胚分离蛋白的酶解产物水解度没有明显变化,因此ACE抑制活性的提高是由于蛋白结构的变化造成的。在超声功率800 W时,酶解产物的ACE相对抑制活性提高了41.09%。 展开更多
关键词 超声波处理 麦胚蛋白 结构 ACE抑制活性 酶解
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Alcalase蛋白酶降解大豆胰蛋白酶抑制剂的研究 被引量：16
10
作者 杨晓泉 陈中 黄纪昆 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期18-22,共5页
研究了不同酶解条件下 (pH值、温度、时间、加酶量和添加巯基还原剂 ) ,碱性内切蛋白酶Alcalase对大豆蛋白和大豆胰蛋白酶抑制剂的降解作用。研究结果表明 ,Alcalase可同时降解大豆蛋白和胰蛋白酶抑制剂。该酶解反应的最适条件为 :pH 8 ... 研究了不同酶解条件下 (pH值、温度、时间、加酶量和添加巯基还原剂 ) ,碱性内切蛋白酶Alcalase对大豆蛋白和大豆胰蛋白酶抑制剂的降解作用。研究结果表明 ,Alcalase可同时降解大豆蛋白和胰蛋白酶抑制剂。该酶解反应的最适条件为 :pH 8 0、温度 6 0℃、最适加酶量 10 μL/g蛋白 (约 0 0 2 832AU/ g蛋白 ) ,添加Na2 SO3为ω(Na2 SO3) =0 3% ,水解时间 4h。在此条件下 ,残留胰蛋白酶抑制活性为对照的 2 0 % ,可溶性蛋白含量可达 2 7mg/mL ,游离氨基酸含量为 7 1mg/mL ,大豆蛋白的水解度为 8 9%。 展开更多
关键词 大豆蛋白 胰蛋白酶抑制剂 ALCALASE 酶解 降解作用
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酶解蛋清蛋白制备ACE抑制肽的工艺研究 被引量：11
11
作者 张瑞东 迟玉杰 阮长青 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第14期1-4,共4页
为获取酶解蛋清蛋白制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的工艺参数,研究4种蛋白酶酶解蛋清蛋白所得产物对ACE的抑制活性,筛选出胰蛋白酶作为制备蛋清蛋白ACE抑制肽的适宜用酶。运用响应曲面法研究酶解时间、底物浓度([S])和酶与底物质量比... 为获取酶解蛋清蛋白制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的工艺参数,研究4种蛋白酶酶解蛋清蛋白所得产物对ACE的抑制活性,筛选出胰蛋白酶作为制备蛋清蛋白ACE抑制肽的适宜用酶。运用响应曲面法研究酶解时间、底物浓度([S])和酶与底物质量比([E]/[S])对制备ACE抑制肽工艺的影响,建立以上3因素与ACE抑制率关系的数学模型。结果确定胰蛋白酶酶解蛋清蛋白制备ACE抑制肽的适宜酶解条件为酶解时间4.87h、[S]3.06%、[E]/[S]2.91%、酶解温度45℃、pH7.4,此条件下制备的蛋清蛋白酶解产物ACE抑制率达到50.73%。 展开更多
关键词 蛋清蛋白 酶解工艺 ACE抑制肽 响应面法 胰蛋白酶
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响应面法优化猪血红蛋白制备ACE抑制肽的酶解工艺条件 被引量：10
12
作者 郑炯 邓惠玲 阚建全 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第23期209-214,共6页
以猪血红蛋白为原料,采用胃蛋白酶水解猪血红蛋白制备ACE抑制肽。以体外ACE抑制率和水解度为指标,通过单因素试验对酶解温度、酶解pH值、底物质量浓度、加酶量、酶解时间等酶解工艺参数进行研究,并用响应面法优化酶解工艺,建立二次多项... 以猪血红蛋白为原料,采用胃蛋白酶水解猪血红蛋白制备ACE抑制肽。以体外ACE抑制率和水解度为指标,通过单因素试验对酶解温度、酶解pH值、底物质量浓度、加酶量、酶解时间等酶解工艺参数进行研究,并用响应面法优化酶解工艺,建立二次多项数学模型。结果表明,胃蛋白酶水解猪血红蛋白制备ACE抑制肽的最佳工艺参数为酶解温度37.60℃、酶解pH 1.98、底物质量浓度4.98g/100mL、加酶量3.04%、酶解时间4h,酶解产物的最大ACE抑制率为70.09%。 展开更多
关键词 猪血红蛋白 ACE抑制肽 酶解工艺 响应面法
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酶解虾壳蛋白制备ACE抑制剂的工艺优化 被引量：7
13
作者 施旭丹 罗自生 +1 位作者 那地拉.阿合买提江 孙静静 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第11期131-136,共6页
以虾壳粉为原料,以水解度和ACE抑制率为指标,利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,其中中性蛋白酶和碱性蛋白酶有较高的ACE抑制活性,因此对碱性蛋白酶和中性蛋白酶的工艺条件进一步优化。结果表明:碱性蛋白酶... 以虾壳粉为原料,以水解度和ACE抑制率为指标,利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,其中中性蛋白酶和碱性蛋白酶有较高的ACE抑制活性,因此对碱性蛋白酶和中性蛋白酶的工艺条件进一步优化。结果表明:碱性蛋白酶酶解工艺优化条件为:温度60℃、pH9.5、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量4000U/g、酶解时间2.5h,在此条件下ACE抑制率最高,为67.70%,水解度为69.79%;中性蛋白酶酶解工艺优化条件为:温度50℃、pH7.0、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量2000U/g、酶解时间2h,在此条件下ACE抑制率最高,为84.04%,水解度为26.76%。提示中性蛋白酶酶解能够产生更多的ACE抑制肽,是酶解虾壳蛋白制备ACE抑制肽的较优酶。 展开更多
关键词 虾壳 中性蛋白酶 碱性蛋白酶 ACE抑制肽 酶解工艺
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复方黄芪颗粒对肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶-2、金属蛋白酶组织抑制因子-2蛋白表达的影响 被引量：13
14
作者 张弢 李筠 +5 位作者 赵景民 周光德 潘登 孙艳玲 赵雨来 杨建法 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2008年第4期242-244,共3页
目的:探讨复方黄芪颗粒对肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)蛋白表达的影响。方法:应用Chevallier半定量计分系统,病理组织学观察等方法,结合细胞外基质(ECM)特殊染色动态变化观察,分析高、... 目的:探讨复方黄芪颗粒对肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)蛋白表达的影响。方法:应用Chevallier半定量计分系统,病理组织学观察等方法,结合细胞外基质(ECM)特殊染色动态变化观察,分析高、低剂量FFHQKL治疗猪血清诱导肝纤维化大鼠的各时间段肝组织学及ECM量的变化,评估复方黄芪颗粒的抗肝纤维化疗效;应用免疫组织化学染色观察造模结束时以及药物治疗各时间段肝组织内MMP-2、TIMP-2表达量的变化。结果:与模型组比较,高、低剂量复方黄芪颗粒治疗第2个月、3个月结束时,大鼠肝组织Chevallier纤维化评分均明显减少(P<0.01)。复方黄芪颗粒高、低剂量治疗组大鼠在治疗第2个月、3个月结束时,TIMP-2蛋白表达明显减弱,MMP-2蛋白表达明显增强,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:复方黄芪颗粒可以在蛋白水平增强MMP-2酶蛋白的表达,同时抑制TIMP-2酶蛋白的表达,促进ECM的降解,从而达到逆转肝纤维化的目的。 展开更多
关键词 肝纤维化 明胶酶 金属蛋白酶组织抑制因子-2
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胃-胰蛋白酶水解蜂王浆主蛋白制备血管紧张素转化酶抑制肽工艺的优化 被引量：5
15
作者 张伟光 袁鹏 +2 位作者 尹志红 裘卫 沈立荣 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期511-518,共8页
采用胃-胰蛋白酶水解蜂王浆主蛋白(MRJPs),对底物浓度、pH值、酶作用时间和蛋白酶浓度对水解效果的影响进行单因素分析,然后通过正交试验对胃-胰蛋白酶共同作用的酶解工艺进行优化;最后采用超滤分离技术对王浆主蛋白水解产物(H-MRJPs)... 采用胃-胰蛋白酶水解蜂王浆主蛋白(MRJPs),对底物浓度、pH值、酶作用时间和蛋白酶浓度对水解效果的影响进行单因素分析,然后通过正交试验对胃-胰蛋白酶共同作用的酶解工艺进行优化;最后采用超滤分离技术对王浆主蛋白水解产物(H-MRJPs)进行分离,以制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽。结果表明:优化的酶解工艺为37℃恒温、质量比为1%的胃蛋白酶(pH=2.0)和胰蛋白酶(pH=7.5)各水解2h;在最佳工艺条件下,MRJPs水解度为28.7%,总氮回收率为35.5%;通过SDS-PAGE电泳未检测到MRJPs水解产物(H-MRJPs)含有明显的蛋白条带;采用超滤法对H-MRJPs分离得到分子质量范围为<1、1～5和>5ku的3类血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽,其ACE半抑制质量浓度(IC50)分别为0.33、0.61和1.09mg.mL-1,即以分子质量<1ku的产物活性最强。该结果为利用王浆主蛋白开发降压功能食品提供了科学依据。 展开更多
关键词 王浆主蛋白 胃-胰蛋白酶 酶解技术 超滤 血管紧张素转化酶抑制肽
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酶解脱脂蚕蛹蛋白制备ACE抑制肽 被引量：2
16
作者 李勇 王颖 +5 位作者 黄先智 阚建全 晋圣坤 贺亚萍 胡益侨 廖晨 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第11期151-157,共7页
以实验室自制的脱脂蚕蛹蛋白为原料,利用酶工程技术,通过对中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶等的筛选及单因素和响应面优化试验,对ACE抑制肽的制备工艺条件进行较系统的研究。结果表明:选择碱性... 以实验室自制的脱脂蚕蛹蛋白为原料,利用酶工程技术,通过对中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶等的筛选及单因素和响应面优化试验,对ACE抑制肽的制备工艺条件进行较系统的研究。结果表明:选择碱性蛋白酶作为脱脂蚕蛹蛋白制备ACE抑制肽的酶,制备ACE抑制肽的最佳工艺条件为料液比11.88:100、温度50.22℃、pH 9.46、加酶量7.03%、酶解4h。在此条件下制备的ACE抑制肽的ACE抑制率达到41.98%。 展开更多
关键词 蚕蛹蛋白 ACE抑制肽 酶解 工艺条件
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亲和色谱法从猪骨胶原蛋白酶解物中分离纯化血管紧张素转换酶抑制剂 被引量：3
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作者 孙凤祥 王守训 +3 位作者 任维栋 刘长江 杨晓云 邵建新 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2004年第6期347-349,共3页
目的从猪骨胶原蛋白酶解物中分离出高纯度的血管紧张素转换酶抑制剂。方法将胶原蛋白酶解物用双蒸水溶解 ,先上SephadexG 2 5柱 ,用含有 10mmol/L吡啶的 0 .6mol/L醋酸溶液洗脱 ,收集对血管紧张素转换酶有抑制作用的峰值部分冻干 ;再上... 目的从猪骨胶原蛋白酶解物中分离出高纯度的血管紧张素转换酶抑制剂。方法将胶原蛋白酶解物用双蒸水溶解 ,先上SephadexG 2 5柱 ,用含有 10mmol/L吡啶的 0 .6mol/L醋酸溶液洗脱 ,收集对血管紧张素转换酶有抑制作用的峰值部分冻干 ;再上血管紧张素转换酶抑制剂亲和柱洗脱 ,测定各收集管洗脱液的比抑制活力 ,收集峰值部分冻干。结果亲和色谱柱洗脱液峰值管比抑制活力达 14 5 0u/mg,为粗提液的 90 6倍 ,活力回收率为 12 .1%。结论利用亲和色谱法 ,能够从猪骨胶原蛋白酶解物中分离出高纯度的血管紧张素转换酶抑制剂。 展开更多
关键词 亲和色谱 胶原蛋白 酶解物 纯化 血管紧张素转换酶抑制剂
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黄芩素的酶解提取工艺及其抑制弹性蛋白酶活性研究 被引量：4
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作者 姚亚红 薛淑萍 张立伟 《光谱实验室》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期993-996,共4页
利用正交试验对中药黄芩中提取黄芩素酶解工艺进行了初步探讨,确定最佳酶解工艺条件:温度为40℃、pH6.0、时间12h时,黄芩素含量最高;利用酶活力法对黄芩素体外抑制弹性蛋白酶活性进行了研究,发现黄芩素对弹性蛋白酶具有明显的抑制作用,... 利用正交试验对中药黄芩中提取黄芩素酶解工艺进行了初步探讨,确定最佳酶解工艺条件:温度为40℃、pH6.0、时间12h时,黄芩素含量最高;利用酶活力法对黄芩素体外抑制弹性蛋白酶活性进行了研究,发现黄芩素对弹性蛋白酶具有明显的抑制作用,抑制率达92.98%。 展开更多
关键词 黄芩素 酶解 弹性蛋白酶 抑制作用
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家蚕蛹蛋白酶解产物对肿瘤细胞MGC-803的增殖抑制活性鉴定 被引量：4
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作者 穆利霞 谢书越 +4 位作者 李伟欣 林光月 邹宇晓 陈楚锐 廖森泰 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期601-607,共7页
以不同蛋白酶酶解制备家蚕蛹蛋白酶解产物（SPPHs）,采用MTT比色法检测其对人胃腺癌细胞MGC-803的增殖抑制活性。不同蛋白酶酶解制备SPPHs对MGC-803的增殖抑制作用存在显著差异（P〈0.05）,其中家蚕蛹蛋白以Alcalase 2.4L酶解的产物（A... 以不同蛋白酶酶解制备家蚕蛹蛋白酶解产物（SPPHs）,采用MTT比色法检测其对人胃腺癌细胞MGC-803的增殖抑制活性。不同蛋白酶酶解制备SPPHs对MGC-803的增殖抑制作用存在显著差异（P〈0.05）,其中家蚕蛹蛋白以Alcalase 2.4L酶解的产物（AH）对MGC-803的增殖抑制活性最高,当AH的质量浓度为0.25 mg/m L时,水解度（DH）=25%的AH的抑制活性最高,对MGC-803细胞的增殖抑制率可达到92.74%。Alcalase2.4L酶解家蚕蛹蛋白产物的分子质量也显著影响其对MGC-803细胞的增殖抑制活性,其中分子质量〈5 k D组分的抑制率高达91.13%,将该组分经葡聚糖（G-25）凝胶层析后分离出4个组分（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ）,组分Ⅱ对MGC-803细胞的增殖抑制率最高（27.5%）,但与未分离样品相比,抑制效率显著降低,而其他3个分离组分则无抑制作用。研究结果提示,蚕蛹蛋白酶解产物对肿瘤细胞的体外增殖有抑制作用,并且这种抑制作用可能是由多种组分协同完成。 展开更多
关键词 家蚕蛹蛋白 酶解产物 人胃腺癌细胞MGC-803 抑制活性 超滤 葡聚糖凝胶层析
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2型糖尿病大鼠肺组织基质金属蛋白酶-2、9及其抑制因子-1的表达变化 被引量：12
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作者 穆维新 沈亚欣 +1 位作者 崔士杰 王绵 《河北医药》 CAS 2010年第9期1034-1037,共4页
目的通过检测2型糖尿病大鼠肺组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的表达变化,探讨MMP-2、MMP-9及TIMP-1在糖尿病肺损伤中的作用。方法通过高糖、高脂饮食加腹腔注射小剂量链脲... 目的通过检测2型糖尿病大鼠肺组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的表达变化,探讨MMP-2、MMP-9及TIMP-1在糖尿病肺损伤中的作用。方法通过高糖、高脂饮食加腹腔注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法 ,建立2型糖尿病大鼠模型,采用光镜动态观察12周、24周时对照组、糖尿病组的大鼠肺组织的形态学改变,用Masson三色染色观察肺组织胶原沉积情况,应用免疫组织化学方法检测2组大鼠肺组织MMP-2、MMP-9及TIMP-1的动态表达变化情况。结果糖尿病大鼠肺组织胶原含量明显增多,糖尿病大鼠肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1表达增多,同时MMP-2/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比例也增加。随病情进展,上述变化更加明显。结论糖尿病大鼠出现了肺间质纤维化,MMP-2、9及TIMP-1表达增多及其比例紊乱参与了糖尿病肺组织病变的发生发展,可能是糖尿病肺纤维化发生的机制之一。 展开更多
关键词 糖尿病 肺纤维化 基质金属蛋白酶-2 基质金属白酶-9 基质金属蛋白酶抑制物-1
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