右归丸对骨质疏松症模型大鼠骨组织中PKA和CREB蛋白表达的影响 被引量：6

1

作者 姜坤 周强 +4 位作者 孙鑫 邓洋洋 邢克欣 林庶茹 尚德阳 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2015年第11期2239-2241,共3页

目的:通过观察摘除卵巢复制骨质疏松症模型大鼠股骨中PKA和CREB的蛋白表达变化,探究骨质疏松症的病理机制和右归丸对治疗骨质疏松症的疗效机制。方法:实验采用摘除大鼠双侧卵巢的方法复制骨质疏松症模型,并将大鼠分为正常组、假手术组... 目的:通过观察摘除卵巢复制骨质疏松症模型大鼠股骨中PKA和CREB的蛋白表达变化,探究骨质疏松症的病理机制和右归丸对治疗骨质疏松症的疗效机制。方法:实验采用摘除大鼠双侧卵巢的方法复制骨质疏松症模型,并将大鼠分为正常组、假手术组、模型组、右归丸组、阳性药物组福善美组和盖天力组,术后2 d开始给药干预,6次/周,持续12周。用ELISA法检测各组大鼠股骨中PKA和CREB蛋白表达水平。结果:与正常组和假手术组相比,模型组PKA和CREB的蛋白表达水平明显降低;给药干预12周后,与模组相比较,各给药组均可上调大鼠股骨中PKA和CREB蛋白表达水平均,其中右归丸组上调明显。结论:1正常大鼠骨组织中存在PKA和CREB蛋白表达;2骨质疏松症的发病机制可能与骨组织中PKA和CREB的蛋白表达变化有关;3右归丸能够有效治疗骨质疏松,这种作用可能通过激活PKA/CREB信号通路来实现。 展开更多

关键词 右归丸 绝经后骨质疏松症 骨密度 pka蛋白 GREB蛋白

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cAMP依赖蛋白激酶(PKA)磷酸化Nef蛋白对HIV复制的影响

2

作者 李培林 《江汉大学学报（自然科学版）》 2012年第3期77-82,共6页

目的:研究Nef PKA磷酸化位点对HIV复制的影响。方法:在全长HIVNL4-3中,通过将Nef Ser9突变为丙氨酸,构建一个单突变HIV DNA。接着用野生型HIV或单突变型HIV产生病毒,然后用病毒去感染外周血单核细胞(PBMC)。结果:与亲代病毒比较,单突变S... 目的:研究Nef PKA磷酸化位点对HIV复制的影响。方法:在全长HIVNL4-3中,通过将Nef Ser9突变为丙氨酸,构建一个单突变HIV DNA。接着用野生型HIV或单突变型HIV产生病毒,然后用病毒去感染外周血单核细胞(PBMC)。结果:与亲代病毒比较,单突变Ser9为丙氨酸的病毒下调了HIV在静息PBMC中的复制。结论 :该突变在消除静息原代细胞中Nef对HIV复制的影响起重要作用。研究结果显示,PKA对Nef磷酸化是静息细胞中病毒生命周期的重要步骤。 展开更多

关键词 HIV NEF蛋白 磷酸化 蛋白激酶pka

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桃仁清蛋白与大豆分离蛋白功能特性比较研究 被引量：6

3

作者 易建华 李静娟 +1 位作者 朱振宝 杨欣 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期28-32,共5页

为提高桃仁清蛋白(PKA)在食品工业中的应用,将其与大豆分离蛋白(SPI)对照,研究了PKA的溶解性、持水性、持油性、起泡性及泡沫稳定性、乳化性及乳化稳定性和凝胶性等功能特性。结果表明:与SPI相比,PKA具有很好的溶解性、泡沫稳定性、乳... 为提高桃仁清蛋白(PKA)在食品工业中的应用,将其与大豆分离蛋白(SPI)对照,研究了PKA的溶解性、持水性、持油性、起泡性及泡沫稳定性、乳化性及乳化稳定性和凝胶性等功能特性。结果表明:与SPI相比,PKA具有很好的溶解性、泡沫稳定性、乳化稳定性及较低的凝胶质量浓度,持油性略高于SPI,但起泡性、乳化性及持水性较差;PKA溶解性受溶解条件影响较小。PKA具有良好的功能性质,适合作为食品添加剂或配料。 展开更多

关键词 桃仁清蛋白(pka) 大豆分离蛋白(SPI) 功能特性

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尾加压素Ⅱ促进大鼠心肌胶原蛋白表达及乳鼠心肌成纤维细胞的增殖

4

作者 刘文媛 韩清华 +1 位作者 刘青华 王瑾 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第7期970-974,共5页

目的探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)对大鼠心肌纤维化的影响。方法腹主动脉缩窄术建立慢性压力超负荷大鼠心力衰竭模型,大鼠分为假手术组、造模4、8和12周组。利用Western blot分析心肌组织中UⅡ、G蛋白偶联受体(GPR14)、胶原Ⅰ(col-Ⅰ)、Ⅲ(col-... 目的探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)对大鼠心肌纤维化的影响。方法腹主动脉缩窄术建立慢性压力超负荷大鼠心力衰竭模型,大鼠分为假手术组、造模4、8和12周组。利用Western blot分析心肌组织中UⅡ、G蛋白偶联受体(GPR14)、胶原Ⅰ(col-Ⅰ)、Ⅲ(col-Ⅲ)及蛋白激酶A(PKA)的表达。体外培养乳鼠成纤维细胞,分为对照组、UⅡ处理组、UⅡ+KT5720处理组及UII+SB-611812组。镜下观察及CKK-8法检测细胞增殖。结果模型组大鼠心肌组织中UⅡ、GPR14、col-Ⅰ、col-Ⅲ蛋白及PKA的表达显著增加,且呈时间依赖性。UⅡ促进乳鼠成纤维细胞(CFs)的增殖(P<0.05),而KT5720、SB-611812可抑制UⅡ对乳鼠成纤维细胞的促增殖作用。结论 UⅡ及其受体系统促进大鼠心肌纤维化的发生发展。 展开更多

关键词 尾加压素Ⅱ(UⅡ) 心肌纤维化 信号传导 蛋白激酶A(pka)

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益智宁对注意缺陷多动障碍动物模型SHR大鼠前额叶皮质DRD1-AC-cAMP-PKA-DARPP32信号通路的影响 被引量：7

5

作者 赖东兰 陈晓刚 +4 位作者 易浪 彭淑平 沈凌 廖永州 李宜瑞 《辽宁中医杂志》 CAS 2018年第11期2419-2422,共4页

目的:通过观察中药复方益智宁对注意缺陷多动障碍动物模型SHR大鼠前额叶皮质中腺苷酸环化酶(adenylate cyclase,AC)、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)、多巴胺D1受体(dopamine recep... 目的:通过观察中药复方益智宁对注意缺陷多动障碍动物模型SHR大鼠前额叶皮质中腺苷酸环化酶(adenylate cyclase,AC)、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)、多巴胺D1受体(dopamine receptor D1,DRD1)、多巴胺和环磷酸腺苷调节的磷酸化蛋白32(dopamine and cAMP regulated phosphoprotein of 32 kDa,DARPP32)的影响,探讨益智宁治疗ADHD的疗效机制。方法:将30只SHR大鼠随机分为益智宁组、生理盐水对照组、哌甲酯对照组,每组10只,益智宁组给予益智宁煎药液(14.4g·kg^-1),哌甲酯组给予哌甲酯(0.0015 g·kg^-1),生理盐水组给予生理盐水,每组均按12.5 mL/kg等容量灌胃给药。给药4周后,用ELISA法检测各组大鼠前额叶皮质组织中AC、cAMP的浓度,用RT-PCR和Western blot法检测大鼠前额叶皮质组织中PKA、DRD1、DARPP32的表达水平。结果:与生理盐水组比较,哌甲酯组、益智宁组大鼠的前额叶皮质组织中的AC、cAMP含量均有显著升高(P<0.05);与生理盐水组比较,哌甲酯组、益智宁组大鼠的前额叶皮质组织中PKA蛋白表达及mRNA表达显著升高(P<0.01),且益智宁组与哌甲酯组有显著差异(P<0.05);与生理盐水组比较,哌甲酯组、益智宁组大鼠的前额叶皮质组织中DRD1、DARPP32蛋白表达及mRNA表达显著降低(P<0.01),且益智宁组与哌甲酯组有显著差异(P<0.05)。结论:益智宁组可能通过激活SHR大鼠前额叶皮质AC-cAMP-PKA的信号通路,并通过下调DRD1、DARPP32的水平,负反馈调节脑内多巴胺的含量,从而发挥疗效。 展开更多

关键词 注意缺陷多动障碍 益智宁 自发性高血压大鼠SHR 腺苷酸环化酶AC 环磷酸腺苷cAMP 蛋白激酶A(pka) 多巴胺D1受体(DRD1) 多巴胺和环磷酸腺苷调节的磷酸化蛋白32(DARPP32)

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袖状胃切除术通过GLP-1激活cAMP/PKA通路拮抗血管外周脂肪组织炎症

6

作者 肖忠盛 张晓宁 +1 位作者 龙泓 肖友忠 《智慧健康》 2023年第22期31-34,共4页

目的基于GLP-1激活环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)通路探讨袖状胃切除术拮抗血管外周脂肪组织炎症。方法选取SPF级六周龄雄性大鼠48只作为本次研究的对象,无差别分为空白组、袖状胃切除术组以及GLP-1受体激动剂组、GLP-1受体拮抗剂组E... 目的基于GLP-1激活环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)通路探讨袖状胃切除术拮抗血管外周脂肪组织炎症。方法选取SPF级六周龄雄性大鼠48只作为本次研究的对象,无差别分为空白组、袖状胃切除术组以及GLP-1受体激动剂组、GLP-1受体拮抗剂组Exendin(9-39),对四组小鼠血管外周脂肪组织的cAMP/PKA水平以及炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α水平进行测定。结果(1)cAMP/PKA水平比较:GLP-1受体激动剂进一步升高袖状胃切除术小鼠血管外周脂肪组织cAMP/PKA水平,其拮抗剂显著降低血管外周脂肪组织cAMP/PKA水平,差异均具有统计学意义(P<0.05)。(2)炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α水平:GLP-1受体激动剂显著降低血管袖状胃切除术小鼠外周脂肪组织炎症,其拮抗剂显著提高血管外周脂肪组织炎症水平,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论GLP-1受体激动剂与拮抗剂对袖状胃切除术大鼠血管外周脂肪组织炎症以及cAMP/PKA水平均具有较强的相关性,表明GLP-1可能通过激活cAMP/PKA通路参与袖状胃切除术拮抗血管外周脂肪组织炎症。 展开更多

关键词 GLP-1 环磷酸腺苷(cAMP) 蛋白激酶A(pka) 袖状胃切除术 血管外周脂肪组织炎症

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二肽酰肽酶-4抑制剂通过PKA/NF-κB信号通路调节LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应的实验研究 被引量：6

7

作者 黄玉芳 邓文 朱涛 《西部医学》 2016年第1期28-31,35,共5页

目的探讨二肽酰肽酶-4(DPP-4)竞争性抑制剂沙格列汀对LPS诱导的小鼠巨噬细胞(RAW264.7细胞)炎症反应的调节作用及相关的分子机制。方法将RAW264.7细胞分为4组,分别为对照组(Control组)、LPS组、LPS+沙格列汀(LPS+SAX组)和LPS+沙格列汀+... 目的探讨二肽酰肽酶-4(DPP-4)竞争性抑制剂沙格列汀对LPS诱导的小鼠巨噬细胞(RAW264.7细胞)炎症反应的调节作用及相关的分子机制。方法将RAW264.7细胞分为4组,分别为对照组(Control组)、LPS组、LPS+沙格列汀(LPS+SAX组)和LPS+沙格列汀+PKA抑制剂H-89组(LPS+SAX+H-89组)。在干预6小时后使用qPCR法和western blot法对细胞ICAM-1mRNA和蛋白的表达水平进行检测;并采用western blot法对细胞PKA和NF-κB p65活化水平进行分析。结果与Control组相比较,在LPS干预6小时后RAW264.7细胞ICAM-1mRNA和蛋白的表达水平及NF-κB p65活化水平均明显上升,而PKA活化水平明显降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);但LPS组较LPS+SAX组ICAM-1表达和NF-κB p65活化水平的增加更明显,而PKA活化下降更加明显,差异均有统计学意义(P均<0.05)。同时发现在LPS诱导状态下沙格列汀对于ICAM-1表达和NF-κB p65活化水平的抑制作用和PKA活化水平的促进作用可被PKA抑制剂H-89显著拮抗,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论本研究显示DPP-4抑制剂可以通过调控PKA/NF-κB信号通路下调LPS诱导的小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞的炎症反应,为DPP-4抑制剂应用于炎症性疾病的治疗奠定了初步的理论基础。 展开更多

关键词 沙格列汀 RAW264.7细胞 细胞内细胞黏附分-1(ICAM-1) 蛋白激酶A(pka) 核转录因子-κB(NF-κB)

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补阳还五汤对糖尿病周围神经病变大鼠的止痛作用及机制研究 被引量：3

8

作者 赵静 张建 胡爱民 《广州中医药大学学报》 CAS 2024年第4期1002-1010,共9页

【目的】探讨补阳还五汤对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠的止痛作用及机制。【方法】将60只大鼠分为正常组,模型组(MNCV)和感觉神经传导速度(SNCV),中药低、中、高剂量组,中药高剂量+H-89[蛋白激酶A(PKA)抑制剂]组,每组10只。除正常组,... 【目的】探讨补阳还五汤对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠的止痛作用及机制。【方法】将60只大鼠分为正常组,模型组(MNCV)和感觉神经传导速度(SNCV),中药低、中、高剂量组,中药高剂量+H-89[蛋白激酶A(PKA)抑制剂]组,每组10只。除正常组,其他各组大鼠采用高脂高糖饲料饲喂结合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法构建DPN模型。给药结束后,检测大鼠足热痛阈值,测定大鼠运动神经传导速度(MNCV)和感觉神经传导速度(SNCV),免疫组织化学法观察表皮内神经纤维密度(IENF),酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清空腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α),血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素1(Ang-1)、CD34水平,坐骨神经组织中环磷酸腺苷(cAMP)浓度,Western Blot法检测坐骨神经组织中PKA和反应元件结合蛋白(CREB)表达水平。【结果】与正常组比较,模型组足热痛阈值,TC、TG、LDL-C、HOMA-IR,IL-1β、IL-6和TNF-α水平均显著增加(P<0.05),HDL-C、FINS,VEGF、Ang-1、CD34,IENF,MNCV和SNCV值,cAMP浓度水平,PKA和CREB磷酸化水平均显著降低(P<0.05);与模型组比较,中药低、中、高剂量组上述指标均得到显著改善(P<0.05),且呈剂量依赖性;与中药高剂量+H-89组比较,中药高剂量组各指标水平均被逆转。【结论】补阳还五汤可改善DPN大鼠胰岛素抵抗、血脂代谢,减轻肢体疼痛,改善局部微循环障碍,保护神经功能,体现了“活血通络止痛”的治疗特点;补阳还五汤的止痛作用可能与改善局部微循环障碍、抑制炎症因子释放及调节cAMP/PKA/CREB信号通路蛋白表达有关。 展开更多

关键词 补阳还五汤 糖尿病周围神经病变 疼痛 微循环障碍 炎症因子 环磷酸腺苷(cAMP)-蛋白激酶A(pka)-cAMP反应元件结合蛋白(CREB)通路 大鼠

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蛋白激酶A(PKA)介导的信号通路:正调节还是负调节? 被引量：5

9

作者 林明群 张宗梁 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第17期1793-1803,共11页

蛋白激酶A是由 2个调节亚基与 2个催化亚基构成的异四聚体 .在不同的组织中 ,PKA可以起着不同的调节作用 ,如生长、分化和特定基因的表达 .在免疫系统中 ,PKA介导了一个普遍性的抑制性信号 ,对维持免疫系统的稳定起着重要的作用 .PKA通... 蛋白激酶A是由 2个调节亚基与 2个催化亚基构成的异四聚体 .在不同的组织中 ,PKA可以起着不同的调节作用 ,如生长、分化和特定基因的表达 .在免疫系统中 ,PKA介导了一个普遍性的抑制性信号 ,对维持免疫系统的稳定起着重要的作用 .PKA通过对Raf 1的磷酸化抑制了Raf 1的激活 ,从而阻断了Ras/Raf 1 /MEK/MAPK信号通路的激活 ,抑制细胞的增殖 .在转录因子的调节方面 ,PKA可以激活CREB而促进了含CRE基因的转录 ;但它同时却抑制了NF kB的活性而介导了细胞因子等表达的抑制 . 展开更多

关键词 蛋白激酶A(pka) Raf1 分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)

原文传递

骨髓间充质干细胞对多器官功能障碍综合征大鼠炎症的抑制作用及机制 被引量：1

10

作者 尹燕涛 曹秋梅 马炳辰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期673-678,共6页

目的观察骨髓间充质干细胞(BMSC)对多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠的炎症抑制作用及机制。方法SD大鼠随机分为对照组、模型组、BMSC组,每组10只。模型组和BMSC组大鼠腹腔注射7 mg/kg脂多糖(LPS)建立MODS模型。体外培养大鼠BMSC,取第4... 目的观察骨髓间充质干细胞(BMSC)对多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠的炎症抑制作用及机制。方法SD大鼠随机分为对照组、模型组、BMSC组,每组10只。模型组和BMSC组大鼠腹腔注射7 mg/kg脂多糖(LPS)建立MODS模型。体外培养大鼠BMSC,取第4代细胞用于实验,BMSC组大鼠尾静脉注射1×10^(6)个BMSC,对照组和模型组大鼠尾静脉注射等量生理盐水。造模后72 h,血气分析仪检测血氧分压(PaO_(2))、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2));ELISA检测大鼠血清总胆红素(TB)、白蛋白(ALB)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、环磷酸腺苷(cAMP)的含量;HE染色观察肺、肝和肾组织病变情况;Western blot法检测大鼠肺、肝和肾组织中蛋白激酶A(PKA)、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达。结果与对照组相比,模型组和BMSC组PaO_(2)显著降低,PaCO_(2)显著增高;TB、Cr、BUN、TNF-α和IL-6水平升高,ALB和cAMP水平降低,肺、肝、肾组织中PKA蛋白表达水平降低,NF-κB p65蛋白表达水平升高。与模型组比较,BMSC组PaO_(2)显著升高,PaCO显著降低,TB、Cr、BUN、TNF-α、IL-6水平降低,ALB和cAMP水平升高,肺、肝、肾组织中PKA蛋白表达水平升高,NF-κB p65蛋白表达水平降低。结论BMSC可减轻MODS大鼠器官功能损害,抑制炎症因子释放,与cAMP/PKA/NF-κB信号通路的表达水平改变有关。 展开更多

关键词 多器官功能障碍综合征(MODS) 骨髓间充质干细胞(BMSC) 炎症 环磷酸腺苷(cAMP) 蛋白激酶A(pka) 核因子κB p65(NF-κB p65)

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参仙升脉口服液联合曲美他嗪对缓慢性心律失常患者外周血单个核细胞中cAMP/PKA信号通路相关蛋白水平的影响 被引量：3

11

作者 潘金鹏 崔鹏 +2 位作者 赵硕 刘敏 杜芯瑜 《现代生物医学进展》 CAS 2021年第19期3778-3782,共5页

目的:观察缓慢性心律失常(BA)经参仙升脉口服液联合曲美他嗪治疗4周后的临床疗效及对外周血单个核细胞中环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)信号通路相关蛋白水平的影响。方法:将2017年8月~2020年8月期间我院收治的126例BA患者随机分为两... 目的:观察缓慢性心律失常(BA)经参仙升脉口服液联合曲美他嗪治疗4周后的临床疗效及对外周血单个核细胞中环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)信号通路相关蛋白水平的影响。方法:将2017年8月~2020年8月期间我院收治的126例BA患者随机分为两组,对照组和观察组,各63例。对照组接受曲美他嗪治疗,观察组接受参仙升脉口服液联合曲美他嗪治疗,观察并对比两组24 h动态心电图指标(最慢心率、静息状态下心率、24 h平均心率)、心功能指标[左室射血分数(LVEF)、心输出量(CO)、心脏指数(CI)]、疗效、外周血单个核细胞中cAMP/PKA信号通路相关蛋白(cAMP蛋白、PKA蛋白)水平及不良反应。结果:观察组的临床总有效率90.48%(57/63)高于对照组的71.43%(45/63),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗4周后,与对照组比较,观察组静息状态下心率、24 h平均心率、最慢心率均较高(P<0.05)。治疗4周后,观察组LVEF、CO、CI高于对照组(P<0.05)。治疗4周后,观察组外周血单个核细胞中cAMP蛋白、PKA蛋白水平高于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率组间对比无差异(P>0.05)。结论:参仙升脉口服液联合曲美他嗪治疗BA患者,可改善治疗效果,促进24h动态心电图、心功能指标改善,其主要作用机制可能与调节cAMP/PKA信号通路相关蛋白表达有关。 展开更多

关键词 参仙升脉口服液 曲美他嗪 缓慢性心律失常 临床疗效 cAMP/pka信号通路相关蛋白

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可溶性纤维连接蛋白对SGC-7901细胞中PKA活性的影响

12

作者 王忠诚 李永金 陈永昌 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2011年第5期492-497,共6页

本研究通过向SGC-7901细胞中加入可溶性纤维连接蛋白(fibronectin,FN)探讨可溶性纤维连接蛋白对PKA活性的影响。实验采用蛋白印迹技术检测可溶性FN在不同浓度及作用时间情况下对PKA C_α亚基表达水平以及PKA作用底物血管扩张刺激磷蛋白(... 本研究通过向SGC-7901细胞中加入可溶性纤维连接蛋白(fibronectin,FN)探讨可溶性纤维连接蛋白对PKA活性的影响。实验采用蛋白印迹技术检测可溶性FN在不同浓度及作用时间情况下对PKA C_α亚基表达水平以及PKA作用底物血管扩张刺激磷蛋白(vasodilator-stimulated phosphoprotein,VASP)磷酸化水平的影响;采用免疫荧光技术检测可溶性FN对PKA作用底物P-VASP分布的影响。结果显示,在SGC-7901细胞中,可溶性FN在0.5～8μg/ml浓度区间内,对PKA活性存在剂量依赖性抑制效应;选取1μg/ml可溶性FN作用12h以后,可溶性FN对PKA活性存在时间依赖性抑制效应;同时,我们建立了能够稳定表达人甲状腺A激酶锚定蛋白(human thyroid AKAP,Ht31)肽段的SGC细胞,Ht31破坏PKA锚定后,FN对PKA活性的抑制作用消失;免疫荧光显示可溶性FN可以使VASP磷酸化位置聚集于细胞边缘。因此,我们认为在SGC-7901细胞中可溶性FN对PKA活性存在抑制作用,这种抑制效应与可溶性FN的浓度及作用时间呈正比且取决于PKA能否正常锚定;可溶性FN可以影响PKA活化位置。 展开更多

关键词 可溶性纤维连接蛋白:pka p-VASP Ht31

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舒芬太尼调节cAMP/PKA/CREB信号通路对卵巢癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响 被引量：4

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作者 甄磊 张懿兰 +1 位作者 王晓娜 焦颖 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2024年第3期445-455,共11页

该文旨在探究舒芬太尼(SFTN)调节环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)信号通路对卵巢癌(OC)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。用浓度为2.5~160 ng/mL的舒芬太尼处理人OC细胞(SKOV-3),CCK-8法检测细胞活性,筛选... 该文旨在探究舒芬太尼(SFTN)调节环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)信号通路对卵巢癌(OC)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。用浓度为2.5~160 ng/mL的舒芬太尼处理人OC细胞(SKOV-3),CCK-8法检测细胞活性,筛选最佳药物浓度。将SKOV-3细胞分为对照组(Control组),舒芬太尼低、中、高浓度组(SFTN-L组、SFTN-M组、SFTN-H组),舒芬太尼高浓度+PKA激活剂组(SFTN-H+8-溴-cAMP组),平板克隆法检测细胞增殖;流式细胞术检细胞凋亡;划痕实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭;ELISA法检测环磷酸腺苷(cAMP)水平;Western blot法检测细胞核增殖抗原标记物(Ki67)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、蛋白激酶A(PKA)、磷酸化蛋白激酶A(p-PKA)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白(p-CREB)蛋白表达情况;裸鼠移植瘤实验检测舒芬太尼对OC移植瘤生长的影响。选择舒芬太尼浓度为20 ng/mL、40 ng/mL、80 ng/mL进行后续实验。与Control组比较,SFTN-L、SFTN-M、SFTN-H组的集落形成数、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数量及Ki67、CyclinD1、MMP-2、MMP-9、cAMP、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB表达水平降低,细胞凋亡率及Caspase-3、Bax表达水平显著升高,且呈浓度依赖性(P<0.05);与SFTN-H组相比,SFTN-H+8-溴-cAMP组的集落形成数、划痕愈合率、细胞侵袭数量及Ki67、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9、cAMP、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB表达水平升高,细胞凋亡率及Caspase-3、Bax表达水平显著降低(P<0.05)。移植瘤实验显示,SFTN组小鼠移植瘤比Control组生长缓慢,移植瘤质量、体积均减小,cAMP、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB表达水平降低(P<0.05)。舒芬太尼通过抑制cAMP/PKA/CREB信号通路从而抑制OC细胞增殖和侵袭,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 卵巢癌 舒芬太尼 环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(pka)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)信号通路 增殖 凋亡 侵袭

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基于cAMP/PKA/NMDAR信号通路探讨黑逍遥散对APP/PS1双转基因AD小鼠海马神经元突触可塑性的影响 被引量：3

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作者 胡韵韵 吕育洁 +3 位作者 孟志鹏 杨娇 陈怡琴 王虎平 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第17期27-34,共8页

目的:探究黑逍遥散通过调控环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)信号通路干预APP/PS1小鼠突触可塑性的作用及其机制。方法:选取4月龄雄性C57BL/6J小鼠12只作空白组,同月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠60只,随机... 目的:探究黑逍遥散通过调控环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)信号通路干预APP/PS1小鼠突触可塑性的作用及其机制。方法:选取4月龄雄性C57BL/6J小鼠12只作空白组,同月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠60只,随机分为模型组、KW-6002(腺苷受体的拮抗剂)组(3 mg·kg^(-1))及黑逍遥散高、中、低剂量组(22.10、11.05、5.53 g·kg^(-1)),每组12只,对应药物连续干预90 d。透射电镜观察海马神经元突触超微结构,高尔基染色观察海马CA1区神经元树突棘密度,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测cAMP、PKA、N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NR1)、N-甲基-D-天冬氨酸受体2A(NR2A)、N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(NR2B)、突触后致密物质95(PSD95)、突触蛋白1(SYN1)的蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测cAMP、PKA、NR1的mRNA表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠海马白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-4(IL-4)含量。结果:与空白组比较,模型组小鼠海马CA1区突触前膜与突触后膜分界线清晰程度欠佳,突触囊泡明显减少且分布散乱,突触后膜密度降低,海马CA1区神经元树突棘形态欠规整,排列不连续、密度减少(P<0.01),海马cAMP、PKA、NR1、NR2A、NR2B、PSD95、SYN1的蛋白表达降低(P<0.01),cAMP、PKA、NR1的mRNA表达下调(P<0.01),海马IL-12含量增多、IL-4含量减少(P<0.01);与模型组比较,各用药组小鼠海马CA1区突触前膜与后膜分界线清晰明了且结构完整,突触囊泡增多,排列密集,突触后膜密度增加,神经元树突棘形态较为规则,排列连续,成熟型树突棘密度增多(P<0.05,P<0.01),海马cAMP、PKA、NR1、NR2A、NR2B、PSD95、SYN1的蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01),cAMP、PKA、NR1的mRNA表达提高(P<0.01),海马IL-12含量降低(P<0.01),IL-4含量增加(P<0.01)。结论:黑逍遥散能改善APP/PS1小鼠海马神经元结构形态,其作用机制可能与激活cAMP/PKA/NMDAR信号通路、修复突触可塑性有关。 展开更多

关键词 黑逍遥散 阿尔茨海默病 突触可塑性 环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(pka)/N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)信号通路

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扶正化纤方水煎液对博来霉素诱导小鼠肺纤维化及肺组织CFTR表达的影响 被引量：2

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作者 姜文 王俊 +3 位作者 王凤婵 陆学超 胡海波 赵国静 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期3468-3475,共8页

目的 探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)在小鼠特发性肺纤维化中的表达及扶正化纤方水煎液的干预作用。方法 84只C57BL/6小鼠分为空白组(12只)和造模组(72只),采用博来霉素构建特发性肺纤维化模型,造模成功后随机分为模型组,吡非尼... 目的 探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)在小鼠特发性肺纤维化中的表达及扶正化纤方水煎液的干预作用。方法 84只C57BL/6小鼠分为空白组(12只)和造模组(72只),采用博来霉素构建特发性肺纤维化模型,造模成功后随机分为模型组,吡非尼酮组,扶正化纤方低、中、高剂量组,扶正化纤方+H-89组,每组12只,给予相应药物干预。称定小鼠体质量和肺质量,计算肺指数,HE、Masson染色观察肺组织炎症细胞浸润和胶原沉积情况,采用试剂盒检测肺组织羟脯氨酸(HYP)水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织环磷酸腺苷(cAMP)水平,RT-qPCR法检测肺组织CFTR mRNA表达,免疫组化法检测肺组织CFTR、白介素17B(IL-17B)蛋白表达,Western blot法检测肺组织CFTR、IL-17B、蛋白激酶A(PKA)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)表达。结果 与空白组比较,模型组小鼠肺指数、HYP水平、炎性细胞浸润和胶原纤维沉积、血清IL-17B表达均升高(P<0.05),肺组织CFTR mRNA和蛋白、cAMP水平、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB表达均降低(P<0.05);与模型组比较,扶正化纤方中、高剂量组小鼠肺指数、HYP水平、炎性细胞浸润和胶原纤维沉积、IL-17B表达降低(P<0.05),肺组织CFTR mRNA和蛋白、cAMP水平、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB表达升高(P<0.05);H-89可减弱扶正化纤方的抗肺纤维化作用。结论 扶正化纤方可能通过激活cAMP/PKA通路,上调CFTR表达,进而发挥抗肺纤维化作用。 展开更多

关键词 扶正化纤方 肺纤维化 囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR) 环磷酸腺苷/蛋白激酶A(cAMP/pka)

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丹皮酚通过调节真杆菌属介导的TGR5/PKA/CREB信号通路抑制酒精性肝损伤的作用机制 被引量：2

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作者 张鲁宁 刘玲玲 +2 位作者 姜胜男 吴琦峰 颜贵明 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期78-86,共9页

目的:探究丹皮酚是否通过调节真杆菌属介导的G蛋白胆汁酸偶联受体5(TGR5)/蛋白激酶A(PKA)/环腺苷单磷酸反应结合元件(CREB)信号通路对酒精性肝损伤小鼠发挥保护作用。方法:将C57BL/6小鼠随机分成5组:正常组、模型组、丹皮酚组(480 mg
... 目的:探究丹皮酚是否通过调节真杆菌属介导的G蛋白胆汁酸偶联受体5(TGR5)/蛋白激酶A(PKA)/环腺苷单磷酸反应结合元件(CREB)信号通路对酒精性肝损伤小鼠发挥保护作用。方法:将C57BL/6小鼠随机分成5组:正常组、模型组、丹皮酚组(480 mg·kg^(-1))、抗生素组(Abs组)和抗生素+丹皮酚组。Lieber-De Carli液体饲料喂养C57BL/6小鼠造模第2天起灌胃给药,连续10 d。测定小鼠血脂、肝功能、炎症因子及氧化应激水平,通过苏木素-伊红(HE)染色法和油红O染色观察肝脏组织形态变化和脂肪堆积情况,采用16S r DNA测序检测空白组、模型组和丹皮酚组小鼠肠道菌群多样性变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测丹皮酚对小鼠回肠组织闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、紧密连接蛋白-1(Claudin-1)和TGR5/PKA/CREB信号通路相关蛋白表达水平的影响。结果:相较于空白组,模型组小鼠的血脂、肝功能、氧化应激水平,炎症因子的表达升高(P<0.01),肝脏脂肪空泡明显,回肠黏膜损伤严重,且回肠组织ZO-1、Claudin-1和TGR5/PKA/CREB蛋白含量显著下降(P<0.01),肠道菌群发生改变,变形菌门明显增多,拟杆菌门与厚壁菌门的比值降低;杜氏杆菌属、乳杆菌属、双歧杆菌属等菌属相对丰富度降低,埃希氏-志贺氏菌属、摩根氏菌属、普罗维登斯菌属、变形杆菌属的相对丰度显著增加。与模型组比较,丹皮酚明显降低了乙醇饲料诱导的肝损伤小鼠的血脂、肝功能、氧化应激水平,炎症因子的表达(P<0.05),减少肝脏脂肪空泡,改善并恢复了回肠肠道屏障,恢复了肝细胞和回肠细胞正常结构。改善了由乙醇引起的肠道菌群紊乱的情况,使真杆菌属等有益菌属相对丰富度增加。回肠组织中ZO-1、Claudin-1、TGR5/PKA/CREB蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:丹皮酚对小鼠酒精性肝损伤具有保护作用,作用机制是通过调节真杆菌属介导的TGR5/PKA/CREB信号通路达到抗炎效果和改善肠道屏障来实现的。 展开更多

关键词 丹皮酚 急性酒精性肝损伤 炎症 G蛋白胆汁酸偶联受体5(TGR5)/蛋白激酶A(pka)/cAMP反应结合元件(CREB)信号通路 真杆菌属

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黄芩苷对扩张型心肌病大鼠心室重构、心室肌细胞凋亡及β1-AR/PKA/CaMKⅡ信号通路的影响 被引量：23

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作者 王赛 胡烨 包斯图 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期140-144,共5页

目的：探讨黄芩苷对阿霉素（ADR）诱导扩张型心肌病大鼠心室重构、心室肌细胞凋亡及β_1肾上腺素受体（β_1-AR）/蛋白激酶A（PKA）/钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）信号通路的影响。方法：雄性Wistar大鼠60只,随机分为正常组、模型组... 目的：探讨黄芩苷对阿霉素（ADR）诱导扩张型心肌病大鼠心室重构、心室肌细胞凋亡及β_1肾上腺素受体（β_1-AR）/蛋白激酶A（PKA）/钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）信号通路的影响。方法：雄性Wistar大鼠60只,随机分为正常组、模型组、黄芩苷低、中、高剂量组及卡维地洛组;模型组给予ADR 2 mg·kg^（-1）腹腔注射,黄芩苷组及卡维地洛组在模型组基础上分别给予黄芩苷（25,50,100 mg·kg^（-1）·d^（-1））,卡维地洛10 mg·kg^（-1）·d^（-1）灌胃,正常组给予等体积0.9%NaCl腹腔注射,1次/周,共3次;7周末各组大鼠行心脏超声检测心室变化及心功能指标;酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组大鼠血清氨基末端脑钠肽前体（N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-pro BNP）,人基裂解素（human stromelysin-2,ST2）含量;采用原位末端转移酶标记法（TUNEL）染色观察各组大鼠心室肌细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组大鼠心室肌组织中β_1-AR,PKA及CaMKⅡ表达。结果：与正常组比较,模型组大鼠出现心室重构明显及心功能减弱（P〈0.05）,血清NT-proBNP,ST2含量增多（P〈0.05）,心室肌细胞凋亡数量增加（P〈0.05）,心室肌组织中β_1-AR,PKA及CaMKⅡ表达增多;与模型组比较,黄芩苷及卡维地洛组大鼠心室重构及心功能改善（P〈0.05）,血清NT-pro BNP,ST2含量降低（P〈0.05）,心室肌凋亡数量减少（P〈0.05）,心室肌组织中β_1-AR,PKA及CaMKⅡ表达减少（P〈0.05）。结论：黄芩苷可有效改善ADR诱导的扩张型心肌病大鼠心室重构,减少心肌细胞凋亡,其机制可能与抑制心室肌细胞β-AR/PKA/CaMKⅡ信号通路表达有关。 展开更多

关键词 黄芩苷 扩张型心肌病 心室重构 凋亡 β1-肾上腺素受体(β1-AR)/蛋白激酶A(pka)/钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信号通路

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铝作用于cAMP-蛋白激酶A途径及对学习记忆的影响 被引量：6

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作者 孙家郡 邢伟 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期177-179,共3页

铝是一种常见的金属元素,其神经毒性可能是影响学习记忆机制的因素之一。突触传递长时程增强(LTP)是研究学习记忆的一个可用电生理模型,cAMP蛋白激酶A(PKA)途径是神经元重要的信号传导通路,在学习记忆形成过程中起重要的作用。铝可以影... 铝是一种常见的金属元素,其神经毒性可能是影响学习记忆机制的因素之一。突触传递长时程增强(LTP)是研究学习记忆的一个可用电生理模型,cAMP蛋白激酶A(PKA)途径是神经元重要的信号传导通路,在学习记忆形成过程中起重要的作用。铝可以影响学习记忆机制中某些环节(如神经递质、钙离子浓度、蛋白激酶等),导致智力及认知能力的下降。该文根据近年来国内外在该领域的研究进展,从电生理学、生物化学等方面阐述了铝对学习记忆机制的影响及与cAMP/PKA途径的关系。 展开更多

关键词 铝 环状腺苷酸(cAMP) 蛋白激酶A(pka) 学习记忆

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CDC25B蛋白S149/S321位点突变对小鼠1-细胞期受精卵发育的影响 被引量：2

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作者 刘超 肖建英 +2 位作者 孙小涵 徐晓燕 于秉治 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2012年第2期73-80,共8页

目的:研究小鼠CDC25B蛋白S149位点对小鼠1-细胞期受精卵发育的影响及S149位点与S321位点的关系。方法:构建pBSK-CDC25B-S149A和pBSK-CDC25B-S149A/S321A突变体,体外转录成mRNA;采用小鼠超排卵技术取G1期受精卵,显微注射CDC25B-WT-mRNA... 目的:研究小鼠CDC25B蛋白S149位点对小鼠1-细胞期受精卵发育的影响及S149位点与S321位点的关系。方法:构建pBSK-CDC25B-S149A和pBSK-CDC25B-S149A/S321A突变体,体外转录成mRNA;采用小鼠超排卵技术取G1期受精卵,显微注射CDC25B-WT-mRNA和突变CDC25B-S149A-mRNA、CDC25B-S149A/S321A-mRNA,观察其对受精卵发育、M期促进因子(MPF)活性及CDC2-pTyr15磷酸化状态的影响。结果:CDC25B-S149A-mRNA注射组受精卵卵裂率明显高于CDC25B-WT-mRNA注射组,MPF活性提前1 h达到高峰;而联合突变体CDC25B-S149A/S321A-mRNA注射组卵裂率又显著高于CDC25B-S149A-mRNA注射组。结论:在小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂过程中,蛋白激酶A(PKA)对小鼠CDC25B蛋白S149位点的磷酸化修饰是控制受精卵G2/M转换的重要方式,并且S149位点与S321位点可能具有协同作用。 展开更多

关键词 CDC25B蛋白 蛋白激酶A(pka) M期促进因子(MPF) 小鼠受精卵

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Rab13-蛋白激酶A途径调节体外培养支持细胞屏障通透性的研究 被引量：2

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作者 宿文辉 孟晓娜 吕孟竹 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2014年第8期611-616,642,共7页

目的:研究Rab13蛋白在支持细胞(SC)屏障功能调节中的作用。方法:体外分离培养大鼠睾丸SC,Western blotting检测Rab13的表达,免疫共沉淀检测Rab13与蛋白激酶A(PKA)催化亚基间的相互作用;睾酮处理建立SC体外屏障增强模型,Western blottin... 目的:研究Rab13蛋白在支持细胞(SC)屏障功能调节中的作用。方法:体外分离培养大鼠睾丸SC,Western blotting检测Rab13的表达,免疫共沉淀检测Rab13与蛋白激酶A(PKA)催化亚基间的相互作用;睾酮处理建立SC体外屏障增强模型,Western blotting和放射自显影法分别检测Rab13的表达及PKA活性变化,并通过跨上皮电阻(TER)检测PKA活性对SC屏障功能的影响;小干扰RNA(siRNA)干扰Rab13表达,检测其对PKA活性及SC屏障功能的影响。结果:Rab13的表达随SC屏障的建立逐渐降低,且与PKA催化亚基间存在相互作用;睾酮处理可使Rab13的表达下降而PKA活性升高;Rab13 siRNA干扰可导致PKA活性升高,且SC屏障功能增强;抑制PKA活性可以拮抗睾酮或Rab13 siRNA对屏障功能的增强作用。结论:Rab13可通过调节PKA活性参与调节SC屏障通透性。 展开更多

关键词 支持细胞(Sertoli cell SC) 血一睾屏障 Rab13 蛋白激酶A(pka)

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