独活寄生汤干预膝骨关节炎模型大鼠软骨PERK/Bip信号通路的表达 被引量：20

1

作者 陈俊 吴广文 +5 位作者 许惠凤 郑春松 李西海 邱建清 刘淑如 刘献祥 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第28期4493-4500,共8页

背景:前期研究表明独活寄生汤可有效抑制软骨细胞凋亡,但其具体机制尚不明确。目的:观察独活寄生汤对膝骨关节炎大鼠软骨PERK/Bip信号通路关键调节因子PERK、Bip、eI F-2α、ATF-4、GADD153、Caspase-9、Caspase-3的影响,探讨独活寄生... 背景:前期研究表明独活寄生汤可有效抑制软骨细胞凋亡,但其具体机制尚不明确。目的:观察独活寄生汤对膝骨关节炎大鼠软骨PERK/Bip信号通路关键调节因子PERK、Bip、eI F-2α、ATF-4、GADD153、Caspase-9、Caspase-3的影响,探讨独活寄生汤防治骨关节炎的作用机制。方法:80只SD大鼠适应性喂养1周后,随机分为正常组(20只)和造模组(60只)。造模组应用膝关节注射木瓜蛋白酶法制备膝骨关节炎模型。造模成功后随机分为3组,即模型组(n=20)、治疗组(n=20)和阳性对照组(n=20)。正常组和模型组给予生理盐水;治疗组给予独活寄生汤,按照9.3 g/(kg·d)的药量进行灌胃;阳性对照组给予盐酸氨基葡萄糖胶囊0.15 g/(kg·d)。2周为1个疗程,共4个疗程。分别于2,4个疗程后切取右侧胫骨平台,免疫组化法和RT-PCR法检测PERK、Bip、e IF-2α、ATF-4、GADD153、Caspase-9、Caspase-3蛋白和mRNA表达情况。结果与结论:(1)RT-PCR结果显示,独活寄生汤和盐酸氨基葡萄糖均能抑制PERK、Bip、e IF-2α、ATF-4、GADD153、Caspase-9、Caspase-3 mRNA表达(P<0.05或0.01),干预时间越长,效果越明显,但2组间无显著差异(P>0.05);(2)免疫组化结果与RT-PCR结果趋势一致,即独活寄生汤和盐酸氨基葡萄糖均能抑制PERK、Bip、e IF-2α、ATF-4、GADD153、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达(P<0.05或0.01),干预时间越长,效果越明显,但2组间无显著性差异(P>0.05);(3)结果提示,独活寄生汤可能是通过调控PERK/Bip信号通路,进而抑制因内质网应激反应引起的软骨细胞凋亡。 展开更多

关键词 独活 骨关节炎 细胞凋亡 组织工程 独活寄生汤 软骨 perk/bip信号通路 eIF-2α ATF-4 GADD153 Caspase-9 Caspase-3 免疫组化 内质网应激 国家自然科学基金

在线阅读 下载PDF 职称材料

miR-142-3p靶向PERK/Bip信号通路对骨关节炎模型大鼠的干预作用 被引量：1

2

作者 魏萌 张英民 +3 位作者 康少英 李建伟 王振兴 陈伟 《局解手术学杂志》 2022年第5期379-384,共6页

目的探究微小RNA-142-3p(miR-142-3p)靶向蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/免疫球蛋白结合蛋白(Bip)信号通路对骨关节炎模型大鼠的干预作用。方法选取60只SPF级雄性大鼠,随机挑选15只作为空白组,其余45只建立骨关节炎模型,最终39只建模成功... 目的探究微小RNA-142-3p(miR-142-3p)靶向蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/免疫球蛋白结合蛋白(Bip)信号通路对骨关节炎模型大鼠的干预作用。方法选取60只SPF级雄性大鼠,随机挑选15只作为空白组,其余45只建立骨关节炎模型,最终39只建模成功,随机分为模型组、下调组、上调组,每组13只;建模成功后,空白组和模型组于膝部注射生理盐水,上调组和下调组分别于右膝关节腔内注射miR-142-3p mimic和miR-142-3p inhibitor。HE染色观察各组大鼠膝关节软骨组织病理学变化;观察并比较各组大鼠膝关节活动度、压痛阈值、热痛阈值;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;实时荧光定量PCR检测转化生长因子-β(TGF-β)、Ⅰ型胶原α1(COL1α1)、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)mRNA水平;Western blot检测PERK/Bip信号通路蛋白表达量。结果与模型组相比,下调组miR-142-3p表达量降低,上调组miR-142-3p表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05),提示miR-142-3p转染成功。通过组织病理学观察发现,空白组和上调组大鼠膝关节软骨组织完整,模型组和下调组大鼠膝关节软骨退变,正常软骨结构丧失。与空白组比较,其他各组大鼠膝关节活动度较小,压痛阈值、热痛阈值较低,IL-1β、TNF-α、TGF-β、COL1α1、TIMP1 mRNA水平较高,PERK、Bip、Caspase-9蛋白表达较高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,下调组大鼠膝关节活动度较小,压痛阈值、热痛阈值较低,IL-1β、TNF-α、TGF-β、COL1α1、TIMP1 mRNA水平较高,PERK、Bip、Caspase-9蛋白表达较高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组和下调组比较,上调组大鼠膝关节活动度较大,压痛阈值、热痛阈值较高,IL-1β、TNF-α、TGF-β、COL1α1、TIMP1 mRNA水平较低,PERK、Bip、Caspase-9蛋白表达较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论上调骨关节炎大鼠miR-142-3p的表达可有效改善大鼠膝关节活动度、压痛阈值及热痛阈值,减轻炎症反应,调节滑膜纤维化标志物水平。可能的分子机制是miR-142-3p通过抑制PERK/Bip信号通路上PERK、Bip、Caspase-9蛋白的表达减轻炎症反应。 展开更多

关键词 perk/bip信号通路 微小RNA-142-3p 骨关节炎 炎症反应 滑膜纤维化

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于内质网应激PERK信号通路探讨芍药汤和参苓白术散对胃肠湿热型、脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠的干预

3

作者 杜英杰 魏福光 +6 位作者 张茜 李江红 张志军 谢建辉 马继忠 孟建国 李旭 《中医研究》 2025年第1期77-81,共5页

目的:通过检测内质网应激蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmicreticulum kinase, PERK)信号通路相关基因及蛋白的表达探讨芍药汤和参苓白术散治疗胃肠湿热型和脾虚湿困型溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)的... 目的:通过检测内质网应激蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmicreticulum kinase, PERK)信号通路相关基因及蛋白的表达探讨芍药汤和参苓白术散治疗胃肠湿热型和脾虚湿困型溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)的作用机制。方法:取10只大鼠作为空白组;取30只建立胃肠湿热型UC模型并随机分为胃肠湿热组、芍药汤-胃肠湿热组、参苓白术散-胃肠湿热组,每组10只;取30只建立脾虚湿困脾UC模型并随机分为脾虚湿困组、芍药汤-脾虚湿困组、参苓白术散-脾虚湿困组,每组10只。芍药汤-胃肠湿热组、芍药汤-脾虚湿困组予以芍药汤灌胃,参苓白术散-胃肠湿热组、参苓白术散-脾虚湿困组予以参苓白术散灌胃,空白组、胃肠湿热组和脾虚湿困组给予等体积的生理盐水灌胃。灌胃14 d后,进行大鼠疾病活动指数(disease activity index, DAI)评分;分别用蛋白质印迹法及逆转录-聚合酶链反应法检测结肠组织PERK蛋白和信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid, mRNA)的表达。结果:(1)DAI评分方面。胃肠湿热证型的DAI评分依次是芍药汤-胃肠湿热组<参苓白术散-胃肠湿热组<胃肠湿热组,脾虚湿困证型的DAI评分依次是参苓白术散-脾虚湿困组<芍药汤-脾虚湿困组<脾虚湿困组,组间对比差异有统计学意义(P<0.05)。(2)磷酸化PERK(phospho-PERK,p-PERK)蛋白相对表达量及PERK mRNA相对表达量方面。空白组与芍药汤-胃肠湿热组、参苓白术散-脾虚湿困组间差异无统计学意义(P>0.05),均低于其余各组(P<0.05)。胃肠湿热同证型从低到高依次是芍药汤-胃肠湿热组、参苓白术散-胃肠湿热组、胃肠湿热组,且差异有统计学意义(P<0.05);脾虚湿困同证型从低到高依次是参苓白术散-脾虚湿困组、芍药汤-脾虚湿困组、脾虚湿困组,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在胃肠湿热型和脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠发病过程中PERK信号通路得到同等程度的激活,在对症治疗过程中PERK信号通路得到相似的调控。 展开更多

关键词 溃疡性结肠炎 内质网应激 perk信号通路 芍药汤 参苓白术散

在线阅读 下载PDF 职称材料

4-苯基丁酸抑制PERK/Bip信号通路缓解骨关节炎大鼠内质网应激 被引量：6

4

作者 李炳亮 王建 杨娅 《解剖科学进展》 2020年第6期673-676,共4页

目的观察内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-Phenylbutyricacid,4-PBA)对骨关节炎(osteoarthritis,OA)大鼠内质网应激的影响,探讨PERK/Bip信号通路的调控机制。方法SD大鼠30只,随机分为假手术组(Sham),骨关节炎模型组(OA)和4-PBA治疗组(OA+4... 目的观察内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-Phenylbutyricacid,4-PBA)对骨关节炎(osteoarthritis,OA)大鼠内质网应激的影响,探讨PERK/Bip信号通路的调控机制。方法SD大鼠30只,随机分为假手术组(Sham),骨关节炎模型组(OA)和4-PBA治疗组(OA+4-PBA),每天灌胃0.35g/kg的4-PBA,连续4周;HE染色观察病理组织学变化,TUNEL观察细胞凋亡;ELISA检测炎症因子和氧化应激因子含量;Western blot法检测内质网应激相关蛋白及PERK/Bip信号通路的表达变化。结果4-PBA减轻骨关节炎大鼠损伤,降低膝关节滑膜组织细胞凋亡率,抑制氧化应激损伤和炎症反应,抑制内质网应激GRP78和caspase12的表达,同时下调PERK/Bip信号通路的表达水平。结论4-PBA抑制内质网应激引起的OA大鼠关节损伤,与抑制PERK/Bip信号通路相关。 展开更多

关键词 4-苯基丁酸 关节炎 内质网应激 perk/bip信号通路 大鼠

原文传递

基于内质网应激PERK/ATF4/CHOP信号通路探讨丹参多酚酸盐对膜性肾病大鼠足细胞凋亡的影响 被引量：2

5

作者 郭明鑫 高圣柠 +4 位作者 吴怡欢 毛竞宇 唐淼 吴红红 檀金川 《江苏中医药》 CAS 2024年第9期67-73,共7页

目的:基于蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/活化转录因子4(ATF4)/转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路探讨丹参多酚酸盐对膜性肾病(MN)大鼠内质网应激的影响。方法:将80只雄性SD大鼠随机分配,其中20只为正常组,剩余60只大鼠采用尾静脉注... 目的:基于蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/活化转录因子4(ATF4)/转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路探讨丹参多酚酸盐对膜性肾病(MN)大鼠内质网应激的影响。方法:将80只雄性SD大鼠随机分配,其中20只为正常组,剩余60只大鼠采用尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)的方法诱导MN病变。将造模成功的大鼠随机分为模型组、贝那普利组和丹参多酚酸盐低、中、高剂量组,每组10只,另取10只正常组大鼠共同进行实验。贝那普利组每日给药剂量为10 mg/kg,丹参多酚酸盐低、中、高剂量组每日给药剂量分别为16.7、33.3、66.7 mg/kg,正常组和模型组予等体积生理盐水,各组均每日灌胃1次,连续4周。检测各组大鼠治疗后24 h尿蛋白定量(24 h-UTP);腹主动脉取血分离血清,检测各组大鼠血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)含量;过碘酸六胺银(PASM)染色后光镜观察各组大鼠肾组织病理形态,透射电子显微镜进一步观察各组大鼠肾组织细微结构变化;免疫荧光法检测各组大鼠肾组织免疫球蛋白G(IgG)沉积情况;免疫组化(IHC)法检测各组大鼠肾组织足细胞裂隙膜蛋白(Podocin)、足细胞裂孔隔膜蛋白(Nephrin)表达水平;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组大鼠肾组织PERK、ATF4、CHOP、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果:相较于正常组,模型组大鼠的肾组织显示出显著的病理性变化,肾小球基底膜显著增厚,并出现类似钉突的结构改变,同时伴有系膜基质的增生现象,沿毛细血管袢有IgG弥漫性沉积;各给药组大鼠肾组织上述病理改变有所缓解,足细胞损伤减少,IgG沉积减轻。模型组大鼠24 h-UTP水平显著高于正常组(P<0.01);各给药组大鼠24 h-UTP水平均显著低于模型组(P<0.05,P<0.01),其中丹参多酚酸盐中剂量组大鼠24 h-UTP水平与贝那普利组比较差异无统计学意义(P>0.05),丹参多酚酸盐高剂量组大鼠24 h-UTP水平明显低于贝那普利组(P<0.01),丹参多酚酸盐对MN模型大鼠24 h-UTP水平的降低作用具有明显的剂量依赖性(P<0.01)。各组大鼠血清BUN、Scr水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠肾组织Podocin、Nephrin蛋白表达显著低于正常组(P<0.05);各给药组大鼠上述蛋白表达均显著高于模型组(P<0.05),其中丹参多酚酸盐中剂量组大鼠上述蛋白表达水平与贝那普利组比较差异无统计学意义(P>0.05),丹参多酚酸盐高剂量组大鼠上述蛋白表达水平明显高于贝那普利组(P<0.05),丹参多酚酸盐对MN模型大鼠上述蛋白表达水平的升高作用具有明显的剂量依赖性(P<0.05)。模型组大鼠肾组织PERK、ATF4、CHOP、Bax蛋白表达水平均明显高于正常组(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平明显低于正常组(P<0.01);各给药组大鼠肾组织上述蛋白表达水平均较模型组显著改善(P<0.05,P<0.01),其中丹参多酚酸盐中剂量组大鼠上述蛋白表达水平与贝那普利组比较差异无统计学意义(P>0.05),丹参多酚酸盐高剂量组大鼠上述蛋白表达的改善程度显著优于贝那普利组(P<0.01),丹参多酚酸盐对MN模型大鼠上述蛋白表达水平的改善作用具有明显的剂量依赖性(P<0.01)。结论:丹参多酚酸盐可能通过调控PERK/ATF4/CHOP信号通路,缓解肾组织内质网应激,抑制足细胞凋亡,进而保护肾脏及延缓疾病进展。 展开更多

关键词 膜性肾病 丹参多酚酸盐 内质网应激 perk/ATF4/CHOP信号通路 凋亡 盐酸贝那普利

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于PERK/ATF4/CHOP信号通路研究滋阴明目方含药血清对衣霉素诱导的ARPE-19细胞的作用机制 被引量：1

6

作者 谢薇 彭俊 +2 位作者 宋厚盼 欧晨 彭清华 《湖南中医药大学学报》 CAS 2024年第5期785-790,共6页

目的研究滋阴明目方含药血清对衣霉素诱导ARPE-19细胞的影响及其可能机制。方法构建细胞内质网应激损伤模型,将ARPE-19细胞分为空白组、模型组、空白血清组、滋阴明目方含药血清组、牛磺熊去氧胆酸组。对细胞进行形态观察,CCK-8检测细... 目的研究滋阴明目方含药血清对衣霉素诱导ARPE-19细胞的影响及其可能机制。方法构建细胞内质网应激损伤模型,将ARPE-19细胞分为空白组、模型组、空白血清组、滋阴明目方含药血清组、牛磺熊去氧胆酸组。对细胞进行形态观察,CCK-8检测细胞存活率,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot检测细胞蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、活化转录因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白的表达。结果选用浓度50μmol/L衣霉素干预ARPE-19细胞造模。观察细胞形态发现,滋阴明目方含药血清组和牛磺熊去氧胆酸组ARPE-19细胞较模型组细胞数量增多,生长较均匀,漂浮的死亡ARPE-19细胞及碎片减少。与空白组相比,模型组和空白血清组的细胞存活率下降(P<0.01),凋亡率明显上升(P<0.01),PERK、ATF4、CHOP蛋白表达上调(P<0.01)。与模型组相比,滋阴明目方含药血清组细胞存活率上升(P<0.01),凋亡率明显下降(P<0.01),PERK、ATF4、CHOP蛋白表达下调(P<0.01)。结论滋阴明目方含药血清可以减少ARPE-19细胞内质网应激损伤模型的凋亡,其分子机制与调控PERK-ATF4-CHOP信号通路有关。 展开更多

关键词 滋阴明目方 ARPE-19细胞 衣霉素 内质网应激损伤模型 perk/ATF4/CHOP信号通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

葛根芩连汤对2型糖尿病db/db小鼠胰腺组织PERK/ATF4/CHOP信号通路的影响 被引量：3

7

作者 关晓文 梁永林 +3 位作者 朱向东 苏菲 张媛媛 翟艳会 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第1期97-103,共7页

目的观察葛根芩连汤对2型糖尿病(T2DM)小鼠胰腺内质网应激的影响,探讨其治疗T2DM的作用机制。方法75只SPF级雄性db/db小鼠随机分为模型组、二甲双胍组和葛根芩连汤高、中、低剂量组,每组15只,15只db/m小鼠作为空白组,给药组分别予相应... 目的观察葛根芩连汤对2型糖尿病(T2DM)小鼠胰腺内质网应激的影响,探讨其治疗T2DM的作用机制。方法75只SPF级雄性db/db小鼠随机分为模型组、二甲双胍组和葛根芩连汤高、中、低剂量组,每组15只,15只db/m小鼠作为空白组,给药组分别予相应药物灌胃12周。检测小鼠体质量、空腹血糖(FBG)及糖化血红蛋白(HbA1c),HE染色观察胰腺组织病理变化,TUNEL染色检测胰岛细胞凋亡情况,Western blot检测胰腺组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、p-PERK、活化转录因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白表达,实时荧光定量PCR检测胰腺组织PERK、ATF4、CHOP mRNA表达。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量、FBG和HbA1c含量显著增加(P<0.01);胰腺组织结构不完整,边界模糊,内有空泡,胰岛细胞凋亡明显增加(P<0.01);胰腺组织GRP78、p-PERK、ATF4、CHOP蛋白表达显著升高(P<0.01),PERK、ATF4、CHOP mRNA表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠体质量、FBG和HbA1c含量显著减少(P<0.05,P<0.01);胰腺组织病理改变有所减轻,胰岛细胞凋亡不同程度减少(P<0.05,P<0.01);葛根芩连汤高、中剂量组和二甲双胍组胰腺组织GRP78、p-PERK、ATF4、CHOP蛋白表达显著降低(P<0.01),PERK、ATF4、CHOP mRNA表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论葛根芩连汤可能通过抑制内质网应激PERK/ATF4/CHOP信号通路,下调相关基因和蛋白表达,减少胰岛细胞凋亡,保护胰岛细胞功能,延缓T2DM进展。 展开更多

关键词 葛根芩连汤 2型糖尿病 内质网应激 perk/ATF4/CHOP信号通路 小鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

FABP4沉默通过调节PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路对妊娠糖尿病大鼠内质网应激和胰岛素抵抗的影响 被引量：1

8

作者 李贞 余冬平 +3 位作者 罗武 陶婷 陈辉 王宁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期705-713,共9页

目的:探讨脂肪酸结合蛋白4(FABP4)沉默通过调节蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核细胞启动因子2α(eIF2α)/转录因子4(ATF4)/C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路对妊娠糖尿病(GDM)大鼠内质网应激(ERS)和胰岛素抵抗(IR)的影响。方法:腹腔注射... 目的:探讨脂肪酸结合蛋白4(FABP4)沉默通过调节蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核细胞启动因子2α(eIF2α)/转录因子4(ATF4)/C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路对妊娠糖尿病(GDM)大鼠内质网应激(ERS)和胰岛素抵抗(IR)的影响。方法:腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立GDM大鼠模型。通过尾静脉注射FABP4 siRNA质粒(si-FABP4)、阴性对照质粒(NC)和PERK激活剂(CCT020312),将大鼠随机分为Normal组、GDM组、GDM+NC组、GDM+si-FABP4组、GDM+si-FABP4+CCT020312组。检测胰腺组织中FABP4含量、血脂水平、炎症标志物水平和氧化应激标志物水平,检测胰腺组织中PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路相关蛋白表达。HTR-8/SVneo细胞分为5组:对照(Control)组、高糖(HG)组、HG+NC组、HG+si-FABP4组、HG+si-FABP4+CCT020312组,24 h后检测细胞中FABP4及PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路相关蛋白表达。结果:与Normal组相比,GDM组大鼠血清和胰腺组织中FABP4水平显著上调(P<0.05)。FABP4沉默显著降低了FBG和IR,并伴有血脂、CRP、TNF-α、IL-6及MDA水平降低和SOD、CAT水平升高(P<0.05)。此外,FABP4沉默减轻了胰腺和胎盘组织损伤。而CCT020312上调PERK、eIF2α磷酸化水平和ATF4、CHOP蛋白表达后,FABP4沉默对GDM大鼠IR、炎症、氧化应激以及胰腺和胎盘损伤的抑制作用均被逆转(P<0.05)。FABP4在HG诱导的HTR-8/SVneo细胞中上调表达,沉默FABP4可抑制PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路蛋白表达,CCT020312则逆转这种变化(P<0.05)。结论:FABP4沉默通过抑制炎症和氧化应激,改善GDM大鼠的IR和ERS,其机制与抑制PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路有关。 展开更多

关键词 FABP4 perk/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路 妊娠糖尿病 内质网应激 胰岛素抵抗

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于PERK信号通路调控ERS介导神经元凋亡探讨脊髓伤方对大鼠脊髓压迫神经元的保护作用及机制

9

作者 刘春志 钟妮 +4 位作者 张鼎 汤立蓉 杨汉立 张玲 钟远鸣 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第13期2905-2911,共7页

目的观察脊髓伤方对颈脊髓压迫模型大鼠PERK/eIF2α/CHOP信号通路相关蛋白及mRNA表达的影响,探究其通过调控ERS以抑制神经元凋亡可能的效应机制。方法实验分为假手术组、模型组、阳性对照组、脊髓伤方低、中、高剂量组(n=8)。制备脊髓压... 目的观察脊髓伤方对颈脊髓压迫模型大鼠PERK/eIF2α/CHOP信号通路相关蛋白及mRNA表达的影响,探究其通过调控ERS以抑制神经元凋亡可能的效应机制。方法实验分为假手术组、模型组、阳性对照组、脊髓伤方低、中、高剂量组(n=8)。制备脊髓压迫(CSM)模型大鼠。假手术组和模型组以生理盐水灌胃,阳性对照组以GSK2606414溶液腹腔注射、脊髓伤方各剂量实验组予以不同浓度脊髓伤方灌胃,连续4周。术后2周、4周分别观察颈脊髓压迫大鼠模型BBB评分、改良Rivlin斜板评分;术后4周取颈脊髓组织,HE染色观察模型大鼠的组织病理改变;免疫荧光观察组织CHOP、Caspase-3表达情况;rt-qPCR和Western Blotting观察PERK/eIF2α/CHOP信号通路相关蛋白和mRNA的表达水平。结果与假手术组比较,模型组BBB评分和改良Rivlin斜板评分降低,组织中CHOP、Caspase-3蛋白表达明显升高,PERK/eIF2α/CHOP信号通路相关mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组及脊髓伤方各剂量实验组BBB评分和改良Rivlin斜板评分明显升高,组织中CHOP、Caspase-3蛋白表达明显降低,PERK/eIF2α/CHOP信号通路相关mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);脊髓伤方各剂量实验组中中剂量组效果较好(P<0.05)。结论脊髓伤方可通过干预PERK/eIF2α/CHOP信号通路减轻颈脊髓神经元内质网应激,减少脊髓神经元凋亡,从而保护颈脊髓组织,改善颈脊髓受压破大鼠肢体运动功能。 展开更多

关键词 脊髓伤方 脊髓型颈椎病 perk/eIF2α/CHOP信号通路 神经元凋亡

原文传递

降脂通脉饮对高血脂症大鼠血脂和PERK/ATF4/CHOP信号通路的影响 被引量：2

10

作者 郭锦荣 黄微 +3 位作者 吕丹丹 颜靖文 周芬敏 陆瑞峰 《现代中西医结合杂志》 CAS 2024年第4期465-468,479,共5页

目的观察降脂通脉饮对高血脂症大鼠血脂及蛋白激酶样内质网激酶(PERK)/转录激活因子4(ATF4)/C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路的影响,探讨降脂通脉饮调节血脂的作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组及降脂通脉饮低、中、高剂量... 目的观察降脂通脉饮对高血脂症大鼠血脂及蛋白激酶样内质网激酶(PERK)/转录激活因子4(ATF4)/C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路的影响,探讨降脂通脉饮调节血脂的作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组及降脂通脉饮低、中、高剂量组,每组6只。正常组大鼠给予普通饲料喂养,同时灌胃生理盐水;其余组大鼠给予高脂饲料喂养,其中模型组同时灌胃生理盐水,降脂通脉饮低、中、高剂量组同时灌胃1.56 mg/(kg·d)、3.125 mg/(kg·d)、6.25 mg/(kg·d)的降脂通脉饮。连续干预8周后,生化法检测血清胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,RT-PCR和Western blot法检测颈动脉组织中PERK、ATF4、CHOPmRNA及蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平和PERK、ATF4、CHOP mRNA及蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05);与模型组比较,降脂通脉饮中、高剂量组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平和PERK、ATF4、CHOP mRNA及蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05)。结论降脂通脉饮可能通过调节内质网应激PERK/ATF4/CHOP信号通路而发挥降脂作用。 展开更多

关键词 高血脂症 降脂通脉饮 perk/ATF4/CHOP信号通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

独活寄生汤对膝骨关节炎模型大鼠PERK/Bip信号通路的影响 被引量：39

11

作者 赵林灿 李薇薇 +1 位作者 吴毅明 段卫峰 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期18-24,共7页

目的:基于蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/免疫球蛋白结合蛋白(Bip)信号通路探讨独活寄生汤缓解膝骨关节炎的可能机制。方法:采用寒冷刺激法建立膝骨性关节炎模型,将大鼠随机分为空白组,模型组,塞来昔布组(0.021 g·kg^(-1))和独活寄... 目的:基于蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/免疫球蛋白结合蛋白(Bip)信号通路探讨独活寄生汤缓解膝骨关节炎的可能机制。方法:采用寒冷刺激法建立膝骨性关节炎模型,将大鼠随机分为空白组,模型组,塞来昔布组(0.021 g·kg^(-1))和独活寄生汤低、中、高剂量组(8.37,16.72,33.48 g·kg^(-1)),空白组和模型组给予等体积的生理盐水,记录各组大鼠膝关节直径变化。采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠膝关节软骨病理形态变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),透明质酸(HA)的表达;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western bolt)检测软骨中PERK,Bip,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)mRNA和蛋白的表达。结果:与模型组比较,塞来昔布组和独活寄生汤高剂量组大鼠膝关节红肿明显改善,且关节直径均显著的减小(P<0.01),塞来昔布组和独活寄生汤高剂量组大鼠膝关节软骨局部裂隙缺损有明显好转。与空白组比较,模型组大鼠TNF-α,IL-1β和HA表达水平显著升高(P<0.01),大鼠软骨中PERK,Bip,Caspase-9的mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,塞来昔布组和独活寄生汤高剂量组大鼠血清中TNF-α,IL-1β和HA表达明显下降(P<0.05,P<0.01),塞来昔布组和独活寄生汤高剂量组大鼠软骨中PERK,Bip,Caspase-9的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:独活寄生汤能缓解膝骨关节炎模型大鼠的症状,其机制可能与调节大鼠软骨中PERK/Bip信号通路有关。 展开更多

关键词 独活寄生汤 骨性关节炎 蛋白激酶R样内质网激酶(perk) 免疫球蛋白结合蛋白(bip) 信号通路

原文传递

基于PERK/ATF4信号通路探讨保元汤对慢性心力衰竭模型大鼠的影响

12

作者 高晓宇 吉锋 +4 位作者 郝丹阳 谭勇 王佰蓉 郑一雯 陈学彬 《广州中医药大学学报》 CAS 2024年第7期1851-1857,共7页

【目的】观察保元汤对慢性心力衰竭模型大鼠的治疗作用及机制。【方法】将SD大鼠随机分为空白组、模型组、保元汤组、卡托普利组、保元汤+CCT020312[蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)激活剂]组,每组15只。除空白组,其他各组大鼠采用阿霉素... 【目的】观察保元汤对慢性心力衰竭模型大鼠的治疗作用及机制。【方法】将SD大鼠随机分为空白组、模型组、保元汤组、卡托普利组、保元汤+CCT020312[蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)激活剂]组,每组15只。除空白组,其他各组大鼠采用阿霉素诱导构建慢性心力衰竭模型。给予相应的药物干预后,检测各组大鼠心功能指标[左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)及脑钠肽(BNP)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)],炎症相关因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)],氧化应激因子[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)],细胞凋亡相关指标[B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬酶3(Caspase-3)]及PERK/转录激活因子4(ATF4)信号通路相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、PERK、ATF4、C/EBP同源蛋白(CHOP)水平变化。【结果】与空白组比较,模型组大鼠LVEDD,BNP、cTnI,TNF-α、IL-1β,MDA水平,Bax、Caspase-3,GRP78、PERK、ATF4、CHOP蛋白表达水平显著升高,LVEF、LVFS,SOD及Bcl-2蛋白表达水平显著降低(均P<0.05)。与模型组和保元汤+CCT020312组比较,保元汤组、卡托普利组大鼠LVEDD,BNP、cTnI,TNF-α、IL-1β,MDA水平,Bax、Caspase-3,GRP78、PERK、ATF4、CHOP蛋白表达水平显著降低,LVEF、LVFS,SOD及Bcl-2蛋白表达水平显著升高(均P<0.05)。与卡托普利组比较,保元汤组大鼠上述指标(除CHOP蛋白表达水平外)均无显著变化(P>0.05)。【结论】保元汤可以延缓慢性心力衰竭大鼠进展,其机制可能与抑制PERK/ATF4信号传导通路缓解心肌细胞凋亡,进而减轻炎症反应和氧化应激程度,从而促进心功能及心肌损伤的修复有关。 展开更多

关键词 保元汤 慢性心力衰竭 perk/ATF4信号通路 凋亡 炎症 氧化应激 大鼠

原文传递

独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞PERK/Bip通路关键调控蛋白的影响 被引量：4

13

作者 陈俊 许惠凤 +6 位作者 郑春松 叶锦霞 陈振沅 邱建清 刘淑如 刘献祥 吴广文 《福建中医药》 2018年第5期28-31,共4页

目的观察独活寄生汤含药血清对大鼠退变软骨细胞PERK/Bip信号通路关键调控蛋白的影响。方法采用IL-1β诱导建立体外退变软骨细胞模型,分别采用空白血清和独活寄生汤含药血清干预24 h、48 h、72h后,收集软骨细胞,采用Western Blot法检测... 目的观察独活寄生汤含药血清对大鼠退变软骨细胞PERK/Bip信号通路关键调控蛋白的影响。方法采用IL-1β诱导建立体外退变软骨细胞模型,分别采用空白血清和独活寄生汤含药血清干预24 h、48 h、72h后,收集软骨细胞,采用Western Blot法检测退变软骨细胞中PERK、Bip、eIF-2α、ATF-4、GADD153、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达变化。结果随着干预时间的延长,空白血清组和含药血清组PERK、Bip、eIF-2α、ATF-4、GADD153、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达均逐渐降低,含药血清组降低更明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论独活寄生汤可能是通过调控PERK/Bip信号通路,抑制软骨细胞凋亡,从而起到治疗膝骨关节炎的作用。 展开更多

关键词 骨关节炎 退变软骨细胞 perk/bip信号通路 独活寄生汤 含药血清 大鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于内质网应激PERK信号通路探讨芍药汤对UC大鼠的作用机制 被引量：18

14

作者 罗敏 杜英杰 +3 位作者 姜燕诗 肖金银 林仁敬 李帅军 《湖南中医药大学学报》 CAS 2021年第11期1663-1668,共6页

目的通过检测内质网应激蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)信号通路相关基因及蛋白的表达,探讨芍药汤治疗溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法100只SD大鼠建立胃肠湿热证模型后,随机抽取25只作为空白组,其余大鼠用三硝基苯磺酸法在其基础上建... 目的通过检测内质网应激蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)信号通路相关基因及蛋白的表达,探讨芍药汤治疗溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法100只SD大鼠建立胃肠湿热证模型后,随机抽取25只作为空白组,其余大鼠用三硝基苯磺酸法在其基础上建立UC大鼠模型后分为模型组、柳氮磺吡啶组、芍药汤组,每组25只。空白组、模型组利用生理盐水灌胃,柳氮磺吡啶组利用柳氮磺吡啶灌胃,芍药汤组利用芍药汤灌胃。在灌胃第7、14天,各组大鼠分别进行大鼠疾病活动指数(DAI)评分;同时各组随机处死数量相同的大鼠进行大鼠的结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分;用Western blot法及RT-PCR法检测结肠组织PERK蛋白和mRNA的表达。结果造模4 d后,各模型大鼠结肠组织可见溃疡面,并经病检证实,提示造模成功。与空白组比较,各组各时间点DAI评分、CMDI评分均增高(P<0.05)。(1)DAI评分:灌胃7、14 d时,柳氮磺吡啶组与芍药汤均低于模型组(P<0.05);灌胃14 d时,芍药汤组较柳氮磺吡啶组低(P<0.05)。(2)CMDI评分:灌胃7、14 d时,模型组、柳氮磺吡啶组均高于芍药汤组(P<0.05)。(3)p-PERK蛋白和mRNA的表达:灌胃7 d时,与空白组相比,模型组及柳氮磺吡啶组p-PERK蛋白和mRNA表达均升高(P<0.05);芍药汤组p-PERK蛋白和mRNA表达较模型组低(P<0.05);灌胃14 d时,与空白组相比,模型组及柳氮磺吡啶组p-PERK蛋白和mRNA表达均升高(P<0.05);芍药汤组p-PERK蛋白和mRNA表达较模型组及柳氮磺吡啶组低(P<0.05)。结论芍药汤通过抑制胃肠湿热型UC大鼠结肠ESR过程中PERK信号通路的激活,从而改善UC大鼠的症状及体征,这可能是其治疗UC的作用机制。 展开更多

关键词 芍药汤 溃疡性结肠炎 胃肠湿热型 内质网应激 perk信号通路 DAI评分 CMDI评分

在线阅读 下载PDF 职称材料

运动联合抗抑郁药物对大鼠海马细胞和BDNF/pERK信号通路的影响 被引量：11

15

作者 包玲 胡晓华 +2 位作者 王宗琴 高作慧 冯映映 《中国现代医学杂志》 CAS 2018年第20期14-19,共6页

目的研究运动联合帕罗西汀的抗抑郁效果及其作用机制。方法采用慢性不可预知性温和应激复制大鼠抑郁模型,分为对照组、模型组、运动组、给药组、联合组,每组12只。通过规律性运动和帕罗西汀进行干预,用糖水和Morris水迷宫实验检测大鼠... 目的研究运动联合帕罗西汀的抗抑郁效果及其作用机制。方法采用慢性不可预知性温和应激复制大鼠抑郁模型,分为对照组、模型组、运动组、给药组、联合组,每组12只。通过规律性运动和帕罗西汀进行干预,用糖水和Morris水迷宫实验检测大鼠行为学,作为缺乏快感的客观指标,判定模型是否复制成功。采用DCFH-DA法检测海马细胞的凋亡率和活性氧(ROS)水平,Western blot检测海马细胞中脑源性神经营养因子(BDNF)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p ERK)、神经肽(VGF)蛋白表达水平。结果与对照组相比,联合组糖水消耗量降低,逃避潜伏期延长(P<0.05);与运动组相比,联合组大鼠21 d后糖水消耗量增加,逃避潜伏期降低(P<0.05)。与运动组相比,联合组细胞ROS、凋亡率降低(P<0.05)。模型组大鼠海马细胞中BDNF、p ERK、VGF蛋白表达低于对照组(P<0.05);与运动组相比,联合组海马细胞中BDNF、p ERK、VGF蛋白表达升高。结论运动联合帕罗西汀的抗抑郁效果优于单一运动疗法或药物治疗,可更好地缓解快感缺乏,降低海马细胞凋亡率和氧化应激损伤,其可能是通过BDNF/p ERK信号通路调控下游靶基因VGF的表达而发挥作用。 展开更多

关键词 运动 抑郁症 海马细胞 凋亡 BDNF/perk信号通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

香砂六君子汤对脾虚高脂血症大鼠内质网应激PERK信号通路的影响 被引量：3

16

作者 杜莹 贾连群 +2 位作者 冷雪 王杰 杨关林 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第9期75-78,I0023,共5页

目的探讨香砂六君子汤对脾虚高脂血症大鼠内质网应激蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like ER kinase,PERK)信号通路的影响。方法SD大鼠随机分为4组,即正常对照组、脾虚高脂组、香砂六君子汤组和辛伐他汀组,后3组采用饮食不节... 目的探讨香砂六君子汤对脾虚高脂血症大鼠内质网应激蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like ER kinase,PERK)信号通路的影响。方法SD大鼠随机分为4组,即正常对照组、脾虚高脂组、香砂六君子汤组和辛伐他汀组,后3组采用饮食不节加力竭游泳的复合方法造模15 d后,正常组喂饲基础饲料,其余3组喂饲高脂饲料。12周后,分别给予相对剂量药物和生理盐水。4周后,检测各组大鼠血脂含量、D-木糖排泄率,油红O染色观察肝脏脂质沉积情况,实时荧光定量PCR及Western blot法检测大鼠肝脏葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78 kD,GRP78)、PERK和活化转录因子4(the activating transcription factor 6,ATF4)基因及蛋白表达。结果与正常对照组比较,脾虚高脂组大鼠血清脂质异常,表现为总胆固醇(cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇酯(low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)明显升高,高密度脂蛋白胆固醇酯(high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)明显降低,尿D-木糖排泄率明显降低;肝脏脂质沉积显著,可见明显脂滴;肝脏GRP78、PERK和ATF4 mRNA水平及蛋白表达水平显著升高。与脾虚高脂组比较,香砂六君子汤组和辛伐他汀组大鼠血清TC、TG、LDL-C明显降低,HDL-C明显升高,尿D-木糖排泄率明显升高;其肝脏脂质沉积情况有明显改善,脂滴不同程度减轻;肝脏GRP78、PERK和ATF4 mRNA水平及蛋白表达水平明显降低。结论香砂六君子汤可能通过调控内网应激PERK信号通路来纠正脾虚脂质紊乱的状态。 展开更多

关键词 香砂六君子汤 脾虚 高脂血症 内质网应激 perk信号通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路探讨化浊解毒消痈方对溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜的保护作用 被引量：5

17

作者 娄莹莹 李佃贵 +4 位作者 杨倩 李燕 王思月 王志成 胡贺 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3415-3419,共5页

目的基于PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路探讨化浊解毒消痈方对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的作用。方法将48只小鼠随机分成正常组、模型组、美沙拉嗪组(阳性药,045 g/kg)和化浊解毒消痈方高、中、低剂量组(2868、1434、717 g/kg),每组8只。除... 目的基于PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路探讨化浊解毒消痈方对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的作用。方法将48只小鼠随机分成正常组、模型组、美沙拉嗪组(阳性药,045 g/kg)和化浊解毒消痈方高、中、低剂量组(2868、1434、717 g/kg),每组8只。除正常组外,其余各组小鼠均采用25%葡聚糖硫酸钠(DSS)自由饮用7 d建立溃疡性结肠炎模型,造模后各组灌胃给予相应剂量药物。给药7 d后,分析小鼠疾病活动指数(DAI)评分,HE染色观察结肠组织病理学改变,RT-qPCR和Western blot法检测结肠组织PERK、eIF2α、ATF4、CHOP mRNA和蛋白表达。结果与模型组比较,化浊解毒消痈方各剂量组和美沙拉嗪组小鼠DAI评分降低(P<005),结肠组织病理形态得到改善,结肠组织PERK、eIF2α、ATF4、CHOP mRNA和蛋白表达降低(P<005),其中高剂量组作用与美沙拉嗪组相当。结论化浊解毒消痈方能抑制结肠上皮细胞的过度凋亡,对UC小鼠结肠损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路活化、抑制凋亡,进而修复结肠黏膜、促进溃疡愈合有关。 展开更多

关键词 化浊解毒消痈方 溃疡性结肠炎 perk/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于PERK信号通路介导的细胞凋亡及杯状细胞破坏探讨芍药汤对溃疡性结肠炎大鼠的作用机制 被引量：6

18

作者 吴志强 肖玉娇 +5 位作者 谷丽瑶 李旭 张佩雯 王梨力 肖金银 罗敏 《陕西中医》 CAS 2022年第11期1511-1515,共5页

目的:通过检测溃疡性结肠炎(UC)大鼠p-PERK通路蛋白、C/EBP同源蛋白的表达及结肠杯状细胞数量,探讨芍药汤对UC大鼠的作用机制。方法:84只SD大鼠中随机抽取14只作为空白组,余下70只大鼠通过三硝基苯磺酸建立UC大鼠模型,除去死亡大鼠,随... 目的:通过检测溃疡性结肠炎(UC)大鼠p-PERK通路蛋白、C/EBP同源蛋白的表达及结肠杯状细胞数量,探讨芍药汤对UC大鼠的作用机制。方法:84只SD大鼠中随机抽取14只作为空白组,余下70只大鼠通过三硝基苯磺酸建立UC大鼠模型,除去死亡大鼠,随机分为模型组12只、柳氮磺吡啶组13只、芍药汤低剂量组12只、芍药汤中剂量组13只、芍药汤高剂量组13只。空白组、模型组用等体积的0.9%氯化钠溶液灌胃,柳氮磺吡啶组采用柳氮磺吡啶灌胃,芍药汤高、中、低剂量组按照芍药汤不同剂量灌胃。第14天进行疾病活动指数(DAI)评分。随后将大鼠处死并解剖,进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分,并检测大鼠结肠p-PERK通路蛋白、C/EBP同源蛋白的表达及结肠杯状细胞数量。结果:与空白组比较,柳氮磺吡啶组及芍药汤不同剂量组大鼠DAI、CMDI评分均增高(P<0.05),与模型组比较,柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中、低剂量组DAI、CMDA评分均降低(P<0.05),柳氮磺吡啶组与芍药汤高、中、低剂量组DAI、CMDA评分比较无统计学差异(P>0.05);与空白组比较,模型组、柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中、低剂量组p-PERK、CHOP蛋白表达均上升(P<0.05);与模型组比较,柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中、低剂量组p-PERK、CHOP蛋白表达均下降(P<0.05);与芍药汤低剂量组比较,柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中剂量组p-PERK、CHOP蛋白表达均下降(P<0.05);柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中剂量组p-PERK、CHOP蛋白表达无统计学差异(P>0.05);与空白组比较,其他各组杯状细胞数量均下降(P<0.05);与模型组比较,柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中、低剂量组杯状细胞数量均明显增加(P<0.05);与芍药汤低剂量组比较,柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中剂量组杯状细胞数量均增加(P<0.05);柳氮磺吡啶组和芍药汤高、中剂量组杯状细胞数量比较无统计学差异(P>0.05)。结论:芍药汤能抑制内质网应激PERK信号通路被激活,降低CHOP表达活性,减少细胞凋亡,抑制杯状细胞被破坏,保护肠黏膜屏障,改善UC大鼠的症状和体征,这可能是芍药汤治疗UC的作用机制。 展开更多

关键词 溃疡性结肠炎 芍药汤 perk信号通路 细胞凋亡 杯状细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路探讨健骨颗粒对UMR-106细胞内质网应激凋亡的影响 被引量：2

19

作者 陈赛楠 周芬 +1 位作者 黄云梅 林燕萍 《康复学报》 CSCD 2024年第1期34-43,共10页

目的探讨健骨颗粒含药血清对UMR-106成骨样细胞内质网应激ERS凋亡的影响和作用机制。方法选用UMR-106成骨样细胞,采用0、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05μmol/L不同浓度的GSK2606414(PERK抑制剂)对细胞进行干预,采用CCK8法筛选GSK260641... 目的探讨健骨颗粒含药血清对UMR-106成骨样细胞内质网应激ERS凋亡的影响和作用机制。方法选用UMR-106成骨样细胞,采用0、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05μmol/L不同浓度的GSK2606414(PERK抑制剂)对细胞进行干预,采用CCK8法筛选GSK2606414最佳干预浓度。将生长状态较好的UMR-106细胞随机分为阴性对照组(NC组)、模型组(H_(2)O_(2)组)、健骨颗粒组(H_(2)O_(2)+JG组)和阳性对照组(H_(2)O_(2)+GSK2606414组)4组。NC组和H_(2)O_(2)组采用10%生理盐水血清干预12 h,H_(2)O_(2)+JG组采用10%健骨颗粒含药血清干预12 h,H_(2)O_(2)+GSK2606414组采用0.03μmol/L的GSK2606414和10%生理盐水血清干预12 h,除NC组外,其余各组在不更换新培养基的情况下,再分别加入10μmol/L H_(2)O_(2)干预12 h。采用激光共聚焦显微镜观察细胞内NC组和H_(2)O_(2)组GRP78和Caspase-12荧光表达情况,DCFH-DA检测活性氧(ROS)含量,激光共聚焦显微镜观察细胞内钙离子实时动态变化判断ROS/ERS模型是否成立。再采用An⁃nexin V-FITC/PI检测4组细胞晚期凋亡率,qPCR和Western blot检测4组ERS相关标志指标GRP78、PERK、eIf2α、ATF4和CHOP mRNA转录水平和蛋白相对表达量。结果与0μmol/L组比较,0.03μmol/L的GSK2606414是干预UMR-106细胞12 h后对细胞活力没有影响的最大浓度,故使用该浓度作为后续H_(2)O_(2)+GSK2606414组的实验干预条件。与NC组相比,H_(2)O_(2)组ROS含量显著增高(P<0.01),GRP78和Caspase-12的蛋白荧光表达量明显增加,细胞内钙离子流动速度加快并持续增高,表明H_(2)O_(2)诱导UMR-106细胞ROS/ERS模型的成功建立。与NC组相比,H_(2)O_(2)组凋亡率显著增高(P<0.05),GRP78、PERK、eIf2α、ATF4、CHOP mRNA转录水平和蛋白相对表达量均显著增高(P<0.01)。与H_(2)O_(2)组相比,H_(2)O_(2)+JG组和H_(2)O_(2)+GSK2606414组ROS含量显著降低(P<0.01),凋亡率显著降低(P<0.05),GRP78、PERK、eIf2α、ATF4、CHOP mRNA转录水平(P<0.05)和蛋白相对表达量(P<0.01)均显著降低。结论健骨颗粒可通过PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路缓解内质网过度应激,降低成骨细胞凋亡率,发挥防治绝经后骨质疏松症的作用。 展开更多

关键词 绝经后骨质疏松症 内质网应激 健骨颗粒 perk/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路 成骨细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于PERK/ATF4/CHOP信号通路探讨瑞香素对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的影响 被引量：5

20

作者 敖琴 胡欢 +6 位作者 刘俊 曾家顺 黄颖 凌益 李培霆 秦龙燕 李龙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期705-711,共7页

目的探讨瑞香素(daphnetin,DAP)对人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLS)的作用及其与内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)PERK/ATF4/CHOP信号通路的关系。方法RA-FLS细胞培养,免疫荧光法检查波形蛋白(vimentin)和CD68对细胞... 目的探讨瑞香素(daphnetin,DAP)对人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLS)的作用及其与内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)PERK/ATF4/CHOP信号通路的关系。方法RA-FLS细胞培养,免疫荧光法检查波形蛋白(vimentin)和CD68对细胞进行鉴定;CCK-8检测(0、5、10、20、30、40、50、60、70)mg·L^(-1) DAP对RA-FLS细胞增殖活性的影响,根据增殖活性将实验分为空白组(Blank)、低剂量组(L-DAP)、中剂量组(M-DAP)、高剂量组(H-DAP)以及高剂量+抑制剂4-PBA组(H-DAP+4-PBA);ELISA检测TNF-α、IL-6水平;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell及划痕实验检测细胞侵袭及迁移能力,Western blot检测细胞中与内质网应激相关蛋白GRP78、PERK、p-PERK、ATF4、CHOP、Caspase-12、C-caspase-12、Bcl-2表达。结果CCK-8结果显示,与0 mg·L^(-1) DAP组比较,20~70 mg·L^(-1) DAP中各组增殖活性均差异具有显著性(P<0.05),组间比较后0、20、40、60 mg·L^(-1) DAP对应的细胞增殖率差异具有统计学意义(P<0.05),以此浓度分别作为空白、低剂量、中剂量、高剂量组以及高剂量+4-PBA实验分组依据;DAP可成浓度依耐性抑制RA-FLS细胞炎症因子IL-6、TNF-α释放,减弱细胞侵袭能力,促进细胞凋亡,上调PERK、p-PERK、ATF4、GRP78、CHOP及Caspase-12及C-caspase-12蛋白表达,降低抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平。另一组实验证明,高剂量DAP+4-PBA可上调IL-6、TNF-α表达以及细胞侵袭,抑制细胞凋亡及ERS相关蛋白表达。结论DAP可通过激活PERK/ATF4/CHOP信号通路调节相关炎症因子分泌,抑制RA-FLS细胞增殖及侵袭,诱导细胞凋亡,有望成为治疗RA的潜在途径。 展开更多

关键词 瑞香素 类风湿关节炎 perk/ATF4/CHOP信号通路 内质网应激 滑膜成纤维细胞 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料