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高表达microRNA-22改善小鼠心肌梗死后心功能 被引量：5
1
作者 凌琳 凌子成 顾少华 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2018年第5期457-462,共6页
目的观察高表达microRNA-22对小鼠心肌梗死后心功能的保护作用及机制。方法构建小鼠心肌梗死模型,用携带microRNA-22的腺病毒载体转染至心肌梗死周围区域,观察高表达microRNA-22对小鼠心肌梗死后心功能的保护作用。采用超声心动图检测... 目的观察高表达microRNA-22对小鼠心肌梗死后心功能的保护作用及机制。方法构建小鼠心肌梗死模型,用携带microRNA-22的腺病毒载体转染至心肌梗死周围区域,观察高表达microRNA-22对小鼠心肌梗死后心功能的保护作用。采用超声心动图检测心功能,力竭游泳检测运动能力,HE及Masson染色检测心肌微结构及纤维化,Western blot检测PTEN蛋白表达情况。结果高表达microRNA-22组小鼠左心室射血分数（LVEF）（49.38%±2.51%比42.29%±2.74%,P〈0.05）及短轴缩短率（FS）（24.24%±0.64%比22.59%±0.73%,P〈0.05）较空载腺病毒组升高,心脏收缩功能维持较好;高表达microRNA-22组力竭运动时间较空载腺病毒组延长（8.13±1.01min比7.02±1.32 min,P〈0.05）,小鼠整体运动能力改善;高表达microRNA-22组小鼠HE染色示心肌结构维持较好,Masson染色示心肌纤维化程度较轻;高表达microRNA-22组心肌梗死周围区域内microRNA-22表达增加（6.66±2.01比1.22±0.07,P〈0.05）,PTEN蛋白表达下降（0.63±0.19比2.23±0.44,P〈0.05）。结论小鼠心肌梗死后在体高表达microRNA-22改善心脏收缩功能及运动能力,改善心肌微结构,减轻心肌纤维化。 展开更多
关键词 microrna-22 心肌梗死 心功能 心室重构
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高表达microRNA-22对缺氧心肌细胞的保护作用及机制 被引量：2
2
作者 凌琳 凌子成 顾少华 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2017年第10期997-1001,共5页
目的观察高表达microRNA-22对体外培养的缺氧心肌细胞的保护作用及机制。方法用携带microRNA-22的腺病毒载体和空载体转染体外缺氧条件下培养的原代心肌细胞,检测高表达microRNA-22后心肌细胞生物学特性的改变。采用MTT检测细胞活力,Ed... 目的观察高表达microRNA-22对体外培养的缺氧心肌细胞的保护作用及机制。方法用携带microRNA-22的腺病毒载体和空载体转染体外缺氧条件下培养的原代心肌细胞,检测高表达microRNA-22后心肌细胞生物学特性的改变。采用MTT检测细胞活力,EdU检测细胞DNA合成能力,Caspase-3检测细胞凋亡情况。结果表达microRNA-22的腺病毒载体成功转染原代心肌细胞,流式细胞仪检测绿色荧光蛋白阳性细胞比例>95%,高表达microRNA-22从蛋白水平显著下调PTEN表达。与空载腺病毒组相比,高表达microRNA-22组细胞核增殖明显增加,细胞生长更快,细胞活力增加,细胞凋亡减少。结论体外高表达microRNA-22能保护缺氧条件下的心肌细胞。 展开更多
关键词 microrna-22 心肌细胞:细胞特性
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肺炎支原体肺炎患儿血清microRNA-21和microRNA-221水平变化及与炎症因子、T淋巴细胞亚群的相关性 被引量：20
3
作者 田伟 梁淳 宋亚娟 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第19期19-24,共6页
目的探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿血清microRNA-21(miR-21)和microRNA-221(miR-221)的水平变化及与炎症因子、T淋巴细胞亚群的关系。方法选取2017年1月—2019年1月邯郸市中心医院就诊的MPP患儿120例为研究对象(MPP组),另选取本院同期体... 目的探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿血清microRNA-21(miR-21)和microRNA-221(miR-221)的水平变化及与炎症因子、T淋巴细胞亚群的关系。方法选取2017年1月—2019年1月邯郸市中心医院就诊的MPP患儿120例为研究对象(MPP组),另选取本院同期体检的健康儿童100例为对照组(CON组)。比较两组研究对象血清miR-21和miR-221的水平差异,并分析二者与患儿外周血中炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]和T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))之间的相关性。结果MPP组血清miR-21和miR-221水平高于CON组(P<0.05)。MPP组外周血CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)低于CON组,而IL-6、IL-8、TNF-α的水平高于CON组(均P<0.05)。MPP组血清miR-21和miR-221与患者外周血CD3^(+)(r=-0.494和-0.656,P=0.037和0.014)、CD4^(+)(r=-0.621和-0.554,P=0.015和0.031)、CD8^(+)(r=-0.772和-0.476,P=0.003和0.043)、CD4^(+)/CD8^(+)(r=-0.545和-0.660,P=0.023和0.014)均呈负相关,而与TNF-α(r=0.787和0.619,P=0.000和0.015)、IL-6(r=0.530和0.598,P=0.035和0.029)、IL-8(r=0.665和0.614,P=0.012和0.017)均呈正相关。结论MPP患儿血清miR-21和miR-221水平升高,且与患儿T淋巴细胞亚群水平的降低、炎症因子水平的升高有一定的相关性,监测两者的水平变化有助于评估MPP患儿的免疫状态和炎症反应,并为合理制订治疗方案提供帮助。 展开更多
关键词 肺炎支原体肺炎 microrna-21 microrna-221 T淋巴细胞亚群 炎症因子
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microRNA-224在肝细胞癌组织和血浆中表达的相关性 被引量：7
4
作者 高军平 向邦德 +2 位作者 倪航航 赵荫农 黎乐群 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第32期4012-4016,4021,共6页
目的探讨microRNA-224(miR-224)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者癌组织与血浆中表达的相关性。方法采用qRT-PCR检测20例HCC患者的癌组织、癌旁组织、术前血浆及20例健康人血浆的miR-224表达量,比较癌组织与癌旁组织、HCC... 目的探讨microRNA-224(miR-224)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者癌组织与血浆中表达的相关性。方法采用qRT-PCR检测20例HCC患者的癌组织、癌旁组织、术前血浆及20例健康人血浆的miR-224表达量,比较癌组织与癌旁组织、HCC患者与健康人血浆miR-224的表达差异,分析miR-224在HCC血浆与癌组织中表达的相关性。结果①miR-224在HCC癌组织、癌旁组织、血浆及健康人血浆中的平均表达量分别为(0.14±0.04)、(0.02±0.01)、(1.15±0.26)和(0.11±0.03)。癌组织miR-224表达量高于癌旁组织(P<0.01),HCC患者血浆miR-224表达量高于健康人血浆(P<0.01);②miR-224在HCC血浆及相应癌组织中的相对表达量呈正相关(P<0.001)。结论 HCC血浆miR-224表达量高于健康人群,并与肝癌组织表达量呈正相关,血浆miR-224有可能成为一种新的血清学指标用于肝癌诊断。 展开更多
关键词 microrna-224 肝细胞癌 血浆 癌组织
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MicroRNA-221通过抑制CDKN1C/p57表达促进结肠癌细胞增殖 被引量：11
5
作者 孙凯 王伟 +2 位作者 雷尚通 吴承堂 李国新 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1885-1889,共5页
目的探讨microRNA-221(MIR221)对结肠癌细胞中CDKN1C/p57表达调控及细胞增殖的影响。方法常规培养人结肠癌Caco2细胞系,预先给予或不给予CDKN1C/p57干扰性小RNA(anti-p57-siRNA)处理,再以脂质体分别转染MIR221前体(pre-MIR221)或MIR221... 目的探讨microRNA-221(MIR221)对结肠癌细胞中CDKN1C/p57表达调控及细胞增殖的影响。方法常规培养人结肠癌Caco2细胞系,预先给予或不给予CDKN1C/p57干扰性小RNA(anti-p57-siRNA)处理,再以脂质体分别转染MIR221前体(pre-MIR221)或MIR221特异性抑制剂(anti-MIR221)寡核苷酸,应用实时荧光定量PCR(Real-time RT-PCR)检测Caco2细胞中MIR221表达状况,运用半定量RT-PCR及Western-blot分析CDKN1C/p57 mRNA及蛋白表达状况,并通过噻唑蓝(MTT)比色法观察细胞的增殖状态;构建pGL3-p57荧光素酶报告载体并与pre-MIR221或anti-MIR221共转染Caco2细胞,检测转染细胞中荧光素酶活性变化。结果 Caco2细胞转染pre-MIR221后,CDKN1C/p57蛋白表达水平下降,细胞增殖显著(P<0.01);而anti-MIR221可上调CDKN1C/p57蛋白表达继而抑制细胞增殖,且此种抑制作用可被anti-p57-siRNA逆转,说明此种抑制效应确由CDKN1C/p57所介导;在转染重组有CDKN1C/p57基因3'-UTR片段的荧光素酶报告载体的Caco2细胞中,共转染pre-MIR221后荧光素酶活性下降,而共转染anti-MIR221后荧光素酶活性增高,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论 MIR221可通过与CDKN1C/p57 mRNA 3'-UTR区域结合使结肠癌细胞中CDKN1C/p57蛋白表达下降而促进肿瘤增殖;anti-MIR221则可通过上调CDKN1C/p57蛋白表达继而抑制细胞增殖而发挥抗瘤效应。 展开更多
关键词 结肠癌 microrna-221 CDKN1C/p57 增殖
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microRNA-224通过调节Bim影响人非小细胞肺癌的增殖与凋亡 被引量：3
6
作者 魏晨晨 姜黎黎 +2 位作者 陈沁楠 王鹤 王朝霞 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期942-946,共5页
目的:研究microRNA-224(miR-224)在人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及对NSCLC细胞增殖能力和凋亡的影响。方法:采用荧光实时定量PCR(q PCR)检测20对NSCLC组织与癌旁组织中miR-224的表达量,以及miR-224在NSCL... 目的:研究microRNA-224(miR-224)在人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及对NSCLC细胞增殖能力和凋亡的影响。方法:采用荧光实时定量PCR(q PCR)检测20对NSCLC组织与癌旁组织中miR-224的表达量,以及miR-224在NSCLC细胞A549与正常肺支气管上皮细胞中的表达量,并计算差值;转染anti-miR-224至A549细胞,q PCR检测anti-miR-224的转染效率;四甲基偶氮唑盐(MTT)实验及克隆形成实验检测miR-224对A549细胞增殖能力的影响,流式细胞技术检测细胞周期及凋亡;荧光素酶报告实验证实miR-224与靶基因Bim的结合;q PCR及Western blot检测转染anti-miR-224后A549细胞中Bim的表达量。结果:与癌旁正常组织相比,miR-224在NSCLC组织及细胞中均显著高表达(P<0.05);抑制miR-224能够显著抑制A549细胞的增殖能力并促进凋亡,并促进了Bim的表达。结论:miR-224在NSCLC中呈高表达,miR-224能够通过调控Bim抑制A549细胞的增殖能力并诱导凋亡。 展开更多
关键词 microrna-224 非小细胞肺癌 增殖 凋亡
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MicroRNA-224-5p在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义 被引量：8
7
作者 徐志勇 周建龙 +3 位作者 周娟 谢波 郑积华 张为民 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第21期3463-3467,共5页
目的:探讨microRNA-224-5p在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:提取70例NSCLC和20例正常肺组织的总RNA,采用茎环逆转录-荧光定量聚合酶链反应检测microRNA-224-5p的相对表达量。结果 :Micro RNA-224-5p在NSCL... 目的:探讨microRNA-224-5p在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:提取70例NSCLC和20例正常肺组织的总RNA,采用茎环逆转录-荧光定量聚合酶链反应检测microRNA-224-5p的相对表达量。结果 :Micro RNA-224-5p在NSCLC组织表达量明显上调,microRNA-224-5p在NSCLC中的表达量与患者的TNM分期及淋巴结转移有关,TNM分期越晚表达量越高,淋巴结转移的患者中microRNA-224-5p的表达量也上调,ROX曲线显示,其评价NSCLC患者是否发生转移敏感性为82.7%、特异性为77.8%。结论:Micro RNA-224-5p在NSCLC中的表达上调,可能作为一个癌基因参与NSCLC的发生、发展和转移。 展开更多
关键词 肺肿瘤 microrna-224-5p NSCLC TNM分期 淋巴结转移
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神经胶质瘤患者脑脊液microRNA-221水平的测定及意义 被引量：6
8
作者 陈欣 潘泰峰 +1 位作者 汪林涛 赵斌杰 《山西医科大学学报》 CAS 2013年第2期142-144,共3页
目的探讨microRNA-221(miR-221)在神经胶质瘤患者脑脊液中的水平及其临床意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测49例神经胶质瘤患者及40例健康人脑脊液中miR-221的水平,分析miR-221与病理分级间的关系。结果神经... 目的探讨microRNA-221(miR-221)在神经胶质瘤患者脑脊液中的水平及其临床意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测49例神经胶质瘤患者及40例健康人脑脊液中miR-221的水平,分析miR-221与病理分级间的关系。结果神经胶质瘤患者脑脊液中miR-221水平与对照组相比明显升高,差异具有统计学意义(0.68±0.10 vs0.47±0.07,P<0.01);神经胶质瘤患者脑脊液中miR-221水平随着病理分级增加有所增高,但差异没有统计学意义(P>0.05)。结论神经胶质瘤患者脑脊液中miR-21水平增高,miR-221可能参与了胶质瘤的发生、发展过程。 展开更多
关键词 microrna-221 神经胶质瘤 脑脊液
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难治性癫痫患者神经调节蛋白1、microRNA-221-3p表达与认知功能的关系 被引量：6
9
作者 庄婵芝 潘志雄 +4 位作者 何素丽 陈翔 谢泽娟 陈嘉迪 何文贞 《实用临床医药杂志》 CAS 2021年第22期50-54,共5页
目的探讨难治性癫痫患者血清神经调节蛋白1(NRG1)、microRNA-221-3p(miR-221-3p)表达水平与认知功能障碍(CD)的关系。方法选取64例难治性癫痫患者(难治性癫痫组)和58例抗癫痫药物控制良好患者(药物控制良好组)作为研究对象,另选取同期本... 目的探讨难治性癫痫患者血清神经调节蛋白1(NRG1)、microRNA-221-3p(miR-221-3p)表达水平与认知功能障碍(CD)的关系。方法选取64例难治性癫痫患者(难治性癫痫组)和58例抗癫痫药物控制良好患者(药物控制良好组)作为研究对象,另选取同期本院70例健康体检者纳入对照组。采用蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评估难治性癫痫患者的认知功能受损程度,并根据MoCA总分将难治性癫痫患者分为CD组40例和非CD组24例。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-221-3p水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清NRG1水平,并采用Pearson相关性分析探讨miR-221-3p、NRG1水平与MoCA总分的相关性,采用多因素Logistic回归分析探讨难治性癫痫患者发生CD的影响因素。结果难治性癫痫组血清miR-221-3p、NRG1水平高于对照组、药物控制良好组,差异有统计学意义(P<0.05);CD组血清miR-221-3p、NRG1水平高于非CD组,MoCA总分、空间与执行能力评分、语言评分、延迟记忆评分、计算力与定向评分低于非CD组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,难治性癫痫CD患者血清miR-221-3p、NRG1水平均与MoCA总分呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析显示,NRG1、miR-221-3p均为难治性癫痫患者发生CD的影响因素(P<0.05)。结论难治性癫痫合并CD患者血清miR-221-3p、NRG1水平较高,且miR-221-3p、NRG1均与难治性癫痫患者CD进程密切相关。 展开更多
关键词 难治性癫痫 神经调节蛋白1 microrna-221-3p 认知功能 相关性
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MicroRNA-224靶向CNNM1抑制前列腺癌血管生成的实验研究 被引量：3
10
作者 黄亚强 黄红星 +3 位作者 麦智鹏 黎卫 郑轶群 袁润强 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第17期19-24,共6页
目的研究microR NA-224(miR-224)对前列腺癌生化复发及血管生成的影响。方法生物信息学分析及荧光素酶报告实验预测细胞周期调节蛋白1(CNNM1)受miR-224负性调控。Taylor前列腺癌数据库分析、验证CNNM1、miR-224的表达关系及其与前列腺... 目的研究microR NA-224(miR-224)对前列腺癌生化复发及血管生成的影响。方法生物信息学分析及荧光素酶报告实验预测细胞周期调节蛋白1(CNNM1)受miR-224负性调控。Taylor前列腺癌数据库分析、验证CNNM1、miR-224的表达关系及其与前列腺癌生化复发的相关性。前列腺癌PC3细胞体外培养及动物体内成瘤实验研究CNNM1、miR-224表达对前列腺癌微血管生成标志物CD31的影响。结果 CNNM1表达受miR-224靶向调节,前列腺癌组织中CNNM1与miR-224的表达呈负相关(P<0.05)。miR-224与前列腺癌的生化复发呈负相关(P<0.05),CNNM1与前列腺的生化复发呈正相关(P<0.05);在过表达miR-224的PC3细胞株内,CNNM1和CD31的表达量下降;CNNM1过表达能促进CD31的生成。前列腺癌细胞裸鼠体内成瘤组织免疫组织化学法染色提示,miR-224过表达能抑制前列腺癌组织内微血管形成。结论 miR-224通过靶向调控CNNM1表达,抑制前列腺癌微血管形成,控制前列腺癌生化复发。 展开更多
关键词 前列腺癌 microrna-224 细胞周期调节蛋白1 生化复发 血管生成
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microRNA-221在结直肠癌中的表达及其对癌细胞迁移的影响 被引量：6
11
作者 王刚 解寒冰 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第4期58-63,共6页
目的研究上皮-间质转化(EMT)相关的微小RNA(micro RNA,以下简称miRNA)-221在结直肠癌患者中的表达水平,并探索其对结直肠癌细胞迁移水平的影响。方法选取该院40例结直肠癌患者为研究组,选取同期体检的40例健康人群为对照组。采用实时定... 目的研究上皮-间质转化(EMT)相关的微小RNA(micro RNA,以下简称miRNA)-221在结直肠癌患者中的表达水平,并探索其对结直肠癌细胞迁移水平的影响。方法选取该院40例结直肠癌患者为研究组,选取同期体检的40例健康人群为对照组。采用实时定量RT-PCR法检测结直肠癌患者癌组织以及癌旁组织中mi RNA-221表达水平,同时对比结直肠癌患者及正常人血浆中miRNA-221表达水平。对结直肠细胞采用miRNA-221的mimic及inhibitor分别高、低表达miRNA-221后,采用transwell法分别检测细胞的侵袭水平以及EMT相关蛋白表达。结果 miRNA-221在直肠癌组织的表达水平显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);mi RNA-221在直肠癌患者血浆中的表达水平显著高于健康对照人群,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰结直肠癌HT-29细胞株中miRNA-221后,结直肠癌细胞迁移能力显著降低(均P<0.05),且细胞中EMT相关的上皮钙黏蛋白(E-cad)的表达水平降低;而过表达HT-29细胞株中mi RNA-221,结直肠癌细胞迁移能力显著增加,且细胞中EMT相关的上皮钙黏蛋白(E-cad)的表达水平增加。结论结直肠癌患者高表达的miRNA-221通过促进结直肠癌细胞的迁移水平来参与结直肠癌发生发展的进程。 展开更多
关键词 microrna-221 结直肠癌 上皮钙黏蛋白 迁移
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microRNA-22-3p低表达上调幼年哮喘气道重塑大鼠的NK1R表达
12
作者 宋建刚 高永伟 +3 位作者 刘庆 贾鲲鹏 庞随军 李元霞 《西部医学》 2021年第1期4-9,共6页
目的探讨幼年哮喘气道重塑大鼠的microRNA-22-3p(miR-22-3p)表达水平和神经激肽受体1(NK1R)表达水平的相关性。方法将48只Wistar大鼠分为对照组、模型组、模型+mimic组、模型+mimic-NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor-NC组。对照... 目的探讨幼年哮喘气道重塑大鼠的microRNA-22-3p(miR-22-3p)表达水平和神经激肽受体1(NK1R)表达水平的相关性。方法将48只Wistar大鼠分为对照组、模型组、模型+mimic组、模型+mimic-NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor-NC组。对照组注射生理盐水并吸入空气;模型组应用卵白蛋白(OVA)雾化吸入法建立哮喘大鼠模型;模型+mimic组、模型+mimic-NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor-NC组,在大鼠每次激发前1 h内分别尾静脉注射1 mL的mimic、mimic-NC、inhibitor、inhibitor-NC。H&E染色法观察小鼠气道重塑变化,RT-qPCR检测miR-22-3p的水平变化。荧光素酶基因报告检测方法在大鼠气道平滑肌细胞RASMCs中验证miR-22-3p靶向NK1R。使用Western blot和免疫组织化学法检测NK1R的表达水平。结果与对照组比较,模型组发生明显的气道重塑现象,且气道组织中miR-22-3p水平降低(P<0.05)。在RASMCs细胞中,NK1R的3′UTR和miR-22-3p的直接结合,导致荧光素酶活性强度降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组的NK1R的mRNA和蛋白的表达水平明显上调(P<0.01)。与模型+mimic-NC组比较,模型+mimic组miR-22-3p的水平上调,而NK1R的表达下调(均P<0.05)。与模型+inhibitor-NC组比较,模型+inhibitor组miR-22-3p的水平下调,而NK1R水平上调(均P<0.05)。结论哮喘诱发大鼠气道NK1R的表达增加,miR-22-3p直接靶向调节抑制哮喘大鼠气道重塑中NK1R的表达水平,下调miR-22-3p解除对NK1R的抑制从而上调NK1R水平。 展开更多
关键词 microrna-22-3p 幼年大鼠 哮喘 神经激肽受体1 气道平滑肌重塑
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X线辐射剂量对结直肠癌细胞中microRNA-221和p57^(kip2)表达的影响 被引量：1
13
作者 孙凯 张晓槟 +4 位作者 邓海军 钟育波 雷尚通 区文弢 吴承堂 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期921-924,共4页
目的探讨不同剂量X线辐射对人结直肠癌Caco2细胞系中microRNA-221(miR-221)和p57kip2表达的影响。方法常规培养Caco2细胞系并分为5组,分别给予不同剂量X线(0、2、4、6和8 Gy)照射,24 h后提取细胞总RNA和蛋白质,应用real-time Q-PCR检测... 目的探讨不同剂量X线辐射对人结直肠癌Caco2细胞系中microRNA-221(miR-221)和p57kip2表达的影响。方法常规培养Caco2细胞系并分为5组,分别给予不同剂量X线(0、2、4、6和8 Gy)照射,24 h后提取细胞总RNA和蛋白质,应用real-time Q-PCR检测细胞中miR-221和p57kip2mRNA的表达水平,Western blot检测p57kip2蛋白的表达变化。结果 Caco2细胞系在不同照射剂量下,miR-221表达水平随着照射剂量的增加而增加,而p57kip2蛋白表达水平则随着照射剂量的增加而逐步降低,且呈剂量依赖效应,两者差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论放射线辐射剂量可影响结直肠癌细胞中miR-221/p57kip2调控通路,抑制miR-221表达可能会提高结直肠癌细胞的放射敏感度。 展开更多
关键词 结直肠癌 microrna-221 P57^KIP2 辐射剂量 放射敏感度
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MicroRNA-223表达与肝癌根治性切除术预后的相关性 被引量：4
14
作者 王云雀 黄湘壹 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第6期59-64,共6页
目的识别可以作为肝癌根治性切除术患者预后标志物的microRNA(miRNA)分子。方法利用miRNA微阵列方法对2例原发性肝癌及对应的肺转移性肝癌进行miRNA表达分析。将原发性和转移性肝癌中表达量有2倍差异的miRNAs作为候选miRNAs分子。在miRN... 目的识别可以作为肝癌根治性切除术患者预后标志物的microRNA(miRNA)分子。方法利用miRNA微阵列方法对2例原发性肝癌及对应的肺转移性肝癌进行miRNA表达分析。将原发性和转移性肝癌中表达量有2倍差异的miRNAs作为候选miRNAs分子。在miRNA验证过程中,运用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分析37例肝癌及相应癌旁非肿瘤组织中候选miRNAs分子的表达,并将其与患者的临床病理特征及生存情况进行相关性分析。结果最终选取8种miRNA(smiR-27b、122、142-5p、196a、223、590-5p、630及944)作为候选miRNA。只有miR-223表达水平与肿瘤分期、有丝分裂指数相关。将肝癌患者分为miR-223高表达组(25例)和miR-223低表达组(12例)后发现,miR-223高表达与较高T分期、淋巴结转移、较高丝分裂指数及较高Ki-67阳性指数相关。此外,miR-223高表达还与总体生存率和无病存活率下降相关(P<0.05),中位随访时间37.9个月[疾病复发危险比为16.267(95%CI:1.732,153.789)P=0.015]。结论肝癌组织中miR-223异常表达与肝癌患者治疗结束后发生复发转移,以及无病生存时间和总生存率有关,通过检测肿瘤组织中miR-223 qRT-PCR反应有可能预测患者预后。 展开更多
关键词 肝癌 MICRORNA microrna-223
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microRNA-223对糖基化终产物诱导人脂肪间充质干细胞凋亡和氧化应激影响的体外研究 被引量：2
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作者 王哲 张殿宝 杨向红 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期1-6,共6页
目的观察microRNA-223(miR-223)对糖基化终产物(AGE)诱导人脂肪间充质干细胞(h ADSC)凋亡和氧化应激的影响。方法采用酶消化法分离培养h ADSC,并应用流式细胞术对表面抗原CD14、CD34、CD45、CD90、CD105和人类白细胞抗原DR(HLA-DR)进行... 目的观察microRNA-223(miR-223)对糖基化终产物(AGE)诱导人脂肪间充质干细胞(h ADSC)凋亡和氧化应激的影响。方法采用酶消化法分离培养h ADSC,并应用流式细胞术对表面抗原CD14、CD34、CD45、CD90、CD105和人类白细胞抗原DR(HLA-DR)进行检测。将h ADSC分为牛血清白蛋白(BSA)对照组、AGE修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)作用组、miR-223模拟物转染组、miR-223模拟物转染+AGE-BSA组、miR-223抑制物转染组和miR-223抑制物转染+AGE-BSA组。应用CCK-8法和TUNEL染色检测各组细胞存活率和凋亡率,Western blot检测Cleaved Caspase3蛋白表达水平,应用双氯荧光素(DCFH-DA)试剂盒检测各组细胞活性氧(ROS)含量。结果流式细胞术检测结果表明,原代培养的h ADSC高表达CD14、CD90和CD105,不表达CD34、CD45和HLADR。CCK-8法、TUNEL染色、Western blot和DCFH-DA法检测结果表明,与BSA对照组相比,AGE-BSA作用组h ADSC凋亡率、miR-223表达水平、Cleaved Caspase3蛋白表达水平、ROS生成显著升高,而细胞存活率下降(P<0.05);与AGE-BSA作用组相比,miR-223模拟物转染能够进一步上调AGE-BSA引起的h ADSC凋亡率、Cleaved Caspase3蛋白表达水平和ROS生成增加,下调AGE-BSA引起的h ADSC存活率减少(P<0.05);与AGE-BSA作用组相比,miR-223抑制物转染能够抑制h ADSC凋亡率、Cleaved Caspase3蛋白表达水平和ROS生成增加,拮抗AGEBSA引起的h ADSC存活率减少(P<0.05)。结论 miR-223高表达能够促进AGE-BSA引起的h ADSC细胞凋亡和ROS生成,其可能作为调控h ADSC促进糖尿病创伤愈合的新靶点。 展开更多
关键词 糖基化终产物 人脂肪间充质干细胞 microrna-223 凋亡 氧化应激
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microRNA-224对缺氧诱导结肠癌细胞凋亡的影响 被引量：1
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作者 张娟 冯燕 和水祥 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第1期30-33,共4页
目的:通过结肠癌细胞实验检测microRNA-224在结肠癌发生发展过程中的作用。方法:建立缺氧导致结肠癌细胞凋亡的模型,细胞计数盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)法检测结肠癌细胞活力;Annexin/PI流式细胞术检测结肠癌细胞凋亡率的变化。Anne... 目的:通过结肠癌细胞实验检测microRNA-224在结肠癌发生发展过程中的作用。方法:建立缺氧导致结肠癌细胞凋亡的模型,细胞计数盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)法检测结肠癌细胞活力;Annexin/PI流式细胞术检测结肠癌细胞凋亡率的变化。Annexin/PI流式细胞术检测转染microRNA-224后结肠癌细胞凋亡的变化。蛋白免疫印迹检测转染microRNA-224后凋亡蛋白Caspase-3的变化。结果:凋亡率在缺氧的结肠癌细胞组高于正常结肠癌细胞组(P<0.05);缺氧诱导凋亡组转染microRNA-224后凋亡率低于空质粒对照组(P<0.05);在缺氧诱导凋亡组中转染microRNA-224,凋亡相关蛋白Caspase-3的表达低于对照组(P<0.05)。结论:microRNA-224可抑制结肠癌细胞凋亡,结肠癌细胞的凋亡失衡在结肠癌的发生发展过程中具有重要意义。 展开更多
关键词 microrna-224 结肠癌细胞 缺氧 凋亡+
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健脾清热活血方介导microRNA-222-3p调控TGF-β1、CDKN1B/p27表达防治结肠癌的离体研究 被引量：4
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作者 张涛 张馨月 +2 位作者 卢鑫 黄晓燕 林逸婷 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1863-1867,共5页
目的通过检测健脾清热活血方基于microRNA-222-3p调控TGF-β通路对结肠癌HCT-116细胞迁移的变化以及TGF-β1、CDKN1B/p27的表达,探讨该方防治结肠癌的效用及可能机制。方法参照血清药理学方法,制备大鼠含药血清。应用RNAi技术构建稳定沉... 目的通过检测健脾清热活血方基于microRNA-222-3p调控TGF-β通路对结肠癌HCT-116细胞迁移的变化以及TGF-β1、CDKN1B/p27的表达,探讨该方防治结肠癌的效用及可能机制。方法参照血清药理学方法,制备大鼠含药血清。应用RNAi技术构建稳定沉默miR-222结肠癌HCT-116细胞系。离体实验随机分为空白对照组(HCT-116)、阴性对照组(NC)、阳性对照组(miR-222-3p沉默)、治疗组(miR-222-3p沉默+低/中/高剂量中药)。Transwell法检测细胞迁移能力,应用现代分子生物学技术检测TGF-β1、CDKN1B/p27表达。结果成功构建TUD-hsa-miR-222-3p Inhibitor慢病毒载体并获得miR-222稳定沉默的结肠癌HCT-116细胞系,与正常组及NC组对比,miR-222沉默后HCT-116细胞迁移能力明显下降,有显著差异(P<0.05);在治疗组中HCT-116细胞迁移数目较sh-miR222-3p组减少更为显著(P<0.05)。对于TGF-β1/CDKN1B/p27mRNA表达,与阳性对照组比较,治疗组CDKN1B/p27mRNA表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。WB结果显示,与阳性对照组相比,治疗组TGF-β1/CDKN1B/p27蛋白表达均下调,有统计学意义(P<0.05)。结论健脾清热活血方可能通过抑制miRNA-222-3p减少TGF-β1、CDKN1B/p27表达,降低细胞迁移能力,诱导结肠癌细胞凋亡,达到防治结肠癌的效用。 展开更多
关键词 健脾清热活血方 microrna-222-3p RNA干扰 转化生长因子-Β1 结肠癌
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粪便microRNA-221对早期结直肠癌检出的意义 被引量：2
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作者 胡晶晶 曾理 +3 位作者 李开学 刘若丹 张永锋 熊鹰 《深圳中西医结合杂志》 2016年第22期25-27,F0003,共4页
目的:探讨micro RNA-221在早期结肠癌患者粪便中的表达情况,并研究其作为早期结直肠癌以及癌前病变分子诊断标志物的可行性。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应检测245例大肠病变患者的粪便及30例正常人群粪便中micro RNA-221的水平,分... 目的:探讨micro RNA-221在早期结肠癌患者粪便中的表达情况,并研究其作为早期结直肠癌以及癌前病变分子诊断标志物的可行性。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应检测245例大肠病变患者的粪便及30例正常人群粪便中micro RNA-221的水平,分析micro RNA-221与不同临床病理分级的关系。结果:结肠病变的患者粪便中micro RNA-221水平随着病理分级增加而增高,差异具有统计学意义(P<0.001)。进展型腺瘤和早期结直肠癌组织中micro RNA-221水平与对照组相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:早期结直肠癌粪便中micro RNA-221的表达上调,可能参与了结直肠癌的发生及发展,粪便micro RNA-221有可能成为筛查早期结直肠癌非侵入性的标志物。 展开更多
关键词 结直肠癌 microrna-221 生物标志物
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microRNA-223调控人胚胎干细胞向树突细胞分化
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作者 朱明霞 万文丽 +6 位作者 胡凯 王艳芳 王晶 朱晓雯 闫新星 景红梅 克晓燕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1275-1282,共8页
目的:建立人胚胎干细胞(ESC)向树突细胞诱导分化的新策略,探讨microRNA-223(miR-223)在人胚胎干细胞源树突细胞产生过程中的调控作用及其分子机制。方法:采用人胚胎干细胞在胞外基质Ⅳ型胶原蛋白上直接贴壁培养,加入造血生长因子分步向... 目的:建立人胚胎干细胞(ESC)向树突细胞诱导分化的新策略,探讨microRNA-223(miR-223)在人胚胎干细胞源树突细胞产生过程中的调控作用及其分子机制。方法:采用人胚胎干细胞在胞外基质Ⅳ型胶原蛋白上直接贴壁培养,加入造血生长因子分步向造血干/祖细胞、共同髓系祖细胞和树突细胞诱导的方案,通过形态学、流式细胞术和造血集落形成实验鉴定分化细胞;人胚胎干细胞经慢病毒转染过表达miR-223或抑制其表达后启动向树突细胞分化,比较不同miR-223表达水平下分化细胞中造血集落形成的数目和表面标记物的表达量;应用双荧光素酶报告基因检测验证TGFBR3是miR-223发挥作用的直接靶标。结果:人ES细胞成功诱导为树突细胞,分化细胞中表达CD83比例可达82%,在整个分化过程中miR-223表达呈上调趋势;添加miR-223模拟物组分化细胞表达CD34^+CD45^+、CD34^+CD45^+以及CD83^+的比例均显著高于添加miR-223抑制剂组和阴性对照组(P<0.05);添加miR-223抑制剂组分化细胞表达各阶段细胞标记物显著低于阴性对照组(P<0.05);添加miR-223模拟物组分化细胞出现大约759个CFU/105细胞数,显著高于其它各组(P<0.05);双荧光素酶报告基因结果显示,miR-223显著抑制TGFBR3-3'UTR结构的荧光素酶活性(下降了37%)(P<0.05),而且TGFBR3-3'UTR突变型的荧光素酶活性显著高于野生型(P<0.01);随着向树突细胞分化成熟,添加miR-223模拟物组分化细胞表达TGFBR3水平逐渐下降,而添加miR-223抑制剂组由于内源性miR-223受到抑制而明显上调TGFBR3的表达。结论:miR-223调控人胚胎干细胞向树突细胞分化,可能通过直接作用于靶标TGFBR3而促进胚胎干细胞源树突细胞的产生。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 树突细胞 microrna-223 诱导分化 TGFBR3
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MicroRNA-222对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
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作者 卢滨 贾金广 +1 位作者 李利华 姚菲菲 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期34-40,共7页
目的探讨microRNA-222(miR-222)对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法将miR-222和对照分别转染入肺腺癌细胞系A549进行活细胞计数法试剂盒(CCK-8)增殖实验、Transwell迁移及Matrigel侵袭实验,观察miR-222对肺腺癌细胞增殖、迁移和... 目的探讨microRNA-222(miR-222)对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法将miR-222和对照分别转染入肺腺癌细胞系A549进行活细胞计数法试剂盒(CCK-8)增殖实验、Transwell迁移及Matrigel侵袭实验,观察miR-222对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。运用荧光素酶报告实验、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及Western blot验证miR-222靶向下调ETS1的过程。结果 CCK-8增殖实验,Transwell迁移及Matrigel侵袭实验发现,与对照组相比miR-222能够促进肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。荧光素酶报告实验、qRT-PCR及Western blot实验发现,miR-222可以靶向下调ETS1的表达,且ETS1参与调节上述过程。结论 miR-222通过靶向下调ETS1,促进肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 microrna-222 ETS1 增殖 迁移 侵袭
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