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Lieber-DeCarli酒精性肝损伤小鼠模型的转录组学分析
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作者 阮天音 王四园 +4 位作者 李旭涛 张昊 彭渊 刘成海 陶艳艳 《中国实验动物学报》 北大核心 2025年第2期204-215,共12页
目的 分析Lieber-DeCarli酒精性肝损伤小鼠模型的转录组学特点。方法 雄性C57BL/6J小鼠18只,随机分成酒精饲料组10只和对照组8只。酒精饲料组喂养Lieber-DeCarli酒精饲料,先以10~57.3 mL/L递增量的95%酒精饲料适应性喂养1周,再以57.3 mL... 目的 分析Lieber-DeCarli酒精性肝损伤小鼠模型的转录组学特点。方法 雄性C57BL/6J小鼠18只,随机分成酒精饲料组10只和对照组8只。酒精饲料组喂养Lieber-DeCarli酒精饲料,先以10~57.3 mL/L递增量的95%酒精饲料适应性喂养1周,再以57.3 mL/L 95%酒精饲料喂养2周,共3周;对照组同时喂养对照饲料。处死小鼠留取血清和肝组织,试剂盒检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)与肝组织总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、还原型谷胱甘肽(GSH)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)含量;ELISA法测定小鼠肝组织炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,并用qRT-PCR验证IL-6、TNF-α、TGF-β1基因表达。苏木素-伊红(HE)、油红O染色观察肝组织病理变化;通过免疫组织化学染色法,使用F4/80抗体检测巨噬细胞的表达变化。RNA-seq分析两组肝组织差异基因并进行GO和KEGG分析,再以qRT-PCR验证差异基因表达。结果 与对照组比较,酒精饲料组小鼠体质量显著下降(P<0.01);血清ALT、AST水平显著升高(P<0.01),肝组织TC、TG、MDA水平显著升高(P<0.05),GSH、T-SOD含量显著下降(P<0.05);组织中炎症因子IL-6,TNF-α与TGF-β1水平上升,以qRT-PCR验证结果相一致(P<0.05)。肝小叶结构破坏,呈现大泡脂肪变性、微泡性脂肪变性及气球样变性;肝组织中脂滴显著增多,巨噬细胞表达增加。以|log2FC|>1且q<0.05为筛选条件,获得2063个差异基因,其中1236个基因上调,827个基因下调。主要在细胞色素P450对外源性物质的代谢、细胞因子与细胞因子受体的相互作用、趋化因子信号通路、类固醇激素生物合成、谷胱甘肽代谢、视黄醇代谢等通路富集(P<0.05)。qRT-PCR验证其中显著上调(Mmp12、Gstm3、Cyp2a22等)与下调(Serpina1e、Acmsd、Mup3d等)的差异基因各10个,与转录组测序结果一致。结论 酒精性肝损伤主要病理机制涉及细胞色素P450对外源性物质的代谢、细胞因子与细胞因子受体的相互作用、趋化因子信号通路、谷胱甘肽代谢、视黄醇代谢等通路。 展开更多
关键词 酒精性肝损伤 lieber-decarli模型 基因表达 转录组学
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Lieber-DeCarli液体饲料中三种方法诱导酒精性肝病小鼠模型的比较
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作者 黄富春 肖国辉 +5 位作者 汤明云 周鑫 吴旭 王天刚 李志 赵龙 《西南医科大学学报》 2024年第6期507-511,共5页
目的配制Lieber-DeCarli液体饲料,通过酒精热量过渡、酒精不过渡、酒精体积过渡三种方法诱导酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)小鼠模型,比较其肝功能损伤程度、血脂水平和肝脏脂肪变性程度。方法健康雄性C57BL/6J小鼠36只,随机... 目的配制Lieber-DeCarli液体饲料,通过酒精热量过渡、酒精不过渡、酒精体积过渡三种方法诱导酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)小鼠模型,比较其肝功能损伤程度、血脂水平和肝脏脂肪变性程度。方法健康雄性C57BL/6J小鼠36只,随机分为6组(n=6),即酒精热量过渡对照组(A1)、酒精热量过渡组(A2)、酒精不过渡对照组(B1)、酒精不过渡组(B2)、酒精体积过渡对照组(C1)、酒精体积过渡组(C2),在饲喂相应液体饲料的第16、22、28 d分别处死对应组小鼠,测定并比较血清天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷氨酸氨基转移酶(glutamic acid aminotransferase,ALT)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)含量;肝脏苏木精-伊红染色(H&E染色)观察肝脏病理改变;肝脏油红O染色观察肝脏脂肪变性。结果血清生化结果显示,各模型组小鼠血清ALT、AST、TG含量均高于其对照组(P<0.05);A2、B2、C2组小鼠血清AST、ALT含量无明显差异(P>0.05);A2组小鼠血清TC、HDL-C含量高于B2、C2组(P<0.05);A2、C2组小鼠血清LDL-C含量均高于B2组(P<0.05)。病理结果显示,各模型组小鼠肝脏H&E染色均可见肝细胞脂肪变性;肝脏油红O染色均可见橘红色或红色脂滴聚集。结论Lieber-DeCarli液体饲料中三种方法诱导的ALD小鼠模型肝功能损伤无差异,表现为不同程度的肝脏脂肪变性及血脂异常。 展开更多
关键词 lieber-decarli液体饲料 酒精性脂肪肝 小鼠模型
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两种Lieber-DeCarli液体饲料诱导的小鼠酒精性肝损伤模型的建立 被引量:8
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作者 曾涛 姜璐璐 +4 位作者 张翠丽 赵秀兰 于丽华 朱振平 谢克勤 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期258-262,共5页
目的建立常规和低脂Lieber-DeCarli液体饲料诱导的酒精性肝损伤小鼠模型。方法健康雄性昆明小鼠50只,随机分为5组(n=10),即颗粒饲料组、常规对照组、常规乙醇组、低脂对照组和低脂乙醇组。各组小鼠分别喂饲相应的饲料4周,记录每日液体... 目的建立常规和低脂Lieber-DeCarli液体饲料诱导的酒精性肝损伤小鼠模型。方法健康雄性昆明小鼠50只,随机分为5组(n=10),即颗粒饲料组、常规对照组、常规乙醇组、低脂对照组和低脂乙醇组。各组小鼠分别喂饲相应的饲料4周,记录每日液体饲料消耗量。4周末处死小鼠,测定血清转氨酶的活性、血清和肝脏甘油三酯(TG)的含量。制备肝脏冰冻切片,苏丹Ⅲ染色观察肝细胞脂肪变性。结果造模过程中,常规和低脂乙醇组小鼠乙醇摄入量分别为24~34 g/kg.bw/d和15~25 g/kg.bw/d。造模结束时,两液体饲料对照组小鼠体重略高于颗粒饲料组小鼠体重;两乙醇组小鼠肝脏系数均显著高于各自对照组小鼠的肝脏系数(P<0.01)。生化结果显示,常规乙醇组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的活性以及血清和肝脏TG含量均显著高于常规对照组水平(P<0.01);低脂乙醇组小鼠血清ALT的活性和肝脏TG含量均显著高于低脂对照组水平(P<0.05)。病理检查结果显示,乙醇组小鼠肝脏切片中有大量脂滴蓄积。结论自行配制常规和低脂液体饲料,喂饲小鼠4周,均可诱导小鼠出现酒精性肝损伤。该模型简单方便,可用于酒精性肝损伤分子机制研究和防治药物的筛选。 展开更多
关键词 乙醇 lieber-decarli液体饲料 酒精性脂肪肝 甘油三酯
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3,3'-二吲哚甲烷通过抑制肝细胞的内质网应激改善酒精性脂肪肝的研究
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作者 黄冰 张岩 +1 位作者 杨光宇 李文学 《右江医学》 2022年第6期419-423,共5页
目的观察3,3’-二吲哚甲烷(3,3’-diindolylmethane,DIM)对Lieber-DeCarli标准型(regular型)酒精液体乙醇饲料(LD饲料)诱导的小鼠酒精性脂肪肝的改善作用,并对其分子作用机制进行初步探讨。方法将40只6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为4... 目的观察3,3’-二吲哚甲烷(3,3’-diindolylmethane,DIM)对Lieber-DeCarli标准型(regular型)酒精液体乙醇饲料(LD饲料)诱导的小鼠酒精性脂肪肝的改善作用,并对其分子作用机制进行初步探讨。方法将40只6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组:正常对照组、酒精组、DIM(50 mg/kg)组和酒精+DIM(50 mg/kg)组,实验结束后称重,处死小鼠,收集血液和肝脏组织,分离血清测定肝功能指标,油红O染色观察肝脏的脂肪蓄积,Western blot检测内质网应激通路蛋白的表达。结果与对照组相比,DIM对肝脏没有显著的影响,四组之间体重无显著变化。与酒精组相比,DIM处理组血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平显著降低(P<0.05),油红O染色和甘油三酯测定显示肝脏甘油三酯含量显著降低(P<0.05)。DIM明显减轻肝脏脂肪变性,Western blot结果表明DIM能够抑制酒精诱导的内质网通路的关键蛋白PERP、eIF和CHOP的激活作用。结论DIM对小鼠酒精性脂肪肝具有一定的保护作用,其机制可能与抑制酒精激活的内质网应激通路有关。 展开更多
关键词 酒精性脂肪肝 3 3’-二吲哚甲烷 内质网应激 lieber-decarli标准型饲料
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CYP2E1在小鼠酒精性肝纤维化中的作用研究 被引量:4
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作者 代新华 李三强 +8 位作者 宋晓改 李子昂 王玉东 郭威 张艺博 袁旭静 徐卓硕 王同园 刘竞怡 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2021年第5期520-523,共4页
目的探讨CYP2E1在酒精性肝纤维化(ALF)过程中的作用。方法取健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为2组:正常组(n=10)和实验组(n=40),正常组用Lieber-DeCarli液体饲料饲养小鼠8周,实验组用Lieber-DeCarli液体酒精饲料饲养,4周后联合5%CCl 4-橄榄... 目的探讨CYP2E1在酒精性肝纤维化(ALF)过程中的作用。方法取健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为2组:正常组(n=10)和实验组(n=40),正常组用Lieber-DeCarli液体饲料饲养小鼠8周,实验组用Lieber-DeCarli液体酒精饲料饲养,4周后联合5%CCl 4-橄榄油2 ml/kg进行腹腔注射,2次/周,进行ALF造模,共8周。分别于0、2、4、6、8周每组各取4只小鼠进行眼球采血以检测血清中ALT活性;颈椎脱臼处死小鼠取肝,HE染色观察肝组织病理学形态改变和坏死得分;蛋白免疫印迹法检测CYP2E1的表达水平。结果与正常组相比,实验组肝功能指标和肝纤维化水平逐渐升高,在造模第4周时出现最严重肝损伤(P<0.01)。随着造模时间的延长,肝脏出现不同程度的损伤修复现象,且CYP2E1表达量逐渐降低。结论CYP2E1的表达在ALF形成过程中起一定的作用。 展开更多
关键词 酒精性肝纤维化 CYP2E1 lieber-decarli液体酒精饲料 表达分析
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解整合素-金属蛋白酶9在小鼠酒精性肝纤维化过程中的表达 被引量:1
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作者 宋晓改 李三强 +8 位作者 文馨 郭威 李子昂 宋琢爽 魏鹏雪 王同园 杨欢 朱文枫 张兵兵 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2020年第7期810-813,817,共5页
目的研究解整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)在小鼠酒精性肝纤维化过程中的表达。方法将50只健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组10只,实验组40只。正常小鼠采用Lieber-DeCarli TP4030C对照液体饲料饲养小鼠8周,实验小鼠采用Lieber-DeCarli TP... 目的研究解整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)在小鼠酒精性肝纤维化过程中的表达。方法将50只健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组10只,实验组40只。正常小鼠采用Lieber-DeCarli TP4030C对照液体饲料饲养小鼠8周,实验小鼠采用Lieber-DeCarli TP4030A酒精液体饲料喂养4周后联合5%四氯化碳橄榄油溶液2 ml/kg,腹腔注射,2次/周,总共8周诱导小鼠酒精性肝纤维化模型。分别于0、2、4、6、8周各取4只小鼠摘除眼球取血并分离血清,检测谷草转氨酶(AST)活性;颈椎脱臼处死小鼠并取肝,用免疫组化法测定0、2、4、6、8周小鼠肝组织中ADAM9蛋白的表达变化。结果小鼠经Lieber-DeCarli液体饲料喂养后0、2、4、6、8周AST活性分别为(110±14)U/L、(163±52)U/L、(200±26)U/L、(229±17)U/L、(509±111)U/L,从酶活性可以看出,酒精液体饲料喂养2周后,血清AST活性开始上升,随着喂养时间的增加,血清AST活性持续升高,8周达到最高值(P<0.01)。免疫组化结果显示,酒精液体饲料喂养2周后,ADAM9的蛋白表达量上升,随着喂养周数不断增加,ADAM9的蛋白表达量持续升高,8周达到最高值(P<0.01)。结论 ADAM9在小鼠酒精性肝纤维化过程中表达不断升高且变化显著,与肝纤维化的发展进程密切相关,可能起到促进肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 解整合素-金属蛋白酶9 酒精性肝纤维化 谷草转氨酶 lieber-decarli液体饲料
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Intervention Effects of Jianpi Liqi Huoxue Decoction (健脾理气活血汤) on Lipid Peroxidative Liver Injury Induced by Alcohol 被引量:5
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作者 崔剑巍 胡义扬 +5 位作者 方志红 王晓柠 成扬 彭景华 冯琴 张慧 《Chinese Journal of Integrative Medicine》 SCIE CAS 2006年第4期281-286,共6页
Objective: To study the intervention effects of Jianpi Liqi Huoxue Decoction (健脾理气活血汤, JLHD) on lipid peroxidative liver injury induced by alcohol. Methods: The rat alcoholic model of liver disease (ALD) ... Objective: To study the intervention effects of Jianpi Liqi Huoxue Decoction (健脾理气活血汤, JLHD) on lipid peroxidative liver injury induced by alcohol. Methods: The rat alcoholic model of liver disease (ALD) induced by Lieber-DeCarli liquid diet was established. Thirty-two male SD rats were randomly divided into 4 groups : the normal group ( n = 5), the control group ( n = 9), the model group ( n = 9) and the JLHD group ( n =9). From the 4th week after modeling, the rats were given JLHD or distilled water by gastrogavage respectively, and the samples of blood and liver tissues were taken out from the rats for determination by the end of the 8th week. The hepatic pathological changes were observed with HE staining; the liver injury related indices, including activity of alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) in serum, γ-glutamyl transpeptidase (γ-GT) activity and triglyceride (TG) content in liver tissues, as well as the lipid peroxidation related indices, including malonaldehyde (MDA) content and nitric oxide synthase (NOS) activity in liver tissue, serum Fe^2+ level, and the anti-peroxidation capacity related indices, including superoxide dismutase (SOD) activity, glutathion (GSH) content and reactive oxygen species (anti- ROS) activity in liver tissues were determined. Results: ( 1 ) There were obvious figures of fatty degeneration and inflammatory infiltration in liver tissues of the model group. As compared with the control group, in the model group, the activity of ALT and AST, and Fe^2+ content in serum, γ-GT and NOS activity, TG and MDA content in liver tissues were significantly higher ( P〈0. 01 ), while the activity of SOD, GSH and anti-ROS in liver tissues were significantly lower (P〈0.01). (2) The fatty degeneration and inflammatory infiltration of liver tissues in the JLHD group were significantly lessen as compared with those in the model group; and the abnormalities of all the indexes revealed in the model rats were restored to certain extent in the JLHD group, and especially significant were the levels of ALT activity, MDA content and Fe^2+ , which were nearly normal. Conclusion: JLHD has significant effects against alcoholic liver injury, the acting mechanism of which is likely to be related with its anti-lipid peroxidative effect. 展开更多
关键词 Jianpi Liqi Huoxue Decoction ALCOHOL liver injury lipid peroxidation lieber-decarli model
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