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蝙蝠体表蛛蝇中肯科伊病毒的分离鉴定
被引量：
2
1
作者
冯云
付士红
+3 位作者
张海林
杨卫红
章域震
梁国栋
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期461-470,共10页
为调查云南省蝙蝠体表寄生虫蛛蝇中病原体的携带情况。采集蝙蝠体表蛛蝇标本,用细胞培养法分离病毒,对阳性分离物进行分子生物学鉴定,用RT-PCR（Reverse transcription PCR）、TCID（50）（Tissue culture infective dose）、免疫荧光...
为调查云南省蝙蝠体表寄生虫蛛蝇中病原体的携带情况。采集蝙蝠体表蛛蝇标本,用细胞培养法分离病毒,对阳性分离物进行分子生物学鉴定,用RT-PCR（Reverse transcription PCR）、TCID（50）（Tissue culture infective dose）、免疫荧光等实验对病毒的特性进行研究。2012年从励腊县的棕果蝠（Rousettus leschenaulti）体表采集蛛蝇183只,利用节肢动物线粒体细胞色素氧化酶I（COI）的通用引物用PCR方法鉴定为蛛蝇科的Eucampsipoda sundaica。从这些蛛蝇中分离到1株阳性分离物MLBC1215,能引起金黄地鼠肾细胞（Golden hamster kidney cell,BHK-21）和非洲绿猴肾细胞（African green monkey kidney cell,VeroE6）出现圆缩、脱落的细胞病变（Cytopathic effect,CPE）。用RT-PCR方法扩增序列,测序结果显示MLBC1215病毒株为三节段RNA病毒,各基因组编码区序列长度分别为S基因为975核苷酸,M基因为4 568核苷酸,L基因为6 866核苷酸,3个基因节段核苷酸序列所形成的进化树拓扑构图相似,MLBC1215病毒株的S、M和L基因均与1970年泰国分离的肯科伊病毒（Kaeng Khoi orthobunyavirus,KKV）（PSC-19）处于同一进化分支。MLBC1215株的S、M、L片段与泰国PSC-19株的核苷酸的同源性分别为97.9%、94.4%和95.3%;氨基酸的同源性分别为98.7%、96.5%和98.4%。MLBC1215株在BHK-21细胞生长到60h达到最高滴度,TCID_（50）为10^（4.8）/0.1ml,随后病毒滴度逐渐下降,至144h TCID_（50）为10^（3.6）/0.1ml。MLBC1215株对小白鼠的主要器官均能引起病理改变,从而导致小白鼠发病死亡。采集的33份人血清中有9份IgG抗体与MLBC1215株有反应,检测结果为阳性,抗体滴度为4份1：20,4份1：40,1份1：80。本次研究证实云南省腊勐县蝙蝠体表吸血昆虫蛛蝇携带布尼亚病毒目KKV。
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关键词
肯科伊病毒(
kkv
)
蛛蝇
勐腊
原文传递
蝙蝠寄生蛛蝇中分离3株肯科伊病毒的全基因序列特征分析
2
作者
王娟
徐子乾
+3 位作者
冯云
邝国鹏
杨卫红
梁国栋
《中华实验和临床病毒学杂志》
CAS
CSCD
2022年第3期283-288,共6页
目的了解云南省蝙蝠体表寄生蛛蝇中肯科伊病毒(Kaeng Khoi virus,KKV)的感染情况。方法2014年在保山市和2017年在瑞丽市采集蝙蝠体表寄生蛛蝇标本并进行鉴定,应用细胞组织培养法进行病毒分离,对阳性分离物进行序列扩增测序,对病毒全基...
目的了解云南省蝙蝠体表寄生蛛蝇中肯科伊病毒(Kaeng Khoi virus,KKV)的感染情况。方法2014年在保山市和2017年在瑞丽市采集蝙蝠体表寄生蛛蝇标本并进行鉴定,应用细胞组织培养法进行病毒分离,对阳性分离物进行序列扩增测序,对病毒全基因序列进行同源性和系统进化分析。结果用蛛蝇标本研磨上清液接种BHK-21细胞,从瑞丽市和保山市蛛蝇标本分离到3株阳性分离物(WDBC1704、WDBC1710和BSBC1406),均能使BHK-21细胞出现圆缩、脱落的细胞病变。经RT-PCR和高通量测序扩增后,获得3株阳性分离物的全基因组序列。系统进化分析显示3株阳性分离物的S、M、L基因均与泰国分离的KKV原型株PSC-19在同一进化支。本次分离的3株KKV与云南省既往分离株WDBC1403亲缘关系最近,其中BSBC1406株又形成一个独立的小分支。序列对比显示3株分离株之间在M基因上存在较大差异,BSBC1406与其他2株相似度仅为78.0%~78.1%,开放阅读框区中Gc蛋白的氨基酸相似度均为85.3%。结论从云南蝙蝠寄生蛛蝇中新分离的3株KKV与原型株有较大差异,特别是BSBC1406株与其他分离株存在一定差异,可能已发生了变异,应加强云南省媒介昆虫携带KKV的监测及其与人类疾病关系的研究。
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关键词
肯科伊病毒
蛛蝇
蝙蝠
系统进化分析
原文传递
题名
蝙蝠体表蛛蝇中肯科伊病毒的分离鉴定
被引量：
2
1
作者
冯云
付士红
张海林
杨卫红
章域震
梁国栋
机构
云南省地方病防治所、云南省自然疫源性疾病防控技术重点实验室
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、国家传染病预防和控制重点实验室
出处
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期461-470,共10页
基金
国家自然科学基金/地区基金(项目号:31560049),题目:蝙蝠体表吸血昆虫携带病毒及其与蝙蝠和其他人畜动物感染关系研究
云南省应用基础研究计划项目/面上项目(项目号:2016FB029),题目:蝙蝠体表吸血昆虫携带病毒及其与蝙蝠和其他人畜动物感染关系研究~~
文摘
为调查云南省蝙蝠体表寄生虫蛛蝇中病原体的携带情况。采集蝙蝠体表蛛蝇标本,用细胞培养法分离病毒,对阳性分离物进行分子生物学鉴定,用RT-PCR（Reverse transcription PCR）、TCID（50）（Tissue culture infective dose）、免疫荧光等实验对病毒的特性进行研究。2012年从励腊县的棕果蝠（Rousettus leschenaulti）体表采集蛛蝇183只,利用节肢动物线粒体细胞色素氧化酶I（COI）的通用引物用PCR方法鉴定为蛛蝇科的Eucampsipoda sundaica。从这些蛛蝇中分离到1株阳性分离物MLBC1215,能引起金黄地鼠肾细胞（Golden hamster kidney cell,BHK-21）和非洲绿猴肾细胞（African green monkey kidney cell,VeroE6）出现圆缩、脱落的细胞病变（Cytopathic effect,CPE）。用RT-PCR方法扩增序列,测序结果显示MLBC1215病毒株为三节段RNA病毒,各基因组编码区序列长度分别为S基因为975核苷酸,M基因为4 568核苷酸,L基因为6 866核苷酸,3个基因节段核苷酸序列所形成的进化树拓扑构图相似,MLBC1215病毒株的S、M和L基因均与1970年泰国分离的肯科伊病毒（Kaeng Khoi orthobunyavirus,KKV）（PSC-19）处于同一进化分支。MLBC1215株的S、M、L片段与泰国PSC-19株的核苷酸的同源性分别为97.9%、94.4%和95.3%;氨基酸的同源性分别为98.7%、96.5%和98.4%。MLBC1215株在BHK-21细胞生长到60h达到最高滴度,TCID_（50）为10^（4.8）/0.1ml,随后病毒滴度逐渐下降,至144h TCID_（50）为10^（3.6）/0.1ml。MLBC1215株对小白鼠的主要器官均能引起病理改变,从而导致小白鼠发病死亡。采集的33份人血清中有9份IgG抗体与MLBC1215株有反应,检测结果为阳性,抗体滴度为4份1：20,4份1：40,1份1：80。本次研究证实云南省腊勐县蝙蝠体表吸血昆虫蛛蝇携带布尼亚病毒目KKV。
关键词
肯科伊病毒(
kkv
)
蛛蝇
勐腊
Keywords
kaeng khoi virus（kkv）
Eucampsipoda sundaica
Mengla
分类号
R373.3 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
蝙蝠寄生蛛蝇中分离3株肯科伊病毒的全基因序列特征分析
2
作者
王娟
徐子乾
冯云
邝国鹏
杨卫红
梁国栋
机构
大理大学公共卫生学院
云南省地方病防治所云南省自然疫源性疾病防控技术重点实验室
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
出处
《中华实验和临床病毒学杂志》
CAS
CSCD
2022年第3期283-288,共6页
基金
云南省高层次卫生计生技术人才医学学科带头人(D-2017055)
云南省中青年学术和技术带头人后备人才(2019HB052)
云南省地方病防治所科技计划项目太阳鸟计划(YIEDC-202101)。
文摘
目的了解云南省蝙蝠体表寄生蛛蝇中肯科伊病毒(Kaeng Khoi virus,KKV)的感染情况。方法2014年在保山市和2017年在瑞丽市采集蝙蝠体表寄生蛛蝇标本并进行鉴定,应用细胞组织培养法进行病毒分离,对阳性分离物进行序列扩增测序,对病毒全基因序列进行同源性和系统进化分析。结果用蛛蝇标本研磨上清液接种BHK-21细胞,从瑞丽市和保山市蛛蝇标本分离到3株阳性分离物(WDBC1704、WDBC1710和BSBC1406),均能使BHK-21细胞出现圆缩、脱落的细胞病变。经RT-PCR和高通量测序扩增后,获得3株阳性分离物的全基因组序列。系统进化分析显示3株阳性分离物的S、M、L基因均与泰国分离的KKV原型株PSC-19在同一进化支。本次分离的3株KKV与云南省既往分离株WDBC1403亲缘关系最近,其中BSBC1406株又形成一个独立的小分支。序列对比显示3株分离株之间在M基因上存在较大差异,BSBC1406与其他2株相似度仅为78.0%~78.1%,开放阅读框区中Gc蛋白的氨基酸相似度均为85.3%。结论从云南蝙蝠寄生蛛蝇中新分离的3株KKV与原型株有较大差异,特别是BSBC1406株与其他分离株存在一定差异,可能已发生了变异,应加强云南省媒介昆虫携带KKV的监测及其与人类疾病关系的研究。
关键词
肯科伊病毒
蛛蝇
蝙蝠
系统进化分析
Keywords
kaeng
khoi
virus
Bat fly
Bat
Phylogenetic analysis
分类号
R373.3 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
蝙蝠体表蛛蝇中肯科伊病毒的分离鉴定
冯云
付士红
张海林
杨卫红
章域震
梁国栋
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
原文传递
2
蝙蝠寄生蛛蝇中分离3株肯科伊病毒的全基因序列特征分析
王娟
徐子乾
冯云
邝国鹏
杨卫红
梁国栋
《中华实验和临床病毒学杂志》
CAS
CSCD
2022
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